Name: a novel murine model of arteriovenous fistula failure: the surgical procedure in detail
Uploaded: 2016-02-03T13:00:00.000+00:00
Duration: 10 min 10 s
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This study was supported by a grant from the Dutch Kidney Foundation (KJPB 08.0003). 
Carolien Rothuizen is acknowledged for her contribution to the study. Hoang Pham is acknowledged for his assistance with the pathology work-up.

모든 실험은 라이덴 대학 의료 센터의 동물 복지위원회에 의해 승인되었다. 1. 동물 준비 및 마취 <ol><li> 3-4%의 이소 플루 란으로 가득 연속 마취 유도 챔버에서 마우스 (1-3 개월)를 마취. </li><li> 목 및 전기 면도기를 이용하여 좌측 상부 다리의 내측부의 복부 측면을 면도 모발을 제거 테이프의 조각을 사용한다. </li><li> 두 눈에 눈 연고를 적용합니다. </li><li> 코 환기 마스크가 고정되는 가열 담요에 동물을 배치합니다. 접착 테이프를 사용하여 코 마스크에 머리를 흥분시키는. <ol><li> 다음 흐름에 산소가 풍부한 공기 세트를 사용하여 1.5 내지 2.0 %의 농도로 이소 플루 란을 전달 : 공기 0.3 L / min로 100 % 산소 / 분 0.2 L. 마취 깊이를 평가하고 필요한 경우 이소 플루 란의 농도를 조정 발가락 사이 피부 핀치. </li></ol></li><li> 동물을 흥분시키는누운 자세에서 약 37 ° C로 설정되어 모든 사지에 접착 테이프로 가열 담요. </li><li> 0.1 mg을 투여로 염화나트륨 0.9 %에 용해 된 부 프레 노르 핀을 주입 / 동물의 측면에서 0.9 % NaCl을 멸균 피하 0.5ml를 함께 kg이다. </li><li> 준비된 지역에 클로르헥시딘 팅크 0.5 %를 적용합니다. </li></ol> 2. 피부 절개 <ol><li> 외과 의사를 향해 머리를 가진 현미경으로 동물을 배치합니다. </li><li> 마이크로 가위를 사용하여 복부 목의 중간 선에서 약 1.5 cm의 종 절개를합니다. </li><li> 집게로 침샘을 잡고는 부분적으로 상처 밖에까지 두개쪽으로 오른쪽 침샘을 대체. </li></ol> 3. 해부 및 정맥 준비 <ol><li> 확인하고 퉁명스럽게 확산하여 혈관 주위 조직으로부터 완전히 오른쪽 외부 경정맥의 dorsomedial 분기를 해부 단지longside 및 혈관의 방향. </li><li> 해부 정맥 주위에 루프 (10.0 봉합)을 배치하고 잠​​금없이 하나의 매듭을 적용합니다. </li></ol> 4. 흉쇄 근육을 제거 <ol><li> 집게를 사용하여, 퉁명스럽게 그 국경을 따라 확산에 의해 그 주변에서 오른쪽 흉쇄 근육을 해부하다. 격리 된 근육에서 열린 포셉 한 쌍을 놓고는 6.0 봉합사와 근위 및 원위 결찰. 이어서, cauterizer를 사용 근육 절개. </li></ol> 5. 해부 및 경동맥 준비 <ol><li> 확인하고 집게를 사용하여 오른쪽 경동맥을 해부하다. 동맥의 조작에 도움이 동맥 주위에 6.0 봉합 실을 배치합니다. </li><li> 같은 말단 및 근위 가능한 혈관 클램프를 적용합니다. </li><li> 전문 마이크로 가위를 사용하여 약 1mm의 동맥의 중간에 세로 절개를합니다. </li><li> 린스헤파린 용액과 동맥 [100 IU / ㎖] 선박이 피가 깨끗해질 때까지. </li><li> 측정 및 폭을 혈관 클램프 [1.1 mm]을 일치시킬 필요 절개의 길이를 조정한다. </li></ol> 정맥 6. 내고 <ol><li> 근위 이미 준비 정맥의 혈관 클램프를 적용하고 정맥 주위 봉합 실을 배치합니다. </li><li> 이전에 배치 된 10.0 봉합사를 사용하여 가능한 한 원심 정맥을 봉합 실에 배치하고 결찰하는 haemostat를 사용하여 정맥에 부드러운 꼬리 견인을 적용합니다. </li><li> 결찰에 단지 근위 가위를 사용하여 정맥을 잘라. </li><li> 혈관 집게를 사용하여 부드럽게 혈관의 내강을 열고 헤파린 솔루션 [100 IU / ㎖]로 씻어. </li></ol> 문합 제 1 항에 창조 <ol><li> 여섯 O &#39;에서 봉합 다음에 12시 위치에 2 평방 노트를 사용하여 중단 된 봉합사 (10.0)과 동맥 정맥을 연결합니다시계 위치입니다. 그것은 자신의 축 주위를 회​​전 할 수없이 동맥에 정맥을 연결해야합니다. 외과 적 노출을 개선시키기 위해 동물을 돌린다. </li><li> 정맥 주위 봉합 실을 놓고 haemostat를 사용하여 부드러운 측면 견인을 적용합니다. </li><li> 동일한 단속 봉합을 사용하여 문합 표시 복부 측에 약 3-4 봉합 부가 배치하여 문합을 완료. </li></ol> 8. 헤파린 관리 <ol><li> 가열 담요를 180 ° 회전하고 왼쪽 상단 다리에 현미경을 집중한다. </li><li> 상부 다리의 중간 부분에 길이 방향으로 실행하고 피부를 통해 볼 수있는 혈관 구조를 찾아 대퇴 정맥 / 동맥 / 신경 다발을 확인합니다. 직접 길이 방법으로 대퇴 정맥으로 약 1cm의 미세 가위와 절개를합니다. </li><li> 조심스럽게 대퇴 정맥의 혈관 주위 조직을 해부하고 선량 오에 헤파린을 주입대퇴 정맥에 0.2 IU / g의 체중 바. </li></ol> 문합 제 2 항 만들기 <ol><li> 목 영역으로 돌아가 정맥 주위에 배치 된 봉합 실을 제거합니다. </li><li> 연속적으로 정맥을 통해 다시 경동맥 아래에있는 경동맥 아래를 통과 봉합 실 (6.0)을 놓습니다. (그림 1L) </li><li> 정맥 혈관 클램프를 제거합니다. </li><li> 다음으로, 동시에 혈관 클램프를 왜곡하여 절반 완료 동정맥루를 시계 방향 방식으로 경동맥의 축을 따라 180도 트위스트와 봉합 실의 끝 부분에 중간 견인을 적용합니다. </li><li> 단계 7.2에서 설명하는 것과 같은 방식으로 문합을 완료합니다. </li></ol> 10. 혈관 클램프 제거 <ol><li> 봉합 실을 제거하고 혈관이 180 ° 시계 반대 방향으로 회전 클램프. </li><li> 근위 혈관 클램프 다음 말초 혈관 클램프를 제거합니다. </li> &lt;리는&gt; 부드럽게 혈관 집게로 정맥 유출 관을 폐색하여 문합의 개통을 평가합니다. 특허 문합 경우, 사전 흡장 정맥 절에서는 박동성 방식으로 확장됩니다. 원래의 해부학 적 위치하여 집게에 대한 권리 침샘을 변경합니다. </li></ol> 11. 피부 폐쇄 및 수술 후 케어 <ol><li> 중단 봉합 (6.0)와 상부 다리의 피부를 닫습니다. </li><li> 중단 봉합 (6.0)과 목의 피부를 닫습니다. </li><li> 가열 블랭킷으로부터 동물을 제거하고 0.5 ml의 0.9 % 염화나트륨을 피하 주사. </li><li> 가열 램프 가열 어두운 새장에 동물을 놓고 완전히 복구 할 수 있습니다. 동물이 완전히 회복되지 않는 경우,이 때문에 외과 영역에서 출혈에 혈역학 적 충격으로 고생하지 않도록. 이러한 부어 목 혈액의 누출로 표지판을 찾아보십시오. </li><li> bupr의 첫 번째 주사 후 약 6 시간 후enorphine, 추가로 72 시간 동안 적절한 진통을 제공하기 위해, 제조자에 의해 권장되는 투여 량의 부 프레 노르 핀 피하의 서방 성 제제의 단일 투여 량을 주입. </li></ol> (12) 조직 수확 <ol><li> 복강 투여 미다 졸람 (5 ㎎ / ㎏)을 포함 마취-혼합물, 메데 토미 (0.5 ㎎ / ㎏)과 펜타닐 (0.05 ㎎ / ㎏)과 동물을 마취. </li><li> 비 가열 된 실리콘 매트에 그것의 발과 뺨을 통해 바늘을 삽입하여 앙와위에서 동물을 흥분시키는. </li><li> 마이크로 가위와 목에 흉터를 통해 약 1.5-2.0 cm의 절개를합니다. </li><li> AVF를 해부하고, 쉽게 식별하기 위해 proximal-, 말초 동맥 및 정맥 유출 기관 주위 봉합 스레드 (6.0)를 배치합니다. </li><li> 프로토콜의 섹션 10.3에서 설명하는대로 AVF의 개통을 평가합니다. </li><li> 내측 유 개복술을 수행하여 복강을 열고마이크로 가위를 노래. <ol><li> 쇄골 라인에 꼬리 쪽부터 가위를 사용하여 왼쪽과 오른쪽 복부 갈비뼈를 잘라. 마이크로 가위를 사용하여 집게를 사용하여 두개쪽으로이 부분을 복부 흉곽의 중간 부분에 부착 이후에 대체되는 다이아 프램을 가로로 쪼개다. </li><li> 열등한 대정맥 정맥을 찾아 마이크로 가위로를 가로로 쪼개다. </li></ol></li><li> 좌심실에서 바늘 23 게이지 바늘을 삽입하고 intravasal 유체가 거의 깨끗해질 때까지 약 100 mmHg로의 압력에서 PBS로 관류. </li><li> 니들을 제거하지 않고, 현재 약 100 mmHg의 압력에서 10 분 동안 4 % 포르말린 관류. </li><li> 마이크로 가위로 동맥과 정맥 모두에 병행하여 AVF 절제 및 4 % 포르말린 용액 O / N에서 잠수함. </li></ol> 13. 조직 임베딩 및 단면 <ol><li> 제조의 protoco에 따라 파라핀하기 위해 조직을 처리엘. 프로토콜은 다음의 구성으로 적용 : <ol><li> RT에서 1 시간 동안 70 % 에탄올에 담가. 배를 반복합니다. </li><li> 실온에서 1 시간 동안 에탄올 96 %에 빠져. 배를 반복합니다. </li><li> 실온에서 1 시간 동안 에탄올 99.5 %에 빠져. 한 번 반복합니다. </li><li> 실온에서 1.5 시간 동안 에탄올 99.5 %에 빠져. </li><li> RT에서 1 시간 동안 100 % 크실렌 빠져. 한 번 반복합니다. </li><li> 62 ° C에서 1 시간 동안 Parafin에 빠져. 배를 반복합니다. </li></ol></li><li> 정맥 유출 관이 삽입 카세트에 수직 배향되도록 파라핀에 AVF를 포함. </li><li> 마이크로톰을 사용하여 각각 5 μm의 두께 부 (30) (12)로 이루어지는 직렬 섹션을 생성한다. 그런 다음 각 직렬 섹션의, 문합에 가장 가까운 지역부터 시작 질서 열두까지 위치 하나에서 시작하는 단일 장착 유리에 한 섹션을 배치합니다. </li></ol>

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저자는 공개 아무것도 없어.

AVF는 혈액 투석 치료의 아킬레스로 간주됩니다. 불행하게도, AVF는 여전히 실패 8-10의 높은 숫자에서 겪고있다. 기본 메커니즘에 대한 광범위한 연구에도 불구하고, 정확한 병태 생리는 알려져 있지 않다. AVF 실패 수많은 쥐 모델은 이미 문헌 2,3,11,12에 기재되어있다. 그러나, 이러한 모델 중 어느 것도 대부분의 임상 상황에서 사용되는 동맥 측 문합 구성에 정맥 끝을 통합하지 않?...

기능 혈관 통로 도관은 살아 남기 위해 만성 혈액 투석에 의존 신부전 환자를위한 매우 중요하다. 동정맥루 (AVF)의 건설은 현재 혈관 액세스를 위해 바람직한 선택이 될 것입니다. 그러나 AVF 합병증 만성 혈액 투석 환자의 주요 사망 원인을 구성한다. 광범위한 과학적 노력에도 불구하고, 소설의 어느 것도 AVF 내구성의 상당한 개선 될 않았다 AVF 액세스 관련 합병증을 줄이기 위해 접근합니다. 이 실망 진행의 일부 혈액 투석 액세스 실패의 기본 기전 불완전한 이해에 관한 것이다. 밀접하게 인간의 병리를 모방 AV 접속 실패, 동물 모델의 병태 생리를 해명하기 위해 가장 중요하다. 이러한 관점에서뿐만 아니라 동물 종뿐만 아니라, 문 합부 필요한 항 coagulatory 요법 기간 서지 후 후속공예 계정 하나에주의해야한다. 큰 동물은 새로운 치료 전략을 개발 목표로 개입 연구에 가장 적합한 반면, 뮤린 모델 의한 형질 전환 마우스의 가용성 AV 액세스 실패를 기본 분자 메커니즘에서 더 파악할 수있는 큰 잠재력을 가지고있다. 또한, 마우스의 수많은 큰 동물의 사용과 비교하여 낮은 비용으로 이러한 목적을 위해 사용될 수있다. AVF 장애 제 뮤린 모델 Kwei 및 동부 알.이이 모델 2004에 기술되었다에서 avfs는 경동맥 및 혈관 내 카테터를 사용하는 엔드 투 엔드 방식으로 경정맥을 이용하여 구성 하였다. 엔드 - 투 - 엔드 구성 및 혈관 내 카테터의 존재는 인간에서 avfs이 모델의 유효성을 제한하지만이 모델에서 avfs 초기 정맥 적응을 연구하는 것이 유용 할 수있다. 개선 AVF 모델은 Castier과 등에 의해 소개되었다. (3)하는 말에경동맥 경정맥 측에 접속된다. 그러나, 혈액 투석 환자에서 avfs 보통 동맥 측 정맥 끝 anatomizing 의해 구성된다. 이 유로 (4) 내의 혈역학 적 프로파일을 결정하기 때문에 AVF의 정확한 구성은 AV 액세스 모델의 중요한 특성이다. 후자는 장애 및 내막 증식증 (1H)의 후속 개발 내피 중요한 기여. 인간 6에서 사용 된 바와 같이 새로운 쥐 모델은 최근에 동일한 해부학 적 구성으로 개발되었다. 이 모델에서 AVF 중단 봉합 경동맥 측 외부 경정맥의 분기 단부 anastomosing하여 C57BL / 6 마​​우스에서 생성된다. 본 논문에서는 복잡한 기전을 해명보고자 뮤린 모델의 보급을 촉진하기 위해서,이 모델의 미세 수술 절차에 집​​중혈액 투석 접근 실패.

<table><tbody><tr><td>Dissecting microsocpe</td><td>Leica</td><td>M80</td><td></td></tr><tr><td>Forceps</td><td>Medicon</td><td>07.61.25</td><td></td></tr><tr><td>Vascular forceps</td><td>S&amp;amp;T</td><td>JFL-3D.2</td><td></td></tr><tr><td>Vascular forceps</td><td>S&amp;amp;T</td><td>D-5a.2</td><td></td></tr><tr><td>Forceps</td><td>Roboz</td><td>SS/45</td><td></td></tr><tr><td>Micro scissor 5 mm blade</td><td>Fine science tools</td><td>15000-08</td><td></td></tr><tr><td>Micro scissor 2 mm blade</td><td>Fine science tools</td><td>15000-03</td><td></td></tr><tr><td>Scissor</td><td>Medicon</td><td>05.12.21</td><td></td></tr><tr><td>Clip applier 1</td><td>S&amp;amp;T</td><td>CAF-4</td><td></td></tr><tr><td>Vascular clamp 1</td><td>S&amp;amp;T</td><td>B-1V</td><td></td></tr><tr><td>Clip applier 2</td><td>BBraun</td><td>FE572K</td><td></td></tr><tr><td>Vascular clamp 2</td><td>BBraun</td><td>FE740K</td><td></td></tr><tr><td>Hemostatic forceps</td><td>BBraun</td><td>BH110</td><td></td></tr><tr><td>10.0 sutures</td><td>BBraun</td><td>G1117041</td><td></td></tr><tr><td>6.0 sutures</td><td>BBraun</td><td>768464</td><td></td></tr><tr><td>Cauterizer</td><td>Fine science tools</td><td>18010-00</td><td></td></tr><tr><td>Needle holder</td><td>Medicon</td><td>11.82.18</td><td></td></tr><tr><td>Ocular ointment</td><td>Pharmachemie</td><td>41821101</td><td></td></tr><tr><td>Chlorhexidine tincture 0,5%</td><td>Leiden University Medical Center</td><td>NA</td><td></td></tr><tr><td>Heparin</td><td>Leo Pharma</td><td>012866-08</td><td></td></tr><tr><td>Buprenorphin</td><td>RB Pharmaceuticals&amp;nbsp;</td><td>283732</td><td></td></tr><tr><td>Isoflurane</td><td>Pharmachemie</td><td>45,112,110</td><td></td></tr><tr><td>Anesthesia mask</td><td>Maastricht university</td><td>custom made</td><td></td></tr><tr><td>Midazolam</td><td>Actavis</td><td>AAAC6877</td><td></td></tr><tr><td>Dexmedetomidine</td><td>Orion</td><td>141-267</td><td></td></tr><tr><td>Fentanyl</td><td>Bipharma</td><td>15923002</td><td></td></tr><tr><td>Continuous anaesthetic induction chamber</td><td>Vet-tech solutions</td><td>AN010R</td><td></td></tr></tbody></table>

a novel murine model of arteriovenous fistula failure: the surgical procedure in detail

The arteriovenous fistula (AVF) still suffers from a high number of failures caused by insufficient remodeling and intimal hyperplasia from which the exact pathophysiology remains unknown. In order to unravel the pathophysiology a murine model of AVF-failure was developed in which the configuration of the anastomosis resembles the preferred situation in the clinical setting. A model was described in which an AVF is created by connecting the venous end of the branch of the external jugular vein to the side of the common carotid artery using interrupted sutures. At a histological level, we observed progressive stenotic intimal lesions in the venous outflow tract that is also seen in failed human AVFs. Although this procedure can be technically challenging due to the small dimensions of the animal, we were able to achieve a surgical success rate of 97% after sufficient training. The key advantage of a murine model is the availability of transgenic animals. In view of the different proposed mechanisms that are responsible for AVF failure, disabling genes that might play a role in vascular remodeling can help us to unravel the complex pathophysiology of AVF failure.

문합 (그림 1)의 생성 후, 개통은 곧 혈관 집게로 정맥 유출 관을 폐색에 의해 평가되어야한다. 문합 특허 때, 폐색에 혈관 계통의 근위 명확하게 박동성 방식으로 확장한다. 또한 명백 적외선 투시 효과적으로 혈관 조영술로 함수 (NIRF) (도 2) 근처하여 확인된다. 수술의 실패는 (그림 2)에 도시되어 같은 문합의 폐쇄로 이어질 수 있습니다. 이 오류가 너무 좁 문...

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A Novel Murine Model of Arteriovenous Fistula Failure: The Surgical Procedure in Detail

Here we present a murine model of arteriovenous fistula (AVF) failure in which a clinically relevant anastomotic configuration is incorporated. This model can be used to study the pathophysiology and to test possible therapeutic interventions.

동정맥루 실패의 소설 쥐 모델 : 세부 수술

The arteriovenous fistula (AVF) still suffers from a high number of failures caused by insufficient remodeling and intimal hyperplasia from which the ...

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Technical Aspects of the Mouse Aortocaval Fistula

Technical aspects of creating an arteriovenous fistula in the mouse are discussed. Under general anesthesia, an abdominal incision is made, and the aorta and inferior vena cava (IVC) are exposed. The proximal infrarenal aorta and the distal aorta are dissected for clamp placement and needle puncture, respectively. Special attention is paid to avoid dissection between the aorta and the IVC. After clamping the aorta, a 25 G needle is used to puncture both walls of the aorta into the IVC. The surrounding connective tissue is used for hemostatic compression. Successful creation of the AVF will show pulsatile arterial blood flow in the IVC. Further confirmation of successful AVF can be achieved by post-operative Doppler ultrasound.

The goal is to produce an arteriovenous fistula that is simple and reproducible. This method does not use sutures or glue adhesive. Therefore the samples can be used with the least amount of foreign materials for analysis.

마우스 Aortocaval 누관의 기술적 측면

Technical aspects of creating an arteriovenous fistula in the mouse are discussed. Under general anesthesia, an abdominal incision is made, and the aorta ...

연구

의학

Adult Mouse Venous Hypertension Model: Common Carotid Artery to External Jugular Vein Anastomosis.

The understanding of the pathophysiology of brain arteriovenous malformations and arteriovenous fistulas has improved thanks to animal models. A rat model creating an artificial fistula between the common carotid artery (CCA) and the external jugular vein (EJV) has been widely described and proved technically feasible. This construct provokes a consistent cerebral venous hypertension (CVH), and therefore has helped studying the contribution of venous hypertension to formation, clinical symptoms, and prognosis of brain AVMs and dural AVFs. Equivalent mice models have been only scarcely described and have shown trouble with stenosis of the fistula. An established murine model would allow the study of not only pathophysiology but also potential genetic therapies for these cerebrovascular diseases.
We present a model of arteriovenous fistula that produces a durable intracranial venous hypertension in the mouse. Microsurgical anastomosis of the murine CCA and EJV can be difficult due to diminutive anatomy and frequently result in a non-patent fistula. In this step-by-step protocol we address all the important challenges encountered during this procedure. Avoiding excessive retraction of the vein during the exposure, using 11-0 sutures instead of 10-0, and making a carefully planned end-to-side anastomosis are some of the critical steps. Although this method requires advanced microsurgical skills and a longer learning curve that the equivalent in the rat, it can be consistently developed.
This novel model has been designed to integrate transgenic mouse techniques with a previously well-established experimental system that has proved useful to study brain AVMs and dural AVFs. By opening the possibility of using transgenic mice, a broader spectrum of valid models can be achieved and genetic treatments can also be tested. The experimental construct could also be further adapted to the study of other cerebrovascular diseases related with venous hypertension such as migraine, transient global amnesia, transient monocular blindness, etc.

We describe a method for creating a reliable model of cerebral venous hypertension in the adult mouse. This model has been widely described and tested in the rat. This new counterpart in the mice opens the possibility of using genetic modified animals and thereby broadens the applications of the model.

성인 마우스 정맥 ​​고혈압 모델 : 외부 경정맥 정맥 문합에 경동맥.

The understanding of the pathophysiology of brain arteriovenous malformations and arteriovenous fistulas has improved thanks to animal models. A rat model ...

A New Murine Model of Endovascular Aortic Aneurysm Repair

Endovascular aneurysm exclusion is a validated technique to prevent aneurysm rupture. Long-term results highlight technique limitations and new aspects of Abdominal aortic aneurysm (AAA) pathophysiology. There is no abdominal aortic aneurysm endograft exclusion model cheap and reproducible, which would allow deep investigations of AAA before and after treatment. We hereby describe how to induce, and then to exclude with a covered coronary stentgraft an abdominal aortic aneurysm in a rat. The well known elastase induced AAA model was first reported in 19901 in a rat, then described in mice2. Elastin degradation leads to dilation of the aorta with inflammatory infiltration of the abdominal wall and intra luminal thrombus, matching with human AAA. Endovascular exclusion with small covered stentgraft is then performed, excluding any interactions between circulating blood and the aneurysm thrombus. Appropriate exclusion and stentgraft patency is confirmed before euthanasia by an angiography thought the left carotid artery. Partial control of elastase diffusion makes aneurysm shape different for each animal. It is difficult to create an aneurysm, which will allow an appropriate length of aorta below the aneurysm for an easy stentgraft introduction, and with adequate proximal and distal neck to prevent endoleaks. Lots of failure can result to stentgraft introduction which sometimes lead to aorta tear with pain and troubles to stitch it, and endothelial damage with post op aorta thrombosis. Giving aspirin to rats before stentgraft implantation decreases failure rate without major hemorrhage. Clamping time activates neutrophils, endothelium and platelets, and may interfere with biological analysis.

Histological and biochemical modifications after aneurysm endograft exclusion are still unclear. We describe a new model of endograft implantation on a murine aneurysm. Through thrombus analysis with and without persistant circulating blood stream interface, and new endovascular biomaterials evaluation, this model will help to better understand endovascular aneurysm exclusion pathobiology.

혈관 동맥류 수리의 새로운 쥐과 모델

Endovascular aneurysm exclusion is a validated technique to prevent aneurysm rupture. Long-term results highlight technique limitations and new aspects of ...

Murine Model of Femoral Artery Wire Injury with Implantation of a Perivascular Drug Delivery Patch

Percutaneous interventions including balloon angioplasty and stenting have been used to restore blood flow in vessels with occlusive vascular disease. While these therapies lead to the rapid restoration of blood flow, these technologies remain limited by restenosis in the case of bare metal stents and angioplasty, or reduced healing and possibly enhanced risk of thrombosis in the case of drug eluting stents. A key pathophysiological mechanism in the formation of restenosis is intimal hyperplasia caused by the activation of vascular smooth muscle cells and inflammation due to arterial stretch and injury. Surgeries that induce arterial injury in genetically modified mice are useful for the mechanistic study of the vascular response to injury but are often technically challenging to perform in mouse models due to the their small size and lack of appropriate sized devices. We describe two approaches for a surgical technique that induces endothelial denudation and arterial stretch in the femoral artery of mice to produce robust neointimal hyperplasia. The first approach creates an arteriotomy in the muscular branch of the femoral artery to obtain vascular access. Following wire injury this arterial branch is ligated to close the arteriotomy. A second approach creates an arteriotomy in the main femoral artery that is later closed through localized cautery. This method allows for vascular access through a larger vessel and, consequently, provides a less technically demanding procedure that can be used in smaller mice. Following either method of arterial injury, a degradable drug delivery patch can be placed over or around the injured artery to deliver therapeutic agents.

We describe a surgical technique that produces wire injury in the femoral artery of mice to induce neointimal hyperplasia to serve as a model testing system for the perivascular delivery of therapeutic compounds for the inhibition of restenosis.

혈관 주위 약물 전달 패치의 주입과 대퇴 동맥 와이어 부상의 쥐 모델

Percutaneous interventions including balloon angioplasty and stenting have been used to restore blood flow in vessels with occlusive vascular disease. ...

Intraluminal Drug Delivery to the Mouse Arteriovenous Fistula Endothelium

Delivery of therapeutic agents to enhance arteriovenous fistula (AVF) maturation can be administered either via intraluminal or external routes. The simple murine AVF model was combined with intraluminal administration of drug solution to the venous endothelium at the same time as fistula creation. Technical aspects of this model are discussed. Under general anesthesia, an abdominal incision is made and the aorta and inferior vena cava (IVC) are exposed. The infra-renal aorta and IVC are dissected for clamping. After proximal and distal clamping, the puncture site is exposed and a 25 G needle is used to puncture both walls of the aorta and into the IVC. Immediately after the puncture, a reporter gene-expressing viral vector was infused in the IVC via the same needle, followed by 15 min of incubation. The intraluminal administration method enabled more robust viral gene delivery to the venous endothelium compared to administration by the external route. This novel method of delivery will facilitate studies that explore the role of the endothelium in AVF maturation and enable intraluminal drug delivery at the time of surgical operation.

After puncturing the aorta through the inferior vena cava (IVC) to create an aorto-caval fistula in the mouse, solution containing a drug is infused into the IVC via the same needle, followed by incubation. This method enables more robust drug delivery to the venous endothelium compared to the external route.

마우스 동정맥루 내피에 관내 약물 전달

Delivery of therapeutic agents to enhance arteriovenous fistula (AVF) maturation can be administered either via intraluminal or external routes. The ...

Murine Model of Central Venous Stenosis using Aortocaval Fistula with an Outflow Stenosis

Central venous stenosis is an important entity contributing to arteriovenous fistula (AVF) failure. A murine AVF model was modified to create a partial ligation of the inferior vena cava (IVC) in the outflow of the fistula, mimicking central venous stenosis. Technical aspects of this model are introduced. The aorta and IVC are exposed, following an abdominal incision. The infra-renal aorta and IVC are dissected for proximal clamping, and the distal aorta is exposed for puncture. The IVC at the midpoint between the left renal vein and the aortic bifurcation is carefully dissected to place an 8-0 suture beneath the IVC. After clamping the aorta and IVC, an AVF is created by puncturing the infra-renal aorta through both walls into the IVC with a 25 G needle, followed by ligating a 22 G intra-venous (IV) catheter and IVC together. The catheter is then removed, creating a reproducible venous stenosis without occlusion. The aorta and IVC are unclamped after confirming primary hemostasis. This novel model of central vein stenosis is easy to perform, reproducible, and will facilitate studies on AVF failure.

An aortocaval fistula was created by puncturing the murine infra-renal aorta through both walls into the inferior vena cava and was followed by creation of a stenosis in its outflow via partial ligation of the inferior vena cava. This reproducible model can be used to study central venous stenosis.

유출 협착증을 가진 Aortocaval 누공을 사용하여 중앙 정맥 협착증의 뮤린 모형

Central venous stenosis is an important entity contributing to arteriovenous fistula (AVF) failure. A murine AVF model was modified to create a partial ...

Creating Radio-cephalic Arteriovenous Fistula in the Forearm with a Modified No-Touch Technique

Autologous arteriovenous fistula (AVF) is the primary and best option to obtain vascular access for hemodialysis treatment; other options are arteriovenous graft (AVG) and central venous catheterization (CVC). The implementation of radio-cephalic autologous arteriovenous fistula (RC-AVF) in the forearm was preferred among patients with superior vascular conditions. However, there is a high rate of early fistula failure. The chosen surgical method is understood to have an effect on the maturation of the fistula. New surgical procedures such as radial artery deviation and reimplantation (RADAR) have been significantly improved for juxta-anastomotic stenosis. Nevertheless, new problems such as stenosis of arteries and narrowing of surgical indication were also found. In this report, we presented a modified no-touch technique (MNTT) to create an RC-AVF, in which the venous and arterial wall avoid devascularization and the radial artery does not sever.

We present a modified no-touch technique (MNTT) to create a radio-cephalic arteriovenous fistula (RC-AVF) in which the venous and arterial wall avoid devascularization and the radial artery does not sever.

수정된 노터치 기술로 팔뚝에 무선 세팔릭 동맥 누공 만들기

Autologous arteriovenous fistula (AVF) is the primary and best option to obtain vascular access for hemodialysis treatment; other options are ...

A Murine Model of Hemodialysis Access-Related Hand Dysfunction

Chronic kidney disease is a major public health problem, and the prevalence of end-stage renal disease (ESRD) requiring chronic renal replacement therapies such as hemodialysis continues to increase. Autogenous arteriovenous fistula (AVF) placement remains a primary vascular access option for ESRD patients. Unfortunately, approximately half of the hemodialysis patients experience dialysis access-related hand dysfunction (ARHD), ranging from subtle paresthesia to digital gangrene. Notably, the underlying biologic drivers responsible for ARHD are poorly understood, and no adequate animal model exists to elucidate the mechanisms and/or develop novel therapeutics for the prevention/treatment of ARHD. Herein, we describe a new mouse model in which an AVF is created between the left common iliac artery and vein, thereby facilitating the assessment of limb pathophysiology. The microsurgery includes vessel isolation, longitudinal venotomy, creation of arteriovenous anastomosis, and venous reconstruction. Sham surgeries include all the critical steps except for AVF creation. Iliac AVF placement results in clinically relevant alterations in central hemodynamics, peripheral ischemia, and impairments in hindlimb neuromotor performance. This novel preclinical AVF model provides a useful platform that recapitulates common neuromotor perturbations reported by hemodialysis patients, allowing researchers to investigate the mechanisms of ARHD pathophysiology and test potential therapeutics.

This protocol details the surgical steps of murine common iliac arteriovenous fistula creation. We developed this model to study hemodialysis access-related limb pathophysiology.

혈액 투석 접근 관련 손 기능 장애의 쥐 모델

Chronic kidney disease is a major public health problem, and the prevalence of end-stage renal disease (ESRD) requiring chronic renal replacement ...

A Modified Technique for Arteriovenous Fistula Construction in Rabbits

Juxta-anastomotic stenosis is a challenging problem that often causes non-maturation and decreases the patency of an arteriovenous fistula (AVF). Injury to the veins and arteries during the operation and hemodynamic changes can lead to intimal hyperplasia, leading to juxta-anastomotic stenosis. To reduce injury to the veins and arteries during the operation, this study proposes a new modified no-touch technique (MNTT) for AVF construction that can decrease the rate of juxta-anastomotic stenosis and improve the AVF patency. To unravel the hemodynamic changes and mechanisms of the MNTT, this study presented an AVF procedure using this technique. Although this procedure is technically challenging, 94.4% procedural success was achieved after adequate training. Ultimately, 13 out of 34 rabbits had a functional AVF 4 weeks after the surgery, leading to a 38.2% AVF patency rate. However, at 4 weeks, the survival rate was 86.1%. Ultrasonography showed active blood flow through AVF anastomosis. Furthermore, the spiral laminar flow was observed in the vein and artery near the anastomosis, suggesting that this technique may improve the hemodynamics of the AVF. On histological observation, significant venous intimal hyperplasia was observed at the AVF anastomosis, whereas no significant intimal hyperplasia was observed at the proximal external jugular vein (EJV) of the anastomosis. This technique will improve the understanding of the mechanisms underlying the use of MNTT for AVF construction and provide technical support for the further optimization of the surgical approach in AVF construction.

The present protocol proposes the creation of an arteriovenous fistula in rabbits using a modified no-touch technique. The technique involves the side-to-side anastomosis of the common carotid artery and external jugular vein without the dissection of the perivenous tissues or cutting off the artery.

토끼의 동정맥루 건설을위한 수정 된 기술

Juxta-anastomotic stenosis is a challenging problem that often causes non-maturation and decreases the patency of an arteriovenous fistula (AVF). Injury ...

RV Volume Overload 마우스 모델을 확립하기 위해 수정된 동정맥루 수술

Establishment and Confirmation of a Postnatal Right Ventricular Volume Overload Mouse Model

Right ventricular (RV) volume overload (VO) is common in children with congenital heart disease. In view of distinct developmental stages,the RV myocardium may respond differently to VO in children compared to adults. The present study aims to establish a postnatal RV VO model in mice using a modified abdominal arteriovenous fistula. To confirm the creation of VO and the following morphological and hemodynamic changes of the RV, abdominal ultrasound, echocardiography, and histochemical staining were performed for 3 months. As a result, the procedure in postnatal mice showed an acceptable survival and fistula success rate. In VO mice, the RV cavity was enlarged with a thickened free wall, and the stroke volume was increased by about 30%-40% within 2 months after surgery. Thereafter, the RV systolic pressure increased, corresponding pulmonary valve regurgitation was observed, and small pulmonary artery remodeling appeared. In conclusion, modified arteriovenous fistula (AVF) surgery is feasible to establish the RV VO model in postnatal mice. Considering the probability of fistula closure and elevated pulmonary artery resistance, abdominal ultrasound and echocardiography must be performed to confirm the model status before application.

저자 스포트라이트: Establishment and Confirmation of a Postnatal Right Ventricular Volume Overload Mouse Model(출생 후 우심실 용적 과부하 마우스 모델의 확립 및 확인)  

This protocol presents the establishment and confirmation of a postnatal right ventricular volume overload (VO) model in mice with abdominal arteriovenous fistula (AVF), which can be applied to investigate how VO contributes to postnatal heart development.

동정맥루 실패의 소설 쥐 모델 : 세부 수술

요약

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마우스 Aortocaval 누관의 기술적 측면

성인 마우스 정맥 고혈압 모델 : 외부 경정맥 정맥 문합에 경동맥.

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혈관 주위 약물 전달 패치의 주입과 대퇴 동맥 와이어 부상의 쥐 모델

마우스 동정맥루 내피에 관내 약물 전달

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수정된 노터치 기술로 팔뚝에 무선 세팔릭 동맥 누공 만들기

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