Name: surgical angiogenesis in porcine tibial allotransplantation: a new large animal bone vascularized composite allotransplantation model
Uploaded: 2017-08-13T13:00:00.000+00:00
Duration: 10 min 31 s
Description: Watch this Scientific Journal Video about Surgical Angiogenesis in Porcine Tibial Allotransplantation: A New Large Animal Bone Vascularized Composite Allotransplantation Model at JoVE.com

저자는 사단의 미디어 지원 서비스, 메이 요 클리닉 로체스터, 미네소타 비디오 제작을 위한 뿐만 아니라 비디오의 편집 요 Kotsougianis 감사 합니다. 우수한 작품은 짐 Postier, 로체스터, 미네소타에 의해 실시 됐다. 또한, 저자 박사 Dimitra Kotsougiani에 대 한 급여 지원 제공에 대 한 독일 연구 재단 (도이치 가운데)를 감사 하 고 싶다 (DFG 그랜트: 코 4903/1-1). 이 작품은 Tarek E. Obaid에서 관대 한 선물에 의해 지원 되었다. 이 작품은 Microvascular 연구 실험실, 학과의 정형 외과 수술 메이 요 클리닉 로체스터, 미네소타에서에서 수행 되었다.

연구 기관 동물 관리 및 사용 위원회 (IACUC) 메이 요 클리닉의 로체스터에 의해 승인 되었다. 유카탄 미니어처 돼지가 수술 VCA 동안 모두 기증자와 받는 사람으로 봉사 했다. 기증자와 받는 사람 쌍 Sla 22,23주요 불일치를 위해 DNA 시퀀스 돼지 백혈구 항 원 (SLA) haplotyping에 근거 했다. 동물 나이 및 무게 일치와 동일한 혈액형의 했다. 2 수술 팀 동시에 기증자에 게 서 그것의 영양 배와 돼지 tibial 뼈 세그먼트를 수확 하 고 orthopically 배치 수용자 tibial 뼈 세그먼트를 받을 받는 사람을 준비 합니다. 뼈 영양 선박의 microvascular 복구, 동시에 받는 파생 arteriovenous 번들 자생 신생 대 tibial 세그먼트 내에서 배치 했다.
1. presurgical 준비
<ol><li>빠른 유카탄 미니어처 돼지 절차 전날 고 제어 약국에 대 한 무게.</li>
	<li>Xylazine (2 mg/kg)와 tiletamine HCL와 zolazepam (5 mg/kg), HCL의 조합 진정 동물 피하 투여.</li>
	<li>주변 카 테 터를 정 맥 주사 약물 및 염 분 배달에 대 한 귀 정 맥에 놓고 buprenorphine (0.18 mg/kg)과 예방 항생제 (1 g cefazoline 정 맥 및 5 mg/kg ceftiofur 근육).</li>
	<li>오른쪽 hindlimb와 각각 vascularized tibial 뼈 세그먼트와 중앙 정 맥 카 테 터의 위치에 대 한 사이트에 대 한 베스트 사이트 역할을 하는 왼쪽된 목 면도.</li>
	<li>생체 신호 및 진정 작용의 수준 입 근육의 이완을 테스트 하 여 확인 합니다.</li>
	<li>Sternal recumbency24에 적절 한 크기의 endotracheal 튜브 동물 넣어야</li>
	<li>작업 테이블에 미니어처 돼지를 전송 및 isoflurane (1-3%)을 투여 하 여 마 취의 유지 보수에 대 한 호흡 기계에 연결.</li>
	<li>종을, 동 공 빛과 각 막 반사를 테스트 하 여 마 취 깊이 확인 합니다.</li>
	<li>귀에 부착 된 펄스 속도도 전송 프로브 산소 포화를 모니터링 합니다. 혈압 팔목 및 온도 프로브를 사용 하 여 자가 중요 한 기호 모니터링.</li>
	<li>지구 온난화 패드에 부정사 위치에 유카탄 미니어처 돼지를 배치 합니다. 또한, 저체온증을 방지 하기 위해 작업 중 강제 공기 데우는 담요를 사용 합니다.</li>
	<li>눈에 마 취에서 건조를 방지 하기 위해 수 의사 연 고를 사용 합니다.</li>
</ol>2. 수확 Vascularized Tibial 뼈 세그먼트의
<ol><li>Povidone-요오드 솔루션 각 미니어처 돼지의 오른쪽 다리를 씻어. 메 마른 수건으로 피부를 건조 하 고 메 마른 패션에는 말단을 드러 워 진. 포함 하 고 오염 위험을 최소화 하는 요오드 수태 접착제 절 개 드 레이프와 사지를 분리.</li>
	<li>Tibiotalar 공동으로 경골의 앞쪽 능선을 따라 distally 확장 무릎 관절에서 시작 hindlimb에 메스 anterolaterally와 절 개를 수행 합니다.</li>
	<li>가 위는 피부와 피하 조직 dissect 그리고 경골에서 앞쪽 구획 근육을 옆으로 철회. 참고: tibialis 앞쪽 근육 원래 릴리스 쉽게 노출 합니다. 상호 막 이제 노출 됩니다.</li>
	<li>두개골 tibial 동맥을 식별 하 고 (나중에 사용 하도록 arteriovenous 번들으로 수술 신생) 정 맥. 참고: 두개골 tibial 동맥 및 정 맥 상호 막의 앞쪽 표면에 거짓말.</li>
	<li>요원의 시야를 개선 하기 위해 그것의 삽입에서 전방 tibial 근육에서 일부 놓고 진동 톱을 사용 하 여 tibial 능선의 부분을 제거.</li>
	<li>두개골 tibial 혈관을 보호 하는 시저와 tibial 결 절 수준에서 상호 막 시작 incise.</li>
	<li>막 아래 distally 실행 꼬리 tibial 혈관을 시각화. 참고: 그들은 두개골 tibial 혈관에서 분기 하 고는 결 절을 그냥 원심 tibial diaphysis의 영양소 작은 꽃 자루를. 이제 시각화 영양 구멍 및 배 tibial 결 절을 그것의 후부 측면 표면 단지 말 초에 경골을 입력 가능 하다.</li>
	<li>태그는 microclamp와 영양소 작은 꽃 자루. 관 작은 꽃 자루를 분리 하지 마십시오.</li>
	<li>영양소의 구멍; 근처 tibial 앞쪽 칸에 근육 지점 식별 이 문 합 vascularized 뼈 allotransplant 영양소 선박에 대 한 사용할 수 있습니다. microclamp와 함께 근육 분기를 표시 합니다.</li>
	<li>
관 작은 꽃 자루를 포함 하 여 3.5 cm tibial 뼈 세그먼트의 추수.
	<ol>
<li>절단 지 그를 사용 하 여 정확 하 고 재현성 뼈 절제를 위해. 위치와 수정 절단 영양 구멍 및 혈관을 포함 하는 경골의 내측 표면에 지 그.<ol>
<li>지 그에 의해 guided 3.5 cm tibial 세그먼트를 제거 하는 진동 톱으로 병렬 뼈 상처를 수행 합니다. 크기 및 모양이 일치를 극대화 하기 위해 동일한 위치 및 기증자와 받는 사람 동물에 대 한 지 그를 사용 합니다.</li>
		</ol>
</li>
	</ol>
</li>
	<li>일단 두 컷 진동 톱으로 만들어진, 후부 표면에 영양소 작은 꽃 자루를 시각화 하는 tibial 뼈 세그먼트를 회전 합니다. 가 위 두개골 tibial 동맥에서 기원에 영양소 작은 꽃 자루를 나눕니다. 해 부 및가 위, 그 표면에과 근육의 얇은 팔목을 떠나 tibial 세그먼트를 무료.</li>
	<li>Tibial 뼈 세그먼트를 철회 하 고 장소에서 두개골 tibial 동맥을 떠나 날카로운 클램프와의 관 작은 꽃 자루와 tibial 뼈 세그먼트 상승. 참고: vascularized 뼈 세그먼트 이제 microvascular 전송에 대 한 준비 이며 3.5 cm tibial 뼈 결함 각 유카탄 미니어처 돼지에 만들어졌습니다.</li>
	<li>선 흡수 polyglactin으로 발목에 두개골 tibial 선박 3-0 봉합, 혈관 주위 조직 만들 arteriovenous (AV) 번들의 커 프 스와 함께 그들을 자유롭게. 두고 봉합 적어도 5 cm 긴 tibial 뼈 세그먼트에 주입을 쉽게 하기 위해.</li>
</ol>3. Orthotopic Tibial 뼈 VCA 재건 외과 신생과 함께
<ol><li>
뼈 VCAs로 그들을 사용 하 여 두 동물 사이의 영양소의 pedicles와 수확된 tibial 뼈 세그먼트를 교환 합니다.
	<ol>
<li>두개골 tibial arteriovenous (AV) 번들의 tibial 뼈 세그먼트를 수 있도록 하려면 V 모양의 진동 톱을 사용 하 여 인접 교차로 사이트에서 세그먼트를 제거 합니다.</li>
		<li>Tibial 뼈 세그먼트의 골 수 운하와 tibial 뼈 결함 사이트의 원심 부분에 0.5 c m 직경의 구멍을 드릴 및 후속 홍보 intramedullary 운하에 distally, 출혈 되어 받는 사람 AV 번들 소개 자생 새로운 혈액 공급입니다.</li>
	</ol>
</li>
	<li>
받는 사람 결함으로 vascularized tibial 뼈 세그먼트 orthotopically를 놓습니다.
	<ol>
<li>끝에 끝 방식으로 간단한 중단된 봉합 기술, 9-0 봉합25를 사용 하 여 전방 tibial 구획의 준비 된 근육 지점 tibial 뼈 세그먼트의 영양소 작은 꽃 자루 anastomose</li>
	</ol>
</li>
	<li>짤 테스트26를 사용 하 여 microvascular 문 합의 patency를 확인 합니다.</li>
	<li>
9 홀 3.5 m m 잠금 플레이트를 사용 하 여 osteosynthesis를 얻을 수 있습니다.
	<ol>
<li>경골 anteromedially에 9 홀 접시를 놓습니다. 3 bicortical 나사 위와 tibial 뼈 세그먼트 아래 접시를 수정 합니다. 또한, 내부 고정을 위한 tibial 뼈 세그먼트에서 unicortical 나사를 놓습니다. 확인 하는 뼈의 위치 올바른 VCA 및 플레이트, 사용 하 여 anteroposterior 및 측면 방사선.</li>
	</ol>
</li>
	<li>Fascial 수행 하 고 3-0와 2-0 흡수 봉합 중단 계층화 된 피부 폐쇄를 사용 하 여. 마지막으로 폐색 투명 한 드레싱으로 상처를 봉인.</li>
</ol>4. 중앙 정 맥 카 테 테 르 배치 Jugular 외부 정 맥에
<ol><li>
수술 후 약물 관리, 면역 (IS) 마약 수준 모니터링에 대 한 오픈 기술을 사용 하 여 외부 경 정 맥에 정 맥 카 테 터를 놓습니다. 마 취 (참조 섹션 1) allotransplantation 절차의 결론에 배치를 수행 합니다.
	<ol>
<li>메스와 함께 목에 anterolateral 절 개를 수행 합니다. 가 위로 피하 조직 해 부와 노출 왼쪽된 경 정 맥.</li>
		<li>외부 경 정 맥에 작은 구멍을 통해 경 정 맥에 Hickman 카 테 터를 배치 하 고 비 흡수 봉합 확보. 피하 터널링 하 여에 카 테 터를 exteriorize.</li>
		<li>피부에 장소에 카 테 터를 장악 하 고 닫기 사용 하 여 계층에서 목 3-0와 2-0 흡수 봉합 중단.</li>
		<li>절 개 폐색 붕대를 놓습니다. 엄마 랑 붕대를 사용 하 여 장소에 붕대와 카 테 터를 잡아.</li>
	</ol>
</li>
</ol>5. 수술 후 치료 및 후속
<ol><li>즉시 수술 후, carprofen (4 mg/kg) 수술 후 진통의 근육 주사와 유카탄 미니어처 돼지 취급. 필요에 따라 강도 높은 통증을 치료 하 buprenorphine (0.18 mg/kg)를 관리 합니다.</li>
	<li>돼지를 60 분에 대 한 복구 다음 돼지는 특별 집중 치료 단위 팬을 모니터 밀접 하 게 완전 한 회복까지 허용 합니다.</li>
	<li>정상으로 유카탄 미니어처 돼지 케이지 및 물, 음식에 대 한 ad libitum 액세스를 제공 이동 합니다.</li>
	<li>Tacrolimus 관리 (0.8-1.5 mg/kg/day) 및 mycophenolate mofetil (MMF) (50-70 mg/kg/일) 구두로 그리고 methylprednisolone 나트륨 호박 정 맥 (500 mg/day로 시작) 2 주 동안.</li>
	<li>여 물 혈액 수준, 5.0-30.0 ng/mL에 대 한 목표에 따라 면역 억제 약의 매일 복용량을 조정tacrolimus 및 1.0-3.5 µ g/l MMF, 각각. 하루에 50 밀리 그램의 유지 보수 복용량에 도달할 때까지 점차적으로 methylprednisolone의 복용량을 감소.</li>
	<li>예방 항생제 gentamicin 관리 (3 mg/kg 정 맥) 및 ceftiofur (5 mg/kg 피하) 2 주 동안.</li>
</ol>

<ol>
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T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Transplantation+of+a+vascularized+rabbit+femoral+diaphyseal+segment:+mechanical+and+histologic+properties+of+a+new+living+bone+transplantation+model.">Transplantation of a vascularized rabbit femoral diaphyseal segment: mechanical and histologic properties of a new living bone transplantation model.</a> Microsurgery. 28, 291-299 (2008).</li><li>Laiblin, C., Jaeschke, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Clinical+chemistry+examinations+of+bone+and+muscle+metabolism+under+stress+in+the+Gottingen+miniature+pig--an+experimental+study.">Clinical chemistry examinations of bone and muscle metabolism under stress in the Gottingen miniature pig--an experimental study.</a> Berliner und Munchener tierarztliche Wochenschrift. 92, 124-128 (1979).</li><li>Saalmuller, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Characterization+of+swine+leukocyte+differentiation+antigens.">Characterization of swine leukocyte differentiation antigens.</a> Immunol Today. 17, 352-354 (1996).</li><li>Pelzer, M., Larsen, M., Friedrich, P. F., Aleff, R. A., Bishop, A. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Repopulation+of+vascularized+bone+allotransplants+with+recipient-derived+cells:+detection+by+laser+capture+microdissection+and+real-time+PCR.">Repopulation of vascularized bone allotransplants with recipient-derived cells: detection by laser capture microdissection and real-time PCR.</a> J Orthopaedic Res. 27, 1514-1520 (2009).</li><li>Muramatsu, K., Kurokawa, Y., Kuriyama, R., Taguchi, T., Bishop, A. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Gradual+graft-cell+repopulation+with+recipient+cells+following+vascularized+bone+and+limb+allotransplantation.">Gradual graft-cell repopulation with recipient cells following vascularized bone and limb allotransplantation.</a> Microsurgery. 25, 599-605 (2005).</li><li>Muramatsu, K., Bishop, A. T., Sunagawa, T., Valenzuela, R. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Fate+of+donor+cells+in+vascularized+bone+grafts:+identification+of+systemic+chimerism+by+the+polymerase+chain+reaction.">Fate of donor cells in vascularized bone grafts: identification of systemic chimerism by the polymerase chain reaction.</a> Plastic and reconstructive surgery. 111, 763-777 (2003).</li><li>Vossen, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Bone+quality+and+healing+in+a+swine+vascularized+bone+allotransplantation+model+using+cyclosporine-based+immunosuppression+therapy.">Bone quality and healing in a swine vascularized bone allotransplantation model using cyclosporine-based immunosuppression therapy.</a> Plast Reconstr Surg. 115, 529-538 (2005).</li><li>Lee, W. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Relative+antigenicity+of+components+of+a+vascularized+limb+allograft.">Relative antigenicity of components of a vascularized limb allograft.</a> Plast Reconstr Surg. 87, 401-411 (1991).</li></ol>

저자 들은 아무 경쟁 금융 관심사 선언 합니다.

Vascularized 수용자 뼈 (뼈 VCA)의 이식 큰 단편 뼈가 있는 결함에 대 한 미래 재건 옵션을 나타낼 수 있습니다. 그러나, 긴-장기-면역 억제 (IS)의 필요와 뼈 VCA 생존에 필요한 중요 한 부작용은이 무생물 중요 한 응용 프로그램6에 정당화 하기가 어렵습니다.
돼지 모델 상당한 이점을8,9 제공할 수 있습니다 실험실 쥐의 타고 ...

큰 단편 뼈가 있는 결함 종은 후 외상, 감염 또는 수술 사지 절약에서 유래한 다. Vascularized 자생 뼈 이식, 뼈 전송, 보 철 교체, cryopreserved 괴 이식 등 현재 재건 옵션 단독 사용 또는 조합에서 중요 한 병 적 상태와 관련 된 고의 높은 요율을 합병증1,2,3.
Microvascular 네트워크의 형성과 뼈 osteogenic 지원, chondrogenic, 뼈 복구4에 필요한 중간 엽 줄기 세포의 항상성 위해 필수적입니다.
생활 수용자 뼈, vascularized 복합 조직 allotransplantation (VCA 뼈), 그것의 영양 작은 꽃 자루의 microsurgical 문 합 수행의 형태로 이식 미래 재건 대안을 나타낼 수 있습니다. Cryopreserved 수용자 뼈 처럼 즉각적인 안정성 밀접 하 게 일치 하는 뼈 결함 형태에 의해 제공 됩니다. 향상 된 치유와 생활의 리 모델링 제공 자생 vascularized 이식 처럼 뼈 조직. Allotransplant 절차에서 장애물 긴-장기-면역 억제 (IS)의 필요를 남아 있습니다. 문제는 더 심각한 골격 조직, 마약 복용 2-3 회 이상의 장기 이식5를 요구 하는. 부수적인 위험 기관 독성, 악성 종양, 감염 또는 이식-비교-호스트 질병의 개발을 포함 하 여은이 무생물 중요 한 응용 프로그램6에 정당화 하기가 어렵습니다. 그러나, 급성과 만성 거부의 에피소드 현재 장기 IS7주요 문제는 남아 있다. 밀접 하 게 조직 적합성 항 원 일치, 기증자 전용 허용 오차를 유발 및 마약 immunotherapy 향상에 지속적인 노력 하지 아직 일상적으로 성공 임상 약물 무료 조직 생존8,9허용에.
우리 이전 뼈 VCA 생존 능력을 유지 하 고 작은 동물 모델에 이식된 뼈 내의 새로운 자생 순환의 승진에 의해 개장 하는 뼈를 강화 하는 방법을 설명 했다. 이 이식된 자생 조직10,,1112에서 외과 신생의 추가 사용 하 여 이루어집니다. 수용자 뼈 세그먼트와 영양 뼈 세그먼트 작은 꽃 자루의 문 합 microsurgically 이식 됩니다. 또한 호스트 파생 혈관 수용자 vascularized 뼈 세그먼트의 골 수 운하로 이식 됩니다. 이 2 주 과정에서 수용자 영양 혈관의 patency 마약 면역 억제 유지 됩니다. IS-철수 후 영양소 작은 꽃 자루는 결국 thrombose13. 호스트에서 파생 된 혈관에 따라 새로운 모 세관 침대, 조직의 생존을 유지 하기 위해 충분 한 순환을 제공 합니다. 치유 하 고 개장 하는 뼈 골 이후 강화 되 고 신생 결합된10,,1112. 아니 더 immunotherapy 필수 이며 뼈 생존 한 면역학 유능한 호스트와 기증자 전용 관용의 부재에도 불구 하 고 장기 유지 됩니다.
최고의 치유, 기계적 속성 및 큰 동물 모델에서 면역학의 연구 임상 연습으로 뼈 allotransplantation의이 새로운 방법의 번역 선행 한다. 돼지 모델 같은 VCA 연구14,,1516에 이상적입니다. 미니어처 돼지 크기와 해부학에 본질적으로 동일한 수술 임 플 란 트 기법을 사용 하 여 골격 재건을 허용 하는 사람에 게 비교할 수 있습니다. 면역학 돼지 잘 돼지 백혈구 항 원 (SLA) haplotypes 등 혈액 종류, 이식 수술에 필요한, 정의 됩니다. 세포 계보 연구는 면역 반응17,,1819,,2021의 상세한 분석으로 섹스 불일치 이식 가능.
여기, 우리는 단편 뼈 손실 및 재구성의 연구에 대 한 적합 한 유카탄 미니어처 돼지에서 뼈 VCA allotransplantation 모델을 설명합니다. 수술 신생의 상호 작용을 조사 하기 위해이 모델을 사용할 수 있습니다 및 단기 뼈 VCA 생존에 그리고 기능, osteocyte 계보를 포함 하 여 뼈 혈액 흐름, 치유 하 고 개장 하는, alloresponsiveness 및도로 역학 다른 혁신적인 면역 modulatory 전략을 테스트 합니다.

<table><tbody><tr><td>Xylazine</td><td>VetTek, Bluesprings, MO</td><td>N/A</td><td>2mg/kg</td></tr><tr><td>Telazol</td><td>Pfizer Inc., NY, NY</td><td>2103</td><td>5mg/kg</td></tr><tr><td>Buprenorphine</td><td>Zoo Pharm, Windsor, CO</td><td>N/A</td><td>0.18mg/kg</td></tr><tr><td>Cefazoline</td><td>Hospira, Lake Forest, IL</td><td>RL-4539</td><td>1g</td></tr><tr><td>Ethilon sutures</td><td>Ethicon, Sommerville, NJ</td><td>BV 130-5</td><td>9-0</td></tr><tr><td>Locking plate</td><td>DePuy Synthes Vet, West Chester, PA</td><td>VP4041.09</td><td>9-hole 3.5mm locking plate</td></tr><tr><td>Vicryl sutures</td><td>Ethicon, Sommerville, NJ</td><td>J808T</td><td>2-0, 3-0</td></tr><tr><td>Tegaderm</td><td>3M Health Care, St. Paul, MN&amp;nbsp;</td><td>16006</td><td>15x10cm</td></tr><tr><td>Hickman catheter</td><td>Bard Access System Inc., Salt Lake City, UT</td><td>600560</td><td>9.6 French</td></tr><tr><td>Carprofen</td><td>Zoetis Inc., Kalamazoo, MI</td><td>1760R-60-06-759</td><td>4mg/kg</td></tr><tr><td>Tacrolimus</td><td>Sandoz Inc., Princeton, NJ&amp;nbsp;</td><td>973975</td><td>(0.8-1.5mg/kg/day)</td></tr><tr><td>Mycophenolate Mofetil&amp;nbsp;</td><td>Sandoz Inc., Princeton, NJ&amp;nbsp;</td><td>772212</td><td>(50-70mg/kg/day)&amp;nbsp;</td></tr><tr><td>Methylprednisolone sodium succinate</td><td>Pfizer Inc., NY, NY</td><td>2375-03-0</td><td>500 mg</td></tr><tr><td>Gentamicin</td><td>Sparhawk Laboratories, Lenexa, KS</td><td>1405-41-0</td><td>3mg/kg&amp;nbsp;</td></tr><tr><td>Dermabond Prineo</td><td>Ethicon, San Lorenzo, Puerto Rico</td><td>6510-01-6140050</td><td></td></tr><tr><td>Isoflurane 99.9% 250 ml</td><td>Abbott Animal&amp;nbsp; Health&amp;nbsp;</td><td>05260-5</td><td></td></tr><tr><td>Lactated Ringer&#039;s 1L</td><td>Baxter Corporation</td><td>JB1064</td><td></td></tr><tr><td>Saline 0.9%, 1 L</td><td>Baxter Corporation</td><td>60208</td><td></td></tr><tr><td>Ceftiofur</td><td>Pfizer Canada Inc.</td><td>11103</td><td>5mg/kg</td></tr><tr><td>Microfil</td><td>Flow Tech Inc, Carver, MA</td><td>MV-122</td><td>125 ml</td></tr><tr><td>Decalcifying Solution</td><td>Thermo Fisher Scientific, Chesire, WA, UK</td><td>8340-1</td><td></td></tr></tbody></table>

surgical angiogenesis in porcine tibial allotransplantation: a new large animal bone vascularized composite allotransplantation model

외상, 감염 악성 종양, 선천적인 비정상 인 단편 뼈 손실 주요 재건 도전 남아 있습니다. 현재 치료 옵션 실패와 상당한 사망률의 중요 한 위험을가지고.
뼈의 사용 나가도록 복합 allotransplantation (VCA) 모두 가까운 일치 절제 뼈 크기와 모양 및 개장 하는 치유 및 살아있는 뼈의 잠재력의 제안할 것입니다. 현재, 평생 약물 면역 억제 (IS)가 필요 합니다. 기관 독성, 기회 감염 및 신 생물 위험 같은 비 치명적인 징후를 취급 하는.
우리 이전 VCA 내의 받는 사람 파생된 혈관의 주입에 의해 뼈 및 관절 VCA 생존 쥐와 토끼 긴 장기 면역 억제의 필요 없이 유지 될 수 있습니다 설명 했다. 그것은 측정 흐름 및 활성 뼈 개장, IS의만 2 주를 필요로 자생, neoangiogenic 순환을 생성 합니다. 작은 동물에서 뼈 생리학, 해부학, 면역학에서 실질적으로 사람 다, 임상 응용 프로그램은 착수 하기 전에이 기술을 평가 하는 돼지 뼈 VCA 모델을 개발 했습니다. 미니어처 돼지 allotransplantation 연구, 면역학, 해 부, 생리 및 크기 유사성 그들의 사람에 게 주어진 현재 널리 사용 됩니다. 여기, 우리는 새로운 돼지 orthotopic tibial 뼈 VCA 모델 테스트 VCA 생존 능력을 유지 하기 위해 자생 외과 신생의 역할을 설명 합니다.
모델 재구성 단편 tibial 뼈 결함 크기 및 모양이 일치 수용자 tibial 뼈 세그먼트를 사용 하 여 주요 걸쳐 유카탄 미니어처 돼지에 돼지 백혈구 항 원 (SLA) 불일치 이식. 영양소 선박 수리 및 수용자 tibial 뼈 세그먼트의 골 수 운하로 받는 사람 파생된 자생 혈관의 이식 동시 단기 IS와 함께에서 수행 됩니다. 이 짧은 시간에 대 한 수용자 영양 혈관을 통해 흐름을 유지 하는 이식된 조직에서 개발 하는 neoangiogenic 자생 순환을 수 있습니다. 새로운 자생 순환 약물 치료와 후속 영양 혈관 혈전 증의 다음 뼈 생존 능력을 유지 합니다.

설명된 기술 4 개의 SLA 주요 불일치 유카탄 미니어처 돼지와 단편 tibial 결함 크기 일치 tibial VCA를 사용 하 여 개축 성공적으로 수행 했습니다. 뼈 allotransplant의 동시 영양소 선박 수리 및 allotransplant 골 수 운하 내의 받는 사람 동물에서 AV 번들의 주입 허용 즉시 뼈 순환 및 개발을 통해 새로운 자생 혈액 공급의 (그림 1) 시간입니다. 16 주에는 neoangiogenic...

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Surgical Angiogenesis in Porcine Tibial Allotransplantation: A New Large Animal Bone Vascularized Composite Allotransplantation Model

현재 어떤 종류 vascularized 복합 allotransplantation의 긴-장기-면역 억제, 어려운 생활을 경계 표시에 대 한 지원에 따라 달라 집니다. 선물이 새로운 돼지 tibial VCA 모델 뼈 VCA를 공부 하 고 장기 면역 변조 없이 뼈 생존을 유지 하기 위해 수술 신생의 사용 방법을 설명 하는 데 사용할 수 있습니다.

돼지 Tibial Allotransplantation 외과 신생: 새로운 큰 동물 뼈 나가도록 복합 Allotransplantation 모델

Segmental bone loss resulting from trauma, infection malignancy and congenital anomaly remains a major reconstructive challenge. Current therapeutic ...

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Research

JoVE Journal

Medicine

7.6K 조회수.  Mayo Clinic. 현재 어떤 종류 vascularized 복합 allotransplantation의 긴-장기-면역 억제, 어려운 생활을 경계 표시에 대 한 지원에 따라 달라 집니다. 선물이 새로운 돼지 tibial VCA 모델 뼈 VCA를 공부 하 고 장기 면역 변조 없이 뼈 생존을 유지 하기 위해 수술 신생의 사용 방법을 설명 하는 데 사용할 수 있습니다.

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Autologous Endothelial Progenitor Cell-Seeding Technology and Biocompatibility Testing For Cardiovascular Devices in Large Animal Model

Implantable cardiovascular devices are manufactured from artificial materials (e.g. titanium (Ti), expanded polytetrafluoroethylene), which pose the risk of thromboemboli formation1,2,3. We have developed a method to line the inside surface of Ti tubes with autologous blood-derived human or porcine endothelial progenitor cells (EPCs)4. By implanting Ti tubes containing a confluent layer of porcine EPCs in the inferior vena cava (IVC) of pigs, we tested the improved biocompatibility of the cell-seeded surface in the prothrombotic environment of a large animal model and compared it to unmodified bare metal surfaces5,6,7 (Figure 1). This method can be used to endothelialize devices within minutes of implantation and test their antithrombotic function in vivo. 
Peripheral blood was obtained from 50 kg Yorkshire swine and its mononuclear cell fraction cultured to isolate EPCs4,8. Ti tubes (9.4 mm ID) were pre-cut into three 4.5 cm longitudinal sections and reassembled with heat-shrink tubing. A seeding device was built, which allows for slow rotation of the Ti tubes. 
We performed a laparotomy on the pigs and externalized the intestine and urinary bladder. Sharp and blunt dissection was used to skeletonize the IVC from its bifurcation distal to the right renal artery proximal. The Ti tubes were then filled with fluorescently-labeled autologous EPC suspension and rotated at 10 RPH x 30 min to achieve uniform cell-coating9. After administration of 100 USP/ kg heparin, both ends of the IVC and a lumbar vein were clamped. A 4 cm veinotomy was performed and the device inserted and filled with phosphate-buffered saline. As the veinotomy was closed with a 4-0 Prolene running suture, one clamp was removed to de-air the IVC. At the end of the procedure, the fascia was approximated with 0-PDS (polydioxanone suture), the subcutaneous space closed with 2-0 Vicryl and the skin stapled closed. 
After 3 - 21 days, pigs were euthanized, the device explanted en-block and fixed. The Ti tubes were disassembled and the inner surfaces imaged with a fluorescent microscope.
We found that the bare metal Ti tubes fully occluded whereas the EPC-seeded tubes remained patent. Further, we were able to demonstrate a confluent layer of EPCs on the inside blood-contacting surface.
Concluding, our technology can be used to endothelialize Ti tubes within minutes of implantation with autologous EPCs to prevent thrombosis of the device. Our surgical method allows for testing the improved biocompatibility of such modified devices with minimal blood loss and EPC-seeded surface disruption.

A method for seeding titanium blood-contacting biomaterials with autologous cells and testing biocompatibility is described. This method uses endothelial progenitor cells and titanium tubes, seeded within minutes of surgical implantation into porcine venae cavae. This technique is adaptable to many other implantable biomedical devices.

Autologous 내피 전구 세포 - 심는 기술 및 대형 동물 모델에서 순환기 장치에 대한 Biocompatibility 테스트

Implantable cardiovascular devices are manufactured from artificial materials (e.g. titanium (Ti), expanded polytetrafluoroethylene), which pose the risk ...

연구

생체공학

Orthotopic Aortic Transplantation in Mice for the Study of Vascular Disease

Vascular procedures involving anastomoses in the mouse are generally thought to be difficult and highly dependent on the skill of the individual surgeon. This is largely true, but there are a number of important principles that can reduce the difficulty of these procedures and enhance reproducibility. Orthotopic aortic transplantation is an excellent procedure in which to learn these principles because it involves only two end-to-end anastomoses, but requires good suturing technique and handling of the vessels for consistent success. This procedure begins with the procurement of a length of abdominal aorta from a donor animal, followed by division of the native aorta in the recipient. The procured aorta is then placed between the divided ends of the recipient aorta and sutured into place using end-to-end anastomoses. To accomplish this objective successfully requires a high degree of concentration, good tools, a steady hand, and an appreciation of how easily the vasculature of a mouse can be damaged, resulting in thrombosis. Learning these important principles is what occupies most of the beginner's time when learning microsurgery in small rodents. Throughout this protocol, we refer to these important points. This model can be used to study vascular disease in a variety of different experimental systems1-8. In the context shown here, it is most often used for the study of post-transplant vascular disease, a common long-term complication of solid organ transplantation in which intimal hyperplasia occurs within the allograft. The primary advantage of the model is that it facilitates quantitative morphometric analyses and the transplanted vessel lies contiguous to the endogenous vessel, which can serve as an additional control9. The technique shown here is most often used for mice weighing 18-25 grams. We have accumulated most of our experience using the C57BL/6J, BALB/cJ, and C3H/HeJ strains.

We describe a technique in which a section of the abdominal aorta from a mouse is transplanted orthotopically to just below the renal arteries in an allogeneic or syngeneic recipient. This technique can be useful in studies in which transplantation of large arteries of uniform size is deemed advantageous.

혈관 질병의 연구에 대한 마우스의 Orthotopic 대동맥 이식

Vascular procedures involving anastomoses in the mouse are generally thought to be difficult and highly dependent on the skill of the individual surgeon. ...

의학

A Modified Heterotopic Swine Hind Limb Transplant Model for Translational Vascularized Composite Allotransplantation (VCA) Research

Vascularized Composite Allotransplantation (VCA) such as hand and face transplants represent a viable treatment option for complex musculoskeletal trauma and devastating tissue loss. Despite favorable and highly encouraging early and intermediate functional outcomes, rejection of the highly immunogenic skin component of a VCA and potential adverse effects of chronic multi-drug immunosuppression continue to hamper widespread clinical application of VCA. Therefore, research in this novel field needs to focus on translational studies related to unique immunologic features of VCA and to develop novel immunomodulatory strategies for immunomodulation and tolerance induction following VCA without the need for long term immunosuppression.
This article describes a reliable and reproducible translational large animal model of VCA that is comprised of an osteomyocutaneous flap in a MHC-defined swine heterotopic hind limb allotransplantation. Briefly, a well-vascularized skin paddle is identified in the anteromedial thigh region using near infrared laser angiography. The underlying muscles, knee joint, distal femur, and proximal tibia are harvested on a femoral vascular pedicle. This allograft can be considered both a VCA and a vascularized bone marrow transplant with its unique immune privileged features. The graft is transplanted to a subcutaneous abdominal pocket in the recipient animal with a skin component exteriorized to the dorsolateral region for immune monitoring.
Three surgical teams work simultaneously in a well-coordinated manner to reduce anesthesia and ischemia times, thereby improving efficiency of this model and reducing potential confounders in experimental protocols. This model serves as the groundwork for future therapeutic strategies aimed at reducing and potentially eliminating the need for chronic multi-drug immunosuppression in VCA.

A Modified Heterotopic Swine Hind Limb Transplant Model for Translational Vascularized Composite Allotransplantation VCA Research

Vascularized Composite Allotransplantations (VCA) have become a clinical reality. However, broad clinical application of VCA is limited by chronic multi-drug immunosuppression. The authors present a reliable and reproducible large animal model to translate novel immunomodulatory strategies that can minimize or potentially eliminate the need of immunosuppression in VCA.

번역 상 혈관을 조성한 복합 동종 이식 (VCA) 연구를위한 수정 된 이소성 돼지 뒷다리 이식 모델

Vascularized Composite Allotransplantation (VCA) such as hand and face transplants represent a viable treatment option for complex musculoskeletal trauma ...

Computed Tomography and Optical Imaging of Osteogenesis-angiogenesis Coupling to Assess Integration of Cranial Bone Autografts and Allografts

A major parameter determining the success of a bone-grafting procedure is vascularization of the area surrounding the graft. We hypothesized that implantation of a bone autograft would induce greater bone regeneration by abundant blood vessel formation. To investigate the effect of the graft on neovascularization at the defect site, we developed a micro&#8211;computed tomography (&#181;CT) approach to characterize newly forming blood vessels, which involves systemic perfusion of the animal with a polymerizing contrast agent. This method enables detailed vascular analysis of an organ in its entirety. Additionally, blood perfusion was assessed using fluorescence imaging (FLI) of a blood-borne fluorescent agent. Bone formation was quantified by FLI using a hydroxyapatite-targeted probe and &#181;CT analysis. Stem cell recruitment was monitored by bioluminescence imaging (BLI) of transgenic mice that express luciferase under the control of the osteocalcin promoter. Here we describe and demonstrate preparation of the allograft, calvarial defect surgery, &#181;CT scanning protocols for the neovascularization study and bone formation analysis (including the in vivo perfusion of contrast agent), and the protocol for data analysis.
The 3D high-resolution analysis of vasculature demonstrated significantly greater angiogenesis in animals with implanted autografts, especially with respect to arteriole formation. Accordingly, blood perfusion was significantly higher in the autograft group by the 7th day after surgery. We observed superior bone mineralization and measured greater bone formation in animals that received autografts. Autograft implantation induced resident stem cell recruitment to the graft-host bone suture, where the cells differentiated into bone-forming cells between the 7th and 10th postoperative day. This finding means that enhanced bone formation may be attributed to the augmented vascular feeding that characterizes autograft implantation. The methods depicted may serve as an optimal tool to study bone regeneration in terms of tightly bounded bone formation and neovascularization.

Implantation of autologous and allogeneic bone grafts constitute accepted approaches to treat major craniofacial bone loss. Yet the effect of graft composition on the interplay among neovascularization, cell differentiation and bone formation is unclear. We present a multimodal imaging protocol aimed to elucidate the angiogenesis-osteogenesis interdependence at the graft proximity.

컴퓨터 단층 촬영 및 골 형성 - 혈관 신생 커플 링의 광학 이미징 두개골 뼈자가 이식과 동종 이식 통합을 평가하기 위해

A major parameter determining the success of a bone-grafting procedure is vascularization of the area surrounding the graft. We hypothesized that ...

Implantation of Inferior Vena Cava Interposition Graft in Mouse Model

Biodegradable scaffolds seeded with bone marrow mononuclear cells (BMCs) are often used for reconstructive surgery to treat congenital cardiac anomalies. The long-term clinical results showed excellent patency rates, however, with significant incidence of stenosis. To investigate the cellular and molecular mechanisms of vascular neotissue formation and prevent stenosis development in tissue engineered vascular grafts (TEVGs), we developed a mouse model of the graft with approximately 1 mm internal diameter. First, the TEVGs were assembled from biodegradable tubular scaffolds fabricated from a polyglycolic acid nonwoven felt mesh coated with &#949;-caprolactone and L-lactide copolymer. The scaffolds were then placed in a lyophilizer, vacuumed for 24 hr, and stored in a desiccator until cell seeding. Second, bone marrow was collected from donor mice and mononuclear cells were isolated by density gradient centrifugation. Third, approximately one million cells were seeded on a scaffold and incubated O/N. Finally, the seeded scaffolds were then implanted as infrarenal vena cava interposition grafts in C57BL/6 mice. The implanted grafts demonstrated excellent patency (&#62;90%) without evidence of thromboembolic complications or aneurysmal formation. This murine model will aid us in understanding and quantifying the cellular and molecular mechanisms of neotissue formation in the TEVG.

To improve our knowledge of cellular and molecular neotissue formation, a murine model of the TEVG was recently developed. The grafts were implanted as infrarenal vena cava interposition grafts in C57BL/6 mice. This model achieves similar results to those achieved in our clinical investigation, but over a far shortened time-course.

마우스 모델에서 하대 정맥 끼어 이식의 주입

Biodegradable scaffolds seeded with bone marrow mononuclear cells (BMCs) are often used for reconstructive surgery to treat congenital cardiac anomalies. ...

The Arteriovenous (AV) Loop in a Small Animal Model to Study Angiogenesis and Vascularized Tissue Engineering

A functional blood vessel network is a prerequisite for the survival and growth of almost all tissues and organs in the human body. Moreover, in pathological situations such as cancer, vascularization plays a leading role in disease progression. Consequently, there is a strong need for a standardized and well-characterized in vivo model in order to elucidate the mechanisms of neovascularization and develop different vascularization approaches for tissue engineering and regenerative medicine.
We describe a microsurgical approach for a small animal model for induction of a vascular axis consisting of a vein and artery that are anastomosed to an arteriovenous (AV) loop. The AV loop is transferred to an enclosed implantation chamber to create an isolated microenvironment in vivo, which is connected to the living organism only by means of the vascular axis. Using 3D imaging (MRI, micro-CT) and immunohistology, the growing vasculature can be visualized over time. By implanting different cells, growth factors and matrices, their function in blood vessel network formation can be analyzed without any disturbing influences from the surroundings in a well controllable environment. 
In addition to angiogenesis and antiangiogenesis studies, the AV loop model is also perfectly suited for engineering vascularized tissues. After a certain prevascularization time, the generated tissues can be transplanted into the defect site and microsurgically connected to the local vessels, thereby ensuring immediate blood supply and integration of the engineered tissue. By varying the matrices, cells, growth factors and chamber architecture, it is possible to generate various tissues, which can then be tailored to the individual patient's needs.

The Arteriovenous AV Loop in a Small Animal Model to Study Angiogenesis and Vascularized Tissue Engineering

We describe a microsurgical approach for the generation of an arteriovenous (AV) loop as a model for analyzing vascularization in vivo in an isolated and well-characterized environment. This model is not only useful for the investigation of angiogenesis, but is also optimally suited for engineering axially vascularized and transplantable tissues.

소형 동물 모델에서의 동정맥 (AV) 루프는 혈관 신생과 혈관을 조성한 조직 공학을 공부하기

A functional blood vessel network is a prerequisite for the survival and growth of almost all tissues and organs in the human body. Moreover, in ...

Heterotopic Renal Autotransplantation in a Porcine Model: A Step-by-Step Protocol

Kidney transplantation is the treatment of choice for patients suffering from end-stage renal disease. It offers better life expectancy and higher quality of life when compared to dialysis. Although the last few decades have seen major improvements in patient outcomes following kidney transplantation, the increasing shortage of available organs represents a severe problem worldwide. To expand the donor pool, marginal kidney grafts recovered from extended criteria donors (ECD) or donated after circulatory death (DCD) are now accepted for transplantation. To further improve the postoperative outcome of these marginal grafts, research must focus on new therapeutic approaches such as alternative preservation techniques, immunomodulation, gene transfer, and stem cell administration.
Experimental studies in animal models are the final step before newly developed techniques can be translated into clinical practice. Porcine kidney transplantation is an excellent model of human transplantation and allows investigation of novel approaches. The major advantage of the porcine model is its anatomical and physiological similarity to the human body, which facilitates the rapid translation of new findings to clinical trials. This article offers a surgical step-by-step protocol for an autotransplantation model and highlights key factors to ensure experimental success. Adequate pre- and postoperative housing, attentive anesthesia, and consistent surgical techniques result in favorable postoperative outcomes. Resection of the contralateral native kidney provides the opportunity to assess post-transplant graft function. The placement of venous and urinary catheters and the use of metabolic cages allow further detailed evaluation. For long-term follow-up studies and investigation of alternative graft preservation techniques, autotransplantation models are superior to allotransplantation models, as they avoid the confounding bias posed by rejection and immunosuppressive medication.

Porcine models of organ transplantation provide an important platform to study mechanisms of organ preservation. This article describes a heterotopic porcine renal autotransplantation model, which allows investigating new approaches to improve the outcome of transplantation using marginal kidney grafts.

돼지 모델에서 이소성 신장자가 이식 : 단계별 프로토콜

Kidney transplantation is the treatment of choice for patients suffering from end-stage renal disease. It offers better life expectancy and higher quality ...

A Reliable Porcine Fascio-Cutaneous Flap Model for Vascularized Composite Allografts Bioengineering Studies

Vascularized Composite Allografts (VCA) such as hand, face, or penile transplant represents the cutting-edge treatment for devastating skin defects, failed by the first steps of the reconstructive ladder. Despite promising aesthetic and functional outcomes, the main limiting factor remains the need for a drastically applied lifelong immunosuppression and its well-known medical risks, preventing broader indications. Therefore, lifting the immune barrier in VCA is essential to tip the ethical scale and improve patients&#39; quality of life using the most advanced surgical techniques. De novo creation of a patient-specific graft is the upcoming breakthrough in reconstructive transplantation. Using tissue engineering techniques, VCAs can be freed of donor cells and customized for the recipient through perfusion-decellularization-recellularization. To develop these new technologies, a large-scale animal VCA model is necessary. Hence, swine fascio-cutaneous flaps, composed of skin, fat, fascia, and vessels, represent an ideal model for preliminary studies in VCA. Nevertheless, most VCA models described in the literature include muscle and bone. This work reports&#160;a reliable and reproducible technique for saphenous fascio-cutaneous flap harvest in swine, a practical tool for various research fields, especially vascularized composite tissue engineering.

The present protocol describes the porcine fascio-cutaneous flap model and its potential use in vascularized composite tissue research.

혈관화된 복합 동종이식편 생명공학 연구를 위한 신뢰할 수 있는 돼지 근막-피부 피판 모델

Vascularized Composite Allografts (VCA) such as hand, face, or penile transplant represents the cutting-edge treatment for devastating skin defects, ...

Modified Heterotopic Hindlimb Osteomyocutaneous Flap Model in the Rat for Translational Vascularized Composite Allotransplantation Research

Vascularized composite allotransplantation (VCA) is a relatively new field in the reconstructive surgery. Clinical achievements in human VCA include hand and face transplants and, more recently, abdominal wall, uterus, and urogenital transplants. Functional outcomes have exceeded initial expectations, and most recipients enjoy an improved quality of life. However, as clinical experience accumulates, chronic rejection and complications from the immunosuppression must be addressed. In many cases where grafts have failed, the causative pathology has been ischemic vasculopathy. <span style="font-size: 11pt; line-height: 115%; font-family: Arial, sans-serif; color: rgb(41, 43, 49); background-image: initial; background-position: initial; background-size: initial; background-repeat: initial; background-attachment: initial; background-origin: initial; background-clip: initial;">The biological mechanisms of the acute and chronic rejection associated with VCA, especially ischemic vasculopathy, are important areas of research. However, due to the very small number of VCA patients, the evaluation of proposed mechanisms is better addressed in an experimental model. Multiple groups have used animal models to address some of the relevant unsolved questions in VCA rejection and vasculopathy. Several model designs involving a variety of species are described in the literature. Here we present a reproducible model of VCA heterotopic hindlimb osteomyocutaneous flap in the rat that can be utilized for translational VCA research. This model allows for the serial evaluation of the graft, including biopsies and different imaging modalities, while maintaining a low level of morbidity.

Vascularized composite allograft offers life-altering benefits to transplant recipients, but the biological causes of graft rejection and vasculopathy remain poorly understood. The rodent surgical model presented here offers a reproducible, clinically relevant model of transplantation, allowing researchers to evaluate rejection events and potential therapeutic strategies to prevent their occurrence.

변형 된 이종 성 복합체 동종 요법 연구에 대 한 쥐에서 변성 이성애 자 골 진 피부 플랩 모델

Vascularized composite allotransplantation (VCA) is a relatively new field in the reconstructive surgery. Clinical achievements in human VCA include hand ...

A Porcine Heterotopic Heart Transplantation Protocol for Delivery of Therapeutics to a Cardiac Allograft

Cardiac transplantation is the gold standard treatment for end-stage heart failure. However, it remains limited by the number of available donor hearts and complications such as primary graft dysfunction and graft rejection. The recent clinical use of an ex vivo perfusion device in cardiac transplantation introduces a unique opportunity for treating cardiac allografts with therapeutic interventions to improve function and avoid deleterious recipient responses. Establishing a translational, large-animal model for therapeutic delivery to the entire allograft is essential for testing novel therapeutic approaches in cardiac transplantation. The porcine, heterotopic heart transplantation model in the intraabdominal position serves as an excellent model for assessing the effects of novel interventions and the immunopathology of graft rejection. This model additionally offers long-term survival for the pig, given that the graft is not required to maintain the recipient's circulation. The aim of this protocol is to provide a reproducible and robust approach for achieving ex vivo delivery of a therapeutic to the entire cardiac allograft prior to transplantation and provide technical details to perform a survival heterotopic transplant of the ex vivo perfused heart.

We present a protocol for utilizing a normothermic ex vivo sanguinous perfusion system for the delivery of therapeutics to an entire cardiac allograft in a porcine heterotopic heart transplant model.

심장 동종이식편에 치료제를 전달하기 위한 돼지 이질성 심장 이식 프로토콜

Cardiac transplantation is the gold standard treatment for end-stage heart failure. However, it remains limited by the number of available donor hearts ...