이 연구는 출자자는 연구 설계, 자료 수집 및 분석, 게시하는 결정, 또는 원고의 준비를 전혀 역할을 없었다 EAK 할 수있는 국립 종합 의료 과학 연구소 (GM099883와 GM074675)에서 보조금에 의해 지원되었다. (: 접촉 우리는 행동 장치의 설계를 위해 하버드 의과 대학에서 우리의 기계 공장에서 사람들에게 감사 <a href="http://mikesmachine.com">http://mikesmachine.com</a> ). 저자 공헌 : ST는, 기원전 행동 장치를 설계했다. ST의 설계 및 실험 프로토콜을 최적화. ST와 BC 수행하고 실험을 분석 하였다. ST, EAK와 BC는 종이를 썼습니다.

참고 : 다음은 우리가 남성 초파리 쌍의 사이에 신뢰할 수있는 침략의 트리거를 허용하는 데 사용하는 실험 프로토콜 (D. melanogaster의)의 단계별 설명입니다. 이 절차는 &quot;패자&quot;효과의 형성을 유도한다. 이 프로토콜을 사용하여도있다 단기 &quot;승자&quot;효과는 최근 5,6를보고했다. 그림 1은 행동 실험의 타임 라인을 보여줍니다. <img alt="그림 1" src="/files/ftp_upload/53395/53395fig1.jpg" /> 침략 실험 1. 타임 라인을 그림. 1 일에, 말기 남성 번데기는 (날개는 검은 색이 될 때) 새로 제조 된 절연 유리 병에 격리됩니다. 성인으로 부상 후 5 일에서 4 일 된 수컷 파리는 이산화탄소로 마취하고 식별을 위해 서로 다른 색상으로 색칠. 7 일에, 음식 컵과 싸움 챔버는행동 실험을 설정할 준비. 두 6~7일 된 성인 남성은 챔버에로드와 상호 작용을 할 수있다. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/53395/53395fig1large.jpg" target="_blank">이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭하십시오.</a> 1. 1 일 : 번데기의 사회적 고립 <ol><li> 올려 25 ℃, 상대 습도 50 %에서 환경 제어 12 시간 조명 / 12 시간 어두운주기 배양기에서 플라이 주식을 유지한다. </li><li> 절연 유리 병을 준비 녹은 때까지 신선한 플라이 음식을 가열한다. 파스퇴르 피펫을 사용하여, 하나의 빈 유리 테스트 튜브 (1.6 X 10cm)에 약 1.5 ml의 용융 플라이 음식을 전송합니다. 음식이 응고하도록 허용합니다. </li><li> 번데기를 분리 (날개는 검은 색이 될 때) 좋은 붓으로 부드럽게 주식 유리 병에서 말기 남성 번데기를 제거하고 신선하게 준비된 음식을 포함하는 테스트 튜브의 측면에 배치합니다. 면과의 긴밀한 절연 튜브 (그림 2). </li><lI&gt; 25 ° C와 50 %의 상대 습도에서 12 시간 조명 / 12 시간 어두운 인큐베이터에 번데기를 포함하는 장소 격리 병. </li></ol><img alt="그림 2" src="/files/ftp_upload/53395/53395fig2.jpg" /> 그림 2. 사회적 고립. 한 말기 남성 번데기가 새로 제조 된 절연 유리 병에 측면에 배치됩니다. 번데기를 포함하는 절연 유리 병은 25 ℃, 상대 습도 50 %에서 12 시간 조명 / 12 시간 어두운 인큐베이터에 배치됩니다. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/53395/53395fig2large.jpg" target="_blank">이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭하십시오.</a> 2. 제 5 일 : 개인 식별 목적으로 파리 회화 <ol><li> CO 2 마취의 부정적인 영향을 최소화하기 위해 사일 세 남자 파리와 행동 실험 전에 이일과 5 일에서이 단계를 수행합니다. </li><li> CO 2와 함께 파리를 마취. </lI&gt; <li> 고급 이쑤시개로, 가슴에 아크릴 물감의 작은 점을 배치합니다. 머리, 날개, 복부 또는 다리 (그림 3)에 페인트를 두지 마십시오. </li><li> 약 10 초 동안 페인트 건조하자, 부드럽게 원래 절연 유리 병에 다시 파리를 전송합니다. </li><li> 25 ° C와 50 %의 상대 습도에서 12 시간 조명 / 12 시간 어두운 인큐베이터에 절연 튜브를 돌려줍니다. </li></ol><img alt="그림 3" src="/files/ftp_upload/53395/53395fig3.jpg" /> 그림 3. 개인 식별이. CO 2, 아크릴 페인트의 작은 방울과 함께 파리를 마취 한 후 흉부에 적용됩니다. 개인 식별 목적을 위해 서로 다른 색상 (흰색, 여기에 파란색) 사용됩니다. 이 단계에서 이산화탄소의 사용에 대한 아래의 설명을 참조하십시오. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/53395/53395fig3large.jpg" target="_blank">이 figu의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭하십시오</a>레. 3 일 7 : 장치 준비 <ol><li> 식품 컵을 준비합니다 : <ol><li> 이 녹을 때까지 신선한 플라이 음식을 가열한다. </li><li> 파스퇴르 피펫을 사용하여 스크류 캡 바이알 (1.5 cm 직경 1cm 높이)의 뚜껑에 약 0.8 ml의 음식을 전송하고 냉각 할 수 있습니다. 공기 방울을 피하십시오. </li><li> 물을 몇 방울과 건조 효모를 혼합하여 신선한 효모 붙여 넣기를합니다. 두꺼운 경우, 이쑤시개 (도 4)와 음식물 컵 표면의 중심에 효모 페이스트의 작은 방울을 적용한다. </li></ol></li></ol><img alt="그림 4" src="/files/ftp_upload/53395/53395fig4.jpg" /> 식품 컵 준비 그림 4. 음식 컵 신선한 플라이 음식을 준비한다. 음식 응고 후, 효모 페이스트의 점은 음식 컵 표면의 중앙에 배치됩니다. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/53395/53395fig4large.jpg" target="_blank">V하려면 여기를 클릭하십시오</a>이 그림의 더 큰 버전을 서평. <ol start="2"><li> 개인 파이팅 챔버를 준비합니다 : <ol><li> 철저하게 사용하기 전에 물을 때마다 장치 및 개별 전투 실을 씻는다. 사용하기 전에 종이 타월 드라이. </li><li> 각 전투 실의 중심에 음식 컵을 놓고 퍼티의 드롭 위치에 고정한다. </li><li> 장치 뚜껑 (그림 5)와 전투 실을 커버. </li><li> 25 ° C에서 고습 환경 (60 %)로 장치를 배치했다. </li><li> 전투 실을 조명하고 위에서 기록하는 비디오 카메라를 설정하는 장치 위에 광원을 배치합니다. </li></ol></li></ol><img alt="그림 5" src="/files/ftp_upload/53395/53395fig5.jpg" /> 그림 5. 개별 전투 실을 준비. 표면에 효모 페이스트의 점이 신선하게 준비된 음식 컵 세척 개별 인터넷에 고정되어실을 조명. 챔버스는 개별 전투 실에 불투명 한 플라스틱 디바이더의 삽입을 허용 투피스 커버 닫혀있다. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/53395/53395fig5large.jpg" target="_blank">이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭하십시오.</a> 4. 7 일 : 행동 실험 <ol><li> 6-7일 세 남자 파리와 행동 실험을 수행합니다. </li><li> 각 전투 실에 플라스틱 칸막이를 삽입합니다. </li><li> 분리 튜브로부터 면화 플러그를 분리 장치의 측면에 열린 구멍 아래 튜브를 위치. </li><li> 비행은 일반적으로 몇 초 내에, 부정적인 geotaxis에 의해 전투 실에 들어 보자. </li><li> 비행 튜브를 떠나 챔버를 입력 한 후 슬라이딩 벽을 닫습니다. </li><li> 상기 장치의 다른 측면에 싸움 챔버로 제 2 플라이를 도입하는 과정을 반복한다. </li><li> 조명 videotapi 다시 장치를 배치NG 위치. </li><li> 비디오 녹화를 시작하고 파리가 상호 작용할 수 있도록 플라스틱 칸막이를 제거합니다. <ol><li> 침략 실험의 경우 : <ol><li> 이 실험에서 기록 강한 지배 관계의 형성을 보장하기 위해, 적어도 20 분 동안 싸운다. </li><li> 원하는 시간 후, 비디오 녹화를 중지합니다. </li><li> 위에서 설명한 절차를 반대로하여 전투 실에서 파리를 제거합니다. </li><li> 철저하게 각 사용 린스 후 중성 세제와 물을 행동 장치를 씻는다. </li></ol></li><li> &quot;패자&quot;효과 실험 : 주 :이 실험에서, 제 싸움은 시험 위상 조절 단계 및 제 시합으로 간주된다. 싸움 사이의 휴식 기간은 다를 수 있지만 10 분 강력한 &quot;패자&quot;효과의 형성을 할 수 있습니다. <ol><li> 첫 시합을 수행하기 위해 위에서 설명한 절차를 따르십시오. </li><li> 중요한 단계는 : 「패자 &quot;지성, (E)의 형성을 유도 할제 싸움은 적어도 20 분 강한 우성 관계를 설정하기 위해 긴 nsure. 20 분 후, 파리를 분리하는 전투 실에 플라스틱 디바이더를 다시 삽입합니다. </li><li> 나머지의 10 분 기간 후, 부드럽게 파리는 두 번째 경기에 대한 상호 작용을 할 수 있도록 플라스틱 칸막이를 제거합니다. </li><li> 제 20 분간 싸움의 끝에서, 녹화를 중지. </li><li> 위와 같이 행동 챔버에서 파리를 제거합니다. </li><li> 다시 한번, 철저하게 행동 장치를 청소하십시오. </li></ol></li></ol></li></ol> 5. 행동 분석 <ol><li> 동영상을 전송 <ol><li> 컴퓨터에 카메라를 연결합니다. </li><li> &quot;선택한 클립에 가입&quot;비디오 변환 소프트웨어와 옵션을 사용하여, 파리를 하셔도과 함께 영화 클립을 가입 파리의 MTS에 변환합니다. </li><li> 관찰하고 비디오 판독기 소프트웨어와 각 영화를 분석 할 수 있습니다. </li></ol></li><li> 채점 행동 이 수동으로 수행 할 수 있습니다 또는 우리 참고 :가능한 경우 행동 분석 프로그램 소프트웨어를 보내고. 아래 그림은 &quot;패자&quot;효과를 가능한 수동 분석을 설명합니다. <ol><li> 음식 컵 파리 사이의 첫 만남의 시간을 점수 및 제 찌르기의 외관의 시간 (한 비행에 높은 상승하는 행동 패턴 (만남은 적어도 2 초 지속 파리 쌍 사이의 상호 작용은) 그 뒷다리와 아래에 스냅) 상대를 잡기 위해 시도합니다. 이어서, (제 만남과 제 런지 간의 간격) 런지하는 지연 점수. </li><li> 싸움을하는 동안 만남과 런지의 총 수를 계산합니다. 참고 : 원하는 경우, 하나는 날개 위협, 복싱, 펜싱, 후퇴 또는 예를 들어 첫 번째 찌르기 전에 만남의 숫자, 같은 다른 행동 패턴을 득점 할 수 있습니다. </li><li> 우성 (첫 만남과 하나가 음식 컵 선미 떨어져 세 번 연속을위한 피정 비행 시간 사이의 시간의 설립시 점수어) 런지를 수신하는 단계를 포함한다. 비행 주 승자와 어떤 싸움의 패자입니다. </li></ol></li><li> &quot;패자&quot;효과를 계산 <ol><li> 이전 패자는 2 차 싸움 (손실 패자 : LL)을 잃게하는 싸움의 수를 나누어 싸움의 총 수에 의해, 그리고 100 얻은 백분율이 &quot;패자&quot;효과를 나타냅니다 곱 : [(#은 LL 파리) / (# 총 싸움)] × 100 </li><li> &quot;패자&quot;효과가 50 %의 기대 값에서 통계적으로 차이가 있는지 비교하기 위해 카이 제곱 테스트를 사용합니다. </li></ol></li></ol>

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The authors have nothing to disclose.

침략의 연구를위한 모델 생물로 강력한 유전 적 방법과 초파리를 사용하는 현대 시대, 안정적인 전투 행동이 파리 1,7의 단일 쌍으로 얻을 수있는 새로운 실험 무대의 도입으로 12 년 전 약 시작 8,17,19. 이 경기장은 원하는 자원 (식품 컵, 잠재적 인 동료)와 패자를위한 공간으로 후퇴 (으)로 운항하는 항공사를 포함했다. 이 경기장 얻은 결과는 초파리의 싸움 동작에 ?...

동물 시스템의 침략 강하게 수집 및 식품, 영토와 동료와 같은 자원의 유지와 연관되어있다. 이 개인의 피트니스에서 활약 중요한 역할을 감안할 때, 그것은 침략은 동물의 왕국에 걸쳐 진화 것은 놀라운 일이 아니다. 직접 개인에게 혜택을 적응 특성으로, 강한 학습과 기억 구성 요소는 침략과 연관되어 있습니다. 사회 계급에 대한 경쟁에서, 이전의 전투 경험은 이후 대회의 결과에 영향을 미친다. 일반적으로, 이전의 패배 경험이 증가하고, 우승 경험은 감소, 나중에 경연을 잃을 확률은 ( &quot;패자&quot;과 &quot;승자&quot;효과라고도 함). &quot;패자&quot;효과 종의 넓은 범위에서 관찰하고, 일부 리포트는 &quot;승자&quot;효과는 일반적으로 짧은 시간 동안의 2,10,11이 며칠 동안 지속될 수 있다는 것을 시사하고있다. 공격적인 행동의 첫 번째 보고서초파리에서 (D.의 ampelophila) 성 인식과 성 선택 (12)과 관련 논문에서 1915 년 Sturtevant로했다. 나중에, 남성 과일의보다 완벽한 검사가 침략을 비행 반세기가 초파리의 싸움 중에 관찰 된 행동 패턴의 대부분을 설명하는, 만들어졌다. 이들 실험은 대부분 13-15 시간 동안 관찰 암수 파리의 소그룹을 실시 하였다. 최근 강력한 유전자 도구, 이항 단일 섹스 싸움 설정과 관찰, D의 짧은 시간의 추가와 melanogaster의 침략 1.16의 생물학의 연구에 중요한 모델 시스템으로 떠오르고있다. 남성과 여성의 파리의 동성 쌍 사이의 싸움의 분석은 침략가 통계적으로 신뢰할 수있는 방식으로 1,17의 다른 하나의 전환에 박힌 행동 패턴을 포함 것을 보여 주었다. 다른 사람이 싸움에서 관찰하는 동안 관찰 된 행동 패턴 중 일부는 성 특정남녀 모두의. 남성 싸움은 분명 &#39;승자&#39;와 &#39;패자&#39;와 지배 관계의 형성에 여성 싸우면 결과보다 더 높은 강도의 레벨로 이동합니다. 현재, 많은 실험실은 생화학 (18), 신경 7,19-21, 침략의 유전 (22) 토대 조사를 시작했습니다. 불행하게도, 연구의 메타 분석으로 인해 서로 다른 실험실에서 실험 절차의 다양성의 사용 싸움 역학에 대한 통찰력과 형성과 지배 관계의 유지 보수 문제가를 얻을 수 있습니다. 본질적으로 문헌에 기재된 기술은 모두 경기장 밖으로 날아 전송 경기장으로 19,23,24 및 행동 실험 중에 3,4-들을 소개하는 파리의 취급 및 조작을 포함한다. 부드러운 흡입은 파리에게 3,4,23-25를 조작하는 가장 일반적인 방법이지만, 감기 또는 CO 2 마취는 심지어 P 불구하고, 9,26를 사용하는revious 연구는 이미 이러한 절차가 비행 행동 27, 28에 해로운 영향을 미칠 것으로보고있다. 적어도 24 시간의 기간은 동작 (29, 30)에 미치는 영향을 최소화하기 위해 임의의 마취제의 사용 후 권장된다. 파리는 이전 전투 경험에서 배우고 학습과 기억이 동반 아고 니스트 만남의 결과임을 시사, 새로운 상황에서 자신의 행동 패턴의 사용을 수정합니다. 그런 의미에서, 싸움은 이후의 만남 동안 점점 더 자주 사용 후 전략이 일 것을 배우고 날아간 조건화 학습 상황과 유사 비행. 지배 관계가 싸움 중에 설립 된 후 파리 승자는 점점 더와 패자가 갈수록를 lunging으로, 자신의 전투 전략을 변경합니다. 분리의 기간이 지난 후에, 이전 패자는 훨씬 더 복종하는 동작을 보여 순진한 플로리다와 결합 할 때 싸움 차 2를 잃을 가능성이 높다이거 또는 이전 수상자 3,4. 그러나, 파리 처리는 제외된다 실험 절차의 부재는 어렵다 &quot;패자&quot;효과의 상세한 연구를했다. 최근의 연구에서, 우리는 일상적으로 처리를 제거 새로운 절차와 행동 챔버에 파리를 소개하는 실험실 (흡인과 추위 마취)에 사용되는 두 개의 실험 절차를 비교했다. 결과는 저온 마취가 흡인보다 공격에 훨씬 더 큰 부정적인 영향을했지만, 심지어 열망은 파리에서 공격성의 수준을 감소 것을 보여 주었다. 포부는, 그러나, 침략을 함께 학습과 기억에 매우 심각한 영향을 야기했다. 두 실험 절차 (흡인없이 처리), 파리의 처리가 실험 절차 5,6에서 제거 될 때 강력한 &quot;패자&quot;효과 만 관찰과 동일한 프로토콜을 다음과 같습니다. 이상적으로, 라보에 초파리 침략의 연구ratories는 일반적으로 (탈출을 방어하기 위해 자원에 대한 경쟁, 영토와 공간) 야생에서 발생 날아 환경 상황을 포함해야한다. 또한, 실험 조건은 확실하게 유도 관찰 및 검사 하에서 동작을 해석하도록 최적화되어야한다 (동물의 취급을 최소화 마취제 CO (2)의 사용을 제한하고, 실험 방법을 표준화하려고). 대부분 또는 모든 이러한 문제를 해결하기위한 시도에서, 우리는 동안 행동 경기장에 도입 전후 파리의 처리를 없애 새로운 행동 장치를 설계 하였다. 이 장치로, 파리는 자신의 타고난 부정적인 geotaxis이 이동로와 싸움 챔버 밖으로 전송하는 데 사용합니다. (a) 개인 중 행동 변화를 감소; 파리의 취급을 제거함으로써, 프로토콜은 목표 파리는 상호 작용하고 맑은 우성 관계 (수컷)를 생성하는 (b) 필요한 시간을 감소; 및 (c) 안정적으로 충분히 강한 behavio을 유도RAL 변화는 &quot;패자&quot;효과의 형성을 허용합니다. 이 프로토콜은 새로운 실험 장치 및 단계 절차에 의해 단계 공격성을 분석하고 D.에 강한 &quot;패자&quot;효과의 형성을 허용하도록 설명 melanogaster의. 우리는이 행동 장치는 쉽게 초파리에 의해 전시 다른 사회적 행동의 연구에 적용 할 수 있습니다 기대합니다.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="665">
	<tbody>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:216px;">Drosophila melanogaster pupa</td>
			<td style="width:163px;">Bloomington Stock Center</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Standard fly food</td>
			<td style="width:163px;"></td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td style="width:167px;">Fabricated in-house.&#160;</td>
		</tr>
		<tr height="84">
			<td height="84" style="height:84px;width:216px;">Behavioral chambers</td>
			<td style="width:163px;">Mike machine</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td style="width:167px;">Fabricated in-house. Directly&#160; contact the compagny for more informations.</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Borosilicate glass vials</td>
			<td style="width:163px;">VWR International&#160;</td>
			<td style="width:119px;">47729-576</td>
			<td style="width:167px;">16 x 10 mm</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Cotton</td>
			<td style="width:163px;">Fisherbrand</td>
			<td style="width:119px;">22-456-881</td>
			<td style="width:167px;">Any brand can be used</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Pasteur pipettes</td>
			<td style="width:163px;">VWR International&#160;</td>
			<td style="width:119px;">53300-567</td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Paintbrush&#160;</td>
			<td style="width:163px;">Blick Art Material</td>
			<td style="width:119px;">06157-7030</td>
			<td style="width:167px;">Round , Size 3/0</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Toothpick</td>
			<td style="width:163px;">N/A</td>
			<td style="width:119px;">N/A</td>
			<td style="width:167px;">Any brand can be used</td>
		</tr>
		<tr height="63">
			<td height="63" style="height:63px;width:216px;">Acrylic paint (blue/white)</td>
			<td style="width:163px;">Blick Art Material</td>
			<td style="width:119px;">01637-5172/01637-1022</td>
			<td style="width:167px;">Any brand can be used</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Dry active yeast</td>
			<td style="width:163px;">Sigma</td>
			<td style="width:119px;">YSC2-500G</td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:216px;">Srew cap tube</td>
			<td style="width:163px;">VWR International&#160;</td>
			<td style="width:119px;">10011-394&#160;</td>
			<td style="width:167px;">15 mm diameter, 10 mm height</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Eppendorf</td>
			<td style="width:163px;">VWR International&#160;</td>
			<td style="width:119px;">22363212</td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Tape</td>
			<td style="width:163px;">N/A</td>
			<td style="width:119px;">N/A</td>
			<td style="width:167px;">Any brand can be used</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:216px;">Plastic slices</td>
			<td style="width:163px;">Electron Microscopy Sciences</td>
			<td style="width:119px;">70329-40</td>
			<td style="width:167px;">22 x 40 x 0.25 mm Thickness</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Light source (bulb)</td>
			<td style="width:163px;">VWR International&#160;</td>
			<td style="width:119px;">500003-418</td>
			<td style="width:167px;">Any brand can be used</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Timer</td>
			<td style="width:163px;">VWR International&#160;</td>
			<td style="width:119px;">62344-641</td>
			<td style="width:167px;">Any brand can be used</td>
		</tr>
		<tr height="63">
			<td height="63" style="height:63px;width:216px;">Incubator</td>
			<td style="width:163px;">Percival</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td style="width:167px;">Directly contact the constructor for more informations.</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:216px;">Carbon Dioxide Dry (CO2)</td>
			<td style="width:163px;">Medical-Technical Gases, Inc</td>
			<td style="width:119px;">14H31</td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Binocular</td>
			<td style="width:163px;">Nikon</td>
			<td style="width:119px;">SMZ-745</td>
			<td style="width:167px;">Any brand can be used</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:216px;">Camera (SONY Handycam&#160; HDR-CX330)</td>
			<td style="width:163px;">B&#38;H</td>
			<td style="width:119px;">SOHDRCX330B</td>
			<td style="width:167px;">Any brand can be used</td>
		</tr>
		<tr height="84">
			<td height="84" style="height:84px;width:216px;">Computer</td>
			<td style="width:163px;"></td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td style="width:167px;">With a minimum of 1.4 Ghz Processor, running Microsoft Windows or Machintosh HD</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:216px;">ClipWrap</td>
			<td style="width:163px;">Download online</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td style="width:167px;">Any importing software can be used</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:216px;">QuickTime Player</td>
			<td style="width:163px;">Download online</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td style="width:167px;">Any reading software can be used</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:216px;">GraphPad Software</td>
			<td style="width:163px;">Online</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td style="width:167px;">Any statistical software can be used</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

a new approach that eliminates handling for studying aggression and the "loser" effect in drosophila melanogaster

초파리의 공격적인 행동은 전형적인 행동 패턴의 연속 식으로 구성된다 (분석 1 참조). 이 복잡​​한 동작은, 유전, 호르몬, 환경 적 요인에 의해 영향을 받는다. 많은 생물과 마찬가지로, 이전 전투 경험은 파리의 전투 전략과 이후 대회의 결과에 영향을 미친다 : 싸움을 잃고 가능성이 학습과 기억 2-4을 포함 &quot;패자&quot;효과를 공개, 나중에 경연을 잃을 확률이 높아집니다. 침략 같은 복잡한 사회적 행동의 발현을 함께 학습과 기억은, 동물 5,6의 처리 테스트 사전에 민감합니다. 많은 실험 절차는 그러나 침략 7-9, 파리의 처리는 현재 사용할 제외없이 일상적으로 사용되는 프로토콜을 연구하기 위해 다른 실험실에서 사용된다. 여기, 우리는 instea를 사용하여, 파리의 처리하지 않고 새로운 행동 장치를보고D 자신의 타고난 부정적인 geotactic 응답으로 또는 전투 실에서 동물을 이동합니다. 이 프로토콜에서는, 음식 컵을 포함하는 작은 원형의 싸​​움 경기장 전에 파리의 도입에 이동식 플라스틱 슬라이더에 의해 동일한 두 반으로 나누어집니다. 파리 챔버 문과 geotaxis 슬라이딩을 통해 자신의 집에 격리 병에서 챔버를 입력합니다. 플라스틱 슬라이더를 제거하여, 파리는 상호 작용하는 무료입니다. 지정된 기간 후, 파리 후속 실험에 대한 슬라이더로 다시 분리된다. 이 모든 개별 파리 처리없이 쉽게 이루어진다. 이 장치는 침략과 비행 싸움에서 &quot;패자&quot;효과의 형성을 포함한 관련 학습과 기억을 연구하는 새로운 접근 방식을 제공한다. 또한,이 새로운 행동 범용 장치는 파리의 다른 사회적 행동을 연구하기 위해 이용 될 수 있고, 일반적으로, 기본적인 행동 공정에서 경험 관련 변화를 조사하는 관심을 가져야한다.

이 섹션은 행동 챔버의 설계 및 공격성 ​​&quot;패자&quot;효과의 형성을 측정하는 상술 프로토콜에 따라 행동 실험의 전형적인 세트의 분석을 제시한다. 또한,이 장치를 이용하여 측정 될 수있는 다른 행동의 샘플은 그림. 도 6은 신규 장치의 개략도를 나타낸다. 장치는 세 개의 원통형 우물 구성되어 (크기 : 22.86 mm 직경 17 mm 높이) 전투 실 수 있습니다. 두 조각 ?...

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A New Approach that Eliminates Handling for Studying Aggression and the &quot;Loser&quot; Effect in Drosophila melanogaster

과일 동안 행동 패턴은 역학 싸움, 관찰 및 관련 학습과 기억은 실험 조건에 의해 영향을 받는다, 싸움을 비행. 여기에 제시된 프로토콜은 전체 실험 기간 동안 파리의 처리를 제거하는 새로운 절차를 설명합니다. 이 싸움 역학을 개선하고 강력한 &quot;패자&quot;효과의 형성을 할 수 있습니다.

침략 유학을위한 처리 제거하는 새로운 접근하고 &quot;낙오자&quot;효과<em&gt; 초파리</em

Aggressive behavior in Drosophila melanogaster is composed of the sequential expression of stereotypical behavioral patterns (for analysis see 1). This ...

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Research

JoVE Journal

Neuroscience

A New Approach that Eliminates Handling for Studying Aggression and the "Loser" Effect in Drosophila melanogaster

9.5K 조회수.  Harvard Medical School.  과일 동안 행동 패턴은 역학 싸움, 관찰 및 관련 학습과 기억은 실험 조건에 의해 영향을 받는다, 싸움을 비행. 여기에 제시된 프로토콜은 전체 실험 기간 동안 파리의 처리를 제거하는 새로운 절차를 설명합니다. 이 싸움 역학을 개선하고 강력한 "패자"효과의 형성을 할 수 있습니다. 

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Single Sensillum Recordings in the Insects Drosophila melanogaster and Anopheles gambiae

The sense of smell is essential for insects to find foods, mates, predators, and oviposition sites3. Insect olfactory sensory neurons (OSNs) are enclosed in sensory hairs called sensilla, which cover the surface of olfactory organs. The surface of each sensillum is covered with tiny pores, through which odorants pass and dissolve in a fluid called sensillum lymph, which bathes the sensory dendrites of the OSNs housed in a given sensillum. The OSN dendrites express odorant receptor (OR) proteins, which in insects function as odor-gated ion channels4, 5. The interaction of odorants with ORs either increases or decreases the basal firing rate of the OSN. This neuronal activity in the form of action potentials embodies the first representation of the quality, intensity, and temporal characteristics of the odorant6, 7.
Given the easy access to these sensory hairs, it is possible to perform extracellular recordings from single OSNs by introducing a recording electrode into the sensillum lymph, while the reference electrode is placed in the lymph of the eye or body of the insect. In Drosophila, sensilla house between one and four OSNs, but each OSN typically displays a characteristic spike amplitude. Spike sorting techniques make it possible to assign spiking responses to individual OSNs. This single sensillum recording (SSR) technique monitors the difference in potential between the sensillum lymph and the reference electrode as electrical spikes that are generated by the receptor activity on OSNs1, 2, 8. Changes in the number of spikes in response to the odorant represent the cellular basis of odor coding in insects. Here, we describe the preparation method currently used in our lab to perform SSR on Drosophila melanogaster and Anopheles gambiae, and show representative traces induced by the odorants in a sensillum-specific manner.

Single Sensillum Recordings in the Insects Drosophila melanogaster and Anopheles gambiae

Electrophysiological responses of olfactory sensory neurons to odorants can be measured in insects using single sensillum recordings. In this video article we will demonstrate how to perform single sensillum recordings in the antennae of the vinegar fly (Drosophila melanogaster) and the maxillary palps of the malaria mosquito (Anopheles gambiae).

곤충의 단일 Sensillum 레코딩 Drosophila melanogaster과 아노 펠 레스 gambiae</em

The sense of smell is essential for insects to find foods, mates, predators, and oviposition sites3. Insect olfactory sensory neurons (OSNs) are enclosed ...

연구

신경과학

Paired Nanoinjection and Electrophysiology Assay to Screen for Bioactivity of Compounds using the Drosophila melanogaster Giant Fiber System

Screening compounds for in vivo activity can be used as a first step to identify candidates that may be developed into pharmacological agents1,2. We developed a novel nanoinjection/electrophysiology assay that allows the detection of bioactive modulatory effects of compounds on the function of a neuronal circuit that mediates the escape response in Drosophila melanogaster3,4. Our in vivo assay, which uses the Drosophila Giant Fiber System (GFS, Figure 1) allows screening of different types of compounds, such as small molecules or peptides, and requires only minimal quantities to elicit an effect. In addition, the Drosophila GFS offers a large variety of potential molecular targets on neurons or muscles. The Giant Fibers (GFs) synapse electrically (Gap Junctions) as well as chemically (cholinergic) onto a Peripheral Synapsing Interneuron (PSI) and the Tergo Trochanteral Muscle neuron (TTMn)5. The PSI to DLMn (Dorsal Longitudinal Muscle neuron) connection is dependent on D&alpha;7 nicotinic acetylcholine receptors (nAChRs)6. Finally, the neuromuscular junctions (NMJ) of the TTMn and the DLMn with the jump (TTM) and flight muscles (DLM) are glutamatergic7-12. Here, we demonstrate how to inject nanoliter quantities of a compound, while obtaining electrophysiological intracellular recordings from the Giant Fiber System13 and how to monitor the effects of the compound on the function of this circuit. We show specificity of the assay with methyllycaconitine citrate (MLA), a nAChR antagonist, which disrupts the PSI to DLMn connection but not the GF to TTMn connection or the function of the NMJ at the jump or flight muscles.
Before beginning this video it is critical that you carefully watch and become familiar with the JoVE video titled "Electrophysiological Recordings from the Giant Fiber Pathway of D. melanogaster " from Augustin et al7, as the video presented here is intended as an expansion to this existing technique. Here we use the electrophysiological recordings method and focus in detail only on the addition of the paired nanoinjections and monitoring technique.

Paired Nanoinjection and Electrophysiology Assay to Screen for Bioactivity of Compounds using the Drosophila melanogaster Giant Fiber System

A rapid in vivo assay to test for neuromodulatory compounds using the Giant Fiber System (GFS) of Drosophila melanogaster is described. Nanoinjections in the head of the animal along with electrophysiological recordings of the GFS can reveal bioactivity of compounds on neurons or muscles.

를 사용하여 화합물 Bioactivity위한 이점 Nanoinjection 및 화면에 대한 전기 생리학 분석 Drosophila melanogaster 거대 섬유 시스템

Screening compounds for in vivo activity can be used as a first step to identify candidates that may be developed into pharmacological agents1,2. We ...

Visualization of Proprioceptors in Drosophila Larvae and Pupae

Proprioception is the ability to sense the motion, or position, of body parts by responding to stimuli arising within the body. In fruitflies and other insects proprioception is provided by specialized sensory organs termed chordotonal organs (ChOs) 2. Like many other organs in Drosophila, ChOs develop twice during the life cycle of the fly. First, the larval ChOs develop during embryogenesis. Then, the adult ChOs start to develop in the larval imaginal discs and continue to differentiate during metamorphosis.
The development of larval ChOs during embryogenesis has been studied extensively 10,11,13,15,16. The centerpiece of each ChO is a sensory unit composed of a neuron and a scolopale cell. The sensory unit is stretched between two types of accessory cells that attach to the cuticle via specialized epidermal attachment cells 1,9,14. When a fly larva moves, the relative displacement of the epidermal attachment cells leads to stretching of the sensory unit and consequent opening of specific transient receptor potential vanilloid (TRPV) channels at the outer segment of the dendrite 8,12. The elicited signal is then transferred to the locomotor central pattern generator circuit in the central nervous system.
Multiple ChOs have been described in the adult fly 7. These are located near the joints of the adult fly appendages (legs, wings and halters) and in the thorax and abdomen. In addition, several hundreds of ChOs collectively form the Johnston's organ in the adult antenna that transduce acoustic to mechanical energy 3,5,17,4.
In contrast to the extensive knowledge about the development of ChOs in embryonic stages, very little is known about the morphology of these organs during larval stages. Moreover, with the exception of femoral ChOs 18 and Johnston's organ, our knowledge about the development and structure of ChOs in the adult fly is very fragmentary.
Here we describe a method for staining and visualizing ChOs in third instar larvae and pupae. This method can be applied together with genetic tools to better characterize the morphology and understand the development of the various ChOs in the fly.

Visualization of Proprioceptors in Drosophila Larvae and Pupae

A method to immunostain and visualize chordotonal organs in larvae and pupae of Drosophila melanogaster is described.

의 Proprioceptors의 시각화<em&gt; Drosophila</em&gt; 애벌레와 Pupae

Proprioception is the ability to sense the motion, or position, of body parts by responding to stimuli arising within the body. In fruitflies and other ...

Determination of the Spontaneous Locomotor Activity in Drosophila melanogaster

Drosophila melanogaster has been used as an excellent model organism to study environmental and genetic manipulations that affect behavior. One such behavior is spontaneous locomotor activity. Here we describe our protocol that utilizes Drosophila population monitors and a tracking system that allows continuous monitoring of the spontaneous locomotor activity of flies for several days at a time. This method is simple, reliable, and objective and can be used to examine the effects of aging, sex, changes in caloric content of food, addition of drugs, or genetic manipulations that mimic human diseases.

Determination of the Spontaneous Locomotor Activity in Drosophila melanogaster

Drosophila melanogaster are useful in studying genetic or environmental manipulations that affect behaviors such as spontaneous locomotor activity.&#160; Here we describe a protocol that utilizes monitors with infrared beams and data analysis software to quantify spontaneous locomotor activity.&#160;

의 자발적인 운동 활성의 결정<em&gt; 초파리</em

Drosophila melanogaster has been used as an excellent model organism to study environmental and genetic manipulations that affect behavior. One such ...

Straightforward Assay for Quantification of Social Avoidance in Drosophila melanogaster

Drosophila melanogaster is an emerging model to study different aspects of social interactions. For example, flies avoid areas previously occupied by stressed conspecifics due to an odorant released during stress known as the Drosophila stress odorant (dSO). Through the use of the T-maze apparatus, one can quantify the avoidance of the dSO by responder flies in a very affordable and robust assay. Conditions necessary to obtain a strong performance are presented here. A stressful experience is necessary for the flies to emit dSO, as well as enough emitter flies to cause a robust avoidance response to the presence of dSO. Genetic background, but not their group size, strongly altered the avoidance of the dSO by the responder flies. Canton-S and Elwood display a higher performance in avoiding the dSO than Oregon and Samarkand strains. This behavioral assay will allow identification of mechanisms underlying this social behavior, and the assessment of the influence of genes and environmental conditions on both emission and avoidance of the dSO. Such an assay can be included in batteries of simple diagnostic tests used to identify social deficiencies of mutants or environmental conditions of interest.

Straightforward Assay for Quantification of Social Avoidance in Drosophila melanogaster

Here, we present a protocol to quantify the avoidance of stressed individuals. This paradigm is powerful yet user-friendly and can be used to assess the influence of genes and environment on one kind of social interaction in Drosophila melanogaster.

사회 회피의 정량화에 대한 간단한 분석<em&gt; 초파리</em

Drosophila melanogaster is an emerging model to study different aspects of social interactions. For example, flies avoid areas previously occupied by ...

Conditions Affecting Social Space in Drosophila melanogaster

The social space assay described here can be used to quantify social interactions of Drosophila melanogaster &#8212; or other small insects &#8212; in a straightforward manner. As we previously demonstrated 1, in a two-dimensional chamber, we first force the flies to form a tight group, subsequently allowing them to take their preferred distance from each other. After the flies have settled, we measure the distance to the closest neighbor (or social space), processing a static picture with free online software (ImageJ). The analysis of the distance to the closest neighbor allows researchers to determine the effects of genetic and environmental factors on social interaction, while controlling for potential confounding factors. Diverse factors such as climbing ability, time of day, sex, and number of flies, can modify social spacing of flies. We thus propose a series of experimental controls to mitigate these confounding effects. This assay can be used for at least two purposes. First, researchers can determine how their favorite environmental shift (such as isolation, temperature, stress or toxins) will impact social spacing 1,2. Second, researchers can dissect the genetic and neural underpinnings of this basic form of social behavior 1,3. Specifically, we used it as a diagnostic tool to study the role of orthologous genes thought to be involved in social behavior in other organisms, such as candidate genes for autism in humans 4.

Conditions Affecting Social Space in Drosophila melanogaster

The effect of genes and environment on social space of Drosophila melanogaster can be quantified through a powerful but straightforward analytical paradigm. We show here different factors that can affect this social space, and thus need to be taken into consideration when designing experiments in this paradigm.

사회적 공간에 영향을 미치는 조건<em&gt; 초파리</em

The social space assay described here can be used to quantify social interactions of Drosophila melanogaster &#8212; or other small insects &#8212; in a ...

High-resolution Quantification of Odor-guided Behavior in Drosophila melanogaster Using the Flywalk Paradigm

In their natural environment, insects such as the vinegar fly Drosophila melanogaster are bombarded with a huge amount of chemically distinct odorants. To complicate matters even further, the odors detected by the insect nervous system usually are not single compounds but mixtures whose composition and concentration ratios vary. This leads to an almost infinite amount of different olfactory stimuli which have to be evaluated by the nervous system.
To understand which aspects of an odor stimulus determine its evaluation by the fly, it is therefore desirable to efficiently examine odor-guided behavior towards many odorants and odor mixtures. To directly correlate behavior to neuronal activity, behavior should be quantified in a comparable time frame and under identical stimulus conditions as in neurophysiological experiments. However, many currently used olfactory bioassays in Drosophila neuroethology are rather specialized either towards efficiency or towards resolution.
Flywalk, an automated odor delivery and tracking system, bridges the gap between efficiency and resolution. It allows the determination of exactly when an odor packet stimulated a freely walking fly, and to determine the animal&#180;s dynamic behavioral reaction.

High-resolution Quantification of Odor-guided Behavior in Drosophila melanogaster Using the Flywalk Paradigm

The automated tracking system Flywalk is used for high-resolution quantification of odor-guided behavior in Drosophila melanogaster.

에서 냄새 유도 행동의 고해상도 정량화<em&gt; 초파리</em사용&gt;<em&gt; Flywalk</em&gt; 패러다임

In their natural environment, insects such as the vinegar fly Drosophila melanogaster are bombarded with a huge amount of chemically distinct odorants. To ...

A Behavioral Assay for Mechanosensation of MARCM-based Clones in Drosophila melanogaster

Because of the structural and functional homology to the hair cells of the mammalian inner ear, the neurons that innervate the Drosophila external sense organs provide an excellent model system for the study of mechanosensation. This protocol describes a simple touch behavior in fruit flies which can be used to identify mutations that interfere with mechanosensation. The tactile stimulation of a macrochaete bristle on the thorax of flies elicits a grooming reflex from either the first or third leg. Mutations that interfere with mechanotransduction (such as NOMPC), or with other aspects of the reflex arc, can inhibit the grooming response. A traditional screen of adult behaviors would have missed mutants that have essential roles during development. Instead, this protocol combines the touch screen with mosaic analysis with a repressible cell marker (MARCM) to allow for only limited regions of homozygous mutant cells to be generated and marked by the expression of green fluorescent protein (GFP). By testing MARCM clones for abnormal behavioral responses, it is possible to screen a collection of lethal p-element mutations to search for new genes involved in mechanosensation that would have been missed by more traditional methods.

A Behavioral Assay for Mechanosensation of MARCM-based Clones in Drosophila melanogaster

In order to identify novel mutations affecting mechanosensation, we designed an assay that measures the behavioral response to tactile stimulation of fly bristles in mutant clones generated by the MARCM method. The combination of techniques allows for the identification of mechanosensitive mutations that would otherwise be lethal.

의 Mechanosensation에 대한 행동 분석 클론의 MARCM은 기반<em&gt; 초파리</em

Because of the structural and functional homology to the hair cells of the mammalian inner ear, the neurons that innervate the Drosophila external sense ...

Foraging Path-length Protocol for Drosophila melanogaster Larvae

The Drosophila melanogaster larval path-length phenotype is an established measure used to study the genetic and environmental contributions to behavioral variation. The larval path-length assay was developed to measure individual differences in foraging behavior that were later linked to the foraging gene. Larval path-length is an easily scored trait that facilitates the collection of large sample sizes, at minimal cost, for genetic screens. Here we provide a detailed description of the current protocol for the larval path-length assay first used by Sokolowski. The protocol details how to reproducibly handle test animals, perform the behavioral assay and analyze the data. An example of how the assay can be used to measure behavioral plasticity in response to environmental change, by manipulating feeding environment prior to performing the assay, is also provided. Finally, appropriate test design as well as environmental factors that can modify larval path-length such as food quality, developmental age and day effects are discussed.

Foraging Path-length Protocol for Drosophila melanogaster Larvae

We provide a detailed protocol for a Drosophila melanogaster foraging path-length assay. We discuss the preparation and handling of test animals, how to perform the assay and analyze the data.

대한 꼴 경로 길이 프로토콜<em&gt; 노랑 초파리</em&gt; 애벌레

The Drosophila melanogaster larval path-length phenotype is an established measure used to study the genetic and environmental contributions to behavioral ...

A Simple Way to Measure Alterations in Reward-seeking Behavior Using Drosophila melanogaster

We describe a protocol for measuring ethanol self-administration in fruit flies (Drosophila melanogaster) as a proxy for changes in reward states. We demonstrate a simple way to tap into the fly reward system, modify experiences related to natural reward, and use voluntary ethanol consumption as a measure for changes in reward states. The approach serves as a relevant tool to study the neurons and genes that play a role in experience-mediated changes of internal state. The protocol is composed of two discrete parts: exposing the flies to rewarding and nonrewarding experiences, and assaying voluntary ethanol consumption as a measure of the motivation to obtain a drug reward. The two parts can be used independently to induce the modulation of experience as an initial step for further downstream assays or as an independent two-choice feeding assay, respectively. The protocol does not require a complicated setup and can therefore be applied in any laboratory with basic fly culture tools.

A Simple Way to Measure Alterations in Reward-seeking Behavior Using Drosophila melanogaster

We describe a protocol for inducing rewarding and nonrewarding experiences in fruit flies (Drosophila melanogaster) using voluntary ethanol consumption as a measure for changes in reward states.

사용 보상 추구 행동의 변화를 측정하는 간단한 방법<em&gt; 노랑 초파리</em

We describe a protocol for measuring ethanol self-administration in fruit flies (Drosophila melanogaster) as a proxy for changes in reward states. We ...