이 연구는 RWTH 아헨 대학, 독일 (: START 690753 &quot;Arterialisation venöser Gefäße 다이 &#39;제목)의 의료 교수진의 연구 진흥 프로그램&quot;START &quot;의 지원을받는되었다. 우리는 그녀의 뛰어난 편집에 도움 부인 메리 - 조안 Blümich 감사드립니다.

1. 실험 동물 <ol><li> 동물 보호 FELASA 가이드 라인에 따라 수행 될 모든 실험에 대한 로컬 윤리위원회의 승인을 얻습니다. </li><li> 상업적인 증식 (예 : 찰스 강 (Charles River) Wiga GmbH의, Sulzfeld, 독일)에서 구입 할 수있는 여성 Sprague-Dawley 쥐를 사용하십시오. 우리는 7 동물 postoperatively 3, 6, 12 주가 희생 된 그 각각의 세 그룹으로 나누어 21 동물을 사용했습니다. 구입 당시 동물 연령 12 주이어야하며 250~300그램 무게해야합니다. </li><li> 21 주위 온도를 갖는 기후 제어 방에 동물을 유지 ° C, 먹이와 물을 무료로 이용할 수있는 60% 상대 습도와 12 시간 빛을 어두운주기. </li></ol> 2. 마취 및 수술 준비 <ol><li> 1 L / 분의 산소 유량에서 설정, 마취 기계에 연결된 Plexiglas 상자를 사용하여 전신 마취를 유도하고, isofluorane vaporizer wi 번째 5퍼센트 마취 가스. </li><li> 즉시 동물의 깊은 감각 반사 신경 등의 억압 아르 1.5 %에서 isofluorane vaporizer로 마취를 유지합니다. </li><li> 몸 온난화 판에 위로 향한 위치에 쥐 문제를 해결했습니다. </li><li> 흉골 병 sterni 아래 2cm에 턱 각도에서 depilation 크림과의 털을 제거하여 각 동물의 작업 영역을 준비합니다. </li><li> 수술 지역, 동물과 외과 의사의 전면에 준비 영역에 관심을 지불하여 무균 수술 필드를 준비 : </li><ul><li> 살균제로 benchtop를 청소합니다. </li><li> 수술 스크럽 솔루션의 여러 응용 프로그램 (예 : Chlorhexidine 및 70% 이소 프로필 알코올)를 사용하여 절개 사이트를 준비합니다. 먼저 알코올 둘째, 결국은 스크럽 솔루션을 Chlorhexidine을 적용합니다. </li><li> 이전 w를 씻어 된 일회용 수술 가운 및 수술 장갑, 또는 대안 적으로, 시험 장갑을 착용i 번째 수술 살균제. </li></ul><li> 운영 절차에 무균 미세 악기를 사용하십시오. </li><li> 10-20 배 확대에서 작업 현미경 (야생 Heerbrugg M650, 가이 스, 스위스)를 사용하십시오. </li></ol> 3. 해부 그림 1은 쥐의 목의 해부학 적 구조를 도시 : 오른쪽 목 빗근의 절개 전에 1a)를 원위치. 1B) 오른쪽 목 빗근의 절개 후 원위치. 4. 커프 준비 플라스틱 튜브 (Portex, 내경 0.75 mm, 외경 0.94 mm), 스미스 (Smiths 의료, 영국)에서 손으로 3mm의 길이에 수갑을 잘라 버릴거야. 수갑은 플라스틱 튜브의 전체 볼륨을 포함하는 관 모양의 커프 몸과 커프 볼륨의 절반 구성된 커프 핸들로 구성되어 있습니다. 커프 몸과 커프 핸들 모두 동일 경도해야g. 커프 핸들은 수술하는 동안 수갑 조작을 위해 필수적입니다. 소매는 혈관을 통해 미끄러 진 후, 소형 불독 클램프는 출혈 방지 위치에 수갑 유지하고 안정성을 보장하기 위해 커프 핸들과 혈관에 동시에 배치됩니다. 5. 커프 기술 <ol><li> 혈관을 통해 수갑 나오십시오. </li><li> 즉시 나중에, 혈관을 뒤집다 커프 몸의 바깥쪽으로 당겨와 7-0 실크 봉합사로 해결할 수 있습니다. 이러한 방법으로, 즉석의 내강은 내피로 덮여 있습니다. 이후 커프 몸 위에 정맥 이식편을 풀하고 새 7-0 실크 봉합사로 해결할 수 있습니다. 혈전 형성을 방지하기 위해, 그것은 곳에서 동맥을 가지고있는 넥타이를 접촉에서 혈액을 방지하기 위해 즉석 여백에 매우 가까운 정맥 그래프트 넥타이를 고정하는 것이 필수적입니다. 이것은 혈액의 흐름 방향에 의한 말초 문합을위한 중요합니다. 그러나 저자에 의하면,이 간주되지 않습니다같은 이유로 근위 문합을 위해 필수적. </li></ol> 6. 수술 오른쪽 바깥목 정맥의 6.1 준비 <ol><li> 직접 흉골 병 sterni 위의 대략 2.5 cm 길이의 평균 자궁 절개를합니다. </li><li> 완전히 주변 조직에서 오른쪽 바깥목 정맥의 1cm 길이 세그먼트를 분리 </li><li> 7-0 실크 봉합과 정맥 지류를 Ligate. </li></ol> 오른쪽 온목 동맥 6.2 준비 <ol><li> 목 빗근을 준비하고 중간에 가로로 쪼개다. </li><li> 동맥 또는 미주 신경을 압축하지 않도록하기 조심스럽게 오른쪽 온목 동맥을 준비합니다. 팔 머리 트렁크 아래로 경동맥 분기에서 시켜라. </li><li> 그 후, 절개 전에 7-0 실크 봉합과 함께 중간에 두 번 ligate. </li><li> 나일론 커프스 consisti 슬립몸의 NG하고 커프 핸들이 혈관 (그림 2B) 뒤에 확인하는 것이 중요하다 상기 온목 동맥의 말단부를 통해 핸들 (그림 2A). </li><li> 정확히 안정성 (그림 2C)를 보장 할 수있는 커프 손잡이에 작은 불독 클램프와 말초 온목 동맥의 수갑에 채워진 끝을 고정. </li><li> 그 후, 그 결과 동맥 그루터기는 커프 몸만큼이어야된다 봉합사, 뒤에 직접 동맥을 잘라. </li><li> 헤파린 - 생리 식염수 (20 IU 헤파린 / ML 0.9 % NaCl)의 동맥 내강을 씻어. 나중에 사용하기 위해 적절한 위치에 따로 결합 루프를 설정합니다. </li><li> 동맥 몸통 올려와 커프 몸에 비해 슬리브처럼 나오십시오. </li><li> 그 후, 결합 루프와 단단히 매듭을 당겨. </li><li> 의 소매 밖으로 미끄러지는 동맥을 방지하기 위해, 당신은 트릭을 수행 할 수 있습니다 : 오른쪽 s의 동맥 벽 봉합을 모두 파악imultaneously과 왼쪽 집게로 (그림 2D) 매듭 (그림 2e)를합니다. </li><li> 근위 동맥 그루터기 (그림 2F)에 대해 동일한 절차를 반복합니다. </li></ol> 6.3 정맥 그라프 트 위치 <ol><li> 의 소비세 1cm 길이 세그먼트가 바깥목 정맥을 고정 </li><li> 두 수갑에 채워진 동맥은 정맥 개재에 대해 서로 너무 멀리 떨어져 있기 때문에, 대략이 절차에 대한 올바른 거리가 3-0 Vicryl - 봉합을 사용하는 당신이 할 각 미니 겸자 주변 루프. </li><li> 십자로 모두 봉합. </li><li> 그 후, 수갑에 채워진 동맥 stumps의 적절한 위치 (그림 2g)을 가능하게 반대 방향으로 봉합을 뽑아 </li><li> 헤파린 - 생리 식염수로 정맥 세그먼트를 씻어. </li><li> 수갑에 채워진 말초 경동맥을 통해 이전에 반대 정맥 세그먼트의 한쪽 끝을 살짝하고 올바른 posi에 확보실크 7-0 봉합사로 기. </li><li> 이 정맥의 원주가 완전히 균등하게 파악해야한다는 여기서주의하는 것이 중요합니다. </li><li> 헤파린 - 생리 - 솔루션 정맥 세그먼트를 헹구고, 근위 경동맥 잘린 통해 정맥 세그먼트의 다른 쪽 끝을 나오십시오. </li><li> 결합 (그림 2 시간)를 작성, </li><li> 이를 통해 탁 트인 혈액 흐름과 정맥 이식편 (그림 2i)의 arterialization을 허용, 미니 불독 클램프에게 근위 하나에 다음 다른 말초 경동맥 등 걸에서 첫 번째 및 이후 하나를 제거합니다. 혈액 흐름과 맥동이 이식과 온목 동맥 (시각적 평가)에서 관찰하는 경우 수술이 성공적으로 간주됩니다. </li></ol> 6.4. 상처 폐쇄 피하 실행을 봉합를 들어, 4-0 Vicryl을 사용합니다. 피부 실행 봉합를 들어, 3-0 Vicryl을 사용합니다. 7. 복구 및 수술 관리 &lt;/ P&gt; <ol><li> 동물 적외선 온난화 램프 아래에 평면 종이 침대에 마취에서 회복 보자. 모든 동물이 정상적인 나타날 때까지 동물 지주 영역으로 인식 동물을 반환하지 않습니다. </li><li> Postoperatively 0.03-0.05 MG / kg BW SC 2 일간 모든 8-12 시간의 농도에 Buprenorphine을 (Temgesic) 관리 할 수​​ 있습니다. Buprenorphine 단 isofluorane 유도하기 전에 관리 할 수​​ 있습니다. </li><li> 자신의 일반 상태와 질병이나 감염의 징후에 대한 postoperatively 동물을 모니터링 할 수 있습니다. </li></ol> 8. 혈액 흐름 측정 perivascular flowprobe (3mm, MA3PSB)로 : 이식의 수술 명백는 연구 음속에 가까운 혈액의 흐름 측정 시스템 (TS420, 음속에 가까운 시스템 유럽 BV, 마스 트리 히트, 네덜란드 모델)를 사용하여, 혈액의 흐름 측정에 의해 입증되었다. 시스템은 도플러 원리에 기반을두고 있습니다. 9. 대표 결과 F 별aithfully 지침을 상기 유지, 외과 수술의 평균 기간은 65 분 정도 였고. 동물은 훌륭한 신체 조건을 제시하고 전체 실험을하는 동안 예상대로 몸무게가 늘 었는데 : 작업의 시작 시점에서 동물 312 무게 ± 20.39 g. 3 주 희생 시점에서 사후 operatively 동물 육주에서 325.2 ± 28.7 g 무게 333 ± 39.9 g, 12 주짜리 362.22 ± 29g. 어떤 감염은 수술 사이트와 개발없이 염증에 관찰되지 않았습니다. 작업 상처가 예정 시간에 완전히 고쳐 주셨다. 신경 제어 뇌 경색이나 motoric 결핍의 흔적을 보여 주었다 없습니다. 동물 경동맥에서 운영되었으며 두 바깥목 정맥의 하나가 제거 및 자동 이식으로 사용 된 이후는 나중에 중요한 포인트이었습니다. 수술 후 통증 완화 치료는 전혀 알레르기 반응은 관찰되지 않았습니다. &gt; 모든 동물은 전체 실험을하는 동안 경계 및 사회했다. 음식과 물을받을 관한 그들의 습관는 전체 기간 동안 변경되지 남아 있었다. 모든 실험의 생존 속도는 희생의 시점에서 100 %이다. 그라프 트 명백 속도는 처음 10 운영 동물 60 %와 나머지 11 동물 따라 82%했다. 총 그래프트 명백 71 %이다. arterialized 정맥 이식의 혈액 흐름 희생의 시점에서 측정과 8였습니다 ± 세 희생 시간 포인트 사이에 통계적으로 의미있는 차이가없는 3 ML / 분. <img src="/files/ftp_upload/4124/4124fig1.jpg" alt="그림 1" /> 그림 1. 쥐의 목의 해부학. 오른쪽 목 빗근의 절개 전에 1a)를 원위치. 1B) 오른쪽 목 빗근의 절개 후 원위치. e_content &quot;강한 : 유지 - together.within 페이지 =&quot;항상 &quot;&gt; <img src="/files/ftp_upload/4124/4124fig2.jpg" alt="그림 2" /> . 그림 2 Intraoperative 현미경 사진 : 커프 - 몸과 즉석-핸들로 구성된) 커프스, 수갑에 채워진 말초 온목 동맥 그루터기의 클램핑) C; b)는 커프가 온목 동맥의 말단부 위에 미끄러의 D) eversion 소매를 통해 온목 동맥 그루터기, 전자)는 끈으로 everted 온목 동맥 몸통 확보, F) 수갑에 채워진 말초 및 근위 온목 동맥 stumps 모두의 eversion 후 원위치, 두 수갑에 채워진 상태의 근사치에 대한 g)는 십자의 기술 온목 동맥 stumps, H) 정맥 개재 후 원위치, 정맥 개재 이식의 reperfusion 후에) 원위치. <img src="/files/ftp_upload/4124/4124fig3.jpg" alt="그림 3" /> 그림 3. 원위치의 도식 묘사정맥 개재 이식의 reperfusion. 이후 <a href="http://www.jove.com/files/ftp_upload/4124/4124fig3large.jpg" target="_blank">더 큰 그림을 보려면 여기를 클릭하십시오</a> .

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C., Newby, A. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effect+of+matrix+metalloproteinase-9+knockout+on+vein+graft+remodelling+in+mice.">Effect of matrix metalloproteinase-9 knockout on vein graft remodelling in mice.</a> J. Vasc. Res. 47, 299-308 (2010).</li></ol>

관심 없음 충돌이 선언 없습니다.

온목 동맥 바깥목 정맥 이식편을 Interposing 것은 정교한 미세 기술이다. 이 동영상은 초보자 외과 의사가 실험 동물의 낮은 폐기물을 최소한의 시간에이 기술을 습득하는 데 도움이됩니다. 는, 지나치게 깊은 마취 무대를 방지 잘 제어 할 수 있으며, 외과 의사 충분한 시간을 조작 할 수 있기 때문에 Inhalative 마취는이 작업에 대한 최선의 방법입니다. 또한 쥐가 마우스에 비해, ...

<table border="1"><tbody><tr><td> 시약의 이름 </td><td> 회사 </td><td> 카탈로그 번호 </td><td> 코멘트 </td></tr><tr><td> 합 사형 실크 블랙 7-0 </td><td> Ethicon 제품 </td><td> 892100 </td><td></td></tr><tr><td> Vicryl 3-0 </td><td> Ethicon 제품 </td><td> J285G </td><td></td></tr><tr><td> 4-0 Vicryl </td><td> Ethicon 제품 </td><td> J284G </td><td></td></tr><tr><td> Portex 비 멸균 나일론 튜브 0.75 mm, 0.94 mm 미세 정공 폴리에틸렌 (Polythene) 배관 </td><td> Portex UK </td><td> 800/200/175/100 </td><td></td></tr><tr><td> Isofluorane 5% </td><td></td><td></td><td> 모든 genericon </td></tr><tr><td> 헤파린 </td><td></td><td></td><td> 모든 genericon </td></tr><tr><td> 0.9 %의 염분 </td><td></td><td&gt; </td><td> 모든 genericon </td></tr><tr><td> Buprenorphine </td><td></td><td></td><td> 모든 genericon </td></tr></tbody></table>

training a sophisticated microsurgical technique: interposition of external jugular vein graft in the common carotid artery in rats

Neointimal 증식은 하나입니다 주변 동맥 우회 수술뿐만 아니라 동정맥 fistulas의 동맥 관상 동맥 바이 패스 수술에 큰 중요성의 역할 arterialized 정맥의 협착의 주요 원인. 1-5 온목 동맥에서 정맥 그래프트 개재의 실험 절차 소매 - 기술을 사용하여 neointimal 증식하고 문제를 해결할 수 치료 옵션의 aetiology을 검토하기 위해 여러 연구 프로젝트에 적용되었습니다. 6-8는 커프가 neointimal 증식의 개발함으로써 선박 anastomotic 리모델링을 방지하고 이식에서 난류를 유도합니다. 우수한 caval 정맥 이식편을 사용하면 정맥 arterialization 실험에 대한 기존 소형 동물 모델입니다. 9-11이 현재의 프로토콜 설립 경정맥 정맥 그래프트 개재의 첫번째 조우 외 의해 설명 기술., 9뿐만 아니라 다른 사람들에게 말합니다. 12-14 </sup&gt; 그럼에도 불구하고, 이러한 인용 작은 동물의 프로토콜은 복잡합니다. 절차를 간소화하고 필요한 실험 동물의 수를 최소화하기 위해, 비디오 교육을 통해 자세한 동작 프로토콜이 제공됩니다. 이 동영상은 즉석 - 기술과 정맥 그래프트 개재 모두 내용을 보려면 초보자 외과 의사를하는 데 도움이됩니다. 이에, 오른쪽 바깥목 정맥는 각각 일 21 42 84,에 희생 된 그려 그룹으로 분류 21 여성 Sprague Dawley 쥐 온목 동맥에 수갑 - 기술에 이식되었다. 자동 transplantations을 수행했기 때문에 특히 더 기증자 동물은 필요 없습니다. 생존 속도는 희생의 시점에서 100 %이다. 또한, 그라프 트 명백 속도는 처음 10 운영 동물 60 %와 나머지 11 동물 82%했다. 희생의 시간에 혈액의 흐름은 8 ± 3 ML / 분이었다. 결론적으로,이 수술 프로토콜 상당히 간소화, 최적화하고 받아도 표준화절차를 licated. 그것은 따라서 그들에게 빠른 전문 지식을 얻을 수 있으며 실험 동물의 쓸모없는 희생을 방지하는 데 도움이, 가능한 함정을 설명, 초보자 외과 의사에게 쉬운 단계별 지침을 제공합니다.

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Training a Sophisticated Microsurgical Technique: Interposition of External Jugular Vein Graft in the Common Carotid Artery in Rats

Neointimal 증식이 arterialized 정맥의 협착의 주요 원인입니다. 우리는 오른쪽 바깥목 정맥은 Sprague Dawley 쥐 온목 동맥에 커프 기술을 사용하여 이식되어 상기 새로운 프로토콜을 제안합니다. 생존 속도는 희생의 시점에서 100 %이다.

쥐 온목 동맥에 개재 외부 경정맥 정맥 이식의 : 정교한 Microsurgical 기술을 교육

Neointimal hyperplasia is one the primary causes of stenosis in arterialized veins that are of great importance in arterial coronary bypass surgery, in ...

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Research

JoVE Journal

Medicine

20.3K 조회수.  University Hospital RWTH Aachen. Neointimal 증식이 arterialized 정맥의 협착의 주요 원인입니다. 우리는 오른쪽 바깥목 정맥은 Sprague Dawley 쥐 온목 동맥에 커프 기술을 사용하여 이식되어 상기 새로운 프로토콜을 제안합니다. 생존 속도는 희생의 시점에서 100 %이다.

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Adult Mouse Venous Hypertension Model: Common Carotid Artery to External Jugular Vein Anastomosis.

The understanding of the pathophysiology of brain arteriovenous malformations and arteriovenous fistulas has improved thanks to animal models. A rat model creating an artificial fistula between the common carotid artery (CCA) and the external jugular vein (EJV) has been widely described and proved technically feasible. This construct provokes a consistent cerebral venous hypertension (CVH), and therefore has helped studying the contribution of venous hypertension to formation, clinical symptoms, and prognosis of brain AVMs and dural AVFs. Equivalent mice models have been only scarcely described and have shown trouble with stenosis of the fistula. An established murine model would allow the study of not only pathophysiology but also potential genetic therapies for these cerebrovascular diseases.
We present a model of arteriovenous fistula that produces a durable intracranial venous hypertension in the mouse. Microsurgical anastomosis of the murine CCA and EJV can be difficult due to diminutive anatomy and frequently result in a non-patent fistula. In this step-by-step protocol we address all the important challenges encountered during this procedure. Avoiding excessive retraction of the vein during the exposure, using 11-0 sutures instead of 10-0, and making a carefully planned end-to-side anastomosis are some of the critical steps. Although this method requires advanced microsurgical skills and a longer learning curve that the equivalent in the rat, it can be consistently developed.
This novel model has been designed to integrate transgenic mouse techniques with a previously well-established experimental system that has proved useful to study brain AVMs and dural AVFs. By opening the possibility of using transgenic mice, a broader spectrum of valid models can be achieved and genetic treatments can also be tested. The experimental construct could also be further adapted to the study of other cerebrovascular diseases related with venous hypertension such as migraine, transient global amnesia, transient monocular blindness, etc.

We describe a method for creating a reliable model of cerebral venous hypertension in the adult mouse. This model has been widely described and tested in the rat. This new counterpart in the mice opens the possibility of using genetic modified animals and thereby broadens the applications of the model.

성인 마우스 정맥 ​​고혈압 모델 : 외부 경정맥 정맥 문합에 경동맥.

The understanding of the pathophysiology of brain arteriovenous malformations and arteriovenous fistulas has improved thanks to animal models. A rat model ...

연구

의학

Catheterization of the Carotid Artery and Jugular Vein to Perform Hemodynamic Measures, Infusions and Blood Sampling in a Conscious Rat Model

The success of a small animal model to study critical illness is, in part, dependent on the ability of the model to simulate the human condition. Intra-tracheal inoculation of a known amount of bacteria has been successfully used to reproduce the pathogenesis of pneumonia which then develops into sepsis. Monitoring hemodynamic parameters and providing standard clinical treatment including infusion of antibiotics, fluids and drugs to maintain blood pressure is critical to simulate routine supportive care in this model but to do so requires both arterial and venous vascular access. The video details the surgical technique for implanting carotid artery and common jugular vein catheters in an anesthetized rat. Following a 72 hr recovery period, the animals will be re-anesthetized and connected to a tether and swivel setup attached to the rodent housing which connects the implanted catheters to the hemodynamic monitoring system. This setup allows free movement of the rat during the study while continuously monitoring pressures, infusing fluids and drugs (antibiotics, vasopressors) and performing blood sampling.

Vascular accesses to measure hemodynamics, provide fluids and perform blood sampling are important to any small animal model study. We present a technique for implanting catheters into the carotid artery and the common jugular vein in an anesthetized rat for connecting to a system to perform monitoring, infusions and sampling.

경동맥과 경정맥의 도관은 의식 쥐 모델에서, 혼합 및 혈액 샘플링을 혈역학 적 조치를 수행하는

The success of a small animal model to study critical illness is, in part, dependent on the ability of the model to simulate the human condition. ...

Carotid Artery Infusions for Pharmacokinetic and Pharmacodynamic Analysis of Taxanes in Mice

When proposing the use of a drug, drug combination, or drug delivery into a novel system, one must assess the pharmacokinetics of the drug in the study model. As the use of mouse models are often a vital step in preclinical drug discovery and drug development1-8, it is necessary to design a system to introduce drugs into mice in a uniform, reproducible manner. Ideally, the system should permit the collection of blood samples at regular intervals over a set time course. The ability to measure drug concentrations by mass-spectrometry, has allowed investigators to follow the changes in plasma drug levels over time in individual mice1, 9, 10. In this study, paclitaxel was introduced into transgenic mice as a continuous arterial infusion over three hours, while blood samples were simultaneously taken by retro-orbital bleeds at set time points. Carotid artery infusions are a potential alternative to jugular vein infusions, when factors such as mammary tumors or other obstructions make jugular infusions impractical. Using this technique, paclitaxel concentrations in plasma and tissue achieved similar levels as compared to jugular infusion. In this tutorial, we will demonstrate how to successfully catheterize the carotid artery by preparing an optimized catheter for the individual mouse model, then show how to insert and secure the catheter into the mouse carotid artery, thread the end of the catheter out through the back of the mouse&#8217;s neck, and hook the mouse to a pump to deliver a controlled rate of drug influx. Multiple low volume retro-orbital bleeds allow for analysis of plasma drug concentrations over time.

This method was developed with the goal of delivering a steady drug solution via the carotid artery, to assess the pharmacokinetics of novel drugs in mouse models.

When proposing the use of a drug, drug combination, or drug delivery into a novel system, one must assess the pharmacokinetics of the drug in the study ...

Performing Permanent Distal Middle Cerebral with Common Carotid Artery Occlusion in Aged Rats to Study Cortical Ischemia with Sustained Disability

Stroke typically occurs in elderly people with a range of comorbidities including carotid (or other arterial) atherosclerosis, high blood pressure, obesity and diabetes. Accordingly, when evaluating therapies for stroke in animals, it is important to select a model with excellent face validity. Ischemic stroke accounts for 80% of all strokes, and the majority of these occur in the territory of the middle cerebral artery (MCA), often inducing infarcts that affect the sensorimotor cortex, causing persistent plegia or paresis on the contralateral side of the body. We demonstrate in this video a method for producing ischemic stroke in elderly rats, which causes sustained sensorimotor disability and substantial cortical infarcts. Specifically, we induce permanent distal middle cerebral artery occlusion (MCAO) in elderly female rats by using diathermy forceps to occlude a short segment of this artery. The carotid artery on the ipsilateral side to the lesion was then permanently occluded and the contralateral carotid artery was transiently occluded for 60 min. We measure the infarct size using structural T2-weighted magnetic resonance imaging (MRI) at 24 hr and 8 weeks after stroke. In this study, the mean infarct volume was 4.5% &#177; 2.0% (standard deviation) of the ipsilateral hemisphere at 24 hr (corrected for brain swelling using Gerriet&#8217;s equation, n = 5). This model is feasible and clinically relevant as it permits the induction of sustained sensorimotor deficits, which is important for the elucidation of pathophysiological mechanisms and novel treatments.

Here we present a protocol to produce permanent distal middle cerebral artery occlusion in elderly female rats with simultaneous occlusion of the carotid arteries to generate large cortical infarcts and sustained deficits. We show confirmation of the lesion size using structural MRI at 24 hr and 8 weeks after stroke.

세 쥐의 경동맥 폐색으로 영구 말초 중간 대뇌을 수행하면 두피 허혈 지속적인 장애를 연구하는

Stroke typically occurs in elderly people with a range of comorbidities including carotid (or other arterial) atherosclerosis, high blood pressure, ...

Vein Interposition Model: A Suitable Model to Study Bypass Graft Patency

Bypass grafting is an established treatment method for coronary artery disease. Graft patency continues to be the Achilles heel of saphenous vein grafts. Research models for bypass graft failure are essential for a better understanding of pathobiological and pathophysiological processes during graft patency loss. Large animal models, such as pigs or sheep, resemble human anatomical structures but require special facilities and equipment. This video describes a rat vein interposition model to investigate vein graft patency loss. Rats are inexpensive and easy to handle. Compared to mouse models, the convenient size of rats permits better operability and enables a sufficient amount of material to be obtained for further diverse analysis. In brief, the inferior epigastric vein of a donor rat is harvested and used to replace a segment of the femoral artery. Anastomosis is conducted via single stitches and sealed with fibrin glue. Graft patency can be monitored non-invasively using duplex sonography. Myointimal hyperplasia, which is the main cause for graft patency loss, develops progressively over time and can be calculated from histological cross sections.

This video demonstrates a model to study the development of myointimal hyperplasia after venous interposition surgery in rats.

정맥 삽입 위치 모델 : 바이 패스 이식 개통을 연구하기위한 적절한 모델

Bypass grafting is an established treatment method for coronary artery disease. Graft patency continues to be the Achilles heel of saphenous vein grafts. ...

In Vivo Gene Transfer to the Rabbit Common Carotid Artery Endothelium

The goal of this method is to introduce a transgene into the endothelium of isolated segments of both rabbit common carotid arteries. The method achieves focal endothelial-selective transgenesis, thereby allowing an investigator to determine the biological roles of endothelial-expressed transgenes and to quantify the in vivo transcriptional activity of DNA sequences in large artery endothelial cells. The method uses surgical isolation of rabbit common carotid arteries and an arteriotomy to deliver a transgene-expressing viral vector into the arterial lumen. A short incubation period of the vector in the lumen, with subsequent aspiration of the lumen contents, is sufficient to achieve efficient and durable expression of the transgene in the endothelium, with no detectable transduction or expression outside of the isolated arterial segment. The method allows assessment of the biological activities of transgene products both in normal arteries and in models of human vascular disease, while avoiding systemic effects that could be caused either by targeting gene delivery to other sites (e.g. the liver) or by the alternative approach of delivering genetic constructs to the endothelium by germ line transgenesis. Application of the method is limited by the need for a skilled surgeon and anesthetist, a well-equipped operating room, the costs of purchasing and housing rabbits, and the need for expertise in gene-transfer vector construction and use. Results obtained with this method include: transgene-related alterations in arterial structure, cellularity, extracellular matrix, or vasomotor function; increases or reductions in arterial inflammation; alterations in vascular cell apoptosis; and progression, retardation, or regression of diseases such as intimal hyperplasia or atherosclerosis. The method also allows measurement of the ability of native and synthetic DNA regulatory sequences to alter transgene expression in endothelial cells, providing results that include: levels of transgene mRNA, levels of transgene protein, and levels of transgene enzymatic activity.

In Vivo Gene Transfer to the Rabbit Common Carotid Artery Endothelium

This method is to introduce a transgene into the endothelium of rabbit carotid arteries. Introduction of the transgene allows the assessment of the biological role of the transgene product either in normal arteries or disease models. The method is also useful for measuring activity of DNA regulatory sequences.

Vivo에서 토끼 일반적인 경 동맥 내 피에 유전자 이동

The goal of this method is to introduce a transgene into the endothelium of isolated segments of both rabbit common carotid arteries. The method achieves ...

A Rabbit Model of Durable Transgene Expression in Jugular Vein to Common Carotid Artery Interposition Grafts

Vein graft bypass surgery is a common treatment for occlusive arterial disease; however, long-term success is limited by graft failure due to thrombosis, intimal hyperplasia, and atherosclerosis. The goal of this article is to demonstrate a method for placing bilateral venous interposition grafts in a rabbit, then transducing the grafts with a gene transfer vector that achieves durable transgene expression. The method allows the investigation of the biological roles of genes and their protein products in normal vein graft homeostasis. It also allows the testing of transgenes for the activities that could prevent vein graft failure, e.g., whether the expression of a transgene prevents the neointimal growth, reduces the vascular inflammation, or reduces atherosclerosis in rabbits fed with a high-fat diet. During an initial survival surgery, the segments of right and left external jugular vein are excised and placed bilaterally as reversed end-to-side common carotid artery interposition grafts. During a second survival surgery, performed 28 days later, each of the grafts is isolated from the circulation with vascular clips and the lumens are filled (via an arteriotomy) with a solution containing a helper-dependent adenoviral (HDAd) vector. After a 20-min incubation, the vector solution is aspirated, the arteriotomy is repaired, and flow is restored. The veins are harvested at time points dictated by individual experimental protocols. The 28-day delay between the graft placement and the transduction is necessary to ensure the adaptation of the vein graft to the arterial circulation. This adaptation avoids rapid loss of transgene expression that occurs in vein grafts transduced before or immediately after grafting. The method is unique in its ability to achieve durable, stable transgene expression in grafted veins. Compared to other large animal vein graft models, rabbits have advantages of low cost and easy handling. Compared to rodent vein graft models, rabbits have larger and easier-to-manipulate blood vessels that provide abundant tissue for analysis.

This method describes the placement of interposition vein grafts in rabbits, the transduction of the grafts, and the achievement of durable transgene expression. This allows the investigation of physiological and pathological roles of transgenes and their protein products in grafted veins, and testing of gene therapies for vein graft disease.

일반적인 경 동맥 중재 이식 정 맥 경에서에서 튼튼한 Transgene 식의 토끼 모델

Vein graft bypass surgery is a common treatment for occlusive arterial disease; however, long-term success is limited by graft failure due to thrombosis, ...

Phase Contrast Magnetic Resonance Imaging in the Rat Common Carotid Artery

Phase contrast magnetic resonance imaging (PC-MRI) is a noninvasive approach that can quantify flow-related parameters such as blood flow. Previous studies have shown that abnormal blood flow may be associated with systemic vascular risk. Thus, PC-MRI can facilitate the translation of data obtained from animal models of cardiovascular diseases to pertinent clinical investigations. In this report, we describe the procedure for measuring blood flow in the common carotid artery (CCA) of rats using cine-gated PC-MRI and discuss relevant analysis methods. This procedure can be performed in a live, anesthetized animal and does not require euthanasia after the procedure. The proposed scanning parameters yield repeatable measurements for blood flow, indicating excellent reproducibility of the results. The PC-MRI procedure described in this article can be used for pharmacological testing, pathophysiological assessment, and cerebral hemodynamics evaluation.

The overall goal of this procedure is to measure the blood flow in the rat common carotid artery by using noninvasive phase contrast magnetic resonance imaging.

쥐 일반적인 경 동맥에 단계 대조 자기 공명 영상

Phase contrast magnetic resonance imaging (PC-MRI) is a noninvasive approach that can quantify flow-related parameters such as blood flow. Previous ...

Middle Cerebral Artery Occlusion Allowing Reperfusion via Common Carotid Artery Repair in Mice

The ischemic stroke is a major cause of adult long-term disability and death worldwide. The current treatments available are limited, with only tissue plasminogen activator (tPA) as an approved drug treatment to target ischemic strokes. Current research in the field of ischemic stroke focuses on better understanding the pathophysiology of stroke, to develop and investigate novel pharmaceutical targets. Reliable experimental stroke models are crucial for the progression of potential treatments. The middle cerebral artery occlusion (MCAO) model is clinically relevant and the most frequently used surgical model of ischemic stroke in rodents. However, the outcomes of this model, such as lesion volume, are associated with high levels of variability, particularly in mice. The alternative MCAO model described here allows the reperfusion of the common carotid artery (CCA) and the increased perfusion of the middle cerebral artery (MCA) territory, using a tissue pad with fibrinogen-based sealant to repair the vessel, and the improved welfare of the mice by avoiding external carotid artery (ECA) ligation. This reduces the reliance on the Circle of Willis, which is known to be highly anatomically variable in mice. Representative data show that using this alternative surgical approach decreases the variability in lesion volumes between the traditional MCAO approach and the alternative approach described here.

Intraluminal filament occlusion of the middle cerebral artery is the most frequently used in vivo model of experimental stroke in rodents. An alternative surgical approach to allow common carotid artery repair is performed here, which allows the reperfusion of the common carotid artery and a full reperfusion to the middle cerebral artery territory.

쥐에 있는 일반적인 경 동맥 수리 통해 Reperfusion를 허용 하는 중간 대뇌 동맥 폐색

The ischemic stroke is a major cause of adult long-term disability and death worldwide. The current treatments available are limited, with only tissue ...

A Rat Carotid Artery Pressure-Controlled Segmental Balloon Injury with Periadventitial Therapeutic Application

Cardiovascular disease remains the leading cause of death and disability worldwide, in part due to atherosclerosis. Atherosclerotic plaque narrows the luminal surface area in arteries thereby reducing adequate blood flow to organs and distal tissues. Clinically, revascularization procedures such as balloon angioplasty with or without stent placement aim to restore blood flow. Although these procedures reestablish blood flow by reducing plaque burden, they damage the vessel wall, which initiates the arterial healing response. The prolonged healing response causes arterial restenosis, or re-narrowing, ultimately limiting the long-term success of these revascularization procedures. Therefore, preclinical animal models are integral for analyzing the pathophysiological mechanisms driving restenosis, and provide the opportunity to test novel therapeutic strategies. Murine models are cheaper and easier to operate on than large animal models. Balloon or wire injury are the two commonly accepted injury modalities used in murine models. Balloon injury models in particular mimic the clinical angioplasty procedure and cause adequate damage to the artery for the development of restenosis. Herein we describe the surgical details for performing and histologically analyzing the modified, pressure-controlled rat carotid artery balloon injury model. Additionally, this protocol highlights how local periadventitial application of therapeutics can be used to inhibit neointimal hyperplasia. Lastly, we present light sheet fluorescence microscopy as a novel approach for imaging and visualizing the arterial injury in three-dimensions.

The rat carotid artery balloon injury mimics the clinical angioplasty procedure performed to restore blood flow in atherosclerotic vessels. This model induces the arterial injury response by distending the arterial wall, and denuding the intimal layer of endothelial cells, ultimately causing remodeling and an intimal hyperplastic response.

쥐 경동맥 압력 제어 세그먼트 풍선 부상 과식 치료 응용 프로그램

Cardiovascular disease remains the leading cause of death and disability worldwide, in part due to atherosclerosis. Atherosclerotic plaque narrows the ...