행동 장치의 초기 버전을 개발하는 데 도움을 준 아라빈던 사무엘 박사와 마크 게르쇼 박사와 행동 장치를 수정한 매튜 베이티에게 감사드립니다. 이 연구는 신시내티 아동 병원에서 이사회 그랜트에 의해 지원되었다, JST / PRESTO, Dimes의 행진과 NIH R01 GM107582 F.N.H.

1. 파리 준비
<ol><li>라이트 다크(LD) 실험
	<ol>
<li>12시간/암흑 12시간(LD) 사이클 하에서 인큐베이터(25°C/40-60%의 상대 습도(RH)에서 파리를 올립니다. 인큐베이터의 광강도는 ~500-1,000 럭스입니다.</li>
		<li>24시간 동안 행동 에세이를 완료하려면 두 개의 인큐베이터가 필요합니다. 두 인큐베이터는 ON OFF 기능을 갖춘 프로그래밍 가능한 조명을 가져야 합니다. 그들은 또한 빛에 투과할 수 없는 단단한 문이 있어야합니다(즉, 유리 또는 플렉시 유리 없음). 참고: 한 인큐베이터는 "하루" 인큐베이터로 지정하고 12시간 빛과 12시간 어둡게 LD 주기로 설정해야 합니다. 두 번째 인큐베이터는 "밤"인큐베이터로 지정하고 12 시간 어둡고 12 시간 빛으로 첫 번째의 역으로 설정해야합니다. 야간 인큐베이터는 어둠 속에서 접근 할 수있는 방에 배치되어야하며, 야간 질환을 경험하는 파리는 실험을 위해 쉽게 액세스 할 수 있습니다.</li>
		<li>날밤에 플라이 바이알을 인큐베이터에 놓습니다. 새로 부화된 파리를 분석당 20-30으로 모으고 2-3일 동안 동일한 인큐베이터에 보관하십시오.</li>
		<li>2-3 일 후, 온도 환경 설정 행동 분석에 파리를 사용합니다.<ol>
<li>하루 (Zeitgeber 시간 (ZT) 0-12) 실험의 경우, 하루 인큐베이터에서 파리를 수집합니다.</li>
			<li>행동 실험 직전에 수집된 플라이 바이알을 하루 만에 꺼내십시오.</li>
			<li>야간 (ZT 13-24) 실험의 경우 야간 인큐베이터에서 파리를 수집하십시오.</li>
			<li>행동 실험 직전에 수집된 플라이 바이알을 야간 인큐베이터에서 꺼내 알루미늄 호일로 감싸고 빨간 램프 아래 어두운 방에 상자에 넣습니다. 참고: 야간 실험을 위해 어둠 속에서 온도 기본 설정 행동 분석이 수행되므로 행동 실험이 끝날 때까지 파리에 대한 가벼운 노출을 방지해야 합니다. 참고: 파리는 실험이 일어나는 날에 이산화탄소에 노출되어서는 안됩니다.</li>
		</ol>
</li>
	</ol></li>
	<li>일정한 어둠 (DD) 실험
	<ol>
<li>
DD 데이
		<ol>
<li>DD 일 실험에 추가 인큐베이터가 필요하며, 나머지 원고의 "전환" 인큐베이터라고 합니다. 전환 인큐베이터는 어둠 속에서 접근 할 수있는 방에 배치되어야하며, 이러한 방식으로 DD 조건을 경험하는 파리는 실험에 쉽게 액세스 할 수 있습니다. 전환 인큐베이터의 예시 라이트 스케줄은 오후 1시부터 오후 7시까지 켜지고 오후 7시~1시에 조명이 꺼집니다(그림1).</li>
			<li>당일 인큐베이터에서 자란 파리를 수집합니다. 빛이 켜지면 오후 1시에서 7시 사이에 플라이 바이알을 전환 인큐베이터에 놓습니다. 이런 식으로 파리는 오후 7시까지 빛에 제대로 노출되어 빛이 꺼집니다.</li>
			<li>다음날 오후 1시 이전에, 어두운 조건 하에서, 전환 인큐베이터에서 플라이 바이알을 꺼내 알루미늄 호일로 싸서 상자에 넣습니다. 상자를 인큐베이터에 1일 더 보관하십시오.</li>
		</ol>
</li>
		<li>
DD 나이트
		<ol>
<li>빨간 램프 아래 어둠 속에서 밤에 제기 된 파리를 수집합니다. 또는 야간 인큐베이터의 빛이 켜져있을 때 파리를 수집합니다.</li>
			<li>빛이 꺼져도 어둠 속에서 알루미늄 호일로 수집 된 바이알을 감싸고 바이알을 상자에 넣습니다. 상자를 인큐베이터에 2일 더 보관하십시오(그림1B). 참고: 야간 실험을 위해 어둠 속에서 온도 기본 설정 행동 분석이 수행되므로 행동 실험이 끝날 때까지 파리에 대한 가벼운 노출을 방지해야 합니다.</li>
		</ol>
</li>
	</ol></li>
	<li>일정한 빛(LL) 실험
	<ol>
<li>
LL 데이
		<ol>
<li>LL 데이 실험에는 추가 인큐베이터가 필요합니다. 이 인큐베이터는 LL 조건(25°C, 800 럭스)을 유지하며, LIGHT ON은 지속적으로 유지한다.</li>
			<li>당일 인큐베이터에서 자란 파리를 수집합니다. "하루"동안 언제든지 LL 인큐베이터에 플라이 바이알을 놓습니다.</li>
		</ol>
</li>
		<li>
LL 나이트
		<ol>
<li>야간 인큐베이터에서 자란 파리를 수집합니다. 야간 인큐베이터에서 LL 인큐베이터로 비행 바이알을 전송하여 야간 인큐베이터의 빛이 켜져 있는 동안. 참고: 예를 들어, 밤 인큐베이터에서 오전 7시에 빛이 꺼집니다. 야간 인큐베이터에서 오전 7시 이전에 LL 인큐베이터로 플라이 바이알을 옮기고 4일 동안 LL 인큐베이터에 바이알을 보관하십시오. 참고: LL 조건에서 4일째에, TPR은 아직도 3을지속되는 동안, 운동 활동의 진동은15,16폐지됩니다.</li>
		</ol>
</li>
	</ol></li>
</ol>2. 온도 선호도 행동 분석 장치
<ol><li>플렉시 글라스 커버 (29cm x 19.2 cm)(그림 4)를알루미늄 판에 놓습니다.</li>
	<li>플레이트와 덮개 사이의 공기 온도를 모니터링합니다. 6개의 온도 프로브는 차선 중하나(그림 2)내의 커버 내부의 다양한 위치에 부착된다. 참고: 프로브가 알루미늄 플레이트 또는 플렉시글라스 커버를 만지지 않도록 하십시오. 공기 온도는 18-32 °C에서 그라데이션으로 설정해야합니다.</li>
	<li>25°C/65-75% RH로 유지되는 환경실에 장치를 놓습니다. 이 객실은 외부 조명에서 밀봉해야 합니다. 환경실에는 보통 일정한 온도와 습도를 유지하기 위해 팬이 장착되어 있습니다. 참고: 팬의 공기는 기기의 안정적인 온도 그라데이션을 방해할 수 있습니다. 이를 방지하기 위해, 우리는 장치를 둘러싼 영역을 덮는 투명 시트를 사용합니다.</li>
	<li>온도계와 습도계를 준비하여 환경실의 온도와 습도를 확인합니다. 참고: 빛은 드로소필라3의온도 선호도에 영향을 미칩니다. 동일한 빛의 강도는 장치에 균일하게 공급되어야 합니다. 우리의 환경 실 조명의 강도는 ~ 800 럭스입니다. 참고: 행동 실험이 완료되면 CO2 탱크에서 연결된 튜브를 놓거나 장치의 상단 구멍 근처에 튜브를 놓아 마취하고 파리를 제거하십시오.</li>
</ol>3. 사용 장치 준비
<ol><li>플레이트 의 표면에 제대로 온도 그라데이션을 설정하기 위해 적어도 30 분 동안 장치를 켭니다(도 3).</li>
	<li>파리가 덮개의 벽이나 천장을 오르는 것을 방지하기 위해 발수제로 행동 장치의 덮개를 코팅합니다. 여분의 발수물을 닦아 25-30 분 동안 덮개를 둡니다.</li>
	<li>알루미늄 플레이트의 응축을 제거합니다. 플렉시글라스 커버를 알루미늄 플레이트에 놓고 6개의 C-클램프(그림2)로고정합니다. 참고 : 필요한 경우 이중 스틱 테이프를 사용할 수 있으므로 커버가 잘 밀봉되는 것이 매우 중요합니다.</li>
	<li>커버를 15분 이상 그대로 둡니다. 알루미늄 플레이트와 커버 사이의 공기 온도 그라데이션은 18-32 °C에서 생성됩니다.</li>
</ol>4. 온도 기본 설정 동작 분석
<ol><li>커버의 각 차선의 중앙에 작은 구멍을 통해 장치의 알루미늄 판과 플렉시 유리 커버 사이의 공간에 파리를적재(그림 2 및 4). 덮개 슬립으로 구멍을 덮어 파리가 탈출하지 못하도록 합니다.</li>
	<li>어두운 조건에서는 환경 실의 모든 조명을 끕니다. 빨간 램프는 파리가 장치에 배치 될 때 사용할 수 있습니다. 행동 실험이 완료될 때까지 빨간색 램프를 제외한 모든 표시등에 파리가 노출되지 않았는지 확인합니다.</li>
	<li>각 평가판에 대해 후속 시험에서 재사용할 수 없는 20-25개의 성인 파리를 사용하십시오. 행동 분석은 30분 동안 수행됩니다. 플래시가 있거나 깜박이지 않고 몇 장의 사진을 찍습니다. 실험 중에 많은 소음이나 갑작스런 움직임을 하지 않도록 주의하십시오.</li>
	<li>장치에 있는 6개의 프로브의 온도를 기록합니다. 습도뿐만 아니라 실온에 유의하십시오.</li>
	<li>이산화탄소 가스로 장치의 파리를 마취하고 클램프를 풀고 플렉시 유리 덮개를 제거하고 플레이트에서 파리를 제거합니다. 각 실험 후, 파리는 버려지다. 접시에서 응축이나 습기를 닦아냅니다. 플레이트의 덮개를 교체하고 다음 실험을 준비하기 위해 클램프로 조입니다.</li>
	<li>하루 종일 온도 선호도를 나타내기 위해 24시간 기간은 8개의 시간대, 낮 4개, 밤에는 4개로 나뉩니다. 예를 들어, 이러한 ZT 또는 CT 1-3, 4-6, 7-9, 10-12, 13-15, 16-18, 19-21 및 22-24를 사용합니다. 참고: 마스킹 효과로 인한 표현형 변형은 빛이 켜진 직후(ZT0) 또는 OFF(ZT12)가 예상되므로, 이 시간 동안온도 기본 설정 동작(ZT 또는 CT 0-1, 11.5-13 및 23.5-24)을 검사하지 않습니다. 결과가 통계적으로 건전하기 위해서는 각 시간대에서 최소 5번의 시험을 수행해야 합니다.</li>
</ol>5. 데이터 분석
<ol><li>다음과 같이 온도 그라데이션 을 계산합니다: 가장자리를 따라 플렉시글래스 커버의 위쪽과 하단에 배치되는 두 눈금자에 따라 온도 프로브가 배치되는 위치를 결정합니다(그림2A).</li>
	<li>온도 프로브 사이의 온도 그라데이션은 선형으로 추정됩니다. 온도 프로브의 위치와 해당 기록 된 온도에 따라 그림의 적절한 위치에서 각 정도의 온도를 나타내는 선을 그립니다. 각 도 간격에 있는 파리 수를 계산합니다. 벽이나 덮개 천장에 있는 파리는 제외합니다.</li>
	<li>각 차선의 각 온도 범위에서 파리의 백분율을 계산합니다. 평균 우선 온도는 아래와 같이 각 구간의 파리 및 온도 비율의 제품을 합산하여 계산됩니다. 파리의 % x 18.5 °C + 파리의 % x 19.5 ° C + 파리의 % x 20.5 ° C ....+ 파리의 % x 31.5 ° C + 파리의 % x 32.5 °C.</li>
	<li>각 시간대의 평균 선호 온도를 계산합니다: 온도 기본 설정 동작은 각 시간대(ZT 1-3, 4-6, 7-9, 10-12, 13-15, 16-18, 19-21 및 22-24) 동안 >5회 수행됩니다. 각 시간대의 평균 선호 온도를 계산하기 위해 각 평가판의 평균 선호 온도가 함께 평균됩니다. s.e.m. 오류 막대는 평가판 사이의 오류와 같습니다.</li>
</ol>

<ol>
	<li>Krauchi, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+thermophysiological+cascade+leading+to+sleep+initiation+in+relation+to+phase+of+entrainment.">The thermophysiological cascade leading to sleep initiation in relation to phase of entrainment.</a> Sleep Med. Rev. 11, 439-451 (2007).</li><li>Krauchi, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+human+sleep-wake+cycle+reconsidered+from+a+thermoregulatory+point+of+view.">The human sleep-wake cycle reconsidered from a thermoregulatory point of view.</a> Physiol. Behav. 90, 236-245 (2007).</li><li>Kaneko, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Circadian+Rhythm+of+Temperature+Preference+and+Its+Neural+Control+in+Drosophila.">Circadian Rhythm of Temperature Preference and Its Neural Control in Drosophila.</a> Curr. Biol. 22, 1851-1857 (2012).</li><li>Allada, R., Chung, B. Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Circadian+organization+of+behavior+and+physiology+in+Drosophila.">Circadian organization of behavior and physiology in Drosophila.</a> Annu. Rev. Physiol. 72, 605-624 (2010).</li><li>Garrity, P. A., Goodman, M. B., Samuel, A. D., Sengupta, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Running+hot+and+cold:+behavioral+strategies,+neural+circuits,+and+the+molecular+machinery+for+thermotaxis+in+C.+elegans+and+Drosophila..">Running hot and cold: behavioral strategies, neural circuits, and the molecular machinery for thermotaxis in C. elegans and Drosophila..</a> Genes Dev. 24, 2365-2382 (2010).</li><li>Hamada, F. N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=An+internal+thermal+sensor+controlling+temperature+preference+in+Drosophila.">An internal thermal sensor controlling temperature preference in Drosophila.</a> Nature. 454, 217-220 (2008).</li><li>Hong, S. T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=cAMP+signalling+in+mushroom+bodies+modulates+temperature+preference+behaviour+in+Drosophila.">cAMP signalling in mushroom bodies modulates temperature preference behaviour in Drosophila.</a> Nature. 454, 771-775 (2008).</li><li>Dillon, M. E., Wang, G., Garrity, P. A., Huey, R. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Review:+Thermal+preference+in+Drosophila.">Review: Thermal preference in Drosophila.</a> J. Therm. Biol. 34, 109-119 (2009).</li><li>Viswanath, V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Opposite+thermosensor+in+fruitfly+and.">Opposite thermosensor in fruitfly and.</a> Nature. 423, 822-823 (2003).</li><li>Gallio, M., Ofstad, T. A., Macpherson, L. J., Wang, J. W., Zuker, C. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+coding+of+temperature+in+the+Drosophila+brain.">The coding of temperature in the Drosophila brain.</a> Cell. 144, 614-624 (2011).</li><li>Stevenson, R. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+relative+importance+of+behavioral+and+physiological+adjustments+controlling+body+temperature+in+terrestrial+ectotherms.">The relative importance of behavioral and physiological adjustments controlling body temperature in terrestrial ectotherms.</a> Am. Nat. 126 (3), (1985).</li><li>Refinetti, R., Menaker, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+circadian+rhythm+of+body+temperature.">The circadian rhythm of body temperature.</a> Physiol. Behav. 51, 613-637 (1992).</li><li>Duffy, J. F., Dijk, D. J., Klerman, E. B., Czeisler, C. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Later+endogenous+circadian+temperature+nadir+relative+to+an+earlier+wake+time+in+older+people.">Later endogenous circadian temperature nadir relative to an earlier wake time in older people.</a> Am. J. Physiol. 275, 1478-1487 (1998).</li><li>Saper, C. B., Lu, J., Chou, T. C., Gooley, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+hypothalamic+integrator+for+circadian+rhythms.">The hypothalamic integrator for circadian rhythms.</a> Trends Neurosci. 28, 152-157 (2005).</li><li>Konopka, R. J., Pittendrigh, C., Orr, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Reciprocal+behaviour+associated+with+altered+homeostasis+and+photosensitivity+of+Drosophila+clock+mutants.">Reciprocal behaviour associated with altered homeostasis and photosensitivity of Drosophila clock mutants.</a> J. Neurogenet. 6, 1-10 (1989).</li><li>Qiu, J., Hardin, P. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=per+mRNA+cycling+is+locked+to+lights-off+under+photoperiodic+conditions+that+support+circadian+feedback+loop+function.">per mRNA cycling is locked to lights-off under photoperiodic conditions that support circadian feedback loop function.</a> Mol. Cell Biol. 16, 4182-4188 (1996).</li><li>Crocker, A., Sehgal, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Genetic+analysis+of+sleep.">Genetic analysis of sleep.</a> Genes Dev. 24, 1220-1235 (1220).</li><li>Hendricks, J. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Rest+in+Drosophila+is+a+sleep-like+state.">Rest in Drosophila is a sleep-like state.</a> Neuron. 25, 129-138 (2000).</li><li>Shaw, P. J., Cirelli, C., Greenspan, R. J., Tononi, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Correlates+of+sleep+and+waking+in+Drosophila+melanogaster.">Correlates of sleep and waking in Drosophila melanogaster.</a> Science. 287, 1834-1837 (2000).</li><li>Parisky, K. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=PDF+cells+are+a+GABA-responsive+wake-promoting+component+of+the+Drosophila+sleep+circuit.">PDF cells are a GABA-responsive wake-promoting component of the Drosophila sleep circuit.</a> Neuron. 60, 672-682 (2008).</li></ol>

공개할 것은 없습니다.

여기서, 우리는 온도 선호도 행동 장치의 세부 사항 및 TPR 행동의 분석을 설명합니다. Drosophila는 시계 제어 TPR의 현저하고 견고하며 재현 가능한 특징을 전시합니다. 그러나, 우리의 데이터는 적어도 두 가지 요인, 주변 빛과 나이, 크게 TPR 행동 표현형을 방해한다는 것을 건의합니다.
우리는 빛이 Drosophila의온도 선호도에 크게 영향을 미친다는 것을 관찰합니다. ?...

온도는 유비쿼터스 환경 큐입니다. 동물은 유해한 온도를 피하고 편안한 온도를 추구하기 위해 다양한 행동을 나타낸다. 드로소필라는 견고한 온도 선호도 동작6,7을나타낸다. 파리가 18-32°C에서 온도 그라데이션으로 방출되면 파리는 따뜻하고 추운 온도를 모두 피하고3일아침에 25°C의 바람직한 온도를 선택한다. 따뜻한 온도 센서는 열감각 뉴런의 집합, AC 뉴런, 드로소필라 과도 수용체 전위 (TPR) 채널, TRPA16,9을발현. 저온 센서는 제3 안테나 세그먼트를 타래면 저온 회피6의부족을 야기하기 때문에 제 3 안테나 세그먼트에 위치합니다. 최근에는 TRPP 단백질 브리비도(Brv)가10을확인하였다. Brv는 제 3 안테나 세그먼트에서 발현되고 감기 검출을 중재하기 때문에 Brv는 온도 선호도 행동에 중요한 가능한 감기 감지 분자입니다. 요약하면, 파리는 따뜻하고 차가운 온도를 피하고 선호하는 온도를 찾기 위해이 두 온도 센서를 사용합니다.
포유류는 체온을 조절하기 위해 열을 발생하지만, ectotherms는 일반적으로 주변 온도11에체온을 적응시다. 일부 ectotherms는 그들의 BTR12를통제하는 ectotherms를 위한 전략으로 여겨지는 매일 TPR 행동을 전시하기 위하여 알려진다. 파리가 TPR을 전시했는지 여부를 확인하기 위해 24 시간 동안 다양한 지점에서 온도 선호도 행동 분석을 반복했습니다. 우리는 Drosophila가 매일 TPR을 전시한다는 것을 것을을 발견했습니다, 이는 아침에 낮고 저녁에 높은 및 인간에 있는 BTR의 것과 유사한 패턴을 따릅니다13.
Drosophila에서뇌에는 ~ 150 시계 뉴런이 있습니다. 운동 활동을 조절하는 시계 뉴런은 M과 E 발진기라고합니다. 그러나 흥미롭게도 M과 E 발진기는 TPR을 조절하지 않고 대신 뇌의 DN2 클럭 뉴런이 TPR을 조절하지만 운동 활동은 조절하지 않는 것으로 나타났습니다. 이러한 데이터는 TPR이 운동 활동과 독립적으로 규제된다는 것을 나타냅니다. 특히, 포유류 BTR은 또한 운동 활동에서 독립적으로 통제됩니다. 쥐에 있는 절제 연구는 BTR이 운동 활동을 통제하는 그보다는 subparaventricular zone 뉴런의 다른 부세트를 표적으로 하는 특정 SCN 뉴런을 통해 통제된다는 것을 보여줍니다14. 따라서, 우리의 데이터는 포유동물 BTR및 플라이 TPR이 진화적으로 보존될 가능성을 고려합니다3,모두 비행 TPR및 포유류 BTR은 궤변 활동에서 독립적으로 규제되는 circadian 시계 의존온도 리듬을 전시하기 때문에.
여기에서 Drosophila의TPR 행동 분석을 분석하는 방법에 대한 세부 사항을 설명합니다. 이 방법은 TPR의 분자 메커니즘 및 신경 회로뿐만 아니라 뇌가 다른 환경 단서와 내부 생물학적 시계를 통합하는 방법을 조사 할 수 있습니다.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="578">
	<colgroup>
		<col />
		<col />
		<col />
		<col />
	</colgroup>
	<tbody>
		<tr height="41">
			<td height="41" style="height:41px;width:172px;">Bright Lab Jr. Safelight</td>
			<td style="width:109px;">Amazon</td>
			<td style="width:153px;">#B00013J8UY</td>
			<td style="width:144px;">Red light for dark rooms</td>
		</tr>
		<tr height="61">
			<td height="61" style="height:61px;width:172px;">Rain X</td>
			<td style="width:109px;">SOPUS products</td>
			<td style="width:153px;"></td>
			<td style="width:144px;">Water repellent: Apply the plexiglass cover</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:172px;">C-Clamp</td>
			<td style="width:109px;">Home Depot</td>
			<td style="width:153px;"></td>
			<td style="width:144px;"></td>
		</tr>
		<tr height="32">
			<td height="32" style="height:32px;width:172px;">Temperature/hygrometer</td>
			<td style="width:109px;">Fisher</td>
			<td style="width:153px;">15-077-963</td>
			<td style="width:144px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:172px;"></td>
			<td style="width:109px;"></td>
			<td style="width:153px;"></td>
			<td style="width:144px;"></td>
		</tr>
		<tr height="44">
			<td height="44" style="height:44px;width:172px;">Peltier devices</td>
			<td style="width:109px;">TE Technology, Inc.</td>
			<td style="width:153px;">HP-127-1.4-1.15-71P</td>
			<td style="width:144px;"></td>
		</tr>
		<tr height="30">
			<td height="30" style="height:30px;width:172px;">Thermometer</td>
			<td style="width:109px;">Fluke</td>
			<td style="width:153px;">Fluke 52II</td>
			<td style="width:144px;"></td>
		</tr>
		<tr height="46">
			<td height="46" style="height:46px;width:172px;">Bench top controller</td>
			<td style="width:109px;">Oven Industries</td>
			<td style="width:153px;">5R6-570-15R and 5R6-570-24R</td>
			<td style="width:144px;"></td>
		</tr>
		<tr height="36">
			<td height="36" style="height:36px;width:172px;">Temperature sensor probe</td>
			<td style="width:109px;">Oven Industries</td>
			<td style="width:153px;">TR67-32</td>
			<td style="width:144px;"></td>
		</tr>
		<tr height="52">
			<td height="52" style="height:52px;width:172px;">Generic 480 Watt ATX power supply</td>
			<td style="width:109px;"></td>
			<td style="width:153px;"></td>
			<td style="width:144px;">computer cooling system</td>
		</tr>
		<tr height="64">
			<td height="64" style="height:64px;width:172px;">MCR220-QP-RES Dual 120 mm Radiator with reservoir&#160;</td>
			<td style="width:109px;">Swiftech</td>
			<td style="width:153px;"></td>
			<td style="width:144px;">computer cooling system</td>
		</tr>
		<tr height="50">
			<td height="50" style="height:50px;width:172px;">MCP350 In-Line 12V DC pump</td>
			<td style="width:109px;">Swiftech</td>
			<td style="width:153px;"></td>
			<td style="width:144px;">computer cooling system</td>
		</tr>
		<tr height="49">
			<td height="49" style="height:49px;width:172px;">MCW50 graphics Card liquid cooler</td>
			<td style="width:109px;">Swiftech</td>
			<td style="width:153px;"></td>
			<td style="width:144px;">computer cooling system</td>
		</tr>
		<tr height="52">
			<td height="52" style="height:52px;width:172px;">Scythe Kaze-Jyuni SY1225SL12SH fan</td>
			<td style="width:109px;">Crazy PC</td>
			<td style="width:153px;"></td>
			<td style="width:144px;">computer cooling system</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

design and analysis of temperature preference behavior and its circadian rhythm in drosophila

circadian 시계는 수 면, 운동 활동 및 체온 (BTR) 리듬1,2를포함하여 삶의 많은 측면을 조절합니다. 우리는 최근에 온도 선호도 리듬 (TPR)이라고 불리는 새로운 Drosophila circadian 출력을 확인했는데, 이 때 파리의 바람직한 온도는 낮동안 상승하고 3일 밤 동안 떨어집니다. 놀랍게도, TPR 및 운동 활동은 뚜렷한 circadian 뉴런을 통해 제어됩니다3. Drosophila 운동 활동은 잘 알려진 circadian 행동 출력이고 많은 보존된 포유류 circadian 시계 유전자 및 기계장치4의발견에 강한 기여를 제공하고 있습니다. 따라서 TPR을 이해하면 알 수 없는 분자 및 세포 circadian 메커니즘의 식별으로 이어질 것입니다. 여기에서는 TPR 분석기를 수행하고 분석하는 방법을 설명합니다. 이 기술은 TPR의 분자 및 신경 메커니즘을 해부 할뿐만 아니라 다른 환경 신호를 통합하고 동물의 행동을 조절하는 뇌 기능의 기본 메커니즘에 대한 새로운 통찰력을 제공합니다. 또한, 최근 발표된 자료에 따르면 플라이 TPR은 포유류 BTR3과특징을 공유합니다. 드로소필라는 체온이 일반적으로 행동조절되는 동체입니다. 따라서, TPR은 이들 플라이5-8에서리듬체온을 생성하는 데 사용되는 전략이다. 우리는 Drosophila TPR의 추가 탐구는 동물에 있는 체온 통제의 근본적인 기계장치의 특성화를 촉진할 것이라는 점을 믿습니다.

온도 선호도 리듬의 예는 도 5에도시된다. 행동 절차가 성공적으로 완료되면, 파리는 아침에 낮은 온도와 저녁에 더 높은 온도를 선호하는 TPR을 전시해야합니다. ~1-1.5°C의 기온 선호도는 유전적 배경에 관계없이 낮동안 관찰되어야 하며, w 1118, yw 및 캔톤 S파리가 낮3시에유사한 온도 선호도를 나타낸다는 것을 보여주었기 때문에 관찰되어야 한다.<...

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Design and Analysis of Temperature Preference Behavior and its Circadian Rhythm in Drosophila

우리는 최근에 새로운 Drosophila circadian 출력, 온도 선호 리듬 (TPR)을 확인, 있는 파리에서 선호 하는 온도 낮에는 상승 하 고 밤에 폭포. TPR은 다른 circadian 출력, 운동 활동과 독립적으로 규제됩니다. 여기에서 우리는 Drosophila에서TPR의 디자인 그리고 분석을 기술합니다.

드로소필라의 온도 선호도 행동과 Circadian 리듬의 설계 및 분석

The circadian clock regulates many aspects of life, including sleep, locomotor activity, and body temperature (BTR) rhythms1,2. We recently identified a ...

design-analysis-temperature-preference-behavior-its-circadian-rhythm

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Design and Analysis of Temperature Preference Behavior and its Circadian Rhythm in Drosophila

Unit 1

Alternative Signaling Routes in Gene Expression

SCIENTISTS IN ACTION

8.0K 조회수.  Cincinnati Childrens Hospital Medical Center. 우리는 최근에 새로운 Drosophila circadian 출력, 온도 선호 리듬 (TPR)을 확인, 있는 파리에서 선호 하는 온도 낮에는 상승 하 고 밤에 폭포. TPR은 다른 circadian 출력, 운동 활동과 독립적으로 규제됩니다. 여기에서 우리는 Drosophila에서TPR의 디자인 그리고 분석을 기술합니다.

비디오: Design and Analysis of Temperature Preference Behavior and its Circadian Rhythm in Drosophila

High-resolution Measurement of Odor-Driven Behavior in Drosophila Larvae

Olfactory responses in Drosophila larvae have been traditionally studied in Petri dishes comprising a single peripheral odor source. In this behavioral paradigm, the experimenter usually assumes that the rapid diffusion of odorant molecules from the source leads to the creation of a stable gradient in the dish. To establish a quantitative correlation between sensory inputs and behavioral responses, it is necessary to achieve a more thorough characterization of the odorant stimulus conditions. In this video article, we describe a new method allowing the construction of odorant gradients with stable and controllable geometries. We briefly illustrate how these gradients can be used to screen for olfactory defects (full and partial anosmia) and to study more subtle features of chemotaxis behavior.

In this video article, we describe a new method allowing the construction of odorant gradients with stable and controllable geometries. We briefly illustrate how these gradients can be used to screen for olfactory defects (full and partial anosmia) and to study more subtle features of chemotaxis behavior.

Drosophila의 유충에서 냄새 기반 행동의 고해상도 측정

Olfactory responses in Drosophila larvae have been traditionally studied in Petri dishes comprising a single peripheral odor source. In this behavioral ...

연구

생물학

Lens Transplantation in Zebrafish and its Application in the Analysis of Eye Mutants

The lens plays an important role in the development of the optic cup[1,2]. Using the zebrafish as a model organism, questions regarding lens development can be addressed. The zebrafish is useful for genetic studies due to several advantageous characteristics, including small size, high fecundity, short lifecycle, and ease of care. Lens development occurs rapidly in zebrafish. By 72 hpf, the zebrafish lens is functionally mature [3]. Abundant genetic and molecular resources are available to support research in zebrafish. In addition, the similarity of the zebrafish eye to those of other vertebrates provides basis for its use as an excellent animal model of human defects[4-7]. Several zebrafish mutants exhibit lens abnormalities, including high levels of cell death, which in some cases leads to a complete degeneration of lens tissues [8]. To determine whether lens abnormalities are due to intrinsic causes or to defective interactions with the surrounding tissues, transplantation of a mutant lens into a wild-type eye is performed. Using fire-polished metal needles, mutant or wild-type lenses are carefully dissected from the donor animal, and transferred into the host. To distinguish wild-type and mutant tissues, a transgenic line is used as the donor. This line expresses membrane-bound GFP in all tissues, including the lens. This transplantation technique is an essential tool in the studies of zebrafish lens mutants.

Lens development involves interactions with other tissues. Several zebrafish eye mutants are characterized by an abnormally small lens size. Here we demonstrate a lens transplantation experiment to determine whether this phenotype is due to intrinsic causes or defective interactions with tissues that surround the lens.

렌즈 Zebrafish의 이식과 눈 돌연변이의 분석에의 응용

The lens plays an important role in the development of the optic cup[1,2]. Using the zebrafish as a model organism, questions regarding lens development ...

Studying Mitotic Checkpoint by Illustrating Dynamic Kinetochore Protein Behavior and Chromosome Motion in Living Drosophila Syncytial Embryos

The spindle assembly checkpoint (SAC) mechanism is an active signal, which monitors the interaction between chromosome kinetochores and spindle microtubules to prevent anaphase onset until the chromosomes are properly connected. Cells use this mechanism to prevent aneuploidy or genomic instability, and hence cancers and other human diseases like birth defects and Alzheimer's1. A number of the SAC components such as Mad1, Mad2, Bub1, BubR1, Bub3, Mps1, Zw10, Rod and Aurora B kinase have been identified and they are all kinetochore dynamic proteins2. Evidence suggests that the kinetochore is where the SAC signal is initiated. The SAC prime regulatory target is Cdc20. Cdc20 is one of the essential APC/C (Anaphase Promoting Complex or Cyclosome) activators3 and is also a kinetochore dynamic protein4-6. When activated, the SAC inhibits the activity of the APC/C to prevent the destruction of two key substrates, cyclin B and securin, thereby preventing the metaphase to anaphase transition7,8. Exactly how the SAC signal is initiated and assembled on the kinetochores and relayed onto the APC/C to inhibit its function still remains elusive.
Drosophila is an extremely tractable experimental system; a much simpler and better-understood organism compared to the human but one that shares fundamental processes in common. It is, perhaps, one of the best organisms to use for bio-imaging studies in living cells, especially for visualization of the mitotic events in space and time, as the early embryo goes through 13 rapid nuclear division cycles synchronously (8-10 minutes for each cycle at 25 &deg;C) and gradually organizes the nuclei in a single monolayer just underneath the cortex9.
Here, I present a bio-imaging method using transgenic Drosophila expressing GFP (Green Fluorescent Protein) or its variant-targeted proteins of interest and a Leica TCS SP2 confocal laser scanning microscope system to study the SAC function in flies, by showing images of GFP fusion proteins of some of the SAC components, Cdc20 and Mad2, as the example.

Studying Mitotic Checkpoint by Illustrating Dynamic Kinetochore Protein Behavior and Chromosome Motion in Living Drosophila Syncytial Embryos

The kinetochore is where the SAC initiates its signal monitoring the mitotic segregation of the sister chromatids. A method is described to visualize the recruitment and turnover of one of the kinetochore proteins and its coordination with the chromosome motion in Drosophila embryos using a Leica laser scanning confocal system.

생활에서 보여주는 동적 Kinetochore 단백질 행동과 염색체 모션으로 Mitotic 검사 점 유학<em&gt; Drosophila</em&gt; Syncytial 태아

The spindle assembly checkpoint (SAC) mechanism is an active signal, which monitors the interaction between chromosome kinetochores and spindle ...

Extraction and Analysis of Cortisol from Human and Monkey Hair

The stress hormone cortisol (CORT) is slowly incorporated into the growing hair shaft of humans, nonhuman primates, and other mammals. We developed and validated a method for CORT extraction and analysis from rhesus monkey hair and subsequently adapted this method for use with human scalp hair. In contrast to CORT &#34;point samples&#34; obtained from plasma or saliva, hair CORT provides an integrated measure of hypothalamic-pituitary-adrenocortical (HPA) system activity, and thus physiological stress, during the period of hormone incorporation. Because human scalp hair grows at an average rate of 1 cm/month, CORT levels obtained from hair segments several cm in length can potentially serve as a biomarker of stress experienced over a number of months.
In our method, each hair sample is first washed twice in isopropanol to remove any CORT from the outside of the hair shaft that has been deposited from sweat or sebum. After drying, the sample is ground to a fine powder to break up the hair&#39;s protein matrix and increase the surface area for extraction. CORT from the interior of the hair shaft is extracted into methanol, the methanol is evaporated, and the extract is reconstituted in assay buffer. Extracted CORT, along with standards and quality controls, is then analyzed by means of a sensitive and specific commercially available enzyme immunoassay (EIA) kit. Readout from the EIA is converted to pg CORT per mg powdered hair weight. This method has been used in our laboratory to analyze hair CORT in humans, several species of macaque monkeys, marmosets, dogs, and polar bears. Many studies both from our lab and from other research groups have demonstrated the broad applicability of hair CORT for assessing chronic stress exposure in natural as well as laboratory settings.

Cortisol (CORT) accumulates in the growing hair shaft of humans and nonhuman primates. We describe methods for extracting and analyzing hair CORT with high precision and sensitivity. Measurement of hair CORT is particularly well-suited for assessing chronic stress over periods of weeks to months.

추출 및 인간과 원숭이의 머리에서 코르티솔 분석

The stress hormone cortisol (CORT) is slowly incorporated into the growing hair shaft of humans, nonhuman primates, and other mammals. We developed and ...

Cytological Analysis of Spermatogenesis: Live and Fixed Preparations of Drosophila Testes

Drosophila melanogaster is a powerful model system that has been widely used to elucidate a variety of biological processes. For example, studies of both the female and male germ lines of Drosophila have contributed greatly to the current understanding of meiosis as well as stem cell biology. Excellent protocols are available in the literature for the isolation and imaging of Drosophila ovaries&#160;and testes3-12. Herein, methods for the dissection and preparation of Drosophila testes for microscopic analysis are described with an accompanying video demonstration. A protocol for isolating testes from the abdomen of adult males and preparing slides of live tissue for analysis by phase-contrast microscopy as well as a protocol for fixing and immunostaining testes for analysis by fluorescence microscopy are presented. These techniques can be applied in the characterization of Drosophila mutants that exhibit defects in spermatogenesis as well as in the visualization of subcellular localizations of proteins.

Cytological Analysis of Spermatogenesis: Live and Fixed Preparations of Drosophila Testes

Methods for isolating and preparing Drosophila testes samples (live and fixed) for imaging by phase-contrast and fluorescence microscopy are described herein.&#160;

정자의 세포 학적 분석 : 라이브와 고정 준비<em&gt; 초파리</em&gt; 고환

Drosophila melanogaster is a powerful model system that has been widely used to elucidate a variety of biological processes. For example, studies of both ...

Rapid Analysis of Circadian Phenotypes in Arabidopsis Protoplasts Transfected with a Luminescent Clock Reporter

The plant circadian clock allows the anticipation of daily changes to the environment. This anticipation aids the responses to temporally predictable biotic and abiotic stress. Conversely, disruption of circadian timekeeping severely compromises plant health and reduces agricultural crop yields. It is therefore imperative that we understand the intricate regulation of circadian rhythms in plants, including the factors that affect motion of the transcriptional clockwork itself.
Testing circadian defects in the model plant Arabidopsis thaliana (Arabidopsis) traditionally involves crossing specific mutant lines to a line rhythmically expressing firefly luciferase from a circadian clock gene promoter. This approach is laborious, time-consuming, and could be fruitless if a mutant has no circadian phenotype. The methodology presented here allows a rapid initial assessment of circadian phenotypes. Protoplasts derived from mutant and wild-type Arabidopsis are isolated, transfected with a rhythmically expressed luminescent reporter, and imaged under constant light conditions for 5 days. Luminescent traces will directly reveal whether the free-running period of mutant plants is different from wild-type plants. The advantage of the method is that any Arabidopsis line can efficiently be screened, without the need for generating a stably transgenic luminescent clock marker line in that mutant background.

The circadian clock regulates about a third of the Arabidopsis transcriptome, but the percentage of genes that feed back into timekeeping remains unknown. Here we visualize a method to rapidly assess circadian phenotypes in any mutant line of Arabidopsis using luminescent imaging of a circadian reporter transiently expressed in protoplasts.

발광 시계 기자와 애기 장대 원형질체 트랜의 일주기 표현형의 신속한 분석

The plant circadian clock allows the anticipation of daily changes to the environment. This anticipation aids the responses to temporally predictable ...

Observation and Quantification of Mating Behavior in the Pinewood Nematode, Bursaphelenchus xylophilus

A method for observing and quantifying the mating behavior of the pinewood nematode, Bursaphelenchus xylophilus, was established under a stereomicroscope. To improve the mating efficiency of B. Xylophilus and to increase the chances of mating observation, virgin adults were cultured and used for the investigation. Eggs were obtained by keeping the nematodes in water and allowing the females to lay eggs for 10 min. The second-stage juveniles (J2) were synchronized by incubating the eggs for 24 h at 25 &#176;C in the dark, and the early J4 were obtained by culturing the J2 with grey mold, Botrytis cinerea, for another 52 h. At this time point, most J4 nematodes could be clearly distinguished as being male or female using their genital morphology. The male and female J4 were collected and cultured separately in two different Petri dishes for 24 h to get virgin adult nematodes. A virgin male and a virgin female were paired in a drop of water in the well of a concave slide. The mating behavior was filmed with a video recorder under a stereomicroscope. The whole period of the mating process was 82.8 &#177;3.91 min (mean &#177;SE) and could be divided into 4 different phases: searching, contacting, copulating, and lingering. The mean minutes of duration were 21.8 &#177; 2.0, 28.0 &#177; 1.9, 25.8 &#177; 0.7 and 7.2 &#177; 0.5, respectively. Eleven sub-behaviors were described: cruising, approaching, encountering, touching, hooping, locating, attaching, ejaculating, separating, quiescence, and roaming. Interestingly, obvious intra-sexual competition was observed when one female was grouped with 3 males or one male with 3 females. This protocol is useful and valuable, not only in investigating the mating behavior of B. xylophilus, but also in acting as a reference for ethological studies of other nematodes.

Observation and Quantification of Mating Behavior in the Pinewood Nematode, Bursaphelenchus xylophilus

A protocol for investigating the mating behavior of the pinewood nematode, Bursaphelenchus xylophilus, is presented. Behavioral features of B. xylophilus are described in the mating process.

파인 우드 선충의 관측 및 짝짓기 행동의 정량화,<em&gt; 소나무 재선충</em

A method for observing and quantifying the mating behavior of the pinewood nematode, Bursaphelenchus xylophilus, was established under a stereomicroscope. ...

Analysis of Arabidopsis thaliana Growth Behavior in Different Light Qualities

Plant biologists often need to observe the growth behavior of their chosen species. To this end, the plants need constant environmental and stable light conditions, which are preferably variable in quantity and quality so that studies under different setups can be conducted. These requirements are met by climatic chambers featuring light emitting diodes (LED) lights, which can &#8211; in contrast to fluorescent lights &#8211; be set to different wavelengths. LEDs are energy conserving and emit virtually no heat even at light intensities, which often constitutes a problem with other light sources. The presented protocol provides a step-by-step guidance of how to program a climatic chamber equipped with variable LED lights as well as describing several approaches for in depth analysis of growth phenotypes. Depending on the experimental set-up various characteristics of the growing plants can be observed and analyzed. Here we describe how to determine fresh weight, leaf area, photosynthetic activity, and stomatal density. We demonstrate that in order to obtain reliable data and draw valid conclusions it is mandatory to use a sufficient number of individuals for statistical evaluation. Taking too few plants for this kind of analysis results in high statistical errors and consequently in less clear interpretations of the data.

Analysis of Arabidopsis thaliana Growth Behavior in Different Light Qualities

Here, we present a protocol for studying plant growth behavior and especially phenotypes in a reproducible manner. We show how to provide variable and at the same time stable light conditions. Proper analyses depend on sufficient sample numbers and valid statistical evaluations.

다른 빛 자질에 애기 thaliana 성장 행동의 분석

Plant biologists often need to observe the growth behavior of their chosen species. To this end, the plants need constant environmental and stable light ...

Circadian Entrainment of Drosophila Melanogaster

Nearly universal among organisms, circadian rhythms coordinate biological activity to earth&#39;s orbit around the sun. To identify factors creating this rhythm and to understand the resulting outputs, entrainment of model organisms to defined circadian time-points is required. Here we detail a procedure to entrain many Drosophila to a defined circadian rhythm. Furthermore, we detail post-entrainment steps to prepare samples for immunofluorescence, nucleic acid, or protein extraction-based analysis.

Here, we detail how to synchronize Drosophila to a circadian day. This is the first, and most important step necessary for studying biological rhythms and chronobiology.

드로소필라 멜라노가스터의 일레카디아 인교육

Nearly universal among organisms, circadian rhythms coordinate biological activity to earth&#39;s orbit around the sun. To identify factors creating this ...

Dissecting, Fixing, and Visualizing the Drosophila Pupal Notum

The pupae of Drosophila melanogaster are immobile for several days during metamorphosis, during which they develop a new body with a thin transparent adult integument. Their immobility and transparency make them ideal for in vivo live imaging experiments. Many studies have focused on the dorsal epithelial monolayer of the pupal&#160;notum because of its accessibility and relatively large size. In addition to the studies of epithelial mechanics and development, the notum has been an ideal tissue to study wound healing. After an injury, the entire epithelial repair process can be captured by live imaging over 6-12 h. Despite the popularity of the notum for live imaging, very few published studies have utilized fixed notum samples. Fixation and staining are common approaches for nearly all other Drosophila tissues, taking advantage of the large repertoire of simple cellular stains and antibodies. However, the pupal notum is fragile and prone to curling and distortion after removal from the body, making it challenging to complement live imaging. This protocol offers a straightforward method for fixing and staining the pupal notum, both intact and after laser-wounding. With this technique, the ventral side of the pupa is glued down to a coverslip to immobilize the pupa, and the notum is carefully removed, fixed, and stained. The notum epithelium is mounted on a slide or between two coverslips to facilitate imaging from the tissue&#39;s dorsal or ventral side.

Dissecting, Fixing, and Visualizing the Drosophila Pupal Notum

The present protocol details the preparation and visualization of fixed tissue of the Drosophila pupal notum. It can be used for either intact or wounded tissue, and the original architecture of the tissue is preserved. The procedures for dissecting, fixing, and staining are all described in this article.

Drosophila Pupal Notum 해부, 고정 및 시각화

The pupae of Drosophila melanogaster are immobile for several days during metamorphosis, during which they develop a new body with a thin transparent ...