살아있는 Caenorhabditis elegans 웜에서 축삭 수송 시각화

시작하려면 이미징을 위해 준비된 caenorhabditis elegans 슬라이드를 가져 가십시오. 선충을 찾기 위해 4x에서 20x 배율 렌즈 아래의 슬라이드를 관찰하십시오. 위치를 기억한 다음 상세한 이미징을 위해 63x 배율 렌즈로 전환하십시오.

획득 파라미터를 평가하기 위해 초기 이미지를 캡처합니다. 강도 히스토그램을 사용하여 신호 강도를 모니터링하고 필요한 경우 여기 레이저 강도를 높입니다. 다음으로, 488나노미터 레이저를 사용하여 분석할 축삭 영역을 표백합니다.

표백 단계 전후의 신호 강도를 비교하여 표백 효율을 결정합니다. 2 x 2 비닝을 사용하여 개별 전송 이벤트의 신호 강도를 향상시킬 수 있습니다. 노출 시간을 향상시키고 연속적인 시점 사이에 300 - 700밀리초의 시간 해상도를 사용하여 Rab3 전송 이벤트를 따릅니다.

전송 이벤트의 신호 강도와 빈도에 따라 1분에서 3분의 시간 경과를 기록합니다.