환자 유래 3D 신경교종 오가노이드 생성을 위한 초퍼 처리 종양 조각 배양

1 시작하려면 환자로부터 종양 조직 2를 얻어초퍼로 처리합니다. 3 다진 종양 4가 들어있는 페트리 접시를 45도 위로 기울이고 H-GPSA 배지 2.5 밀리리터 5를 조심스럽게 제거합니다. 6 종양 조각을 세척하기 위해, RBC 용해 완충액 2 밀리리터7를 첨가하고, 궤도 쉐이커(8)에서 느린 속도로 배양한다.

9 그런 다음 용해 버퍼를 완전히 폐기합니다. 10 다음으로, 환자 유래 11 오가노이드 배지 4밀리리터를 조직 조각에 추가하고, 12 조직 덩어리를 초저 부착물(13 six well-plate)로 옮깁니다. 14 플레이트를 오비탈 쉐이커 15에서 2-4주 동안 배양합니다.

16 이틀에 한 번씩, 사용한 배지 17의 절반을 미리 따뜻해진 신선한 환자 유래 오가노이드 배지로 교체합니다. 18 조직 저산소증을 방지하기 위해, 19는 환자 유래 오가노이드(20)를 멸균 유리 페트리 접시(21)로 옮기고 현미경으로 조직 형태를 관찰한다. 22 그런 다음 메스를 사용하여 접착 조직을 자릅니다.

23 chopper 방법을 사용하여 얻은 환자 유래 오가노이드, 24개는 수동으로 절단된 것과 비교하여 25 1주일 이내에 원하는 둥근 모양에 도달했습니다. 26 그리고 이 방법을 사용하여 형성된 오가노이드(27)의 수가 훨씬 더 많았다.