Trimethylamine Detection in Animal-Derived Medicine by Headspace GC-MS

시작하려면 약초 분쇄기로 약재 Pheretima, Periplaneta americana 및 Hirudo를 분쇄하십시오. 2번과 4번의 표준 약물 체를 통해 약용 분말을 체로 치십시오. 필요한 샘플 분말을 얻기 위해 두 체 사이에 분말을 수집합니다.

50 밀리리터 플라스틱 원심 분리기 튜브에 1 그램의 분말을 섭취하십시오. 5 % 트리클로로 아세트산 용액 20 밀리리터를 첨가하고 고속 분산 균질화기로 1, 000 RPM에서 1 분 동안 균질화한다. 균질화 후, 실온에서 5분 동안 1, 717 G에서 균질액을 원심분리하고, 상청액을 흡수성 면-담근 유리 깔때기를 통해 50 밀리리터 부피 플라스크 내로 여과한다.

15 밀리리터와 10 밀리리터의 5 % 트리클로로 아세트산 용액으로 추출 과정을 2 회 반복 한 후, 여과 액을 합치고 5 % 트리클로로 아세트산 용액으로 50 밀리리터의 부피를 구성한다. 다음으로, 20 밀리리터의 헤드 스페이스 바이알에 2 밀리리터의 수산화 나트륨 용액과 0.5 그램의 고체 파라핀을 정확하게 첨가한다. 그런 다음 섭씨 70도의 오븐에 약 30분 동안 넣습니다.

바이알을 꺼내 실온으로 식혀 파라핀이 굳도록 합니다. 샘플 헤드스페이스를 처리하려면 각 샘플 추출 용액 2밀리리터를 바이알을 함유하는 응고된 파라핀에 추가합니다. 캡을 누르고 바이알을 밀봉합니다.

측정을 위해 밀봉된 헤드스페이스 바이알을 GCMS에 놓습니다. 표준 곡선을 얻기 위해, 응고된 파라핀 층 상부에 일련의 2밀리리터의 트리메틸아민 표준 용액을 흡인한다. 트리메틸아민 측정을 위해 밀봉된 헤드스페이스 바이알을 기계에 놓습니다.

정밀 테스트를 수행하기 위해, 응고된 파라핀 층 위에 밀리리터당 0.1 마이크로그램의 트리메틸아민 표준 용액 2밀리리터를 흡인한다. 제조업체의 지침에 따라 기계에서 6 개의 병렬 테스트를 수행하십시오. 회수율 실험의 경우, 이전에 설명한 대로 GCMS에서 트리에틸아민이 검출되지 않을 때까지 여러 배치의 시료 분말을 오븐에서 굽습니다.

다음으로, 오븐에서 구운 미세한 분말 1g을 별도의 50밀리리터 플라스틱 원심분리기 튜브에 넣습니다. 모든 튜브에 50 마이크로 리터의 트리메틸 아민 표준 용액을 추가하고 이전에 시연 된대로 5 % 트리클로로 아세트산 용액으로 추출합니다. 트리메틸 아민의 머무름 시간은 2.3 분으로 피크가 급격하고 다른 불순물의 간섭이 없는 것으로 밝혀졌습니다.

Pheretima, Periplaneta americana 및 Hirudo 샘플은 허브의 트리 에틸 아민을 감소시키기 위해 건조하여 스파이크 회수 테스트를 실시한 결과 각각 평균 회수율이 84.49, 94.66 및 85.67 %였습니다. 트리 에틸 아민은 킬로그램 당 13.23에서 271.63 밀리그램 범위의 농도를 가진 9 개의 허브 배치에서 검출되었습니다.