이 작품은 SNF [31003A-138528], Octav 및 Marcella의 Botnar 재단, 노바티스 재단과 엠마 Muschamp 재단의 보조금에 의해 지원되었다. 우리는 우수한 기술 지원을 마틴 Lambelet하고, 장 - 크리스토프 Stehle 감사합니다.

로잔 대학의 윤리위원회는 인체 조직의 사용을 1983 년 개정, 1975 년 헬싱키 선언에 명시된 원칙에 따라 아르 실험을 승인했다. 1 인간 대 복재 정맥 수확 <ol><li> 허혈 하체 바이 패스 수술을받은 환자에서 비 정맥류 인간 복재 정맥의 잉여 세그먼트를 얻습니다. 수술실에서, 요오드 용액과 다리 전체를 소독하고 발에 사타구니에서 다리를 노출하는 환자를 내리면. </li><li> 무릎에 사타구니에서 중간 절개를 (중단 피부 부분을 떠나). </li><li> 조직 (노 터치 기술을) 주변의 척추 경에 큰 복재 정맥을 수확. 4-0 실크 넥타이와 혈관의 보안 측면 분기합니다. 즉시 RPMI-1640 G에서 4 ° C에서 9cm 2.5-4 mm의 외부 직경이 큰 복재 정맥의 긴 잉여 세그먼트의 최소 저장lutamax 매체는, 12.5 % 태아 혈청으로 보충하고 실험실로 가져옵니다. </li></ol> 2 EVPS 디자인 <ol><li> . 그림 1에 나와있는 일반적인 장비를 조립 모든 장비를 오토 클레이브 멸균 조건에서 모든 구성 요소를 유지합니다. 또한, 시스템은 방수 및 배지에 화학 물질이 누출되지 않도록. 표지 폴리 메타 크릴 메틸 (PMMA-GS)를 사용합니다. 스틸 (X5 크롬 니켈 18 10) 및 정맥 지지체로서 폴리 옥시 메틸렌 수지 (POM). </li><li> 정맥과 연결의 배치를 허용하도록 원하는 형상으로 관류 챔버를 설계한다. 이 배양 배지 (그림 1)에 의해 일정한 범위와 함께 선박의 최소 굴곡과 팽창을 할 수 있도록 (원통형 구조를 사용하는 경우 또는 반경) 최소 2.5 cm 있는지 깊이를 확인합니다. 밀봉은 중요한 문제이며, 직사각형 PMMA-GS 건설이 사용되는 이유입니다. </li><li> 원하는 geometr에 정맥 지원 디자인y를 입력합니다. 정맥 또는 꼬임 위에 팽만을 피하기 위해, (정맥이 나사와 함께 꼬아 것처럼 스크류, 그 목적으로 사용될 수 없다) 밀거나 당기는 길이 조정을 허용한다. 참고 : L 모양 (선박에 맞게 5mm 직경)이 정맥 실린더를 지원하는 조각 및 정맥 (그림 1B와 그림 2) 슬라이드 2에 연결하는 강재의로드 여기에 사용됩니다. </li><li> P = 0-10 = HX ρ XG, 여기서 P = 압력 (N / m 2, PA) 유체 열 (m)의 H = 높이 ρ : 압력 열, 같은 시스템에 적용 &quot;휴식 압력&quot;이라고 디자인 = 액체 (kg / m 3), g = 중력 상수 (9.81 m / 초 2)의 밀도. 위에서 아래로 디자인 넷 연결 덕트 : (정맥) 유출에 대한 (정맥) 유입 압력을 적용하고 매체 변경을 허용 할 수 있습니다. </li><li> 매체를 준비합니다. 이전의 연구 5,11-14을 바탕으로, 12.5 Glutamax 보충, RPMI-1640을 선택% 소 태아 혈청, 1 %의 항생제 항진균제 용액 (10,000 U / ㎖ 페니실린 G, 플러스 10 ㎎ / ㎖ 스트렙토 마이신 황산염, 플러스 25 ㎎ / ㎖ 암포 테리 신 B, 플러스 0.5 ㎍ / ㎖의 : 겐타 마이신). 전단 응력 (SS)가 SS = 4 μQ / π의 * r을 3 Q 주어진다하면 유속 (㎖ / 초), 정맥 세그먼트의 반경 (cm)을 r에, 그리고 μ는 관류 매질의 점도이다. <ol><li> 70 kDa의 덱스 트란을 첨가하여 점도를 조정 SS를 변조. 점도계와 점도를 측정한다. 여기에, DYN / cm 2 9-15에 SS를 설정 8퍼센트 70 kDa의 덱스 트란을 추가합니다. </li></ol></li><li> 60 펄스 / 분 정 진폭이 컴퓨터 시스템에인가되고 제어 압력 독립적 150 ± 15 ㎖ / 분의 단방향 흐름을 생성 박동성 카디오이드 신호를 유도하는 기어 펌프를 설정한다. 구동 소프트웨어가 지속적인 수집 및 압력 모니터링, 유속, 펄스 속도, 신호를 통합 있는지 확인합니다. 원하는 경우, 제 2 펌프를 사용하여 (비 동기화hronized) 비 층류, 난류를 생성한다. </li></ol> 3 EVPS 조립 (그림 1) <ol><li> 시작하기 전에 모든 장비는 멸균 있는지 확인합니다. 층류 후드에서 무균 아래의 모든 다음 단계를 수행합니다. </li><li> 배지로 가득 배양 접시에있는 정맥을 놓습니다. 수술 블레이드를 사용하여 3 동일한 세그먼트로 정맥을 나눕니다. </li><li> 즉시 PBS에서 하나의 세그먼트를 씻어. , 세 부분으로 세그먼트를 분할 형태 계측을 위해 포르말린을 수정합니다. 양적 성적 증명서 (RT-PCR)와 단백질 (서양 얼룩) 분석을위한 다른 두 동결. 제어되지 않은 혈관 관류 이들 세그먼트를 고려한다. </li><li> 관류이 나머지 부분을 사용합니다. <ol><li> 아주 부드럽게 정맥 ​​매체를 주입하고 정상 유동 방향을 결정하고; 밸브의 존재 정맥이 반전됩니다. </li><li> 혈관 씰링 실험 성공에 가장 중요합니다. 담보를 통해 누출을 점검한다. 6-0 실크 봉합과 누출을 고정합니다. </li> &lt;/ OL&gt; </li><li> 시간 (2.3, 그림 1)에서 정맥 두 개의 금속 실린더 사이의 세그먼트, 한 끝을 연결합니다. 들여 쓰기 (그림 1A 및 B)의 주위에 Ethibon 3-0로 실린더를 고정합니다. <ol><li> 이전에 매체 가득 관류 챔버로 전체 정맥 세그먼트를 배치합니다. 제 2 세그먼트에 대한 동일한 절차를 반복한다. 제대로 실린더에 정맥을 밀봉하지 않으면이 누수의 원인이 될 것입니다 재 시술이 필요하며, 크게 감염과 실험 실패의 위험을 증가 : 주. </li></ol></li><li> 두 번째 세그먼트를 강화 (메쉬)하기 위해, L 모양의 조각 (2.3 및 그림 1)에서 (첨부 된 정맥 포함)이 실린더를 놓습니다. <ol><li> 온화하고 악기 정맥을 만지지 마십시오. 정맥에 다음 실린더에 먼저 메쉬를 밀어 넣습니다. 푸시 / 풀 흔들림과는 정맥에 메쉬를 얻을 것이다. </li><li> 메쉬 커버 일단 정맥의 전체 표면은 J 확보Ethibon 3-0으로 실린더에 acketed 정맥. </li><li> L 모양의 지원에 정맥 / 실린더 화합물을 재 조립 이전에 매체 가득 관류 챔버로 전송합니다. </li></ol></li><li> 3.2 mm의 내부 직경을 가진 과산화물 처리 된 실리콘 튜브를 이용하여 Y-스플리터 각 금속 실린더 (인 및 유출)을 연결한다. </li><li> 튜브의 동일한 유형을 사용하여 초 Y-스플리터 유출 분배기를 연결한다. 이 Y-스플리터에서 모두 혈관을 통해 관류 압력을 측정하는 하나의 튜브를 사용한다. 폐쇄 루프 시스템 (그림 2)을 형성하기 위해 다시 열로 다른 하나를 연결합니다. </li><li> 인큐베이터 내부 펌프 헤드에 압력 열을 연결하는 긴 (한-m 길이) 튜브를 사용합니다. </li><li> 긴 다른 길이의 튜브 유입 Y-스플리터 펌프 헤드를 연결하여 설정 (도 1)를 완료한다. </li></ol> (4) 혈관 관류 <ol><li> EVPS 조립체 공동 후에mpleted이 매체와 열을 채우기 (재충전 할 수 있도록 정맥 유출 덕트 미만을 유지). 시스템이 가득 찰 때까지 열에 더 많은 매체를 추가합니다. pH가 37 ± 0.1 ° C로 유지 인큐베이터에 모든 시스템을 이동은 (헨더슨 - Hasselbach 방정식을 기반으로 CO 2 / 산도 알고리즘을 사용하여) 7.40 ± 0.01로 일정하게 유지. </li><li> 인큐베이터 외부 기어 펌프 헤드를 가져오고 기어 펌프 드라이브에 연결합니다. 어셈블리를 고정하는 봉 나사. </li><li> 펌프 전원 스위치,이 구동 소프트웨어에서 활성화되어 있는지 확인하고, 매체가 동등하게 모든 구획에 분산 될 때까지 5 분을 할 수 있습니다. </li><li> 압력을 모니터하기 위해 동맥 라인 모니터링을 사용합니다. 컴퓨터에 연결된 압력 변환기에 EVPS 압 출력 (이 동맥 카테터에 대응)에 연결. <ol><li> 튜브가 완전히 매체로 가득하고 거품이 포함되어 있는지 확인합니다. &quot;동맥 리를 통해 드 거품 배양 시스템을네브라스카 &quot;튜브 (그림 2). 디스플레이에 주목하고 60 펄스 / 일정한 진폭의 분의 박동 지향성 신호를 찾습니다. 이 시점에서, 평균 압력은 0~10mm 수은 사이이다. 압력이 &lt;0이고, 열이 점진적으로 (정맥 튜브 사이의 정맥 담보하거나 불충분 한 인) 누수를 찾아 비워합니다. </li></ol></li><li> 정맥 테스트 또는 동맥 테스트를위한 90mm 수은에 6mm 수은에 최소한의 압력을 설정합니다. 이러한 조건에서, 공기 분사기는 열 및 시스템에 필요한 압력을 적용한다. </li><li> 압력 컬럼에 연결된 튜브를 사용하여 모든 이일 매체를 변경합니다. , 압력 변화의 손상을 방지 첫번째 열 플러그를 엽니 다. </li></ol> 관류의 5 완료 <ol><li> 관류의 3 ~ 7 일 후 : 인큐베이터 밖으로 EVPS을 가지고 정맥을 분리. 5mm의 근위부를 버리고 말초 정맥은 장비에 부착 종료합니다. 중앙, 5mm 두께 린을 잘라나머지 부문에서 GS와 포르말린 (형태 학적)에 고정한다. 나머지 조각을 동결하고 더 분자 분석을위한 분말로 줄일 수 있습니다. </li></ol>

<ol>
	<li>Sal Go, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Executive+summary:+heart+disease+and+stroke+statistics--2014+update:+a+report+from+the+american+heart+association.">Executive summary: heart disease and stroke statistics--2014 update: a report from the american heart association.</a> Circulation. 129, 399-410 (2014).</li><li>Sal Conte, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Results+of+PREVENT+III:+a+multicenter,+randomized+trial+of+edifoligide+for+the+prevention+of+vein+graft+failure+in+lower+extremity+bypass+surgery.">Results of PREVENT III: a multicenter, randomized trial of edifoligide for the prevention of vein graft failure in lower extremity bypass surgery.</a> Journal of Vascular Surgery. 43, 742-751 (2006).</li><li>Yu, P., Nguyen, B. T., Tao, M., Bai, Y., Ozaki, C. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mouse+vein+graft+hemodynamic+manipulations+to+enhance+experimental+utility.">Mouse vein graft hemodynamic manipulations to enhance experimental utility.</a> The American Journal of Pathology. 178, 2910-2919 (2011).</li><li>Davies, M. G., Hagen, P. O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Reprinted+article+&amp;#34;Pathophysiology+of+vein+graft+failure:+a+review&amp;#34;.">Reprinted article &amp;#34;Pathophysiology of vein graft failure: a review&amp;#34;.</a> European journal of vascular and endovascular surgery : the official journal of the European Society for Vascular Surgery. 42, S19-S29 (2011).</li><li>Berard, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Role+of+hemodynamic+forces+in+the+ex+vivo+arterialization+of+human+saphenous+veins.">Role of hemodynamic forces in the ex vivo arterialization of human saphenous veins.</a> Journal of Vascular Surgery. 57, 1371-1382 (2013).</li><li>Vijayan, V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Long-term+reduction+of+medial+and+intimal+thickening+in+porcine+saphenous+vein+grafts+with+a+polyglactin+biodegradable+external+sheath.">Long-term reduction of medial and intimal thickening in porcine saphenous vein grafts with a polyglactin biodegradable external sheath.</a> Journal of Vascular Surgery. 40, 1011-1019 (2004).</li><li>Jeremy, J. Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=On+the+biology+of+saphenous+vein+grafts+fitted+with+external+synthetic+sheaths+and+stents.">On the biology of saphenous vein grafts fitted with external synthetic sheaths and stents.</a> Biomaterials. 28, 895-908 (2007).</li><li>Zilla, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Constrictive+external+nitinol+meshes+inhibit+vein+graft+intimal+hyperplasia+in+nonhuman+primates.">Constrictive external nitinol meshes inhibit vein graft intimal hyperplasia in nonhuman primates.</a> The Journal of Thoracic and Cardiovascular Surgery. 136, 717-725 (2008).</li><li>Zilla, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Utilization+of+shape+memory+in+external+vein-graft+meshes+allows+extreme+diameter+constriction+for+suppressing+intimal+hyperplasia:+a+non-human+primate+study.">Utilization of shape memory in external vein-graft meshes allows extreme diameter constriction for suppressing intimal hyperplasia: a non-human primate study.</a> Journal of Vascular Surgery. 49, 1532-1542 (2009).</li><li>Yeoman, M. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+constitutive+model+for+the+warp-weft+coupled+non-linear+behavior+of+knitted+biomedical+textiles.">A constitutive model for the warp-weft coupled non-linear behavior of knitted biomedical textiles.</a> Biomaterials. 31, 8484-8493 (2010).</li><li>Longchamp, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+use+of+external+mesh+reinforcement+to+reduce+intimal+hyperplasia+and+preserve+the+structure+of+human+saphenous+veins.">The use of external mesh reinforcement to reduce intimal hyperplasia and preserve the structure of human saphenous veins.</a> Biomaterials. 35, 2588-2599 (2014).</li><li>Saucy, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ex+vivo+pulsatile+perfusion+of+human+saphenous+veins+induces+intimal+hyperplasia+and+increased+levels+of+the+plasminogen+activator+inhibitor+1.">Ex vivo pulsatile perfusion of human saphenous veins induces intimal hyperplasia and increased levels of the plasminogen activator inhibitor 1.</a> European Surgical Research. Europaische Chirurgische Forschung. Recherches Chirurgicales Europeennes. 45, 50-59 (2010).</li><li>Dubuis, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Atorvastatin-loaded+hydrogel+affects+the+smooth+muscle+cells+of+human+veins.">Atorvastatin-loaded hydrogel affects the smooth muscle cells of human veins.</a> The Journal of pharmacology and experimental. 347, 574-581 (2013).</li><li>Deglise, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Increased+connexin43+expression+in+human+saphenous+veins+in+culture+is+associated+with+intimal+hyperplasia.">Increased connexin43 expression in human saphenous veins in culture is associated with intimal hyperplasia.</a> Journal of Vascular Surgery. 41, 1043-1052 (2005).</li><li>Muto, A., Model, L., Ziegler, K., Eghbalieh, S. D., Dardik, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mechanisms+of+vein+graft+adaptation+to+the+arterial+circulation:+insights+into+the+neointimal+algorithm+and+management+strategies.">Mechanisms of vein graft adaptation to the arterial circulation: insights into the neointimal algorithm and management strategies.</a> Circulation Journal : Official Journal of the Japanese Circulation Society. 74, 1501-1512 (2010).</li><li>Tao, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+simplified+murine+intimal+hyperplasia+model+founded+on+a+focal+carotid+stenosis.">A simplified murine intimal hyperplasia model founded on a focal carotid stenosis.</a> The American Journal of Pathology. 182, 277-287 (2013).</li><li>Berard, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Salvage+treatment+for+venous+aneurysm+complicating+vascular+access+arteriovenous+fistula:+use+of+an+exoprosthesis+to+reinforce+the+vein+after+aneurysmorrhaphy.">Salvage treatment for venous aneurysm complicating vascular access arteriovenous fistula: use of an exoprosthesis to reinforce the vein after aneurysmorrhaphy.</a> European Journal of Vascular and Endovascular Surgery : the Official Journal of the European Society for Vascular Surgery. 40, 100-106 (2010).</li></ol>

저자가 공개하는 게 없다.

이 연구는 인간의 혈관에 광범위한 혈역학 적 연구를 수행 할 수있는 생체 정맥 관류 시스템 (EVPS)을 알게되어. 이 시스템은 생체 내에서 세포를 순환시켜 출시 악화 염증과 성장 요인의 부재에서 정의 혈역학에서 복재 정맥 관류 할 수 있습니다. 따라서, 인간의 혈관 이식 5,11,12,15 IH에서의 제어에 관여하는 기본 경로의 더 나은 이해를 제공한다. 재현성과 정량 혈역학 적 교란은 생체 내에서 제한됩니다. 여러 복잡한 쥐의 미세 절차를 설명 하였다. SS가 심하게 감소 IH 3 개선 흐름 오른쪽 경동맥에 기증자 마우스에서 대정맥의 개재를 통해 바이 패스 isograft 모델과 유출 지점 결찰의 추가 생성, 중반 이식 또는 경동맥 협착을 사용. 바깥 쪽 안쪽으로 리모델링이 더 간 할 수있다 대원위부 경동맥 협착이 16 대 중반에 초점을 사용 rogated. 큰 동물 (양, 돼지 및 원숭이)에서 바이 패스 이식은 기술적으로 쉽게하고 본 연구 8-10에서 사용 된 메쉬로 전임상 인간 크기의 장치를 테스트 할 수있는 매력적인 방법을 나타냅니다. 그러나, 비용 및 검증 분자 도구 적었 이러한 전략의 사용을 제한한다. 마지막으로, 이러한 흐름 조작 끊임없이 벽 장력을 변경하고 하나의 단일 구성을 심문하지 못한다. 또한, 상기 혈역학 및 내분비 및 면역 시스템 간의 복잡한 관계는 단일의 액터 분석을 제한한다. 몇 가지 문제가 EVPS의 사용으로 발생한다. 1) 낮은 수준의 세균 오염은 종종 인간의 정맥 수확 세포가 감염의 ​​중요한 원인으로 대기 순환의 전 생체 내 결석을 동반. 이는 주로 손 세척 방지 별도로 다음에 모든 자료 이전을 고압 증기 멸균 조각사용합니다. 또한 조립체는 90 이하 분 엄격한 무균 하에서 수행된다. 2) 그 반복 살균을 견디는 씰링. 이 때문에, 직사각형 PMMA-GS 건설 조인트의 사용을 피하고 및 변형을 제한 하였다. 3) SS 및 벽 장력이 일정하게되는 혈관 내강 반경 (조직학), 유량 및 점도에 기초하여, 정의 된 시점에서 산출된다. 연속 정맥 직경을 모니터링 및 / 또는 흐름이 환상 변형률 계산 로컬 유량 변동에 대한 자세한 정보를 제공 할 수 있도록 종 방향 영상 (HD 카메라, 레이저 또는 도플러)의 통합. 4) 두 개의 평행 한 정맥 세그먼트는 벽 준수 및 반경 제어되지 않은 차이가있을 수 있습니다. 따라서, 우리는 같은 맥락에서 세그먼트를 비교하고 동일한 압력하에 유량 패턴은 두 세그먼트에서 유사하다는 것을 가정한다. 본 연구에서는 혈관이 박동 층류에 제출 하였다 그러나, 50 % OF 내막 과형성 병소 층류 유동이 중단되는 정맥 이식편의 엔드 - 투 - 사이드 perianastomotic 영역에서 발생한다. 난류 조건이 제 2 펌프의 추가로 모델화 될 수 있고, 제 1 펌프와 비 동기화. 미래 연구는 특히 층류 IH에 중단 및 메쉬 보강 잠재적 이로운 효과의 영향을 평가하기 위해 수행된다. 이미 동맥류 루 17 (그림 4)를 복구하기 위해 수행 흥미롭게도, 메쉬의 유연한 구조는 문합 부위에서 원주 포장을 할 수 있습니다. 따라서, 메쉬는 팽창 perianastomotic, 층류 방해를 제한하기 위해 유용 할 수 있으며, 결과적 문합 부위에서 IH을 감소시킨다. 이것은 말초 우회술에서 특히 유용 자주 정맥 및 경골 또는 비골 동맥 사이의 직경 불일치에 의해 영향을받을 수 있습니다. 요약하면, 여기에 표시된 설정은 인간 V의 병렬 관류 수 있습니다동일한 혈역학 적 조건에서 아인스. 이러한 데이터는 외부 관형 거대 다공성 폴리 에스테르 메쉬의 사용 환경 동맥 (11)에 삽입 이식 정맥 IH의 발전을 제한하는 효과적인 방법임을 보여준다. 이 시스템은 연구의 여러 분야 유익 할 수 있습니다. 특히, 인간의 재료 IH을 줄이는 다양한 방법과 타당성의 효율성을 테스트 전임상 연구를 수행 할 수있는 강력한 도구로 나온다 및 생체 내 동물 모델에 유용한 추가이다. 기타 보철 지원 또는 약제로 코팅 된 메쉬는이 방법 6-10을 사용하여 평가됩니다. 또한, 하나의 생리 가까운 상태에서, 인체 조직에 IH 않도록 국소 도포 약물 분자를 테스트하기 위해 구상 할 수있다. 유전자 치료 개입 과발현 또는 침묵 관심 대상 유전자 정맥 세그먼트 열 변환도 달성 할 수있다. 결론적으로, 우리의 시스템은 우리의 취소를 증가인간의 정맥 이식편 질환에 혈역학 적 기여 derstanding. 이 혁신적인 플랫폼은 새로운 치료 전략을 테스트하고 발생 될 수 있습니다 &quot;옆에 번역 도구에 벤치입니다.&quot;

심장 혈관 질환은 서구 국가 하나의 이환율과 사망률의 주요 원인입니다. 혈관 내 치료에 만든 발전에도 불구하고, 바이 패스 수술을 따라서 만 절반 이상 정맥 이식은 미국에서 매년 수행, 현대 치​​료의 의지가 남아있다. 그러나 수십 년간의 연구에도 불구하고, 하체의 정맥 이식의 30~60% 인해 내막 증식증 (IH) 2에 첫번째 년 안에 실패한다. 기계의 힘, 특히 낮은 전단 응력 (SS) 및 높은 벽 장력이 증식 응답 3,4의 시작과 발전에 중추적입니다. 이 문제를 해결하기 위해, 생체 혈관의 관류 시스템 (EVPS)을 엄격하게 통제 혈역학 적 상태 (압력, 전단 응력), 인간 복재 정맥의 동작에 따라, 공부 생성되었습니다. 이 연구에서, 동맥 순환 형으로 삽입 다음, 고압 prolif을 자극하기에 충분 하였다 (= 100 mmHg로 의미)eration과 내막 층 (IH) (5) 내로 평활근 세포의 이주. 포유 동물의 연구는 &quot;동맥 화 정맥&quot;지원 급성 혈역학이 한번 정맥 동맥에 주입을 향하는 적 환경 변화에 대처하는 효율적인 방법으로서 외부 보강의 사용을 제안했다. 메시는, 과잉 팽창이 방지 증가 전단 응력 및 벽 장력 결과적 IH 6-10 줄였다. 그러나 기본 메커니즘과 바이 패스 개통을 개선 인간의 혈관에 그것의 적용이 완전히 특징되지 않았다. 우리 EVPS는 정맥 번 동맥 섭생에 삽입 대향 변화 (고 전단 응력 및 압력), 외부 거대 다공성 폴리 관형 메쉬의 부재 및 존재하에 인간 복재 정맥의 행동을 모방하는 조건에서 비교하기 위해 사용되었다. 병적 리모델링 및 IH 방지함으로써, 메시는 잠재적 임상 효율 (11)의 증거를 제공 </sup&gt;. 본 연구 1)는 외부 매크로 다공성 폴리 에스테르 메쉬 IH을 줄이고 잠재적 인 임상 응용 프로그램에 대한 중요한 정보를 제공한다는 것을 보여줍니다 제어 압력과 전단 응력 2)에서 생체 인간 복재 정맥 혈류의 모델을 소개합니다.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="1113">
	<tbody>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:453px;">Name</td>
			<td style="width:371px;">Company</td>
			<td style="width:145px;">Catalog Number</td>
			<td style="width:144px;">Comments</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">RPMI 1640 - Glutamax</td>
			<td>Life Technologies</td>
			<td>61870-010</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;"><a name="RANGE!A3">Penicilline/Streptomycine/Fungizone</a></td>
			<td>Bioconcept</td>
			<td>4-02F00-H</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Dextran from Leuconostoc spp. 500 gr.</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>31390</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Tampon PBS CHUV pH 7.1-7.3 1 lt.</td>
			<td>Laboratorium und Grosse Apotheke Dr. G. Bichsel AG</td>
			<td>100 0 324 00</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Cryosectionning embedding medium - Tissue-Tek OCT Compound</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>14-373-65</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Silicon Tubing (Peroxide) L/S 16 (96400-16 ) - 7.5m</td>
			<td>Idex Health &#38; Science GMBH</td>
			<td>MF0037ST</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Y-splitter&#160;</td>
			<td>Idex Health &#38; Science GMBH</td>
			<td>Y-connector</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">35 mm Culture dish</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>CLS430165-100EA</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">15 ml Falcon tube</td>
			<td>BD Bioscence</td>
			<td>352096</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">50 ml Falcon tube</td>
			<td>BD Bioscence</td>
			<td>352098</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Gearing pump - Reglo-Z</td>
			<td>Idex Health &#38; Science GMBH</td>
			<td>SM 895&#160;</td>
			<td>&#160;App-Nr 03736-00194</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Pump Head</td>
			<td>Idex Health &#38; Science GMBH</td>
			<td>MI0008&#160;</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Monitoring Kit TRANSPAC IV</td>
			<td>icumedical</td>
			<td>011-0J736-01</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">20 mL Syringes</td>
			<td>B. Braun Medical SA</td>
			<td>4612041-02</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Etibon 3-0 FS-2</td>
			<td>Ethicon- Johnson&#38;Johnson</td>
			<td>EH7346H</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Mesh ProVena 6-8mm</td>
			<td>B. Braun Medical SA</td>
			<td>1105012-14</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">NaCl: Sodium Chlorure Solution perfusion 0.9% (100 ml)</td>
			<td>B. Braun Medical SA</td>
			<td>534534</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Masterflex L/S Standard Drive</td>
			<td>Cole-Parmer Instrument Co</td>
			<td>7521-10</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Acquisition card</td>
			<td>National Instruments</td>
			<td>PCI-6024 E</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Flowmeter module</td>
			<td>Transonic Systems Inc.</td>
			<td>TS410 and T402</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Stopcock with 3-ways</td>
			<td>BD Connexta Luerlock</td>
			<td>394600</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Millex Filter</td>
			<td>Milian</td>
			<td>SE2M229I04</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

procedure for human saphenous veins ex vivo perfusion and external reinforcement

광범위한 폐색 성 동맥 질환에 대한 현대적인 치료의 주류는 정맥 우회술이다. 그러나, 내구성은 결국 혈관 폐색 이식 실패에 이르게 내막 증식증 (IH)에 의해 위협됩니다. 기계의 힘, 특히 낮은 전단 응력과 높은 벽 장력은, 시작하고 이러한 세포 및 분자 변화를 유지하는 것으로 생각되지만, 자신의 정확한 기여를 풀어 일이다. 선택적 IH의 생물학에 대한 압력과 전단 응력의 ​​역할을 평가하기 위해, 생체 외 관류 시스템 (EVPS)는 동맥 요법에서 인간 복재 정맥 (높은 전단 응력 및 고압)의 세그먼트를 관류하기 위해 만들어졌습니다. 또한, 기술 혁신은 같은 맥락, 외부 메쉬 철근이 하나의 세그먼트를 동시에 관류시켰다. 정맥 노 터치 기술을 사용하여 수확하고 즉시 EVPS에 조립 실험실로 옮겼다. 갓 ISOL의 한 세그먼트나타나는데 정맥 (제어, 일 영)을 관류되지 않았습니다. 다른 두 세그먼트가 최대 칠일 관류하고, 하나는 완전히 4mm (직경) 외부 메쉬 숨겨된다. 압력, 유속 및 맥박수를 연속적으로 모니터링하고 대퇴 동맥에 지배적 혈역학 조건을 모방하도록 조정 하였다. 재관류 완료되면, 정맥 분리하고, 조직 학적 및 분자 분석을 사용 하였다. 생체 외 조건, 고압 하에서 관류 (동맥, = 100 mmHg로 평균) IH 인간 혈관의 리모델링을 생성하기에 충분하다. 이러한 변화들은 외부 메쉬 폴리 에스테르의 존재하에 감소된다.

EVPS 인간 복재 정맥 리모델링하고 IH를 접목에 독립적으로 혈역학 적 힘을 평가하는 유용한 도구를 제공합니다. 그림 1은 관류 챔버와 정맥 지원을 보여줍니다. 도 1A 및도 B에서, 이전에 정맥 지지체 (도 1a) 및 후 (도 1B) 조립체는 각각 묘사된다. 그것은 쉽게 (왼쪽에서 오른쪽으로) 밀어 수 2 L 형상 조각 용 지지체로서 기능 9cm 측정 한 일반 스테인레스 스틸 튜브,​​ (위에서 아래로)로 구성하고 신뢰성있는 기술을 제공한다 정맥에지지 크기 조정. 이 조각의 각 통합 나사 (화살촉)에 의해 제자리에 고정 된 강철 실린더 (정맥 커넥터)에 맞게 POM 디스크를 보유하고있다. 그림 1C-D 단독 (C) 및 정맥 지원 (D)의 삽입 후 재관류 챔버를 보여줍니다. 재관류 챔버에서 함몰로 설계장소 (위)에있는 정맥 지원을 누른 상태에서 정맥 (아래)에서하고 나오는 연결 관의 꼬임을 방지 할 수 있습니다. 도 2는 실시간 영상 (도 2a)과 EVPS의 개략도 (도 2b)를 보여준다. 관류 챔버, 혈관 및 지지대뿐만 아니라 고압 칼럼은 모두 인큐베이터 밖에 남아 펌프, 압력 인젝터 및 제어 장치 반면, 제어 환경 (온도, CO 2와 O 2)에 유지된다. 그림은 유속 (3)을 감시 컴퓨터 (2), 압력에 의해 제어 된 맥동 신호를 발생 기어 펌프 (1)를 도시한다 (4), 및 최소 이완기 혈압을 제어 (5); 동일 복재 정맥이 세그먼트는 별개의 관류 챔버 내부 관류 펌프에 병렬로 접속 (6A 및 6B) 세포 배양 인큐베이터에 배치된다. 그림 3에서, 조직 형태 학적 분석은 외부 보강 달리 고압 칠일 (동맥 요법, 평균 = 100mm 수은) 재관류 후 관찰 내막 증식증 및 병리학 미디어 리모델링을 방지 함을 보여줍니다. 도 3a에서, 헤 마톡 실린 - 에오신 염색 된 대표 조직 학적 섹션 (HE)는 모든 조건에서 용지 층에서 내피 세포의 핵 및 SMCs의 핵에 의해 루멘의 내막을 알 수있다. 3B-C는 대표적인 반 Gieson 탄성 얇은 판을 (보여줍니다 피규어 VGEL는) 섹션 스테인드. 도 3b에서, 내막은 고압 관류 혈관 (IH) 두껍게 비 관류 정맥 대조군에 비해 7 일간, 현상은 주로 외부 메쉬의 존재 하에서 저하 (100mm 수은이 = 의미).도 3c는 도시 병적 인 바깥쪽으로 리모델링 및 미디어 동맥 압력의 칠일을받는 정맥에 숱이. 이는 주로 외부 보강에 의해 방지된다. Furthermor전자는,도 3d, 메이슨의 트리 크롬 염색 (블루 = 결합 조직, 적색 = 근육)에 단지 하나의 내부 층 (내막)에서 세 근육층 및 평활근 세포 축적의 지속성이 병적 리모델링을 연관시킨다. 외부 보강 SMCs 및 미디어 구조의 분포를 유지합니다. 도 4는 외부 메쉬의 현재 임상 응용을 보여주는 도면이다. 예시적인 예는 동맥류 동정맥 누공 (혈액 투석 액세스)의 외부 보강에 의해 제공된다.도 4a는 (위에서 아래로) 정맥 보강의 시간 코스를 나타내는 도면. 정맥의 말단이 맨드릴 (상부 패널)에 고정되는 동안 제, 메쉬 경질 관 주위에 배치 하였다. 그리고 나서, 정맥 맨드릴 튜브 덕분으로 당겨졌다. 정맥 위치에 일단 튜브 천천히 정맥 주위에 메쉬 (U두고 후퇴시켰다pper 중간 패널). 이 특별한 경우에, 과정은 혈관의 양측에 반복하고, 정맥 세그먼트 및 메쉬 강화재는 종단 간 문합술 (하부 패널)에 의해 조립 하였다.도 4b는 동정맥 단부의 확대보기를 제공한다 메시는 동맥의 후벽을 따라 매하여 문합을 감싸 것을 보여주는 -to 측 문합. <img alt="그림 1" fo:content-width="5in" src="/files/ftp_upload/52079/52079fig1highres.jpg" width="500" /> 그림 1 정맥 지원 및 관류 챔버. A. 정맥 지원 한 일반 튜브로 구성되고,이 L 자형 피스, 디스크 및 실린더 (위에서 아래로 형성). B. 정맥 지원 한번 조립. 관류 챔버 C.보기. D. 관류 챔버 대신에 정맥 지원을 유지하도록 설계되어 그 연결을 허용한다정맥과 연결 관에 이온. <img alt="그림이" fo:content-width="5in" src="/files/ftp_upload/52079/52079fig2highres.jpg" width="500" /> 그림 2 생체 관류 시스템. A. 완전히 세포 배양 인큐베이터에서 EVPS을 조립한다. B. 도식 표현합니다. 1) 박동성 카디오 파를 생성하는 펌프; 2) 압력, 유량 (종류, 속도 및 진폭)를 제어하는​​ 컴퓨터; 3) 유량계; 4) 압력 변환기 - 동맥 라인; 5) 가압 분사기; 6) 바로 그 복재 정맥의 두 개의 세그먼트가 (6A)없이 또는 외부 메쉬 보강 관류 아르 (6B). <img alt="그림 3" fo:content-width="5in" src="/files/ftp_upload/52079/52079fig3highres.jpg" width="500" /> 외부 보강 3 그림 내막의 증식을 방지 할 수 있습니다.헤 마톡 실린 - 에오신 (HE) 염색. 대표 조직 학적 섹션. 바 엘라스틴 (VGEL) 스테인드 50 μm의. BC. 대표 조직 학적 섹션을 나타냅니다. 리터 = 루멘 m = 미디어, IH는 = 내막 증식증. 바 메이슨의 트리 크롬 염색 50 μm의. D. 대표 조직 학적 섹션을 나타냅니다. 바는 50 μm의를 나타냅니다. <img alt="그림 4" fo:content-width="5in" src="/files/ftp_upload/52079/52079fig4highres.jpg" width="500" /> 동맥류 루의 4 외부 보강 그림. 정맥 강화 (위에서 아래로). 동정맥 엔드 - 투 - 측 문합 B. 크게보기의 A. 시간 코스 사진.

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Procedure for Human Saphenous Veins Ex Vivo Perfusion and External Reinforcement

내막 증식증 (IH) 및 정맥 이식 실패의 개발로 이어지는 메커니즘은 아직 제대로 이해하고 있습니다. 이 연구는 제어 흐름과 압력 하에서 인간의 혈관을 관류하는 생체 시스템을 설명합니다. 또한 외부 메쉬 보강 효율 IH의 개발 평가 하였다 제한한다.

인간 복재 정맥 절차<em&gt; 전의 VIVO</em&gt; 관류 및 외부 보강

The mainstay of contemporary therapies for extensive occlusive arterial disease is venous bypass graft. However, its durability is threatened by intimal ...

procedure-for-human-saphenous-veins-ex-vivo-perfusion-external

Universidad San Sebastian

Research

JoVE Journal

Medicine

Procedure for Human Saphenous Veins Ex Vivo Perfusion and External Reinforcement

11.1K 조회수.  Brigham and Women's Hospital/Harvard Medical School.  내막 증식증 (IH) 및 정맥 이식 실패의 개발로 이어지는 메커니즘은 아직 제대로 이해하고 있습니다. 이 연구는 제어 흐름과 압력 하에서 인간의 혈관을 관류하는 생체 시스템을 설명합니다. 또한 외부 메쉬 보강 효율 IH의 개발 평가 하였다 제한한다. 

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Technique of Subnormothermic Ex Vivo Liver Perfusion for the Storage, Assessment, and Repair of Marginal Liver Grafts

The success of liver transplantation has resulted in a dramatic organ shortage. In most transplant regions 20-30% of patients on the waiting list for liver transplantation die without receiving an organ transplant or are delisted for disease progression. One strategy to increase the donor pool is the utilization of marginal grafts, such as fatty livers, grafts from older donors, or donation after cardiac death (DCD). The current preservation technique of cold static storage is only poorly tolerated by marginal livers resulting in significant organ damage. In addition, cold static organ storage does not allow graft assessment or repair prior to transplantation.
These shortcomings of cold static preservation have triggered an interest in warm perfused organ preservation to reduce cold ischemic injury, assess liver grafts during preservation, and explore the opportunity to repair marginal livers prior to transplantation. The optimal pressure and flow conditions, perfusion temperature, composition of the perfusion solution and the need for an oxygen carrier has been controversial in the past.
In spite of promising results in several animal studies, the complexity and the costs have prevented a broader clinical application so far. Recently, with enhanced technology and a better understanding of liver physiology during ex vivo perfusion the outcome of warm liver perfusion has improved and consistently good results can be achieved.
This paper will provide information about liver retrieval, storage techniques, and isolated liver perfusion in pigs. We will illustrate a) the requirements to ensure sufficient oxygen supply to the organ, b) technical considerations about the perfusion machine and the perfusion solution, and c) biochemical aspects of isolated organs.

Technique of Subnormothermic Ex Vivo Liver Perfusion for the Storage, Assessment, and Repair of Marginal Liver Grafts

Marginal grafts, such as fatty livers, grafts from older donors, or livers retrieved after cardiac death (DCD) tolerate conventional, cold static storage only poorly. We developed a novel model of subnormothermic ex vivo liver perfusion for preservation, assessment, and repair of marginal liver grafts prior to transplantation.

Subnormothermic의 기술<em&gt; 전의 VIVO</em&gt; 간 스토리지, 평가를위한 관류 및 한계 간 이식의 수리

The success of liver transplantation has resulted in a dramatic organ shortage. In most transplant regions 20-30% of patients on the waiting list for ...

연구

의학

Method of Isolated Ex Vivo Lung Perfusion in a Rat Model: Lessons Learned from Developing a Rat EVLP Program

The number of acceptable donor lungs available for lung transplantation is severely limited due to poor quality. Ex-Vivo Lung Perfusion (EVLP) has allowed lung transplantation in humans to become more readily available by enabling the ability to assess organs and expand the donor pool. As this technology expands and improves, the ability to potentially evaluate and improve the quality of substandard lungs prior to transplant is a critical need. In order to more rigorously evaluate these approaches, a reproducible animal model needs to be established that would allow for testing of improved techniques and management of the donated lungs as well as to the lung-transplant recipient. In addition, an EVLP animal model of associated pathologies, e.g., ventilation induced lung injury (VILI), would provide a novel method to evaluate treatments for these pathologies. Here, we describe the development of a rat EVLP lung program and refinements to this method that allow for a reproducible model for future expansion. We also describe the application of this EVLP system to model VILI in rat lungs. The goal is to provide the research community with key information and &#8220;pearls of wisdom&#8221;/techniques that arose from trial and error and are critical to establishing an EVLP system that is robust and reproducible.

Method of Isolated Ex Vivo Lung Perfusion in a Rat Model: Lessons Learned from Developing a Rat EVLP Program

Ex-Vivo Lung Perfusion (EVLP) has allowed lung transplantation in humans to become more readily available by enabling the ability to assess organs and expand the donor pool. Here, we describe the development of a rat EVLP program and refinements that allow for a reproducible model for future expansion.

고립의 방법<em&gt; 전의 VIVO</em쥐 모델에서&gt; 폐 관류 : 쥐 EVLP 프로그램 개발에서 교훈을

The number of acceptable donor lungs available for lung transplantation is severely limited due to poor quality. Ex-Vivo Lung Perfusion (EVLP) has allowed ...

An Ex vivo Model to Study Hormone Action in the Human Breast

The study of hormone action in the human breast has been hampered by lack of adequate model systems. Upon in vitro culture, primary mammary epithelial cells tend to lose hormone receptor expression. Widely used hormone receptor positive breast cancer cell lines are of limited relevance to the in vivo situation. Here, we describe an ex vivo model to study hormone action in the human breast. Fresh human breast tissue specimens from surgical discard material such as reduction mammoplasties or mammectomies are mechanically and enzymatically digested to obtain tissue fragments containing ducts and lobules and multiple stromal cell types. These tissue microstructures kept in basal medium without growth factors preserve their intercellular contacts, the tissue architecture, and remain hormone responsive for several days. They are readily processed for RNA and protein extraction, histological analysis or stored in freezing medium. Fluorescence activated cell sorting (FACS) can be used to enrich for specific cell populations. This protocol provides a straightforward, standard approach for translational studies with highly complex, varied human specimens.

An Ex vivo Model to Study Hormone Action in the Human Breast

We have developed a novel ex vivo model to study hormone action in the human breast. It is based on tissue microstructures isolated from surgical breast tissue specimens which preserve tissue architecture, intercellular interactions, and paracrine signaling.

<em&gt; 생체 내</em&gt; 모델은 인간의 유방암에서 호르몬 행동을 연구하기 위해

The study of hormone action in the human breast has been hampered by lack of adequate model systems. Upon in vitro culture, primary mammary epithelial ...

Human Dupuytren's Ex Vivo Culture for the Study of Myofibroblasts and Extracellular Matrix Interactions

Organ fibrosis or &#8220;scarring&#8221; is known to account for a high death toll due to the extensive amount of disorders and organs affected (from cirrhosis to cardiovascular diseases). There is no effective treatment and the in vitro tools available do not mimic the in vivo situation rendering the progress of the out of control wound healing process still enigmatic.
To date, 2D and 3D cultures of fibroblasts derived from DD patients are the main experimental models available. Primary cell cultures have many limitations; the fibroblasts derived from DD are altered by the culture conditions, lack cellular context and interactions, which are crucial for the development of fibrosis and weakly represent the derived tissue. Real-time PCR analysis of fibroblasts derived from control and DD samples show that little difference is detectable. 3D cultures of fibroblasts include addition of extracellular matrix that alters the native conditions of these cells. 
As a way to characterize the fibrotic, proliferative properties of these resection specimens we have developed a 3D culture system, using intact human resections of the nodule part of the cord. The system is based on transwell plates with an attached nitrocellulose membrane that allows contact of the tissue with the medium but not with the plastic, thus, preventing the alteration of the tissue. No collagen gel or other extracellular matrix protein substrate is required. The tissue resection specimens maintain their viability and proliferative properties for 7 days. This is the first &#8220;organ&#8221; culture system that allows human resection specimens from DD patients to be grown ex vivo and functionally tested, recapitulating the in vivo situation.

Human Dupuytren&#039;s Ex Vivo Culture for the Study of Myofibroblasts and Extracellular Matrix Interactions

Dupuytren&#8217;s disease (DD) is a fibroproliferative disease of the palm of the hand. Here, we present a protocol to culture resection specimens from DD in a three-dimensional (3D) culture system. Such short-term culture system allows preservation of the 3D structure and molecular properties of the fibrotic tissue.

인간의 Dupuytren의<em&gt; 전의 VIVO</em&gt; 근섬유 아세포의 연구와 세포 외 기질 상호 작용에 대한 문화

Organ fibrosis or &#8220;scarring&#8221; is known to account for a high death toll due to the extensive amount of disorders and organs affected (from ...

Ex Situ Normothermic Machine Perfusion of Donor Livers

In contrast to conventional static cold preservation (0-4 &#176;C), ex situ machine perfusion may provide better preservation of donor livers. Continuous perfusion of organs provides the opportunity to improve organ quality and allows ex situ viability assessment of donor livers prior to transplantation. This video article provides a step by step protocol for ex situ normothermic machine perfusion (37 &#176;C) of human donor livers using a device that provides a pressure and temperature controlled pulsatile perfusion of the hepatic artery and continuous perfusion of the portal vein. The perfusion fluid is oxygenated by two hollow fiber membrane oxygenators and the temperature can be regulated between 10 &#176;C and 37 &#176;C. During perfusion, the metabolic activity of the liver as well as the degree of injury can be assessed by biochemical analysis of samples taken from the perfusion fluid. Machine perfusion is a very promising tool to increase the number of livers that are suitable for transplantation.

Ex Situ Normothermic Machine Perfusion of Donor Livers

Here we present a protocol describing oxygenated ex situ machine perfusion of donor liver grafts. This article contains a step by step protocol to procure and prepare the liver graft for machine perfusion, prepare the perfusion fluid, prime the perfusion machine and perform oxygenated normothermic machine perfusion of the liver graft.

기증자의 간을의 현지 외 정상 체온 기계 관류

In contrast to conventional static cold preservation (0-4 &#176;C), ex situ machine perfusion may provide better preservation of donor livers. Continuous ...

Normothermic Ex Vivo Kidney Perfusion for the Preservation of Kidney Grafts prior to Transplantation

Kidney transplantation has become a well-established treatment option for patients with end-stage renal failure. The persisting organ shortage remains a serious problem. Therefore, the acceptance criteria for organ donors have been extended leading to the usage of marginal kidney grafts. These marginal organs tolerate cold storage poorly resulting in increased preservation injury and higher rates of delayed graft function. To overcome the limitations of cold storage, extensive research is focused on alternative normothermic preservation methods.
Ex vivo normothermic organ perfusion is an innovative preservation technique. The first experimental and clinical trials for ex vivo lung, liver, and kidney perfusions demonstrated favorable outcomes.
In addition to the reduction of cold ischemic injury, the method of normothermic kidney storage offers the opportunity for organ assessment and repair. This manuscript provides information about kidney retrieval, organ preservation techniques, and isolated ex vivo normothermic kidney perfusion (NEVKP) in a porcine model. Surgical techniques, set up for the perfusion solution and the circuit, potential assessment options, and representative results are demonstrated.

Normothermic Ex Vivo Kidney Perfusion for the Preservation of Kidney Grafts prior to Transplantation

The severe organ shortage has resulted in increased use of marginal kidney grafts for transplantation. This has triggered interest in alternative storage methods, since marginal grafts especially tolerate cold storage poorly. The technique of normothermic ex vivo kidney perfusion (NEVKP) represents a novel preservation method for kidney grafts prior to &#160;transplantation.

정상 체온<em&gt; 전의 VIVO</em&gt; 신장의 보존을위한 신장 관류는 이식 전에 이식

Kidney transplantation has become a well-established treatment option for patients with end-stage renal failure. The persisting organ shortage remains a ...

A Small Animal Model of Ex Vivo Normothermic Liver Perfusion

There is a significant shortage of liver allografts available for transplantation, and in response the donor criteria have been expanded. As a result, normothermic ex vivo liver perfusion (NEVLP) has been introduced as a method to evaluate and modify organ function. NEVLP has many advantages in comparison to hypothermic and subnormothermic perfusion including reduced preservation injury, restoration of normal organ function under physiologic conditions, assessment of organ performance, and as a platform for organ repair, remodeling, and modification. Both murine and porcine NEVLP models have been described. We demonstrate a rat model of NEVLP and use this model to show one of its important applications &#8212; the use of a therapeutic molecule added to liver perfusate. Catalase is an endogenous reactive oxygen species (ROS) scavenger and has been demonstrated to decrease ischemia-reperfusion in the eye, brain, and lung. Pegylation has been shown to target catalase to the endothelium. Here, we added pegylated-catalase (PEG-CAT) to the base perfusate and demonstrated its ability to mitigate liver preservation injury. An advantage of our rodent NEVLP model is that it is inexpensive in comparison to larger animal models. A limitation of this study is that it does not currently include post-perfusion liver transplantation. Therefore, prediction of the function of the organ post-transplantation cannot be made with certainty. However, the rat liver transplant model is well established and certainly could be used in conjunction with this model. In conclusion, we have demonstrated an inexpensive, simple, easily replicable NEVLP model using rats. Applications of this model can include testing novel perfusates and perfusate additives, testing software designed for organ evaluation, and experiments designed to repair organs.

A Small Animal Model of Ex Vivo Normothermic Liver Perfusion

There is a significant liver donor shortage, and criteria for liver donors have been expanded. Normothermic ex vivo liver perfusion (NEVLP) has been developed to evaluate and modify organ function. This study demonstrates a rat model of NEVLP and tests the ability of pegylated-catalase, to mitigate liver preservation injury.

Ex Vivo Normothermic 간 관류의 작은 동물 모델

There is a significant shortage of liver allografts available for transplantation, and in response the donor criteria have been expanded. As a result, ...

Determining and Controlling External Power Output During Regular Handrim Wheelchair Propulsion

The use of a manual wheelchair is critical to 1% of the world&#39;s population. Human powered wheeled mobility research has considerably matured, which has led to improved research techniques becoming available over the last decades. To increase the understanding of wheeled mobility performance, monitoring, training, skill acquisition, and optimization of the wheelchair-user interface in rehabilitation, daily life, and sports, further standardization of measurement set-ups and analyses is required. A crucial stepping-stone is the accurate measurement and standardization of external power output (measured in Watts), which is pivotal for the interpretation and comparison of experiments aiming to improve rehabilitation practice, activities of daily living, and adaptive sports. The different methodologies and advantages of accurate power output determination during overground, treadmill, and ergometer-based testing are presented and discussed in detail. Overground propulsion provides the most externally valid mode for testing, but standardization can be troublesome. Treadmill propulsion is mechanically similar to overground propulsion, but turning and accelerating is not possible. An ergometer is the most constrained and standardization is relatively easy. The goal is to stimulate good practice and standardization to facilitate the further development of theory and its application among research facilities and applied clinical and sports sciences around the world.

Accurate and standardized assessment of external power output is crucial in the evaluation of physiological, biomechanical, and perceived stress, strain, and capacity in manual wheelchair propulsion. The current article presents various methods to determine and control power output during wheelchair propulsion studies in the laboratory and beyond.

정기적인 핸림 휠체어 추진 중 외부 전력 출력 결정 및 제어

The use of a manual wheelchair is critical to 1% of the world&#39;s population. Human powered wheeled mobility research has considerably matured, which ...

External Cephalic Version: Is it an Effective and Safe Procedure?

External cephalic version (ECV) is an effective procedure for reducing the number of cesarean sections. To date, there is no video publication showing the methodology of this procedure. The main objective is to show how to perform ECV with a specific protocol with tocolysis before the procedure and analgesia. Moreover, we describe and analyze the factors associated with successful ECV, and also compare to deliveries in the general pregnant population.
A retrospective and descriptive analysis of ECV carried out at the Hospital Clinico Universitario Virgen de la Arrixaca in Murcia (Spain) between 1/1/2014 and 12/31/2018 was assessed. The latest data available of labor deliveries in the local center, which is the biggest maternity department in Spain, were from 2018.
320 patients were recruited and 3 pregnant women were lost during the study. ECV was carried out at 37&#177;3 weeks gestation. ECV was successful in 82.5% (N=264). 19 complications were reported (5.9%): 8 vaginal bleeding (2.5%), 9 fetal bradycardia (2.8%), 1 preterm rupture of membranes (0.3%) and 1 cord prolapse (0.3%). A previous vaginal delivery increases the success rate of ECV ORadjusted=3.03 (1.62-5.68). Maternal Body Mass Index (BMI) affects the success of ECV ORadjusted=0.94 (0.89-0.99). Patients with BMI&#62;40 kg/m2 have an ORadjusted=0.09 (0.009-0.89) compared with those with BMI &#60;25 kg/m2. If ECV was successful, the cesarean delivery index is 22.2% (17.5-27.6%), the eutocic delivery index is 52.1% (46.1-58.1%) and the instrumented vaginal delivery index is 25.7% (20.7-31.2%). There are no differences in cesarean and eutocic delivery indexes after successful ECV. However, a successful ECV is associated with a 6.29% increase in the instrumented delivery rate (OR=1.63).
ECV is an effective procedure to reduce the number of cesarean sections for breech presentations. Maternal BMI and previous vaginal delivery are associated with ECV success. Successful ECV does not modify the usual delivery pattern.

This article shows how to perform the external cephalic version (ECV) by two experienced obstetricians in the obstetric operating room in the presence of an anesthesiologist and a midwife. The ECV is carried out with analgesia and tocolysis. Two attempts are made under ultrasonography control.

외부 뇌절 제고 버전: 그것은 효과적이 고 안전한 절차?

External cephalic version (ECV) is an effective procedure for reducing the number of cesarean sections. To date, there is no video publication showing the ...

Normothermic Ex Vivo Pancreas Perfusion for the Preservation of Pancreas Allografts before Transplantation

Pancreas transplantation (PTx) is a curative treatment for people who live with the burden of a diagnosis of diabetes mellitus (DM). However, due to organ shortages and increasing numbers of patients being listed for PTx, new strategies are needed to increase the number of available grafts for transplantation. 
Static cold storage (SCS) is considered the gold standard for standard criteria organs. However, standard criteria donors (SCD) are becoming scarce and new strategies that can increase the rate of organ acceptance from extended criteria donors (ECD) are urgently needed. 
Normothermic ex vivo perfusion (NEVP) is one of the strategies that has become increasingly popular over the past couple of decades. This preservation method has already been used successfully in other organs (liver, kidneys, and lungs) but has been minimally explored in pancreas transplantation. The few papers that describe the method for pancreas show little success, edema being one of the major issues. The following manuscript describes the successful NEVP method and setup developed by our group to perfuse swine pancreas.

Normothermic Ex Vivo Pancreas Perfusion for the Preservation of Pancreas Allografts before Transplantation

Normothermic ex vivo machine perfusion (NEVP) has scarcely been explored for the preservation of pancreas allografts. We present an innovative preservation technique for pancreas allografts before transplantation.

이식 전 췌장 동종이식의 보존을 위한 Normothermic Ex Vivo 췌장 관류

Pancreas transplantation (PTx) is a curative treatment for people who live with the burden of a diagnosis of diabetes mellitus (DM). However, due to organ ...