자금 출처 : 건강 보조금 HL067177, HL096845 국립 연구소의 지원으로이 작품과 DSW에 P01AI084853

1. 기증 절차 <ol><li> 모든 수술 절차는 무균 기법을 활용하여 수행되었다. 어떤 항생제는 기증자와받는 생쥐 모두 부여하지 않습니다. </li><li> 공여 마우스의 마취의 유도가 5퍼센트 Isoflurane과 함께 시작됩니다. </li><li> 마우스는 orotracheally 20 게이지 정맥 카테터와 intubated 후 125 심호흡 / 분 약 0.5 ML 갯벌 볼륨 (는 체중의 2 %)의 비율로 100 % 산소를 사용하여 쥐 환풍기에 배치됩니다. </li><li> 마취는 흡입된 1-2% Isoflurane으로 유지됩니다. </li><li> 공여 마우스가 위로 향한 위치에 배치되며, 70 % 알코올로 준비. </li><li> Laparosternotomy가 결합된 중간선과 가로 절개로 수행됩니다. </li><li> 100 U / kg의 헤파린이 방금 간 아래에서 하부 대정 맥 (IVC)에 주입한다. </li><li> 다이어프램은 척추쪽으로 복부 늑골 첨부 따라 절단되고, 흉강는 가슴 양쪽 절단에 의해 노출되는목에 벽. </li><li> 다이어프램의 수준에서 IVC의 절개 후 오른쪽 심방 부위요는 냉각의 2 ML로 잘라 폐가 플러시합니다 (4 ℃) 폐동맥의 루트 (시 가로 절개를 통해 Lactated에 울리는의 주입과 헤파린의 0.1 ML PA) 트렁크. </li><li> 최종 갯벌 인플레의 3 분의 2에서 환기를 체포, 심장 - 폐 블록 excised 얼음 (4 ° C)에 저장됩니다. </li><li> 기증자 왼쪽의 폐암은 수갑을 풀러 첨부하여받는 사람을 위해 준비가되어 있습니다. 폐 인대는 폐 정맥 (PV)까지 베인있다. hilum은 식도와 대동맥을 제거하여 내신됩니다. </li><li> hilum의 가장 두개골 측면에 위치한 PA,뿐만 아니라 첨부된 주요 기관지 (BR)를 식별합니다. 기관지에서 PA를 조심스럽게 해부. </li><li> PA의 커프스는 24 게이지 정맥 주사 (IV) 카테 테르로 만든 0.7 mm의 확장자의 길이는 0.5 mm로 절단됩니다. </li><li> 끝단의 전체 표면은 다음 anasto을 촉진하기 abraded합니다mosis. </li><li> 기관지에 대한 커프스는 20 게이지 정맥 주사 카테터에서 파생하고, 0.7 mm의 확장자가 1.0 mm의 길이로 절단됩니다. </li><li> 동일한 자료를 사용하여 PV의 끝단은 기증자 마우스의 무게에 따라 다릅니다. 특히 생쥐에 대한 즉석 크기 24~27g은 22 게이지, 0.7 밀리미터 확장자의 길이는 0.7 mm이다. 27~32g 무게 생쥐의 경우 연구가 0.7 밀리미터 확장자의 길이는 0.7 mm입니다 20 게이지 카테터를 활용. </li><li> 수갑은 PA, PV와 BR의 말초 끝에 삽입하고 9-0 봉합사로 고정됩니다. </li><li> 공여 폐이 붉어지는 및 저장하기 전에 멸균 헤파린과 멸균 식염수에 씻어있다. 공여 폐 그러면 폐 매우 깨끗하고 무균 유지 빙판에 무균 식염수에 배어 멸균 거즈 (4 ° C)로 싸여있다. </li><li> microvessel 클램프는기도로 Lactated 울리는 엔트리를 방지하기 위해 기관지에 배치됩니다. </li></ol> 2. 받는 절차 <ol><li> anes의 유도위 기증자에 대해 설명하는 것처럼 thesia 및 기계적 환기은 동일합니다. </li><li> 왼쪽 가슴 벽은 면도와 70 %의 알코올과 수술 부위가 draped되어 함께 준비하고 있습니다. </li><li> thoracotomy 절개는 척추에 dorsally 가까이 절개하고 심장에 인접한 좌측 폐동맥 혈관과 기관지에 게재 microvessel 클램프를 확대, 왼쪽 세번째 늑간 공간에서 이루어집니다. 당신은 PV 그들 사이 hilum과 BR의 꼬리 끝에, 두개골 측면에서 PA를 볼 수 있습니다. </li><li> 중앙 hilar 구조 채워 떠나는 동안 PA, BR 및 PV에 가벼운 긴장을 일으키는 것으로 hemostat에 부드러운 견인을 사용하여 왼쪽 폐는 흉강에서 꺼냈어요됩니다. </li><li> PA, PV와 BR은 PA, PV와 BR 주위에 느슨하게 위치 9-0 봉합사를 삽입하여 다음 무딘 절개에 의해 분리된다. </li><li> 그 adventitial 칼집, 혈관 주위의 약 네번째 작은 가로 절개에서 완전히 PA을 해부 후니다동맥의 지느러미 부분의 연속은 그대로두고, 앞부분은 벽에 설치했다. </li><li> 감기, Lactated 닮은 - 젖은 솜 거즈에 싸서하고 위에서 설명한 준비 기증자 폐암은 다음 흉강에 위치하고, 수갑이받는 PA, PV와 BR에 삽입하고 9-0 봉합사로 고정됩니다. </li><li> hilar 교차 클램프는 reperfusion 및 통풍을위한있게 제거됩니다. </li><li> 받는 흉부로 다시 이식된 폐를 배치한 후, thoracotomy 절개는 5-0 봉합사를 사용하여 닫힙니다. </li><li> 마우스가 마취에서 회복하기 위해 허용됩니다. Buprenorphine은 (0.05-0.15 밀리그램 / ㎏) 수술 후 즉시 시행, 후 2-3 일 후 수술을 매 8 시간됩니다. </li></ol> 3. 대표 결과 우리의 경험은 반복 연습을 몇 개월 마우스 폐 이식 모델에서 실력되기 위해 필요한 우리에게 가르쳐 왔습니다. 숙련도가 획득되면, 우리죽음 operatively 7 일 포스트 내에 발생하는있는 96% (1백분의 96 연속 수술) perioperative 생존율을 chieved. 두 죽음은 intraoperatively 시작된 그 출혈로 인해 였는데, pneumothraces는 다른 두 생쥐의 사망 원인이 있었다. 모든 절차를 보려면 따뜻한 국소 빈혈 시간은 ± 3.14 분 14.32이었고, 차가운 국소 빈혈 시간은 58.51 ± 18.06 분이었다. 세 orthotopic 폐 이식 그룹이 연구되었습니다 isograft : 6 / C57BL → C57BL / 6, allograft : C57BL/10 → C57BL / 6와 C57BL / 6 → C57BL/10. 우리는 수컷 생쥐를 사용하지만, 남녀 사이에는 상당한 해부 학적 차이가 없기 때문에 우리의 기술은 또한 암컷 생쥐에 적용할 수 있습니다. 거절 병리학의 등급은 임상 폐 이식 7 (표 1)에 대한 표준 기준을 활용 멀게 방식으로 실시되었다. 우리가 isograft (C57BL / 6 → C57BL / 6)에 온화한 없거나 전혀 거절을 관찰 반면, 두 allograft 조합은 안돼요 개발rable 급성 또는 만성 거부 (그림 1). 반대로, OB는 C57BL/10에서 훨씬 더 자주이었다 day28 (표 1)에 의한 C57BL / 6 → C57BL/10 단체보다 → C57BL / 6. <table border="1"><tbody><tr><td></td><td> C57BL / 6 → C57BL / 6 </td><td> C57BL/10 → C57BL / 6 </td><td> C57BL / 6 → C57BL/10 </td><td> P-값 </td></tr><tr><td> 거절 병리 일 28에서 &quot;A&quot;점수 </td><td> 0.67 ± 0.89 </td><td> * 3.33 ± 0.82 </td><td> * 3.29 ± 0.76 </td><td> * P&gt; 0.05 </td></tr><tr><td> 산부인과 / 일 21, 28시 총 생쥐 </td><td> 0 / 24 (0 %) </td><td> ** 34분의 14 (42.1 %) </td><td> ** 16분의 2 (12.5 %) </td><td> ** P &lt;0.05 </td></tr></tbody></table> 표 1. 급성 거부 반응과 obliterative bronchiolitis 포스트 이식의 유행의 Histological 점수. 표준 cri에 의한 급성 거부 반응의 채점 ( &quot;&quot;점수)teria는 대표적인 결과에 설명했다. 데이터는 28 일 게시물 이식에서 &quot;&quot;점수의 평균 ± SD를 나타냅니다. 데이터 일 21 28 사후 이식에서 OB를 개발하는 각 그룹의 생쥐의 수량과 백분율을 나타냅니다. <img alt="그림 1" src="/files/ftp_upload/3947/3947fig1.jpg" /> 그림 1. 28일 포스트 폐 이식의 매크로 연구 결과와 조직 병리학. 패널 1A는 매크로 발견하고 H &amp; E 스테인드 Isograft의 폐 바로 순진 폐를 나타냅니다. 패널 1B와 1C는 H &amp; E와 각각 산부인과와 비 OB를 개발 BL / 6 마​​우스 수신자로 이식 Masson의 Trichrome 스테인드 BL/10 폐 allograft를 나타냅니다. 1B에 흰색 화살표가 OB의 병변을 식별합니다. 패널 1D는 BL/10 마우스받는 사람에 이식 BL / 6 폐 allograft를 보여줍니다. 절차 중에 주요 문제 해결은 다음과 같이 있었다. <ol><li> 혈액 흐름 장애 : 플러쉬 공여 폐까지색깔은 색깔이 흰색이된다. 과도한 압력의 이용은 폐의 부종을 유발 수 있습니다. 그러나 이식 후 부종을 방지하기 위해 너무 많이 밀어 내지 않습니다. </li><li> 기증자에 즉석 삽입의 난이도 : vasculature는 충분한 길이와 연결된 지방과 결합 조직 무료입니다 그걸 확인할. </li><li> anastomotic 사이트에서 출혈하면 : 약 5 분 동안 해당 사이트에 압력을 적용하는 Q 도움말을 사용하십시오. </li><li> 받는 사람 PA 혈액 흐름 방해 : 주로 즉석 삽입시의 비틀림으로 인한. 공기 PA 내에서 관찰되는 경우 문합가 필요로 누른 다음 다시해야. </li><li> 곤란 PV 교합 (anastomosis) : PV의 분리막은 매우 얇고 쉽게 눈물이다. 적절한 커프스 크기를 선택하고 매우 부드럽게받는 사람의 PV로 바로 삽입합니다. </li><li> 받는 사람 PV 혈액 흐름 방해 : 끝단의 위치와 방향을 확인하십시오. 기관지 끝단에서 압축을 풀어주고있다. </li><li> Pneumothorax : 이것은 manipulatio으로 인해 중 기관지 천공으로 인해 발생할 수 있습니다기도, 또는 이식 절차와 관련된 외상에 의한 폐 표면의 천공의 N. 전직은기도 벽 내의 구멍 수술 폐쇄로 치료하며, 후자는 10-0 나일론 봉합사를 사용하여 폐 표면의 누설을 oversewing에 의해 처리됩니다. </li></ol>

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	<li>Asimacopoulos, P. J., Molokhia, F. A., Pegg, C. A., Norman, J. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Lung+transplantation+in+the+rat.">Lung transplantation in the rat.</a> Transplant Proc. 3, 583-585 (1971).</li><li>Yoshida, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Surgical+technique+of+experimental+lung+transplantation+in+rabbits.">Surgical technique of experimental lung transplantation in rabbits.</a> Ann. Thorac. Cardiovasc. Surg. 11, 7-11 (2005).</li><li>McDyer, J. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Human+and+murine+obliterative+bronchiolitis+in+transplant.">Human and murine obliterative bronchiolitis in transplant.</a> Proc. Am. Thorac. Soc. 4, 37-43 (2007).</li><li>Sato, M., Keshavjee, S., Liu, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Translational+research:+animal+models+of+obliterative+bronchiolitis+after+lung+transplantation.">Translational research: animal models of obliterative bronchiolitis after lung transplantation.</a> Am. J. Transplant. 9, 1981-1987 (2009).</li><li>Okazaki, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+mouse+model+of+orthotopic+vascularized+aerated+lung+transplantation.">A mouse model of orthotopic vascularized aerated lung transplantation.</a> Am. J. Transplant. 7, 1672-1679 (2007).</li><li>Fan, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Neutralizing+IL-17+Prevents+Obliterative+Bronchiolitis+in+Murine+Orthotopic+Lung+Transplantation.">Neutralizing IL-17 Prevents Obliterative Bronchiolitis in Murine Orthotopic Lung Transplantation.</a> Am. J. Transplant. 11, 911-922 (2011).</li><li>Stewart, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Revision+of+the+1996+working+formulation+for+the+standardization+of+nomenclature+in+the+diagnosis+of+lung+rejection.">Revision of the 1996 working formulation for the standardization of nomenclature in the diagnosis of lung rejection.</a> J. Heart Lung Transplant. 26, 1229-1242 (2007).</li><li>Mizuta, T., Kawaguchi, A., Nakahara, K., Kawashima, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Simplified+rat+lung+transplantation+using+a+cuff+technique.">Simplified rat lung transplantation using a cuff technique.</a> J. Thorac. Cardiovasc. Surg. 97, 578-581 (1989).</li><li>Jungraithmayr, W. M., Korom, S., Hillinger, S., Weder, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+mouse+model+of+orthotopic,+single-lung+transplantation.">A mouse model of orthotopic, single-lung transplantation.</a> J. Thorac. Cardiovasc. Surg. 137, 486-491 (2009).</li><li>Li, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Orthotopic+vascularized+right+lung+transplantation+in+the+mouse.">Orthotopic vascularized right lung transplantation in the mouse.</a> J. Thorac. Cardiovasc. Surg. , (2010).</li></ol>

관심의 어떠한 충돌 선언 없습니다.

생쥐의 Orthotopic 폐 이식은 microsurgical 요구와 조직의 극단적인 취약성으로 인해 도전한다. 커프스 기법의 도입은 쥐 8 orthotopic 폐 이식의 광범위한 사용을 허용했다. 이것은 우리 실험실의 생쥐에 orthotopic 폐 이식 모델의 개발을위한 기초가되었다. 생쥐와 쥐에서 인간과 달리 왼쪽 폐 하나 밖에 엽을 포함하며 전체 폐 질량의 25 %를 만듭니다. 이것은 왼쪽 단일 폐 이식 순환계 지원 시스템에 대한 필요성없이 murine 모델에서 가능합니다. 우리 예비 수술은 이식된 폐의 환기 및 관류는 PV 문합의 크기에 크게 의존이라고 밝혔다. 특정 PV anastomotic을 재는 완 크기는 기증자에 맞게 활용하고 수신자가 같은 9를보고했다. 부적 절한 커프스 사이징은 PV anast의 이식된 폐 또는 dehiscence 중 무기폐 결과omosis. 오카자키 외가 결합된 선박 결합의 사용을보고하고 기관지 5 클리핑. 현재의 연구에서는 우리가 따뜻한 허혈성 시간을 단축 있습니다 제안해 모든 hilar 구조의 동맥류 클립을 사용합니다. murine 모델에서 orthotopic 왼쪽 폐 이식 중 하나는 제한받는 동물들이 allografts 5 alloimmune-매개 괴사 후에도 살아남을 수있다는 것입니다. 따라서 생존 연구가 가능하지 않습니다와 그라 프트 평가는 이식된 폐 10 histological 검사에 따라 달라집니다. 이 기법을 사용하여, 우리는 생쥐에 잠복기 obliterative bronchiolitis 모델을 개발했습니다. 특히, 기증자 마우스 C57BL/10이고받는 사람은 C57BL / 6입니다. 이것은 미성년자의 역할, 그리고 obliterative bronchiolitis의 pathogenesis 6의 주요 histocompatibility의 항원을 제안합니다. 더욱이, 우리는 IL-17은 murine 모델 obliterative bronchiolitis을 방지 중화보고했습니다. 이 모드는전 폐 이식의 시험 및 임상 폐 이식의 발전을위한 새로운 연구 도구를 나타냅니다.

<table border="1"><tbody><tr><td> 장비의 명칭 </td><td> 회사 </td><td> 카탈로그 번호 </td></tr><tr><td> 자이스 혈구 Opmi 6SFC-1880 </td><td> 프레스콧의 INC </td><td> PMZ014 </td></tr><tr><td> 하버드 쥐 환풍기 </td><td> 하버드 장치 </td><td> 55-7058 </td></tr><tr><td> 20 게이지 정맥 주사 카테터 </td><td> Terumo 의료 공단 </td><td> 100510D </td></tr><tr><td> 22 게이지 정맥 주사 카테터 </td><td> Terumo 의료 공단 </td><td> 081015S </td></tr><tr><td> 24 게이지 정맥 주사 카테터 </td><td> Terumo 의료 공단 </td><td> 100522A </td></tr><tr><td> 9 / 0 마약 쟁이들 블루 버진 실크 </td><td> Ashaway 라인 &amp; 꼬기 Mfg. CO </td><td> MBVS-90 </td></tr><tr><td> 10-0 Alcon 외과 봉합해 </td><td> Alcon 래버러토리스, INC </td><td> 8065-192101 </td></tr><tr><td> BLACK 꼰 실크 5-0/18inches </td><td> 헨리 Schein </td><td> M652630 </td></tr><tr><td> 헤파린 나트륨 1,000 단위 / ML </td><td> APP 제약 </td><td> 407,156 </td></tr><tr><td> Betadine 솔루션 </td><td> 퍼듀 제품 </td><td> 67618-150 </td></tr><tr><td> Lactated 울리는의 주입 </td><td> Hospira </td><td> NDC 0409-7953-03 </td></tr></tbody></table><table border="1"><tbody><tr><td> 생쥐의 스트레인 </td><td> 공급 업체 </td><td> 연령, 체중 </td><td> 성별, 댓글 </td></tr><tr><td> C57BL/10 </td><td> 할란 Sprague-Dawley </td><td> 8~12주, 25-30그램 </td><td> 남성, 기증자 </td></tr><tr><td> C57BL / 6 </td><td> 할란 Sprague-Dawley </td><td> 8~12주, 25-30그램 </td><td> 남성, 공여 또는받는 사람 </td></tr></tbody></table> 표 2. 생쥐의 표, specifIC 시약 및 장비.

development of obliterative bronchiolitis in a murine model of orthotopic lung transplantation

쥐의 Orthotopic 폐 이식 먼저 1971 1 Asimacopoulos 및 동료에 의해 ​​보도되었다. 현재이 방법을 잘 수용하고 all​​o-부결 연구뿐만 아니라 폐 이식 후 국소 빈혈 reperfusion - 부상의 메커니즘을 조사를위한 syngeneic 변종 사이뿐만 아니라 표준입니다. 쥐 및 다른 대형 동물 모델 2의 응용 프로그램이 이러한 연구의 해설에 크게 기여하고 있지만, 이러한 조사의 범위는 녹아웃 및 형질 전환 쥐의 부족에 의해 제한됩니다. obliterative bronchiolitis, 폐 이식 환자에서 사망의 주요 원인에 대한 효과적인 치료로 인해 obliterative bronchiolitis를 복제 사전 임상 모델에 대한 집중적인 수색이있었습니다. tracheal allograft 모델은 가장 널리 사용하고 obliterative bronchiolitis 3 histopathologic 일부 기능을 재현할 수있다. 그러나 그대로 vasculat의 부족받는 사람의 실시 항공 및 obliterative bronchiolitis의 불완전 pathologic 기능과는 아무 관계가있는 우레이 모델 4의 유틸리티를 제한합니다. 다른 고형 장기 이식과는 달리, vascularized 마우스 폐 이식은 최근 2007 5에서 처음으로 오카자키 및 동료에 의해보고되었습니다. 쥐의 폐 이식의 기본 원칙을 적용, 우리의 실험실 obliterative bronchiolitis의 immunopathogenesis 6 진학을 허용 사소한 histoincompatible 항원 murine orthotopic 단일 왼쪽 폐 이식을 사용 obliterative bronchiolitis 모델을 실시했습니다.

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Development of Obliterative Bronchiolitis in a Murine Model of Orthotopic Lung Transplantation

Obliterative bronchiolitis는 폐 이식받는 사람의 장기 생존의 열쇠 장애와 강력한 잠복기 모델의 부족이다 obliterative bronchiolitis의 immunopathogenesis를 검토 걸로. 다른 고형 장기 이식과는 달리, vascularized 마우스 폐 이식이있다는 최근에 개발되었습니다. 여기 murine orthotopic 단일 폐 이식 후 당사 독자 개발한 obliterative bronchiolitis 모델을 보여줍니다.

Orthotopic 폐 이식의 Murine 모델에 Obliterative Bronchiolitis의 개발

Orthotopic lung transplantation in rats was first reported by Asimacopoulos and colleagues in 1971 1. Currently, this method is well accepted and ...

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Research

JoVE Journal

Medicine

20.1K 조회수.  Indiana University School of Medicine. Obliterative bronchiolitis는 폐 이식받는 사람의 장기 생존의 열쇠 장애와 강력한 잠복기 모델의 부족이다 obliterative bronchiolitis의 immunopathogenesis를 검토 걸로. 다른 고형 장기 이식과는 달리, vascularized 마우스 폐 이식이있다는 최근에 개발되었습니다. 여기 murine orthotopic 단일 폐 이식 후 당사 독자 개발한 obliterative bronchiolitis 모델을 보여줍니다.

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Orthotopic Aortic Transplantation: A Rat Model to Study the Development of Chronic Vasculopathy

Research models of chronic rejection are essential to investigate pathobiological and pathophysiological processes during the development of transplant vasculopathy (TVP).
The commonly used animal model for cardiovascular chronic rejection studies is the heterotopic heart transplant model performed in laboratory rodents. This model is used widely in experiments since Ono and Lindsey (3) published their technique. To analyze the findings in the blood vessels, the heart has to be sectioned and all vessels have to be measured.
Another method to investigate chronic rejection in cardiovascular questionings is the aortic transplant model (1, 2). In the orthotopic aortic transplant model, the aorta can easily be histologically evaluated (2). The PVG-to-ACI model is especially useful for CAV studies, since acute vascular rejection is not a major confounding factor and Cyclosporin A (CsA) treatment does not prevent the development of CAV, similar to what we find in the clinical setting (4). A7-day period of CsA is required in this model to prevent acute rejection and to achieve long-term survival with the development of TVP.
This model can also be used to investigate acute cellular rejection and media necrosis in xenogeneic models (5).

This video demonstrates the orthotopic aortic transplant model as a simple model to study the development of transplant vasculopathy (TVP) in rats.

Orthotopic 대동맥 이식 : 만성 Vasculopathy의 개발 연구에 생쥐 모델

Research models of chronic rejection are essential to investigate pathobiological and pathophysiological processes during the development of transplant ...

연구

의학

An Orthotopic Model of Murine Bladder Cancer

In this straightforward procedure, bladder tumors are established in female C57 mice through the use of catheterization, local cauterization, and subsequent cell adhesion. After their bladders are transurethrally catheterized and drained, animals are again catheterized to permit insertion of a platinum wire into bladders without damaging the urethra or bladder. The catheters are made of Teflon to serve as an insulator for the wire, which will conduct electrical current into the bladder to create a burn injury. An electrocautery unit is used to deliver 2.5W to the exposed end of the wire, burning away extracellular layers and providing attachment sites for carcinoma cells that are delivered in suspension to the bladder through a subsequent catheterization. Cells remain in the bladder for 90 minutes, after which the catheters are removed and the bladders allowed to drain naturally. The development of tumor is monitored via ultrasound. Specific attention is paid to the catheterization technique in the accompanying video.

Bladder tumors are established in female mice in a minimally invasive fashion through catheterization, local cauterization, and subsequent adhesion of carcinoma cells to the burn sites.

Murine 방광 암의 Orthotopic 모델

In this straightforward procedure, bladder tumors are established in female C57 mice through the use of catheterization, local cauterization, and ...

Orthotopic Liver Transplantation in Rats

Clinical progress in the field of liver transplantation has been largely supported by animal models1,2. Since the publication of the first orthotopic rat liver transplantation in 1979 by Kamada et al.3, this model has remained the gold standard despite various proposed alternative techniques4. Nevertheless, its broader use is limited by its steep learning curve5.
In this video paper, we show a simple and easy-to-establish revision of Kamada's two-cuff technique. The suprahepatic vena cava anastomosis is performed manually with a running suture, and the vena porta and infrahepatic vena cava anastomoses are performed utilizing a quick-linker cuff system6. Manufacturing the quick-linker kit is shown in a separate video paper.

We present an easy-to-establish revision of the classical two-cuff technique for orthotopic liver transplantation in rat.

쥐에게 Orthotopic 간 이식

Clinical progress in the field of liver transplantation has been largely supported by animal models1,2. Since the publication of the first orthotopic rat ...

Surgical Procedures for a Rat Model of Partial Orthotopic Liver Transplantation with Hepatic Arterial Reconstruction

Orthotopic liver transplantation (OLT) in rats using a whole or partial graft is an indispensable experimental model for transplantation research, such as studies on graft preservation and ischemia-reperfusion injury 1,2, immunological responses 3,4, hemodynamics 5,6, and small-for-size syndrome 7. The rat OLT is among the most difficult animal models in experimental surgery and demands advanced microsurgical skills that take a long time to learn. Consequently, the use of this model has been limited. Since the reliability and reproducibility of results are key components of the experiments in which such complex animal models are used, it is essential for surgeons who are involved in rat OLT to be trained in well-standardized and sophisticated procedures for this model.
While various techniques and modifications of OLT in rats have been reported 8 since the first model was described by Lee et al. 9 in 1973, the elimination of the hepatic arterial reconstruction 10 and the introduction of the cuff anastomosis technique by Kamada et al. 11 were a major advancement in this model, because they simplified the reconstruction procedures to a great degree. In the model by Kamada et al., the hepatic rearterialization was also eliminated. Since rats could survive without hepatic arterial flow after liver transplantation, there was considerable controversy over the value of hepatic arterialization. However, the physiological superiority of the arterialized model has been increasingly acknowledged, especially in terms of preserving the bile duct system 8,12 and the liver integrity 8,13,14.
In this article, we present detailed surgical procedures for a rat model of OLT with hepatic arterial reconstruction using a 50% partial graft after ex vivo liver resection. The reconstruction procedures for each vessel and the bile duct are performed by the following methods: a 7-0 polypropylene continuous suture for the supra- and infrahepatic vena cava; a cuff technique for the portal vein; and a stent technique for the hepatic artery and the bile duct.

Orthotopic liver transplantation in rats is an indispensable experimental model for biomedical research. Here we present our surgical procedures for orthotopic rat liver transplantation with hepatic arterial reconstruction using a 50% partial graft.

간 간선 재건과 부분 Orthotopic 간 이식의 쥐 모델에 대한 외과 절차

Orthotopic liver transplantation (OLT) in rats using a whole or partial graft is an indispensable experimental model for transplantation research, such as ...

Murine Corneal Transplantation: A Model to Study the Most Common Form of Solid Organ Transplantation

Corneal transplantation is the most common form of organ transplantation in the United States with between 45,000 and 55,000 procedures performed each year. While several animal models exist for this procedure and mice are the species that is most commonly used. The reasons for using mice are the relative cost of using this species, the existence of many genetically defined strains that allow for the study of immune responses, and the existence of an extensive array of reagents that can be used to further define responses in this species. This model has been used to define factors in the cornea that are responsible for the relative immune privilege status of this tissue that enables corneal allografts to survive acute rejection in the absence of immunosuppressive therapy. It has also been used to define those factors that are most important in rejection of such allografts. Consequently, much of what we know concerning mechanisms of both corneal allograft acceptance and rejection are due to studies using a murine model of corneal transplantation. In addition to describing a model for acute corneal allograft rejection, we also present for the first time a model of late-term corneal allograft rejection.

Mice have been used as a model for studying many forms of transplantation, including corneal transplantation. We describe in this report a murine model for both acute and late-term corneal transplantation.

쥐의 각막 이식 : 고체 장기 이식의 가장 일반적인 형태를 연구하기위한 모델

Corneal transplantation is the most common form of organ transplantation in the United States with between 45,000 and 55,000 procedures performed each ...

Method of Isolated Ex Vivo Lung Perfusion in a Rat Model: Lessons Learned from Developing a Rat EVLP Program

The number of acceptable donor lungs available for lung transplantation is severely limited due to poor quality. Ex-Vivo Lung Perfusion (EVLP) has allowed lung transplantation in humans to become more readily available by enabling the ability to assess organs and expand the donor pool. As this technology expands and improves, the ability to potentially evaluate and improve the quality of substandard lungs prior to transplant is a critical need. In order to more rigorously evaluate these approaches, a reproducible animal model needs to be established that would allow for testing of improved techniques and management of the donated lungs as well as to the lung-transplant recipient. In addition, an EVLP animal model of associated pathologies, e.g., ventilation induced lung injury (VILI), would provide a novel method to evaluate treatments for these pathologies. Here, we describe the development of a rat EVLP lung program and refinements to this method that allow for a reproducible model for future expansion. We also describe the application of this EVLP system to model VILI in rat lungs. The goal is to provide the research community with key information and &#8220;pearls of wisdom&#8221;/techniques that arose from trial and error and are critical to establishing an EVLP system that is robust and reproducible.

Method of Isolated Ex Vivo Lung Perfusion in a Rat Model: Lessons Learned from Developing a Rat EVLP Program

Ex-Vivo Lung Perfusion (EVLP) has allowed lung transplantation in humans to become more readily available by enabling the ability to assess organs and expand the donor pool. Here, we describe the development of a rat EVLP program and refinements that allow for a reproducible model for future expansion.

고립의 방법<em&gt; 전의 VIVO</em쥐 모델에서&gt; 폐 관류 : 쥐 EVLP 프로그램 개발에서 교훈을

The number of acceptable donor lungs available for lung transplantation is severely limited due to poor quality. Ex-Vivo Lung Perfusion (EVLP) has allowed ...

Pre-clinical Orthotopic Murine Model of Human Prostate Cancer

To study the multifaceted biology of prostate cancer, pre-clinical in vivo models offer a range of options to uncover critical biological information about this disease. The human orthotopic prostate cancer xenograft mouse model provides a useful alternative approach for understanding the specific interactions between genetically and molecularly altered tumor cells, their organ microenvironment, and for evaluation of efficacy of therapeutic regimens. This is a well characterized model designed to study the molecular events of primary tumor development and it recapitulates the early events in the metastatic cascade prior to embolism and entry of tumor cells into the circulation. Thus it allows elucidation of molecular mechanisms underlying the initial phase of metastatic disease. In addition, this model can annotate drug targets of clinical relevance and is a valuable tool to study prostate cancer progression. In this manuscript we describe a detailed procedure to establish a human orthotopic prostate cancer xenograft mouse model.

Prostate cancer is the second most common cause of cancer-related deaths in the United States. An orthotopic cancer model provides a useful approach to understand the biology of prostate cancer and to evaluate the efficacy of therapeutic regimens. This protocol describes detailed steps necessary to establish an orthotopic prostate cancer mouse model.

인간의 전립선 암의 전 임상 동소 이식 쥐 모델

To study the multifaceted biology of prostate cancer, pre-clinical in vivo models offer a range of options to uncover critical biological information ...

Open Tracheostomy Gastric Acid Aspiration Murine Model of Acute Lung Injury Results in Maximal Acute Nonlethal Lung Injury

Acid pneumonitis is a major cause of sterile acute lung injury (ALI) in humans. Acid pneumonitis spans the clinical spectrum from asymptomatic to acute respiratory distress syndrome (ARDS), characterized by neutrophilic alveolitis, and injury to both alveolar epithelium and vascular endothelium. Clinically, ARDS is defined by acute onset of hypoxemia, bilateral patchy pulmonary infiltrates and non-cardiogenic pulmonary edema. Human studies have provided us with valuable information about the physiological and inflammatory changes in the lung caused by ARDS, which has led to various hypotheses about the underling mechanisms. Unfortunately, difficulties determining the etiology of ARDS, as well as a wide range of pathophysiology have resulted in a lack of critical information that could be useful in developing therapeutic strategies.
Translational animal models are valuable when their pathogenesis and pathophysiology accurately reproduce a concept proven in both in vitro and clinical settings. Although large animal models (e.g., sheep) share characteristics of the anatomy of human trachea-bronchial tree, murine models provide a host of other advantages including: low cost; short reproductive cycle lending itself to greater data acquisition; a well understood immunologic system; and a well characterized genome leading to the availability of a variety of gene deletion and transgenic strains. A robust model of low pH induced ARDS requires a murine ALI that targets mainly the alveolar epithelium, secondarily the vascular endothelium, as well as the small airways leading to the alveoli. Furthermore, a reproducible injury with wide differences between different injurious and non-injurious insults is important.
The murine gastric acid aspiration model presented here using hydrochloric acid employs an open tracheostomy and recreates a pathogenic scenario that reproduces the low pH pneumonitis injury in humans. Additionally, this model can be used to examine interaction of a low pH insult with other pulmonary injurious entities (e.g., food particles, pathogenic bacteria).

This protocol induces acute lung injury in a mouse that has close fidelity to the pathogenesis of acid pneumonitis observed in humans. We generate a maximal acute nonlethal low pH lung injury and account for differences in rodent-human anatomic respiratory structure using an open tracheostomy coupled with circumferential pressure release.

급성 폐 손상의 열기 기관 절개 위산 흡인 쥐 모델은 최대한 급성 치명적 폐 손상의 결과

Acid pneumonitis is a major cause of sterile acute lung injury (ALI) in humans. Acid pneumonitis spans the clinical spectrum from asymptomatic to acute ...

A Pre-Clinical Porcine Model of Orthotopic Heart Transplantation

Fifty-years following the first successful report, cardiac transplantation remains the gold-standard treatment for eligible patients with advanced heart failure. Multiple small-animal models of heart transplantation have been used to study the acute and long-term effects of novel therapies. However, few are tested and demonstrated success in clinical trials. It is of critical importance to evaluate new therapies in a clinically relevant large-animal model for efficient and reliable translation of basic studies&#39;&#160;findings. Here, we describe a pre-clinical large-animal (porcine) model of orthotopic heart transplantation that has been firmly established and previously used to investigate novel cardioprotective strategies. This procedure focuses on acute ischemia-reperfusion injury and is a reliable method to investigate novel interventions which have been tested and validated in smaller experimental models, such as the murine model. We demonstrate its usefulness in assessing cardiac performance during the early post-transplantation period and other potential possibilities enabled by the model.

Here, we describe a pre-clinical large-animal (porcine) model of orthotopic heart transplantation that has been firmly established and utilized to investigate novel cardioprotective strategies.

정형외 심장 이식의 전 임상 돼지 모델

Fifty-years following the first successful report, cardiac transplantation remains the gold-standard treatment for eligible patients with advanced heart ...

Reduced Complications after Arterial Reconnection in a Rat Model of Orthotopic Liver Transplantation

The rat orthotopic liver transplantation (OLT) model is a powerful tool to study acute and chronic rejection. However, it is not a complete representation of human liver transplantation due to the absence of arterial reconnection. Described here is a modified transplantation procedure that includes the incorporation of hepatic artery (HA) reconnection, leading to a marked improvement in transplant outcomes. With a mean anhepatic time of 12 min and 14 s, HA reconnection results in improved perfusion of the transplanted liver and an increase in long-term recipient survival from 37.5% to 88.2%. This protocol includes the use of 3D-printed cuffs and holders to connect the portal vein and infrahepatic inferior vena cava. It can be implemented for studying multiple aspects of liver transplantation, from immune response and infection to technical aspects of the procedure. By incorporating a simple and practical method for arterial reconnection using a microvascular technique, this modified rat OLT protocol closely mimics aspects of human liver transplantation and will serve as a valuable and clinically relevant research model.

The goal of this study is to modify the rat orthotopic liver transplant model to better represent human liver transplantation and improve recipient survival. The presented method reestablishes hepatic arterial inflow by connecting the donor liver&#39;s common hepatic artery to the recipient liver&#39;s proper hepatic artery.

직교 간 이식의 쥐 모형에 있는 동맥 재연결 후에 감소된 합병증

The rat orthotopic liver transplantation (OLT) model is a powerful tool to study acute and chronic rejection. However, it is not a complete representation ...