This work is supported in part by American Heart Association Scientist Development Grant and NARSAD Young Investigator Award to Yingwei Mao.

참고 : 동물을 포함한 모든 프로토콜은 펜실베니아 주립 대학의 동물 관리 지침에 따라 추적 관찰, IACUC의 # 44057 1. 렌티 바이러스 생산 참고 : 형질 전날, LentiX-293 세포는 80 % 포화 상태에 있어야합니다. <ol><li> 단지 형질 전환 전에 DMEM으로 세포를 씻어 실온에서 5 분 동안 페니실린 (100 IU / ml) 및 스트렙토 마이신 (100 ㎕ / ml)이 DMEM / 10 % FBS의 10ml에 품어. </li><li> 1 분 동안 1 ㎖의 DMEM 소용돌이 : 3 비율 (PEI 3 μL의 1 μg의 DNA :) DNA와 폴리에틸렌 이민 (PEI) (1) (1 ㎎ / ㎖)을 희석. DNA의 체적은 DNA의 농도에 의존했다. 실온에서 10 분 동안 인큐베이션. <ol><li> 예를 들어, 접시 당 PEI의 60 μL 벡터 플라스미드의 10 μg의, psPax2 14 플라스미드의 5 μg의, 수 포성 구내염 바이러스 (VSV)의 5 μg의 구성 DNA 플라스미드의 20 μg의를 사용합니다. </li></ol></li><l난&gt; 1 분 동안 텍싱 다시 DNA와 PEI 솔루션을 섞는다. 실온에서 10 분 동안 인큐베이션. </li><li> DMEM (100mm 접시에 10 ml의 배지에 대한 예 1 ㎖) 총 배지의 1 / 10 볼륨. 접시에 드롭에 의해 DNA - 페이 혼합물 드롭 1 ㎖를 추가하고 문화 매체가 DNA와 잘 혼합 때까지 주위에 접시를 소용돌이 친다. </li><li> 실온에서 6 시간 동안 품어 뜨는을 제거합니다. 배지 5 mL를 추가합니다. </li><li> 형질 전환 후 48 시간은 50 ㎖ 튜브에 4 ℃에서 5 분 동안 627 XG에 바이러스 뜨는 스핀를 수집합니다. 초 원심 분리기 튜브에 0.45 ㎛의 주사기 필터를 통해 바이러스 상등액 30㎖의 필터. </li><li> 튜브를 밸런스, 파라 필름의 작은 조각 튜브를 충당하기 위해 멸균 물을 추가합니다. 스핀 튜브를 4 ℃에서 120 분 동안 11,249 XG에. 진공 팁을 사용하여 액체를 제거합니다. </li><li> 차가운 PBS 100 μL 튜브를 추가합니다. 조심스럽게 4 ° CO / N에서 튜브를 바위. </li><li> 바이러스, 피펫 (T)를 다시 일시 중단그는 PBS는 끝 펠렛을 만지지 않도록 조심하면서, 펠렛 10 배 이상 단계 1.8에서 추가. 이 작업이 완료 될 때까지 펠릿을 재현 탁하지 않는다. </li><li> -80 ° C에서 액체 질소 저장 튜브, 플래시 동결 당 10 ~ 20 μL에서 바이러스를 나누어지는. </li></ol> 2. 정위 주입 악기의 2.1) 준비 <ol><li> 이전에 수술 가위, 무딘 엔드 집게, 바늘 홀더, 메스, 면봉 한 쌍, 및 멸균 지표와 밀봉 팩에 천 및 오토 클레이브를 놓습니다. 또한, 10 %, 포비돈 요오드, 70 % 에틸 알코올, 흡수성 봉합사, 가열 패드, 인공 눈물을 구 유리 비드 살균기, 드릴, 드릴 비트,이 일회용 주사기, 주입 주사기, 전기 면도기, 진통 (케토 프로 펜), 마취제 (AVERTIN), 장갑, 및 주입 펌프 정위 장치. </li><li> 0.2 사용하여 멸균 후드에서 1.25 % AVERTIN 신선한 솔루션 그 날, 필터를 확인# 181; 멸균 주사기 필터를 M 및 멸균 혈청 유리 병에 넣습니다. 차 - 아밀 알코올 5 ㎖에 2,2,2- tribromoethyl 알코올의 2.5 g을 혼합 한 후 200 ml의 물에 용해. 5. 15 아래의 pH를 유지 </li></ol> 마우스 2.2) 준비 <ol><li> 마우스 (375 ㎎ / ㎏)의 중량을 기준 AVERTIN 관리]. 15 복강 내 (IP) 주입을 통해 AVERTIN와 마우스를 주사 한 후 완전 마취까지 다시 케이지로 놓는다. </li><li> IP 주입 (ketaprofen, 5 ㎎ / ㎏), 장소 건조를 방지하기 위해 마우스의 눈에 인공 눈물을 통해 진통을 제공합니다. </li><li> 마우스가 자신의 발을 곤란에 의해 완전히 잠 들어 있는지 확인합니다. 마우스가 발 핀치에 응답하는 경우, 다음 (50 μL의 용량에) 더 많은 마취제를 제공합니다. 전기 면도기를 이용하여 마우스의 면도 헤드. (주둥이의 상단에, 일반적으로 그냥 귀 뒤에서)에 조작 할 수있는 지역 및 주변 지역을 면도. </li><li> 마우스 나 배치정위 장치 NTO. 전방 클램프에 앞니를 래치, 클램프를 낮추고 턱이 완전히 안전 있도록 조입니다. </li><li> 완전히 머리를 안정 외이도에 귀 막대를 삽입합니다. 내이가 손상 될 수있는, 너무 멀리에 귀 막대를 삽입하지 않도록주의하십시오. 완성되면, 마우스 본체는 헤드의 위치를​​ 방해하지 않고 약간 이동 될 수 있어야한다. </li><li> 절차 내내 쥐의 체온을 조절하기 위해 마우스 하에서 가열 패드를 배치. </li><li> 철저하게 수술 영역을 청소합니다. 면봉을 사용하여 수술 부위의 중앙으로부터 시작하여 바깥쪽으로 이동하는 원 운동을 10 % 포비돈 요오드를 문질러. 그 후, 동일한 방식으로 수술 부위에 70 %의 에틸 알코올을 문질러 면봉을 사용한다. 두 번 반복합니다. </li></ol> 2.3) 첫 번째 절개 <ol><li> 마우스가 수험 공부를하게되면, 멸균 장비 가방을 엽니 다. 변경 장갑 touchi 전에악기를 ng를. 멸균 천을 꺼내 천으로 악기를 배치합니다. 어떤 악기 않은 멸균 표면에 닿으면, 그것을 소독 15 초 동안 유리 구슬 살균기를 사용합니다. </li><li> 비 지배적 인 손에 지배적 인 손과 무딘 엔드 집게에 메스를 가져 가라. 무딘 엔드 집게로 부드럽게 그립 마우스의 피부를 사용하고, 메스를 사용하여 절개를합니다. 약 1.5 cm (코 쪽) 귀 위의 절개를 시작하고 귀 아래 약 0.5 cm로 확장 할 수 있습니다. (그림 1) 브레 그마 노출 마우스의 머리의 중앙에 수직으로 절개를 확장 할 수 있습니다. </li><li> 브레 그마가 가시화되면, 부드럽게 두개골의 표면을 덮고있는 피를 제거하는 살균면 팁을. 머리 피부 측으로 밀어 두면 끝을 사용한다. </li></ol> 2.4) 장비 설치 <ol><li> 모든 혈액 두개골 표면으로부터 제거되고 브레 그마가 분명히 가시화되면 (콘을 주사기를 준비10 8 TU 1 μL의 / ㎖, 볼륨)의 자기 중심. 흄 후드에서 바이러스와 주사기 주입되는 입력합니다. 기포 내부 없는지 확인합니다. 완전히 고정되어 있는지 확인하고, 정위 장치에 주사기를 놓습니다. </li><li> 멸균 주사기 바늘의 끝은 브레 그마의 교점과 라인 간가 설정되도록 그것이 바로 두개골 표면 위에까지 천천히 주사기를 낮출. 0으로이 점을 설정하고,이 시점에서 좌표를 결정합니다. </li><li> 관심의 뇌 영역에 따라, 정위 좌표를 변화한다. 뇌지도 책 (4)를 이용하여 이러한 좌표를 결정합니다. 좌표가 결정되면, 그 좌표에 일치하도록 주사기의 바늘을 움직인다. 좌표를 사용하여 치아 이랑을 대상 = +/- 1mm, A / P = -1.82 mm M / L. 구멍을 뚫어야 할 필요가있는 시각화하기 위해 두개골 위 오른쪽에있는 바늘을 낮 춥니 다. </li><li> 약간 주사기를 올려 드릴을 가지고 드릴 BI를 배치두개골에 약 45 ° 각도에서 대상 드릴 사이트 위의 T 오른쪽. 시추를 시작하고, 두개골 방법을 제공 할 때까지 시추를 유지한다. 두개골 방법을 제공하는 경우, 저항의 저하를 검출 할 수있다. 대뇌 피질의 손상을 방지하기 위해, 뇌에 드릴하지 않도록주의하십시오. </li><li> 멸균면 팁을 가지고 구멍에서 모든 피를 닦아. </li><li> 끝이 오른쪽 뇌 (안 두개골)의 표면에 앉아 있도록 주사기를 낮 춥니 다. D / V를가 뇌 아틀라스 좌표에 기초하여, 원하는 깊이까지 더 낮은 0 주사기 (깊이) 좌표를 설정한다. -1.79 mm로 치아 이랑, 설정 D / V에 도달합니다. </li><li> 0.2 μL / 분의 속도로 주사를 시작한다. 주사기가 원하는 깊이보다 낮은 슬립하지 않도록 손목 시계. 이 경우, 부드럽게 다시 원하는 깊이에 주사기를 올립니다. </li><li> 주입이 완료된 후, 잔여 바이러스가 흡수되었는지 확인 약 2 분을 기다린다. 천천히 주사기를 제기하고 리를 제거하기 위해면 팁을 사용주사 부위에서 파운드. </li><li> 다른 반구에 대해 반복합니다. </li></ol> 2.5) 봉합 <ol><li> 포장 및 그립에서 바늘 홀더를 사용하여 바늘을 멸균 봉합사와 바늘을 제거합니다. 떨어진 바늘 홀더 바늘의 날카로운 에지에 직면한다. 비 지배적 인 손에 무딘 엔드 집게를 잡고 마우스 그립 피부에 그것을 사용할 수 있습니다. 지배적 인 손으로 시작합니다. </li><li> 부드럽게 피부 봉합을 통하여 밀어 절개의 반대편에 피부를 잡아 무딘 단부 집게를 사용한다. 약 0.75 인치가 남을 때까지 통해 봉합사를 당깁니다. </li><li> 바늘의 이동을하자, 바늘 홀더 한 번 주위의​​ 봉합을 포장 무딘 엔드 집게를 사용하여, 다음, 바늘 홀더와 0.75 인치 나머지 봉합을 잡은 통해 봉합사를 당겨 바늘과 바늘 홀더 있도록 그들은 원래의되었던 것과 헤드의 대향 측에서 끝낸다. 이 매듭을 형성​​한다. </li><li> 이 단계를 반복합니다세 번 이상, 머리의 측면 번갈아 바늘 홀더는 각각의 시간에 끝난다. </li><li> 봉합사를 잘라 단계를 반복 2.5.1-2.5.3 절개를 닫을 때까지. </li></ol> 2.6) 수술 후 케어 <ol><li> 부드럽게 마우스의 귀 막대를 제거하고 전방 클램프에서의 턱을 제거합니다. </li><li> 이 깨어나서 자신의 주위에 이동 될 때까지 가열 패드에 마우스를 유지합니다. 매일 마우스를 모니터링하고 유지하며, 손질 먹거나 마시는하지 고통의 흔적에 대한 눈을 밖으로. 필요하다고 판단되는 경우 추가 진통제를주십시오. </li></ol> 3. 필드 테스트 3.1) 설정 <ol><li> 50cm 높은 벽, 크기 50cm X 50cm와 빈 사각형, 플라스틱 분야를 얻습니다 (하지만 약간 더 클 수 있습니다.) 실험을 시작하기 전에 70 %의 에틸 알코올과 아레나 청소. 에틸 알코올이 완전히 경기장에 마우스를 배치하기 전에 건조 가지고 있는지 확인하십시오. </li><li> 에 경기장을 배치바닥 및 조명은 그림자와 눈부심을 최소화하기 위해 설정되어 있는지 확인하려고합니다. </li><li> 추적 소프트웨어를 사용하는 경우, (마우스의 밝은 전망을 가지고 충분히 멀리 떨어져 전체 포함하는 전체 경기장,하지만 충분히 가까이), 오픈 필드의 직접 오버 헤드 열기 필드 위의 약 1.5 피트 카메라를 배치합니다. </li><li> 상자 (30cm X 30cm 약 지역)의 중심 영역을 설정합니다. (16), 시간대를 설정 측면 패널의 영역 (1) 탭을 클릭합니다. <ol><li> 상단 패널에서 모양의 윤곽을 선택하고 중앙 영역의 경계를 설명합니다. 영역을 추가 선택하고 중앙 영역의 내부를 클릭합니다. 프로그램 지시 사항을 사용하여 (이이 절차를 &quot;중심&quot;이라한다) 영역의 이름. 행동 테스트 손으로 득점 할 경우, 필드의 바닥이 테이프를 사용하여 표시, 10cm X 10cm 사각형으로 분할되어 있는지 확인합니다. </li></ol></li><li> 소프트웨어를 설정 때문에 설정이 올바른지, 마우스가 쉽게 VISI입니다화면 BLE. 시험 분야 (조명) 및 마우스 컬러와 호환되도록 시스템에서 검출 설정을 조정하여이 작업을 수행. 참고 : 설정이 올 때, 시스템은 어떤 그림자 또는 소변 / 대변 만 마우스를 추적하고,해서는 안된다. 구체적인 소프트웨어 설정은 경기장 조명 및 마우스의 컬러에 의존한다. </li></ol> 3.2) 적응도 및 테스트 <ol><li> 주변 환경에 적응을하기 위해 시험 전에 행동 방 1 시간에 실험 쥐를 이동합니다. 순응에 대한 자신의 새장에 마우스를 둡니다. </li><li> 테이프에 카메라의 행동 작업을 켜고 마우스가 벽을 향하도록 경기장의 중앙 앞쪽으로 마우스를 놓습니다. </li><li> 5 분 타이머를 설정하고 멀리 경기장에서 단계. 가능하면 실수 마우스에 영향을주지 않도록하기 위해, 공간을 남겨. </li><li> 5 분가되면, 마우스를 제거하고 자신의 새장에 배치합니다. </li><li> 철저하게 다음 마우스로 진행하기 전에 현장을 청소하기 위해 70 %의 에틸 알코올을 사용합니다. 에틸 알코올이 완전히 건조 가지고 있는지 확인하십시오. </li></ol> 3.3) 점수 <ol><li> 네 발은 중간 30cm X 30cm의 내부에있을 때, 필드의 중심에있는 것으로 마우스를 고려한다. </li><li> 마우스 중심에서 소비하는 시간을 정량화. 또한,이 시간 (예 : Noldus의 ethovison 등) 추적 소프트웨어를 사용하여 결정합니다. <ol><li> 이렇게하려면 분석 탭으로 이동 및 분석 프로필에서 &quot;운동&quot;을​​ 클릭합니다. 현재 설정되어있는 카테고리를 삭제 한 다음 위치 탭에서 &quot;영역&quot;을 선택합니다. 중앙 영역을 선택합니다. 다음, 결과를 볼 수있는 (결과 탭에서) &quot;분석 출력&quot;을 선택합니다. 각각의 재판이 나타납니다 시간을 나열하는 표는 움직이지 보냈다. </li></ol></li><li> 그렇지 않으면, 손으로 OFT 점수. 오픈 필드는 OPE의 하단에 설명 (25) 10cm X 10cm 사각형이 있어야합니다N 필드 (AS 단계 3.1.3에 설명). 마우스는 경기장의 중심으로 항목 수에 더하여, 센터에서 소비하는 시간을 정량화. 16 참고 : 중앙 30cm X 30cm 지역은 열기 필드의 중심으로 간주됩니다. 마우스는 네 개의 발은 30 X 30cm 영역 내에있는 경우 중심 지역에 거주하는 것으로 간주된다. </li></ol> 4. 강제 수영 테스트 주 : 행동 작업 사이의 오일의 최소 허용합니다. 4.1) 설정 <ol><li> 2 L 명확한 버킷을 확보, 22 ° C의 물을 채우기. 테이블에 양동이를 놓고 조명은 그림자와 눈부심을 최소화하기 위해 설정되어 있는지 확인하려고합니다. </li><li> 추적 소프트웨어를 사용하는 경우, 직접 오버 헤드 버킷의 카메라를 배치합니다. </li><li> 소프트웨어를 설정 마우스가 화면에 쉽게 볼 수 있도록. </li></ol> 4.2) 적응도 및 테스트 <ol><li> 행동 소유주에 실험 쥐를 이동검사 전 OM 1 시간은 주변 환경을 적응한다. 순응에 대한 자신의 새장에 마우스를 둡니다. </li><li> 테이프에 카메라 행동 작업을 켭니다. 조심스럽게 물 물통의 중간에 마우스를 배치했다. 마우스를 떨어 뜨리지 않도록해야합니다. 천천히 마우스를 내려 전면 발을 먼저 물에 접촉하도록. 잠수에서 자신의 머리를 방지하기 위해주의해야합니다. </li><li> 6 분 동안 타이머를 설정하고 행동 영역에서 멀리 단계. </li><li> 6 분가되면, 버킷에서 마우스를 제거하고 자신의 새장에 다시 마우스를 배치하기 전에 물기를 닦아 낸다. </li></ol> 4.3) 점수 <ol><li> 수영 대 떠있는 시간을 정량화, (기본 설정해야합니다) Noldus에 의해 제안 추적 소프트웨어를 사용하는 경우, 11 % %의 부동을 설정합니다. </li><li> 추적 시스템을 사용하여 정량화하기 위해, 분석 탭으로 이동 및 분석 프로필에서 이동을 클릭합니다. 에, 현재 설정되어있는 카테고리를 삭제하고 이동 상태를 선택(개인 행동 아래) 왼쪽 패널. 11 %로 부동을 설정합니다. </li><li> 결과 탭에서, 트랙 시각화를 선택합니다. 결과를 볼 수있는 (결과 탭에서) 분석 출력을 선택합니다. 각각의 재판이 나타납니다 시간을 나열하는 표는 움직이지 보냈다. </li><li> 손 채점 경우, 마우스가 마우스가 움직이지 소비 시간의 수영이나 등산, 그리고 양을 소비 한 시간을 측정한다. 또한, 처음에 움직 레이턴시를 측정한다. 결과 섹션에서 그림 2를 참조하십시오. </li></ol>

<ol>
	<li>Schwenk, F., Baron, U., Rajewsky, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+Cre-transgenic+mouse+strain+for+ubiquitous+deletion+of+loxP-flanked+gene+segments+including+deletion+in+germ+cells.">A Cre-transgenic mouse strain for ubiquitous deletion of loxP-flanked gene segments including deletion in germ cells.</a> Nucleic Acids Research. 23 (24), 5080-5081 (1995).</li><li>Hirrlinger, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Split-cre+complementation+indicates+coincident+activity+of+different+genes+in+vivo.">Split-cre complementation indicates coincident activity of different genes in vivo.</a> PLoS One. 4 (1), 1-10 (2009).</li><li>Fenno, L. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Targeting+cells+with+single+vectors+using+multiple-feature+Boolean+logic.">Targeting cells with single vectors using multiple-feature Boolean logic.</a> Nature Protocols. 11 (7), 763-772 (2014).</li><li>Paxinos, G., Franklin, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> The mouse brain in sterotaxic coordinates. , (2001).</li><li>Gould, T. D., Dao, D. T., Kovacsics, C. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mood+and+anxiety+related+phenotypes+in+mice:+the+open+field+test.">Mood and anxiety related phenotypes in mice: the open field test.</a> Humana Press. 42, 1-20 (2009).</li><li>Denenberg, V. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Open-field+behavior+in+the+rat:+W.0hat+does+it+mean.">Open-field behavior in the rat: W.0hat does it mean.</a> Annals of the New York Academy of Sciences. 159, 852-859 (1969).</li><li>Bogdanova, O. V., Kanekar, S., D&#8217;Anci, K. E., Renshaw, P. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Factors+influencing+behavior+in+the+forced+swim+test.">Factors influencing behavior in the forced swim test.</a> Physiology &amp; Behavior. 118, 227-239 (2013).</li><li>Porsolt, R. D., Anton, G., Blavet, N., Jalfre, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Behavioral+despair+in+rats:+A+new+model+sensitive+to+antidepressant+treatments.">Behavioral despair in rats: A new model sensitive to antidepressant treatments.</a> European Journal of Pharmacology. 47 (4), 379-391 (1978).</li><li>Hunsberger, J., Dunman, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Animal+models+for+depression-like+and+anxiety-like+behavior.">Animal models for depression-like and anxiety-like behavior.</a> Nature Protocol Exchange. , (2007).</li><li>Hommel, J. D., Sears, R. M., Georgescu, D., Simmons, D. L., DiLeone, R. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Local+gene+knockdown+in+the+brain+using+viral-mediated+RNA+interference.">Local gene knockdown in the brain using viral-mediated RNA interference.</a> Nature Medicine. 9 (12), 1539-1544 (2003).</li><li>Mao, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Disrupted+in+schizophrenia+1+regulates+neuronal+progenitor+proliferation+via+modulation+of+GSK3beta/beta-catenin+signaling.">Disrupted in schizophrenia 1 regulates neuronal progenitor proliferation via modulation of GSK3beta/beta-catenin signaling.</a> Cell. 136 (6), 1017-1031 (2009).</li><li>Clark, M. S., Sexton, T. J., McClain, M., Root, D., Kohen, R., Neumai, J. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Overexpression+of+5-HT1B+receptor+in+dorsal+raphe+nucleus+using+herpes+simplex+virus+gene+transfer,+increases+anxiety+behavior+after+inescapable+stress.">Overexpression of 5-HT1B receptor in dorsal raphe nucleus using herpes simplex virus gene transfer, increases anxiety behavior after inescapable stress.</a> Journal of Neuroscience. 2 (11), 4550-4562 (2002).</li><li>Tasan, R. O., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+central+and+basolateral+amygdala+are+critical+sites+of+neuropeptide+Y/Y2+receptor-mediated+regulation+of+anxiety+and+depression.">The central and basolateral amygdala are critical sites of neuropeptide Y/Y2 receptor-mediated regulation of anxiety and depression.</a> Journal of Neuroscience. 30 (18), 6282-6290 (2010).</li><li>Salmon, P., Trono, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Production+and+titration+of+lentiviral+vectors.">Production and titration of lentiviral vectors.</a> Current Protoc Hum Gen. 12 (12.10), (2007).</li><li>Carter, D. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Anesthetizing+mice.">Anesthetizing mice.</a> Methods Mol Biol. 18, 135-136 (1993).</li><li>Alachkar, A., Jiang, D., Harrison, M., Zhou, Y., Chen, G., Mao, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=An+EJC+factor+RBM8a+regulates+anxiety+behaviors.">An EJC factor RBM8a regulates anxiety behaviors.</a> Current Molecular Medicine. 13 (6), 887-899 (2013).</li><li>Bernal, J., Baldwin, M., Gleason, T., Kuhlman, S., Moore, G., Talcott, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Guidelines+for+rodent+survival+surgery.">Guidelines for rodent survival surgery.</a> Journal of Investigative Surgery. 22, 445-451 (2009).</li><li>Wahlsten, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Getting+ready+for+testing.+Mouse+Behavioral+Testing:+How+to+use+mice+in+behavioral+neuroscience.">Getting ready for testing. Mouse Behavioral Testing: How to use mice in behavioral neuroscience.</a> Academic Press. , 133-141 (2011).</li><li>Kheirbek, M. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Differential+control+of+learning+and+anxiety+along+the+dorso-ventral+axis+of+the+dentate+gyrus.">Differential control of learning and anxiety along the dorso-ventral axis of the dentate gyrus.</a> Neuron. 6 (77), 955-968 (2013).</li><li>Snyder, J. S., Soumier, A., Brewer, M., Pickel, J., Cameron, H. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Adult+hippocampal+neurogenesis+buffers+stress+responses+and+depressive+behaviors.">Adult hippocampal neurogenesis buffers stress responses and depressive behaviors.</a> Nature. 476 (7361), 458-461 (2011).</li><li>Sik-Lee, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Induction+of+neuronal+vascular+endothelial+growth+factor+expression+by+cAMP+in+the+dentate+gyrus+of+the+hippocampus+is+required+for+antidepressant-like+behaviors.">Induction of neuronal vascular endothelial growth factor expression by cAMP in the dentate gyrus of the hippocampus is required for antidepressant-like behaviors.</a> Journal of Neuroscience. 29 (26), 8493-8505 (2009).</li><li>Miller, D. G., Adam, M. A., Miller, A. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Gene+transfer+by+retrovirus+vectors+occurs+only+in+cells+that+are+actively+replicating+at+the+time+of+infection.">Gene transfer by retrovirus vectors occurs only in cells that are actively replicating at the time of infection.</a> Molecular and Cellular Biology. 10 (8), 4239-4242 (1990).</li><li>Rubinson, D. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+lentivirus-based+system+to+functionally+silence+genes+in+primary+mammalian+cells,+stem+cells+and+transgenic+mice+by+RNA+interference.">A lentivirus-based system to functionally silence genes in primary mammalian cells, stem cells and transgenic mice by RNA interference.</a> Nature Genetics. 33, 401-406 (2003).</li></ol>

The authors have nothing to disclose.

성공적인 정위 주사는 세 가지 요소에 의존 : 바늘 (팁, 살아 마우스를 유지 (브레 그마의 교회법 및 간가 줄에 바늘의 끝을) 좌표에 대한 올바른 원점 설정, 영점에 대한 권리 깊이를 설정 다만) 뇌 조직의 외관을 터치. 마우스의 생존 능력은 중요하다. 수술 생존율은 마우스가 제대로 마취 적절한 진통제를 수신되어 있는지 확인하여 도움을받을 수 있습니다. 통증 수술 후 회복 나쁨의 주요 원인으...

그 유전자 조작이 용이하기 때문에 마우스 신경 생물학에서 널리 사용되어왔다. 유전자 녹아웃 기술은 각각의 유전 인자는 마우스 동작을 모양 방법을 연구 조사 할 수 있습니다. 또한, CRE-에 loxP 시스템은 조직 -을위한 유용한 도구를 제공하고, 다른 조직에서 유전자 기능을 연구하는 연구자 수 있습니다 생쥐의 유형 - 특정 유전자 녹아웃을, 세포. (1) 그러나, 실제로, CRE 프로모터의 발현 패턴을 제어하기 어려운 , 지금까지 많은 설립 CRE 드라이버는 특정 지역과 관련된 표현을 달성하지 않았습니다. 2,3 대안 적으로, 정위 주사 성인 쥐의 뇌의 특정 영역을 목표로하는 방법이다. 된 cDNA 또는 shRNA를 발현 유전자 조작 바이러스를 주입하여, 유전자 발현의 특정 지역과 관련된 변조를 달성 할 수있다. 각 마우스의 뇌의 크기가 다르지만, 뇌의 특정 영역의 위치는 정위 번호 좌표를 사용하여 결정될 수있다궁둥이 마우스 뇌의 두개골에 랜드 마크에서 설정합니다. 가장 일반적으로 사용되는 랜드 마크 브레 그마, 람다, 및 라인 간가있다. 뇌 아틀라스로부터 얻어지는 좌표를 사용하여, 각 뇌 영역의 4 정확한 위치는 안테 - 후방 (A / P), 내측 - 외측 (M / L)에 의해 식별 될 수 있고, 지느러미 - 복부는 (D는 / V)에서 축 브레 그마는 / 간가 라인 교차. 주사는 형광 현미경으로 확인 할 수 있도록 일반적으로 쥐의 뇌에 주입 바이러스는 하나 빨강, 또는 녹색 형광 단백질 (RFP 또는 GFP) 태그된다. 쥐의 행동 평가는 정신 질환의 기초 연구에 특히 필요하다. 환자의 정신 장애의 증상은 일반적으로 비정상적인 행동을 포함한다. 이러한 인간의 행동 중 일부는 진화 적으로 보존하고 직접 모방 및 마우스에서 관찰 할 수있다. 예를 들어, 우울증 행동 절망을 측정함으로써 마우스에서 모델링 될 수있다. 자주 우울증이있는 사람그들도 도움이 될 것입니다 아무것도 할 것처럼 EN은 결국 자살로 이어질 수있는 증상을 느낀다. 설치류, 이것은 물 풀에 떠 대 수영 마우스 (포기로 간주) 시간의 양을 측정 강제 수영 시험 (FST)를 사용하여 모델링 될 수있다. 이 패러다임은 항우울제와 표현형을 구출에 의해 검증된다. 처리되지 않은 대조군에 비해 훨씬 적은 시간 움직이지를 보낼 것입니다 항우울제를받은 7, 8, 9 마우스를. 다른 행동 테스트, 오픈 필드 테스트 (OFT) 마우스에서 운동을 평가하도록 설계되고, 별도로 마우스에서 불안 표현형을 분석하는데 사용될 수있다. 5,6이 시험은 그들이 가까이있을 때 마우스는 안전한 느낌 전제 소설 열기 필드에서 벽에. 그들은 호기심 동물로 야생 형 마우스는 결국, 새로운 환경을 모색 할 것입니다. 그러나, 필드의 중심에서 적은 시간을 소비하는 것은 마우스 initia를 극복 할 수 없게되므로, 마우스에 불안을 나타낸다L의 공포는 새로운 환경에 가져왔다. 열린 필드의 중심에서 필요한 시간의 양에 의해 정량화 마우스 불안은 많은 정신 질환에 존재하는 인간 임상 불안, 비교 될 수있다. 행동 패러다임 정위 주사의 조합은 타겟 뇌 영역에서 특정 유전자의 발현을 변경하는 신규 한 방법이다. 마우스 동작에 변조 된 유전자 발현의 효과는 결정될 수있다. 전뇌 녹아웃 대조적으로,이 방법은 특정 뇌 영역을 대상으로 특히 유용하다. 또한, 정위 주사는 일반적으로 성인 야생형 마우스에서 수행되며, 따라서, 내인성 유전자 발현이 발달 단계에 걸쳐 유지되었다. 유전자는 배아 발달 또는 출생 후의 단계에서 생존에 필요한 경우이 방법은 효과가 혼동을 방지한다. 하나의 주요 제한은 실험 쥐를 통해 서 갈 필요가 있다는 것입니다H 쥐의 두개골이 가지고있는 침습 수술은 열 수 있습니다. 또한, 유전자 조절의 정도는 바이러스의 역가 및 효율성에 의해 결정된다. 바이러스는 특별한기구를 필요로 정위 좌표를 이용하여 정확한 영역에 주입되어야한다. 정확한 주사 부위의 확인은 사후을 완료 할 수 있습니다. 이 방법은 이전에 각종 신경 질환에서 특정 유전자의 참여를 테스트하는 데 사용되어왔다. 예를 들어, 바이러스 성 매개의 RNAi가 (도파민 합성 할 수있다) 토륨 유전자를 타겟팅하는 흑색질의 compacta에 주입하고, 전위의 거동 분석을 수행 하였다. (10) 또 다른 연구가 관련 마우스의 행동을 평가 렌티 소음 DISC1의 정위 주사를 사용 정신 분열증에. DISC1의 최저은 새로움에 대한 응답으로 증가 운동을 주도 (평행 정신 분열증의 양성 증상), 그리고 더 큰 부동FST. (11)는 마찬가지로, 추가 연구는 5-HT (1B)의 과발현이, OFT 증가 탐색 행동이 방법을 사용하여 항 불안 표현형과 일치 주도 것으로 나타났습니다. (12) 정위 주사 CRE-에 loxP 생쥐에서 재결합을 유도하는 CRE 바이러스를 제공 할 수 있습니다 . 이 방법은 선택적으로 편도선에서 Y2 수용체 맥리의 terminalis의 침대 핵을 제거하기 위해 사용되었다. 행동 분석하면,이 마우스는 유전자가 중앙 편도체에서 삭제 된 항 우울 표현형을 찾았지만, 한 유전자가 기저 편도 또는 맥리의 terminalis의 침대 핵에 삭제없이 표현형. (13) 따라서,이 기술을 동물의 행동에 유전 적 효과를 연구 할 수있는 독특한 도구를 제공합니다.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="608">
	<colgroup>
		<col />
		<col />
		<col />
		<col />
	</colgroup>
	<tbody>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:216px;">Name of Material/ Equipment</td>
			<td style="width:107px;">Company</td>
			<td style="width:119px;">Catalog Number</td>
			<td style="width:167px;">Comments/Description</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:216px;">Stereotactic Apparatus item 51725</td>
			<td style="width:107px;">Stoelting co.</td>
			<td align="right" style="width:119px;">51725</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:216px;">Quintessential stereotaxic pump&#160;</td>
			<td style="width:107px;">Stoelting co.</td>
			<td align="right" style="width:119px;">53311</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Injection Styringe, 65 RN</td>
			<td style="width:107px;">Hamilton</td>
			<td style="width:119px;">7633-01</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">DMEM</td>
			<td style="width:107px;">Sigma-Aldrich</td>
			<td style="width:119px;">D5796</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:216px;">PEI&#160;</td>
			<td style="width:107px;">Polysciences Inc.</td>
			<td align="right" style="width:119px;">23966</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:216px;">Scissors</td>
			<td style="width:107px;">Fine Surgical Tools</td>
			<td style="width:119px;">14084-08</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:216px;">Blunt end forceps</td>
			<td style="width:107px;">Fine Surgical Tools</td>
			<td style="width:119px;">11002-12</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:216px;">Needle holder&#160;</td>
			<td style="width:107px;">Fine Surgical Tools</td>
			<td style="width:119px;">12001-13</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="84">
			<td height="84" style="height:84px;width:216px;">Drill</td>
			<td style="width:107px;">Ram Products Inc</td>
			<td style="width:119px;">Microtorque control box, Tech2000 handpiece</td>
			<td>with pedal</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Glass bead sterilizer</td>
			<td style="width:107px;">Inotech&#160;</td>
			<td style="width:119px;">IS-400</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Absorbable sutures&#160;</td>
			<td style="width:107px;">Unify</td>
			<td style="width:119px;">M-K518r19</td>
			<td>Absorbable, reverse cutting</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Cotton swabs</td>
			<td style="width:107px;">VWR</td>
			<td style="width:119px;">89031-270</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:216px;">Heating pad</td>
			<td style="width:107px;">Gaymar</td>
			<td style="width:119px;">T-pump TP-500 PN11184-000</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:216px;">Artificial tears</td>
			<td style="width:107px;">Rugby</td>
			<td style="width:119px;">NDC 0536-6550-91</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Disposable syringe</td>
			<td style="width:107px;">BD Syringe</td>
			<td align="right" style="width:119px;">309623</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Cloth</td>
			<td style="width:107px;"></td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:216px;">Gloves&#160;</td>
			<td style="width:107px;">Ansell</td>
			<td style="width:119px;">Senseitouch #7823</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:216px;">Avertin or other anesthetic</td>
			<td style="width:107px;">see recipe citation</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:216px;">Ketoprofen or other analgesic</td>
			<td style="width:107px;">see veternarian&#160;</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Tracking software</td>
			<td style="width:107px;">Noldus</td>
			<td style="width:119px;">Ethovision XT</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Tracking Camera</td>
			<td style="width:107px;">Noldus</td>
			<td style="width:119px;">Media Recorder</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

applying stereotactic injection technique to study genetic effects on animal behaviors

정위 주사는 쥐에서 대상 뇌 영역에 높은 역가의 렌티 바이러스를 전달하는 유용한 기술이다. 렌티 바이러스가 과발현 또는 뇌 조직에 큰 손상없이 비교적 집중된 지역에서 최저 유전자 발현 할 수 있습니다. 복구 후, 주입 된 마우스는 오픈 필드 테스트 (OFT)과 강제 수영 시험 (FST) 등의 다양한 행동 작업에 테스트 할 수 있습니다. OFT는 마우스 신규 오픈 필드의 중앙에 보내는 시간의 양을 측정함으로써 마우스에서 운동 및 불안 표현형을 평가하기 위해 디자인된다. 더 불안 마우스 대조군과 비교하여 신규 필드의 중심에서 상당히 적은 시간을 소요한다. FST 물 버킷에 넣고, 마우스가 움직이지 않는 경우에 소요되는 시간을 정량화하여 항 우울증 표현형을 평가한다. 항 우울 표현형을 가진 마우스는 동물을 대조군에 비해 훨씬 적은 시간 움직이지를 보낼 것입니다. 이 프로토콜의 목적은 아이돌을 사용하는 것행동 검사와 함께 렌티 바이러스의 eotactic 주입은 동물의 행동을 조절하는 방법을 유전 적 요인 평가합니다.

<html> 정확한 정위 주입 올바른 좌표를 설정하는 방법에 크게 의존. 바이러스를 주입하기 위해 사용되는 바늘의 팁은 브레 그마의 교차점 간가 라인 (도 1)에 직접적으로 설정되어야한다. 이것은 바늘이 올바르게 배치되어 있는지의 여부를 확인하기 위해 실체 현미경을 사용하는 것이 도움이된다. 현미경으로 보면 바이러스가 주입 된 경우, 그것이 브레 그마의 교차점 간가 라인에 바?...

Watch this Scientific Journal Video about Applying Stereotactic Injection Technique to Study Genetic Effects on Animal Behaviors at JoVE.com

Applying Stereotactic Injection Technique to Study Genetic Effects on Animal Behaviors

렌티 바이러스는 cDNA를 표현 또는 shRNA를 생쥐의 특정 뇌 영역에서 유전자 발현을 조절할 수의 정위 주입. 여기, 우리는 오픈 필드 테스트 (OFT)과 강제 수영 시험 (FST)와 같은 행동 작업으로 정위 주사를 결합하는 프로토콜을 제시한다.

정위 사출 기술을 적용하는 것은 동물의 행동에 유전 적 영향을 연구하기

Stereotactic injection is a useful technique to deliver high titer lentiviruses to targeted brain areas in mice. Lentiviruses can either overexpress or ...

applying-stereotactic-injection-technique-to-study-genetic-effects-on

Research

JoVE Journal

Behavior

14.1K 조회수.  The Pennsylvania State University.  렌티 바이러스는 cDNA를 표현 또는 shRNA를 생쥐의 특정 뇌 영역에서 유전자 발현을 조절할 수의 정위 주입. 여기, 우리는 오픈 필드 테스트 (OFT)과 강제 수영 시험 (FST)와 같은 행동 작업으로 정위 주사를 결합하는 프로토콜을 제시한다. 

비디오: Applying Stereotactic Injection Technique to Study Genetic Effects on Animal Behaviors

Stereotactic Injection of MicroRNA-expressing Lentiviruses to the Mouse Hippocampus CA1 Region and Assessment of the Behavioral Outcome

MicroRNAs (miRNAs) are small regulatory single-stranded RNA molecules around 22 nucleotides long that may each target numerous mRNA transcripts and dim an entire gene expression pathway by inducing destruction and/or inhibiting translation of these targets. Several miRNAs play key roles in maintaining neuronal structure and function and in higher-level brain functions, and methods are sought for manipulating their levels for exploring these functions. Here, we present a direct in vivo method for examining the cognitive consequences of enforced miRNAs excess in mice by stereotactic injection of miRNA-encoding virus particles. Specifically, the current protocol involves injection into the hippocampal CA1 region, which contributes to mammalian memory consolidation, learning, and stress responses, and offers a convenient injection site. The coordinates are measured according to the mouse bregma and virus perfusion is digitally controlled and kept very slow. After injection, the surgery wound is sealed and the animals recover. Lentiviruses encoding silencers of the corresponding mRNA targets serve to implicate the specific miRNA/target interaction responsible for the observed effect, with na&iuml;ve mice, mice injected with saline and mice injected with "empty" lentivirus vectors as controls. One month post-injection, the animals are examined in the Morris Water Maze (MWM) for assessing their navigation learning and memory abilities. The MWM is a round tank filled with colored water with a small platform submerged 1 cm below the water surface. Steady visual cues around the tank allow for spatial navigation (sound and the earth's magnetic field may also assist the animals in navigating). Video camera monitoring enables measuring the route of swim and the time to find and amount the platform. The mouse is first taught that mounting the hidden platform offers an escape from the enforced swimming; it is then tested for using this escape and finally, the platform is removed and probe tests examine if the mouse remembers its previous location. Repeated tests over several consecutive days highlight improved performance of tested mice at shorter latencies to find and mount the platform, and as more direct routes to reach the platform or its location. Failure to show such improvement represents impaired learning and memory and/or anxiety, which may then be tested specifically (e.g. in the elevated plus maze). This approach enables validation of specific miRNAs and target transcripts in the studied cognitive and/or stress-related processes.

MicroRNAs have significant roles in brain structure and function. Here we describe a method to enforce hippocampal miRNA over-expression using stereotactic injection of an engineered miRNA-expressing lentivirus. This approach can serve as a relatively rapid way to assess the in vivo effects of over-expressed miRNAs in specific brain regions.

의 정위 주입 MicroRNA의 발현 마우스 해마 CA1 영역으로 렌티 바이러스 및 행동 결과의 평가

MicroRNAs (miRNAs) are small regulatory single-stranded RNA molecules around 22 nucleotides long that may each target numerous mRNA transcripts and dim an ...

연구

행동분석학

A Within-subjects Experimental Protocol to Assess the Effects of Social Input on Infant EEG

Despite the importance of social interactions for infant brain development, little research has assessed functional neural activation while infants socially interact. Electroencephalography (EEG) power is an advantageous technique to assess infant functional neural activation. However, many studies record infant EEG only during one baseline condition. This protocol describes a paradigm that is designed to comprehensively assess infant EEG activity in both social and nonsocial contexts as well as tease apart how different types of social inputs differentially relate to infant EEG. The within-subjects paradigm includes four controlled conditions. In the nonsocial condition, infants view objects on computer screens. The joint attention condition involves an experimenter directing the infant's attention to pictures. The joint attention condition includes three types of social input: language, face-to-face interaction, and the presence of joint attention. Differences in infant EEG between the nonsocial and joint attention conditions could be due to any of these three types of input. Therefore, two additional conditions (one with language input while the experimenter is hidden behind a screen and one with face-to-face interaction) were included to assess the driving contextual factors in patterns of infant neural activation. Representative results demonstrate that infant EEG power varied by condition, both overall and differentially by brain region, supporting the functional nature of infant EEG power. This technique is advantageous in that it includes conditions that are clearly social or nonsocial and allows for examination of how specific types of social input relate to EEG power. This paradigm can be used to assess how individual differences in age, affect, socioeconomic status, and parent-infant interaction quality relate to the development of the social brain. Based on the demonstrated functional nature of infant EEG power, future studies should consider the role of EEG recording context and design conditions that are clearly social or nonsocial.

This novel protocol is designed to assess the neural bases of social interaction in infants. The paradigm is designed to tease apart how various social inputs such as language, joint attention, and face-to-face interaction relate to infant neural activation. Infant EEG power is recorded during both social and nonsocial conditions.

A는 내 - 과목 실험 프로토콜 유아 EEG에 대한 사회 입력의 효과를 평가하기 위해

Despite the importance of social interactions for infant brain development, little research has assessed functional neural activation while infants ...

Testing Animal Anxiety in Rats: Effects of Open Arm Ledges and Closed Arm Wall Transparency in Elevated Plus Maze Test

The elevated plus maze test is a behavioral test for assessing animal anxiety in rodents. Although this test is widely applied in the field of behavioral science, conflicting outcomes are often provided from different laboratories. To identify reasons for the different outcomes, we previously focused on arm features, which differ between laboratories, most notably the presence/absence of ledges at the sides of open arms and the transparency/opaqueness of closed arm walls. In a previous report, we used a custom designed container to compare rat behavior on different combinations of open and closed arm designs under otherwise identical experimental conditions, and showed that differences in arm features interfere with experimental outcomes. In brief, open arm ledges significantly increased anxiety-like behavior in rats, while transparent arms may also have decreased this behavior. Furthermore, we verified a higher detection sensitivity of the effect of an anxiolytic drug in a combination of no-ledged open arm + opaque walled closed arm compared with a combination of ledged open arm + transparent walled closed arm. In this report, we introduce our protocol for the elevated plus maze test, together with discussion of the key results from the previous report and our experimental experience. We believe this report will provide useful information for researchers who have employed or who plan to use the elevated plus maze in their studies.

Rats' anxiety-like behavior tested by the elevated plus maze varies highly depending on the testing environment. Here we show how apparatus settings, especially arm structure, affect behavior on the maze, and we explain a reliable protocol to detect effects of anxiolytic drugs. This report will contribute to anxiety research.

쥐에서 동물 불안을 테스트: 오픈 팔 레와 닫힌된 팔 벽 투명성 높은 플러스 미로 테스트

The elevated plus maze test is a behavioral test for assessing animal anxiety in rodents. Although this test is widely applied in the field of behavioral ...

Assessment of Social Transmission of Food Preferences Behaviors

Olfactory recognition deficits are suggested to be able to serve as clinical marker to differentiate Alzheimer&#39;s disease (AD) subjects from healthy aging groups. For example, olfactory dysfunction in AD can present as impairment in olfactory recognition, emerging during early stages of the disease and worsening while the disease progresses. The social transmission of food preferences (STFP) task is based on a rudimentary form of communication between rodents concerning distant foods dependent on the transmission of olfactory cues. Healthy wild-type mice would prefer to eat a novel, flavored food that was previously cued by a conspecific, and this food preference would be hampered in transgenic AD mice, such as the APP/PS1 model. Indeed, a strong preference for the cued food in C57Bl6/J mice of 3 months of age was found, and this was reduced in 3 months old transgenic APP/PS1 mice. In summary, STFP task could be a powerful measure to be integrated in present subclinical detection assays of AD.

This paper presents a protocol for the investigation of social transmission of food preference in mice. The advantages and possible applications for this procedure, for instance, in detecting early changes in AD mouse models, are highlighted. To conclude, interpretation of the results in light of critical details are discussed.

식품 환경 설정 행동의 사회적인 전송에 대 한 평가

Olfactory recognition deficits are suggested to be able to serve as clinical marker to differentiate Alzheimer&#39;s disease (AD) subjects from healthy ...

Tickling, a Technique for Inducing Positive Affect When Handling Rats

Handling small animals such as rats can lead to several adverse effects. These include the fear of humans, resistance to handling, increased injury risk for both the animals and the hands of their handlers, decreased animal welfare, and less valid research data. To minimize negative effects on experimental results and human-animal relationships, research animals are often habituated to being handled. However, the methods of habituation are highly variable and often of limited effectiveness. More potently, it is possible for humans to mimic aspects of the animals&#39; playful rough-and-tumble behavior during handling. When applied to laboratory rats in a systematic manner, this playful handling, referred to as tickling, consistently gives rise to positive behavioral responses. This article provides a detailed description of a standardized rat tickling technique. This method can contribute to future investigations into positive affective states in animals, make it easier to handle rats for common husbandry activities such as cage changing or medical/research procedures such as injection, and be implemented as a source of social enrichment. It is concluded that this method can be used to efficiently and practicably reduce rats&#39; fearfulness of humans and improve their welfare, as well as reliably model positive affective states.

This article demonstrates the standardized application of playful handling, a tickling technique designed to mimic rat rough-and-tumble play. This technique is effective at reducing fearful reactions to humans and generating positive affect when rats are handled for common husbandry activities and medical and research procedures such as injection.

간, 쥐를 처리할 때 긍정적인 영향을 유발 하는 기술

Handling small animals such as rats can lead to several adverse effects. These include the fear of humans, resistance to handling, increased injury risk ...

Using a Classroom-Based Deese Roediger McDermott Paradigm to Assess the Effects of Imagery on False Memories

Associated word list procedures can elicit false memories in predictable ways by inducing associative processing, thus making it harder to monitor the accuracy of memories. The purpose of the method presented here was to induce false memories using lists of either semantically or phonologically related words and to assess the effects of imagery instructions on the recall and recognition of those false memories. To do this, we used a modified version of the Deese Roediger McDermott (DRM) paradigm. We adapted word lists from previous DRM studies to suit imagery procedures and created an automated presentation to present the word lists in classroom settings. We then recruited undergraduate classes and instructed some of the classes to create mental images of the list words as they were being presented, while instructing the other classes to simply remember the words. The automated presentation presented word lists to participants, one word at a time, alternating between phonologically and semantically related lists. Participants used paper-pencil recall packets to immediately recall list items, complete a distractor activity, and take a subsequent final recognition test. Often, participants immediately recalled and later recognized words that were related to the list items but were not actually presented; these are known as critical lures and indicate a false memory. The protocol detailed here describes a four-step procedure - list presentation, immediate recall, distractor phase, and final recognition - that can assess the effects of list type and imagery instruction within the DRM paradigm on memory. The automated nature of the list presentation provides the ability to systematically vary variables of interest, and the paper and pencil method of data collection affords an easily accessible method for collecting data in classroom settings. The protocol also offers options to modify the procedure to a more traditional DRM paradigm without imagery and/or list type manipulations. The use of this protocol can provide results relevant to both classroom learning and cognitive science principles.

The method presented here induced false memories using lists of related words and also assessed the effects of imagery instructions on the recall and recognition of those false memories. This protocol details a modified version of the Deese Roediger McDermott (DRM) paradigm.

거짓 기억에 이미지의 효과 평가 하기 위해 교실 기반 Deese Roediger 맥 더 못 패러다임을 사용 하 여

Associated word list procedures can elicit false memories in predictable ways by inducing associative processing, thus making it harder to monitor the ...

Assessing the Coherence of Parents' Short Narratives Regarding their Child Using the Five-Minute Speech Sample Procedure

Valid and efficient measures for assessing the quality of parent-child relationships are needed to facilitate research and evidence-based practice with parents. This paper focuses on such a method, namely Five-Minute Speech Sample-Coherence (FMSS-Coherence). In this method, a parent is asked to speak for five uninterrupted minutes about her/his child and their relationship. The resulted narrative is coded for coherence, namely the extent to which the parent provides&#160;in the narrative&#160;a clear, consistent, multidimensional and well-supported portrayal of the child. FMSS-Coherence is based on attachment research that shows that the coherence of parents&#8217; narratives is indicative of the quality of the parent-child relationship and child adjustment. It overcomes the limitations of attachment narrative measures which are typically labor intensive. FMSS-Coherence is less nuanced than extant attachment narrative measures. Yet, studies of families from different cultural backgrounds, across different child ages and in the context of typically developing children as well as children with special needs suggest that coherence can be reliably evaluated using the FMSS procedure. Furthermore, parents&#8217; FMSS-Coherence is associated with parenting quality and children&#8217;s socio-emotional adjustment. Thus, it holds promise for researchers and practitioners who seek a relatively time- and cost-effective method for assessing the coherence of parents&#8217; narratives regarding their child.

This paper introduces a method for assessing the coherence of parents' short narratives regarding their child and their relationship using the five-minute speech sample procedure.

5분 음성 샘플 절차를 사용하여 자녀에 관한 부모의 짧은 이야기의 일관성 평가

Valid and efficient measures for assessing the quality of parent-child relationships are needed to facilitate research and evidence-based practice with ...

Applying an eMASS Customization Program as a Research Tool to Evaluate Consumer Benefits

As many scholars and practitioners study personalization and relationship marketing, it is important to provide personalization such as mass customization through marketing technology. The purpose of this study is to examine how to conduct consumer research using an online survey and analysis of data. This study examines consumers&#39;&#160;perceived benefits while customizing a product as well as emotional product attachment, attitudes toward a customization program, and loyalty intentions in the context of online retailing. In addition, this study investigates how consumer responses are different based on individual characteristics such as fashion innovativeness. An online survey company in South Korea recruited 290 female apparel shoppers who purchased apparel online. To enhance external validity, this study used an existing retail website with a well-established mass customization program. After completing the customization program, participants complete the online questionnaire. Structural equation modeling (SEM) and latent mean analyses (LMAs) are then performed for analyses. This study stresses the importance of testing measurement invariance for mean comparisons. Before the SEM and LMA, this study follows the hierarchy of invariance tests (configural invariance test, metric invariance test, and scalar invariance test), which are not considered by traditional approaches such as ANOVA. These statistical analyses provide applicability of the invariance test procedures and LMA to consumer behaviors. The conclusions of mean differences have integrity and validity because they are guided by a sophisticated statistical procedure to ensure measurement invariance.

Presented here is a protocol to examine consumer responses toward mass customization in the context of online retailing. The protocol details the online survey procedure and how to analyze data using structural equation modeling and group differences using latent mean analyses.

소비자 혜택을 평가하기 위한 연구 도구로 eMASS 커스터마이징 프로그램 적용

As many scholars and practitioners study personalization and relationship marketing, it is important to provide personalization such as mass customization ...

The Use of Traditional Fear Tests to Evaluate Different Emotional Circuits in Cattle

Animal temperament is complex and has implications for productivity and economic profitability. Quantifying an animal&#39;s response to differing stimuli may facilitate breeding selections and identify animals that are better suited to specific management strategies. Multiple tests have been developed to evaluate cattle temperament (e.g., exit velocity, chute score, pen score, open field test, startle test, bovine zero maze), but each of these tests evaluates the animal&#39;s response to different stimuli (e.g., isolation, novel environment, startle, willingness to enter an enclosed area). Cattle temperament has been observed to be relatively stable over time. However, the evaluation of temperament has the potential to be influenced by current conditions, previous experiences, and observer bias. Many of these temperament tests have been improperly categorized as fear tests and have also been criticized for being subjective. This paper provides a framework for standardizing behavioral tests for cattle and suggests that these different evaluations assess different aspects of the animal&#39;s overall temperament.

Here, we present a protocol to conduct a variety of behavioral tests in cattle that have been designed to evaluate emotions. A battery of behavioral tests (open field test, startle test, bovine zero maze, exit velocity, pen score, and chute score) were conducted to evaluate different components of animal temperament.

가축의 다양한 정서적 회로를 평가하기 위해 전통적인 공포 테스트의 사용

Animal temperament is complex and has implications for productivity and economic profitability. Quantifying an animal&#39;s response to differing stimuli ...

Effects of Surgical Masks on Cardiopulmonary Function in Healthy Subjects

We study the effect of surgical masks on cardiopulmonary function based on a cardiopulmonary exercise test (CPET). This study shows that surgical masks reduce cardiopulmonary exercise capacity and ventilation in healthy young subjects and wearing masks might affect aerobic exercise capacity more in female subjects than in male subjects.

We study the effect of surgical masks on cardiopulmonary function based on a cardiopulmonary exercise test (CPET). This study shows that surgical masks reduce cardiopulmonary exercise capacity and ventilation in healthy young subjects and wearing masks might affect aerobic exercise capacity more in female subjects than in male subjects.

건강한 피험자의 심폐 기능에 대한 수술용 마스크의 효과

We study the effect of surgical masks on cardiopulmonary function based on a cardiopulmonary exercise test (CPET). This study shows that surgical masks ...