Name: neurodevelopmental reflex testing in neonatal rat pups
Uploaded: 2017-04-24T14:00:00.000+00:00
Duration: 9 min 35 s
Description: Watch this Scientific Journal Video about Neurodevelopmental Reflex Testing in Neonatal Rat Pups at JoVE.com

저자는 NeuroDevNet (우수 국가 센터)를 포함하는 우리의 자금 조달 기관을 감사드립니다의 알바 재단, 여성과 어린이 건강 연구소, 알버타 대학.

앨버타 대학의 동물 관리 및 사용위원회, 건강 과학은 모든 동물 연구를 승인했다. 참고 :이 프로토콜은 다른 종과 균주에 적용 할 수 있지만,이 프로토콜은 긴 에반스 쥐를 대상으로합니다. 이러한 래트 다른 설치류 균주에 비해 우수한 성능 모터 시력을 보여왔다. 다음 타이밍 임신,식이 보충제, 모체 염증 및 신경 발달 반사 25, 26 프로토콜이다. 1. 실험 동물 <ol><li> 쥐 동물 주택 시설에 도착하면, 그들의 새로운 환경에 적응 할 수 있도록 하루 이틀을위한 상호 작용 삼가. 적응 후 약 5 일 동안 매일 쥐를 처리하지, 또는 쥐 때 더 이상 스트레스의 조짐을 보이고. 인간에 의한 스트레스 테스트 결과와 르를 변경할 수 있습니다임신 손실 광고. </li><li> 쥐가 익숙해지면, 번식이 시작됩니다. (오전 8시 - 오후 3시) 두 여성 및 2 층 사육 케이지 한 수컷 쥐 (H = 38cm, 1,800cm 2 면적) 밤새 놓는다. 이 케이지는 스트레스와 혼잡을 방지합니다. 아침에 전달 피펫을 사용하여, 식염수의 약 0.25 mL를 암쥐의 질을 세척. 미세 원심 튜브에 솔루션을 전송합니다. </li><li> 다시 각각 기존의 새장에 두 여성과 남성을 놓습니다. </li><li> 래트 발생한 정자 여부가 존재하는 발정주기의 어느 단계를 결정하기 위해 광학 현미경 (100 배) 아래의 섹션 1.2에서 수집 된 용액을보기. 정자가있는 경우, 배아 일 (E1) (그림 1)과 날짜를 기록합니다. 임신을하면 여성에게 E14에 자신의 새장을 제공합니다. 참고 : 질 도말 검사에서 세포는 분명, 따라서 낮은 조명 설정을 사용합니다. 콘덴서가 가장 낮은 설정으로 조정되어 있는지 확인합니다. 광고단지 휘도 제어 광을 어둡게한다. 밝기 전화를 사용할 수있는 경우, 1로 설정합니다. </li></ol> 2.식이 보충제 참고 :이 프로토콜은 임신 마지막 주 동안식이 브로콜리 새싹 소비의 치료 효과를 평가하기위한 것입니다. 우 등의 알에 따른 콩나물 성장. (27). <ol><li> 3 시간 - 2 브로콜리 새싹 씨앗을 만끽 해보세요. 조리대 씨 sprouter 상자에 씨앗을 확산하고 발아 따뜻한 표면에 설정합니다. </li><li> (오전 9시 - 8)과 한 번 오후에 (3-4 PM) 한 번 오전에, 하루에 두 번 씨앗을 물. </li><li> 5 일째에, 일에 대한 창으로 콩나물을 배치 (콩나물은 두 잎 각을 가져야 하루 위에 녹색이 될 것이다). </li><li> 하루의 끝에서, 부드럽게 체로 상자 밖으로 브로콜리 콩나물을 당겨 콩나물을 수확하고 건조 평평한 표면에 누워. </li><li> 콩나물이 완전히 건조되면, w밀봉 된 플라스틱 백 아웃 eigh 200 mg의 장소. </li><li> E14에서부터 PD21 (새끼가되는 이유 일)까지 매일 건조 브로콜리 콩나물 각각 200 mg의 임신 한 쥐 먹이. </li></ol> 3. 염증 <ol><li> 염증을 유발하고 자손에 흰색 물질 부상을 재현, 지질 다당류 (LPS) E19과 E20의 모든 12 시간 임신 쥐를 주입합니다. 주사의 날, 주거 시설에서 연구실에 새장을 가지고. 임신 한 쥐에 적응 적어도 1 시간 동안 침착이 될 수 있습니다. 쥐가 영구적으로 전신 또는 신장 손상의 임상 적 징후가 표시되면, 즉시 안락사와 연구에서 제거됩니다. </li><li> 임신 댐의 무게를. </li><li> 식염수를 100 μL의 : LPS 200 ㎍ / kg (B8 혈청 0127)을 녹인다. ½ 30 G 바늘을 구비 한 1 ml 주사기로 상기 용액을 대기음. <ol><li> 각 주입에 대한 새 바늘을 사용합니다. 이 솔루션은 불편을 최소화하기 위해 몇 분 동안 예열합니다. </리&gt; </ol></li><li> 시간을 기록하고 복강 임신 댐을 주입. 양쪽 번갈아 주사는 동일한 분포를 보장한다. 참고 : Machholz 등. 적절한 억제 및 주입 절차를 설명한다. (28) </li></ol> 4. 발달 반사 테스트 <ol><li> PD1 (출생 일)에, 댐 및 기록 출생 무게에서 새끼를 제거합니다. 다시 각각의 케이지에 새끼를 놓고 PD3 때까지 동물 시설로 이동합니다. 이 댐과 강아지 사이의 산모 결합을 보장합니다. <ol><li> 신뢰성 평가를위한 반사 테스트를 기록합니다. 이 프레임 단위의 분석 (1 / 1,000 S)의 최대 셔터 속도 오도록 비디오 카메라를 조정한다. 이 위 또는 쥐 강아지 각 반사에 사용되는 모든 재료 바로 옆에 있도록 비디오 카메라를 배치합니다. 예컨대, 사지에 배치하기위한, 승강 및 뒷다리의 배치가 포착되도록 래트 새끼 옆에 카메라를 배치했다. </li><li> 가속 바로 잡기 위해, 공중에서 오른쪽으로 강아지의 능력을 기록하기 위해 쥐의 강아지 및 방문 패드 위에 카메라를 배치합니다. </li></ol></li><li> 실험이 끝날 때까지 매일 기록의 무게. PD3에서 신경 발달 반사 테스트 (그림 4)를 시작합니다. 환경에 적응 수 있도록 시험 전에 1 시간의 최소 조용한 방에 새장을 이동합니다. </li><li> 쥐가 야행성으로 매일 일정한 시간에 신경 발달 반사 테스트를 수행합니다. 예를 들어 9 시까 지 테스트 - 매일 정오. 36.5 ° C의 안정된 체온을 유지하기 위해, 직접 항상 가열 램프 아래 또는 열 패드 새끼 유지; 이 시대의 쥐 새끼 쉽게 열을 잃게됩니다. 직장 온도 프로브로 측정한다. 효율적으로 수행하는 경우가 댐과 충분히 쓰레기에서 제거되지 않기 때문에, 새끼의 체온은 변경되지 않습니다. 참고 : 37 ° C를 초과하지 않도록하는 가열 램프의 온도를 모니터링. <ol&gt; <li> 긍정적 인 반응이 관찰 될 때까지 매일 각 반사의 점수를 기록합니다. 강아지가 이틀 연속에서 작업을 수행 할 수있을 때 긍정적 인 반사 반응이 발생합니다. 긍정 응답의 첫번째 발생의 날짜는 정량화에 사용된다. 더 이상의 테스트는 긍정적 인 반응 다음 필요하지 않습니다. 따라서, 각 반사적 종료 날짜는 가변적이다. </li></ol></li><li> 앞다리 파악하는 <ol><li> PD3 일부터의 앞다리 파악 반사 테스트를 실시합니다. 각 앞발의 손바닥에 대해 평활로드 놓고 수동 가벼운 압력을 적용한다. 가벼운 압력이 약간 이루어지는 것이 접촉을 보장하기 위해 앞발을 치환해야하며, 새끼에는로드를 느낄 수있다. 파악하는는로드 주변의 모든 자리의 굴곡으로 나타납니다. 두 앞발은 연속 이틀간로드를 파악할 때 반사의 성공적인 획득은 발생한다. </li><li> 앞다리 파악 점수 : 더 욕심 0 성공 왼쪽으로 한 앞발로 파지 (또는 R 1ight의 앞발은) 여기에 지정 될 수 있습니다 두 앞발로 성공을 잡는 2 </li></ol></li><li> 뒷다리 파악하는 <ol><li> PD3에 시작하는 후지 파악 반사 테스트를 실시합니다. 각 뒷발의 발바닥에 대해 평활로드 놓고 수동 가벼운 압력을 적용한다. 가벼운 압력이 약간 이루어지는 것이 접촉을 보장하기 위해 뒷발을 치환해야하며, 새끼에는로드를 느낄 수있다. 로드의 성공 욕심은로드 주변의 숫자의 굴곡으로 나타납니다. hindpaws 모두가 연속 이틀간로드를 파악할 때 반사의 성공적인 획득은 발생한다. </li><li> 사지 이해 점수 : 더 욕심 0 1 일 뒷발로 잡고 성공을 위해 (왼쪽 또는 오른쪽 뒷발은 여기에 지정 될 수 있습니다) 모두 hindpaws에 의해 성공을 잡는 2 </li></ol></li><li> 바로 잡고 <ol><li> PD3에 시작하는 바로 잡고 반사 테스트를 시작합니다. 네 발 수직으로 단단히, 앙와위에서 강아지를 누르고 있습니다. 오 가자강아지 f를 바로하면 타이머를 시작합니다. 강아지가 / 플립 네 발에 롤오버 할 때 바로 잡고 달성되고, 각각의 발 신체에 수직이다. 각 강아지이 목표를 달성하기 위해 15 s의 최대 값을 지정합니다. </li><li> 복원 정 점수 : 0 (최대 할당 된 시간 또는 15 초) 뒷면에 누워에 대한 1 측면에 거짓말 (왼쪽 또는 오른쪽은 여기에 지정 될 수 있습니다) 또는 (최대 할당 된 시간 또는 15 초) 잘못된 자세 오른쪽에 있지만에서 강아지의 능력 성공적인 복원 정 적절한 자세 2 </li></ol></li><li> 뒷다리 배치 <ol><li> PD4 일부터 반사 테스트를 놓기 사지를 시작합니다. 몸통에 의해, 공중에 수직으로 강아지를 잡으십시오. 부드럽게 스트로크 무딘 표면과 뒷발의 배부 (같은 테이블의 가장자리). 래트 새끼가 다운 그 표면에 배치 뒷다리이어서 자극 뒷다리를 철회 할 때 정확한 배치 반사이다. </li><li> 사지 PL 점수반사를 acing : 어떤 성공 0 1 일 뒷발의 배치에 대 한 (왼쪽 또는 오른쪽 뒷발은 여기에 지정 될 수 있습니다) 모두 hindpaws 성공적인 사지 배치에 대 2 </li></ol></li><li> 클리프 회피 <ol><li> PD4 일부터 절벽 회피 테스트를 시작합니다. 강아지의 앞발과 주둥이가 낭떠러지이되도록 평탄면의 에지에서 래트 새끼를 놓는다. 정확한 결과는 래트 새끼 절벽 모서리 쉬게 보호 반응이다. 실험자의 손이나 거품 착륙 가을에서 강아지를 잡으려고 절벽 아래에 배치됩니다. </li><li> 절벽 회피 점수 : 0 어떤 운동이나 가장자리에서 떨어지는 멀리 절벽에서 이동하는 시도를하지만 매달려 사지 1 멀리 절벽에서 성공적인 운동 2 </li></ol></li><li> 보조 <ol><li> PD6에 걸음 걸이의 평가를 시작합니다. 15 센티미터 diamet의 센터에있는 새끼어 원과 작업을 완료하기 위해 강아지에게 30 초를 할 수 있습니다. 쥐 강아지 미만 30 초에 원 내외 앞발을 움직일 수있을 때 14 성공적인 걸음 걸이가 수행됩니다. </li><li> 이 원의 외부 이동 래트 새끼 걸리는 시간 (초)로 보용 점수. 이 원 안팎 앞발을 이동 강아지 걸리는 시간을 기록한다. 기록 30 초 강아지가 주어진 시간 내에 작업을 완료 할 수없는 경우 </li></ol></li><li> 청각 놀람 <ol><li> PD10에 청각 놀람의 분석을 시작합니다. 놀라게 응답이 존재하는지 여부를 평가하기 위해 직접 강아지 통해 시끄러운 소음 (종)을 제시한다. 강아지 멀리 사운드로부터는 &#39;쳐주는 운동을 표시 할 때 긍정적 놀라게 응답이 관측된다. </li><li> 청각 놀람 점수 : (또는) 않음 놀라게 응답 (예) 긍정적 인 놀라게 응답 </li></ol></li><li> 자세 <ol><li> PD에 대한 자세 분석 시작12.의 비 개방 미끄러운 표면 새끼, 그리고 이동할 때 강아지가 갖는 자세를 관찰한다. 미숙 자세 이동 복부 신체에 대하여 앞발과 hindpaws 모두 직교 좌표의 드래그에 의해 반사된다. 이동 몸체에 강아지가 표면으로부터 복부를 올릴 수 있고, 앞발과 hindpaws 모두 직선 뾰족하거나 평행하면 성숙한 자세를 취득한다. </li><li> 자세 점수 : 어떤 운동 0 미숙 한 자세로 이동 성숙한 자세 2 움직이면서 </li></ol></li><li> 눈 열기 <ol><li> PD12에 눈을 열어 분석을 시작합니다. 두 눈꺼풀이 열려 하루를 기록한다 : 눈에 띄는 눈 0 (1) 하나의 볼 눈용 (좌측 또는 우측 여기 지정 가능) 2 개의 볼 눈 </li></ol></li><li> 가속 바로 잡고 <ol><li> PD14 일부터 가속 바로 잡고 테스트를 시작합니다. 앙와위 30.48 C에 배치 강아지거품 착륙 위 entimeters. 강아지를 삭제하고 그 자체를 잘 할 수있는 능력을 관찰한다. 바로 잡고는 강아지가 발에 발생하기 쉬운 위치 및 토지에 인계 할 수있을 때를 말한다. </li><li> 가속 복원 정 점수 : 그 뒤에 떨어지는 0 1 옆에 떨어지는 위해 (왼쪽 또는 오른쪽은 여기에 지정 될 수 있습니다) 그것의 발에 착륙 2 </li></ol></li></ol> 참고 : 반사의 정량화의 종류는 조사관의 질문에 따라 사용할 수 있습니다. 반사의 정량화는 초기 반사의 관찰, 리플렉스의 실종까지 등장까지의 첫날,이 작업을 성공적으로 수행하는 데 걸리는 시간, 성능의 속도 및 / 또는 시간 경과에 따른 성능의 향상으로 수행 할 수 있습니다. ㄴ 13, 14, 29, 30, 31urrent 연구는, 외관의 첫 날은 점수를 사용 하였다. 다산 모델을 사용하는 경우, 같은 쓰레기에서 새끼는 일반적으로 자궁과 산후 환경, 영양 가용성, 그들의 유전자 구조와 유사하게 동작합니다. (32) 따라서, 하나의 새끼 인해 쓰레기 바이어스에 N = 1로 설명 될 수 없다. 각 깔짚이 없음을 나타내도록 담가 내에 조사 새끼 = 1 평균화 될 수있다. 32, 33 또는, 같은 쓰레기 내의 여러 새끼 같은 쓰레기 내 계정 새끼 고려한 혼합 효과 모델을 이용하여 분석 될 수있다. 32 33

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저자가 공개하는 게 없다.

신경 발달 플렉스 시험 명백한 병리학 분명없는 상황 의미 일 수있다 비정상적인 피질 개발과 성숙의 예측 계수이다. 신경 발달 테스트하는 동안,이 새끼가 매일 같은 시간에 조사되어 있는지 확인하는 것이 중요합니다. 쥐는 야행성 및 테스트가 하루 중 다른 시간에 수행되는 경우 때문에, 자신의 일주기 리듬 성능을 변경할 수 있습니다. 시끄러운 소리가 새끼에 스트레스를 추가 할 수있는 34 테스트는 조용한 방에 완료되어야한다. 35 새끼 반송 인간 처리 및 신규 설정 새끼에 응력을 유도 할 수 있기 때문에, 새로운 환경에 적응하기 위해 최소 1 시간을 필요로한다. 35 개 새끼도 가열 램프 아래 또는 가열 패드 위에 직접 테스트 할 필요가있다. 새끼 더 젊은 덜 수 그들은 thermoregulate 할 수 있습니다. 이러한 이유로, 36, 15 새끼 주어진다의 각각의 PD6 PD3에 복원 정 보행을 행하기위한 30 개 초. 출생시 체중이 교란 요인을 나타내는 첨가량 36은 제어 새끼는 성장이 제한되어서는 안된다. 동일한 영양 성별의 표현을 제공하기 위해 - 10 리터도 8 추려한다. 새끼가 태어난 후에는 산모의 방치를 방지하기 위해 댐과 결합을 형성하기 위해 쥐의 하루 허용하는 것이 중요하다. 새끼는 하루에 테스트해야 또는 두 개의 이전에 하루에 그들은 모양의 발병을 캡처하기 위해 반사를 획득. 실험 모델에 따라 일부 수정이 필요할 수 있습니다. 신생아 마우스는 쥐보다 훨씬 작다. 따라서 가질 수도 사용 설비의 크기는 신생 마우스의 크기를 조정할 수있다. 일부 문제 해결도 요구 될 수있다. 다른 변종과 종은 반사의 개시의 약간 다른 타이밍이있을 수 있습니다. 13이 보고서에 설명 된시기는보고 특정입니다PD3, 4, 6, 10, 12 일부터 새로운 반사를 테스트하고, (14) (도 3) 롱 에반스 새끼에 C. 실험 시험 전에 자연 반사 진행을 확립하기 위해 3 리터 - 조사관 2에 반사 테스트를 수행해야 할 수 있습니다. 데이터에 대한 통계적 분석을 수행 할 때 수집 또한, 실험자는 쓰레기 편향을 방지하기 위해 적절한 방법을 사용한다. 같은 쓰레기에서 새끼 때문에 쓰레기는 n = 1이 아닌 개별 강아지를 나타내고, 서로 동일하게 수행되는 경향이있다. 32 33 더 복잡한 행동 테스트는이 나이에 할 수 없습니다 이후 신생아 설치류 사용할 수있는 유일한 시험이기 때문에 신경 발달 반사 신경을 테스트하는 것이 중요합니다. 다른 방법은 무게와 외모 외에 초기 기간에 사용할 수 없습니다. 여기에 제공된 방법을 따라서지지 여러 연구자들에 의해 사용되어왔다특히 다른 행동 검사가 가능하지 않은 젊은 설치류에, 신경 반사 테스트의 사용합니다. 13, 14, 29, 30, 31, 37, 38이 시험은 신경 발달 장애의 예측은 뇌성 마비 같다 인간 유아 실시 테스트 리플렉스에 평행하고, 신경망의 개체 발생에 관한 추가 정보를 제공한다. 반사의 출현은 신경계의 성숙을 반영 preweaning 기간 동안 특정 시간 동안 발생한다. 이 프로토콜의 39 한계는 모든 실험 모델이 리플렉스 테스트를 실시 할 수없는 점이다. 설치류는 자신의 출생 후 개발이 반사 개발의 발병을 캡처의 장점을 제공하도록, 미성숙 태어난다. 다른 동물 모델 등어린 양으로 성숙 태어난과 반응 시험 중 일부는이 모델에 적용되지 않도록, 설치류 다르게 개발한다. 또한, 반사 테스트는인지 나 행동 이상을 직접 측정하지 않고, 어떤 관찰 된 이상이 일시적 또는 영구적인지 불확실하다. 반사 이외에, 행동 시험은 노년에 보완적인 분석을 수행 할 수있다. 비정상적인 반사 지연이 항상 신경 발달 장애로 연결되지 않기 때문에 이것은 중요하다. 2, 40 테스트는 전형적으로 설치류인지 모터 작업을 수행 할 때 PD21 (이유의 일)에 시작하여 투여된다. 이 테스트는 로타로드 (rotarod), 모리스 물 미로, 상승 된 플러스 미로에 국한되지 봇을 포함한다. 간략하게, 로타로드 (rotarod) 시험 기간 동안 또는 설치류 떨어질 때까지로드에 성능을 회전 막대에 쥐를 배치하고 기록함으로써 수행떨어져서. 이 테스트는 운동 학습 및 강도뿐만 아니라, 기저핵과 소뇌 등의 뇌 구조의 무결성을 평가합니다. 41 모리스 물 미로 유백색 물이 수영장에서 쥐를 배치하고,이 침수 플랫폼을 찾기 위해 설치류 걸리는 시간을 기록으로 구성되어 있습니다. 큐는 항상 플랫폼 위와 같은 큐와 풀의 각 사분면 위에 배치 할 수 있습니다. 이 해마 매개 공간 학습 및 기억의 allocentric 형태 VS 중심적 검사한다. 42 높은 플러스 미로 테스트 측정 두려움과 불안뿐만 아니라 고유의 탐색 행동. 설치류는 지상 상승 4 개의 팔, 묶인 두 개의 개방 및 중앙에 배치된다. 43 회피 탐색 동작은 설치류가 기록들 (각각의 암에서 소비 된 시간으로서 평가). 43이 개 추가 시험은에 대한 조사를 허용, 감각 및인지 기능을 검사모욕은 성인으로 지속하거나 과도 여부 여부를 SESS. 발달 지연을 예측하고, 추가 행동 테스트는 나중에 인생에서 장애의 존재에 대한 보완적인 증거를 제공해야합니다. 또한, 제어 응답 전에 이러한 조건에도 불구하고 등 긴장과 종의 차이, 유전 적 변화, 약물 투여, 실험에 최적화되어야한다, 설명 된 기술은 빠르고 쉽게 저렴, 마스터, 학습 및 개발에 관한 중요한 정보를 제공하고 있습니다 신경계. 그들이 성숙 행동 작업을 수행 할 수없는 경우에 그들은 나이에 새끼의 신경계의 개체 발생과 성숙을 평가 할 수있는 기회를 제공합니다. 또한, 인간 유아 발달 종종 반사 검사를 받아야하고, 따라서, 설치류 반사 번역 가능성 테스트하는 수단을 제공한다. 결론적으로, 이러한 비정상의 심사를위한 우수한 방법인지와 행동의 이상 조사로 이어질 수있는 신생아의 신경 발달.

신경 발달 반사 신경, 또는 발달 이정표는 인간의 신생아 및 유아에 사용되는 초기 평가의 하나입니다. 신경 반사 신경은 뇌간과 척수의 반사 신경을 보여 불수의 반복적 인 운동이다. 이주 수초 및 synaptogenesis 진화하는 것을 특징으로 높은 두피 네트워크의 성숙 자율 제어 및 피질 억제를 촉진한다. 중추 신경계의 진화의 정상적인 진행의 변화는 신경 발달 반사 지연이나 결석을 일으키는 비정상적인 대뇌 피질의 배선, 기능 및 수초의 결과로, 두뇌 발달을 방해 할 수 있습니다. 신경 발달 장애 위험이 높은 인간의 유아는 종종 비정상 초기 반사를 표시합니다. 이상은 나중에 반사의 인수없는 지연 장기간 존재하거나 재현로서 존재하고, 발달 장애 예측할 수있다. 1,2 따라서신경 발달 장애의 실험 모델에서 반사 지연을 모방하는 것이 중요하다. 설치류는 일반적으로 실험 모델로 사용된다. 쥐 새끼 그러므로 특정 복잡한 모터, 감각 및 / 또는인지 행동 업무를 수행하기에 너무 미성숙 태어 때 altricial, 그리고. 이와 관련하여, 그들의 발달 미숙은 모두 물리적 및 장기 개발에 관한 것이다. 쥐, thermoregulate 무능력과 털이 태어 블라인드, 그리고 걸을 수없는된다. 두뇌 발달을 참조하면, 상당한 대뇌 피질의 성숙은 출생 후 발생합니다. PD7-10 새끼가 근에 해당하는 반면 28 주 임신 - (23)의 조기 인간의 뇌와 비슷한 뇌의 성숙 수준에 도달하기 위해 제안되었다; 신생아 쥐 새끼 (PD1 출생의 날이 출생 후 하루 1로 함) 용어는 인간의 두뇌. 3, 4, 5, 6이 상관은 총 해부학 적 분석에 기반하지만, 이러한 수초 진폭 집적 뇌파 등의 뇌 성숙 다른 방법도 기재되어있다. 예를 들어, 5, 7, 올리고 덴드로 사이트가 사전 (23)로부터 현상 인간 태아 뇌에서 주된 세포이다 - 자궁 32 주, 이러한 성숙 단계는 PD1-3 설치류에 대응한다. 래트 새끼에 그 주위 PD7-10 전뇌에 나타나는 반면, 5, 8, 9, 10이 또한, 수초 형성은 인간 자궁 시작; 신생아 쥐의 뇌는 대부분 해제 유수 남아있다. 11, 12 터커 등. P1 및 쥐의 진폭 집적 뇌파 패턴은 23 주 gesta 유사 할 것으로기 태아하는 PD7 및 PD10 강아지는 30에 가깝다 반면, - 각각 32주 및 용어 유아. 7 이러한 이유로, 신생아 쥐 새끼 신생아 반사 테스트는 개체 발생 및 / 또는 두뇌 개발의 중단을 캡처하는 기회를 제공한다. 후술 반사의 전지는 WM 폭스 마우스에서 반사의 개체 발생에 대하여 초기 조사원 중 하나 WM 폭스 Lubics A. 13 (14)에 의한 연구에서 적응된다. (13 개)이 반사는 포함하지만, 걸음 걸이, 청각 놀라는, 자세, 아이 오프닝을 바로 잡고, 사지 잡고 배치, 절벽 회피에 국한되지 않습니다 바로 잡고 가속. 양쪽 앞다리와 뒷다리 파 (각각 인간의 손바닥과 발바닥 파라고 함)은 척수 반사 및 비 - 일차 운동 피질 영역에서 저해에 의해 촉진된다. 15, 16 뒷다리 배치 (발바닥 반사)는 피질 기관의 성숙을 반영한다. 16, 17, 18 벼랑 회피 (보호 반응) (미로)을 바로 잡고, 그리고 (예 코털 (vibrissae) 전정 시스템과 관련된 것과 같은) 감각 입력 및 모터 출력 사이의 통합과 관련된 통신 바로 잡는 가속. 19, 20, 21 보행은 운동을 반영한다. (14) 청각 깜짝 놀라는 핵 pontis의 caudalis을 reticularis에서 음향 자극 거대한 뉴런의 시냅스 연결을 평가합니다. 21 자세 적절한 피질 척수 - / - 피질 척수 돌기, 근육 강도 및 신경근 신경 분포를 포함한다. 22, 23 마감마 아미노 부티 산 수용체 turation 눈 개구와 연관된다. 24 반사가 훨씬 더 복잡한 네트워크를 반영하고 여기에 제공된 일반적인 상관 관계가 있다는 사실을 유지하는 것이 중요합니다. 또한, 이러한 반사 신경보다 복잡한 행동 테스트가 가능하지 않습니다 아주 어린 나이에 신경 발달을 평가하는 빠르고 쉬운 방법을 제공합니다. 본 연구의 목적은 쉽게 실험 신생아 래트 연구에 혼입 될 수 반사 신경 발달 테스트에 대한 일반적인 가이드 라인을 제공하는 것이다. 기술 된 방법론은 긴 에반스 신생아 쥐 새끼에서 수행 된 결과의 정량화는 외관의 첫 날을 기준으로했다. 테스트를 리플렉스 하루가 시작되고 사용되는 장비는 더 나은 (예 : 다른 변종과 종과 같은) 다른 실험 모델에 맞게 수정 될 수있다. 심판의 정상적인 생리 학적 진행을 구축함으로써특정 동물 모델에서 렉스 성숙, 연구자들은 외부 스트레스, 내생 조작 및 / 또는 신생아 쥐 모델에서 신경 발달에 대한 치료 적 개입의 효과를 평가할 수 있습니다. 전반적으로, 뇌 성숙 결정으로서 반사의 사용 산기 뇌 손상을 예측하는데 유리하다 이상 신경 발달 결과를 반영한다.

<table><tbody><tr><td>&lt;em&gt;Breeding&lt;/em&gt;</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Transfer pipettes</td><td>Fisherbrand</td><td>12-711-9AM</td><td>Used for vaginal flushes.</td></tr><tr><td>Sterile Saline</td><td>Hospira</td><td>7983254</td><td>The solution used to collect cells during vaginal flushes.</td></tr><tr><td>400 &amp;micro;L Microcentrifuge tubes</td><td>Fisherbrand</td><td>05-408-120</td><td>Used to hold the saline solution.</td></tr><tr><td>Light microscope</td><td>Leica</td><td>Leica ATC 2000</td><td>For observation of the saline solution. Can be any light microscope used in the lab.</td></tr><tr><td>Slides</td><td>Fisherbrand</td><td>12-552-5</td><td>The saline solution is placed on the slide. Can be any slides used in the lab.</td></tr><tr><td>Coverslips</td><td>Fisherbrand</td><td>12-545-F</td><td>To coverslip the slides. Can use any coverslips used in the lab.</td></tr><tr><td>&lt;em&gt;Dietary&amp;nbsp; Supplementation&lt;/em&gt;</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Broccoli Sprouts seeds</td><td>Mumm&#039;s Sprouting Seeds</td><td></td><td>Broccoli sprouts seeds are ordered and grown in the lab.</td></tr><tr><td>Countertop Seed Sprouter Box</td><td>Mumm&#039;s Sprouting Seeds</td><td></td><td>A box is used to germinate and grow the seeds prior to harvest.</td></tr><tr><td>250 mL beaker</td><td></td><td></td><td>The beaker is used to soak the seed. Any size beaker that would fit can be used.</td></tr><tr><td>&lt;em&gt;Maternal Inflammation&lt;/em&gt;</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Lipoplysaccharide (LPS)</td><td>Sigma</td><td>L3129</td><td>The endotoxin used to mimic maternal inflammation.</td></tr><tr><td>1 mL Syringe</td><td>BD Syringe</td><td>309659</td><td>Used to inject the pregnant rat.</td></tr><tr><td>Gauge (30 G x 1/2)</td><td>BD PrecisionGlide Needle</td><td>305106</td><td>Use the smallest needle to avoid pain and discomfort.</td></tr><tr><td>Sterile Saline (0.9% Sodium Chloride, USP)</td><td>Hospira</td><td></td><td>Saline is used to dissolve LPS.</td></tr><tr><td>&lt;em&gt;Weights&lt;/em&gt;</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Scale</td><td>Denver Instrument</td><td></td><td>For recording the weights. Can be any scale with 2 decimal places used in the lab.</td></tr><tr><td>&lt;em&gt;Neurodevelopmental Reflexes&lt;/em&gt;</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Thin blunt rod</td><td></td><td></td><td>Can be a paperclip or toothpick. This is for forelimb and hindlimb grasping.</td></tr><tr><td>Round filter paper</td><td>Whatman</td><td>1001 150</td><td>15 cm diameter paper used for gait analysis.</td></tr><tr><td>Timer</td><td>Fisher Scientific</td><td>06-662-51</td><td>For timing the time allocated to righting and gait.</td></tr><tr><td>Blunt surface</td><td></td><td></td><td>Can be an edge of a table. This is for hindlimb placing and cliff avoidance.</td></tr><tr><td>Foam landing</td><td></td><td></td><td>For when the pups perform accelerated righting.</td></tr><tr><td>Video recorder</td><td>Sony</td><td>VCT-D580RM</td><td>To record all reflexes tested. Must be able to record at 1/1,000 fps</td></tr><tr><td>Bell</td><td></td><td></td><td>For auditory startle.&amp;nbsp;</td></tr><tr><td>Heat lamp or pad</td><td></td><td></td><td>To maintain the body temperature of the pups underoing examination.</td></tr></tbody></table>

neurodevelopmental reflex testing in neonatal rat pups

신경 발달 반사 테스트는 일반적으로 신경계의 성숙을 평가하기 위해 임상에서 사용된다. 반사 신경 발달은 원시적 반사 칭한다. 그들은 민감하고 나중에 결과와 일치한다. 이상은 반사 신경 발달 장애 위험이 높은 유아의 예측 지표이다 반사의 부재, 지속성, 재현성, 또는 지연과 같이 설명한다. 인간의 유아에서 관찰 할 것 같은 뇌성 마비와 같은 신경 발달 장애의 동물 모델은 종종 비정상적인 발달 반사를 표시합니다. 설명 된 기술은 신생아 래트에서 반사 신경 발달의 다양한 평가. 신경 발달 반사 테스트는 연구자에게 같은 젊은 동물, 그렇지 않으면 사용할 수없는 시험 방법을 제공합니다. 여기에 제시된 방법론은 감지 조기 발병의 BR하는 방법으로 신생아 쥐의 발달 이정표를 검사에 수사관을 지원하는 것을 목표로아인 부상 및 / 또는 치료 적 개입의 효과를 결정. 여기에 제시된 방법은 연구자에 대한 일반적인 지침을 제공하는 것을 목표로하고있다.

이 실험 설계의 타임 라인은 그림 2에 제시되어있다. 30 개 방법 및 결과는 이전에 발표되었다. 연구의 30 목적은 브로콜리 임신 동안 콩나물과 preweaning 기간식이 보충이 LPS 자궁 내 노출에 의해 유도 된 신경 발달 지연의 자손을 보호 여부를 평가하는 것이다. 타이밍 임신 래트 식염수 (대조군, 100 μL) 또는 12 시간마다 E19 및 E20에 LPS (200 ㎍ / kg은 멸균 생리 식염수에 희석 100 μL)을 복강 내 주사를 받았다. 임의로 선택된 임신 댐은 E14에서 PD21 건조 브로콜리 콩나물 하였다 (200 mg / 일)의식이 보충제를 받았다. LPS는 자손을 보호하기 위해 잠재적 인 치료 개입으로 주어졌다 산모의 염증과 브로콜리 콩나물을 모방하는 데 사용되었다. 새끼는 (E23에 자연적으로 태어난 <em&gt; 즉, PD1) 출생 무게 (표 1)을 기록 하였다. PD3 일부터 새끼 반사 신경 발달의 배터리를 시행하고 반사 취득은 반사 등장 일 (도 3, 표 1)로 정의 하였다. 더 세부 사항에 대한 참조 문서를 참조하십시오. (30) 출생 무게 출생 무게의 분석은 주요 치료의 효과 (F (1,23) = 18.5, 0.0003)을 공개, 다이어트 (F (1,23) = 6.5, P = 0.02), 및 상호 작용 효과 (F (1,23) = 7.4, p = 0.01). LPS는 모체 염증의 반사로 식염수 새끼에 비해 훨씬 작다 (6.3 ± 0.2 g, Tukey에의 p &lt;0.001), 식염수 + 브로콜리 콩나물 새끼 (6.2 ± 0.2 g, Tukey에의 P 태어난 새끼 (5.1 ± 0.2 g)였다 &lt;0.001), 및 LPS + 브로콜리 콩나물 새끼 (6.0 ± 0.1 g, Tukey에의 p &lt;0.01). LPS + 브로콜리 콩나물 새끼의 출생 무게는 브로콜리 콩나물 성장이 제한되는 것을 LPS 새끼를 아끼지 것을 제안, 컨트롤에서 차이가 없었다. 신경 발달 반사 테스트 파악하는 반사 치료 또는 다이어트의 어떠한 효과는 앞다리와 뒷다리을 잡는 모두 관찰되지 않았다. 모든 새끼는 이러한 작업을 수행 할 수 있었다. 뒷다리 걸기 치료의 주요 효과 (F (1,23) = 6.8, p는 = 0.02) 뒷다리 배치하는 검출되었다. 염에 비해 (4.3 ± 0.1 일의 Tukey에 p &lt;0.05)과 식염수 + 브로콜리 콩나물 (4.3 ± 0.0 일의 Tukey에 p &lt;0.05), LPS 새끼 크게 (5.1 ± 0.3 지연된했다일). LPS + 브로콜리 콩나물 새끼의 성능이 LPS 새끼 다르지 않았지만, 더 이상 LPS없이 치료를 받고 그 새끼에서이 반사 작업의 개선을 제안, 컨트롤에서 차이가 없습니다. 클리프 회피 치료의 주요 효과 (F (1,25) = 6.0, p = 0.02) 벼랑 회피 분석 다음 검출되었다. LPS 새끼 (5.8 ± 0.4 일)에 비해 크게 염이 반사 (4.4 ± 0.2 일의 Tukey에 p &lt;0.05)를 획득 손상되었다. LPS + 브로콜리 콩나물 새끼 성능의 개선을 제안, 그룹의 다르게 수행하지 않았다. 보조 상당한 치료 효과 (F (1.24) = 15.1, p = 0.0007), 다이어트 (F (1.24) = 6.3, p = 0.02) 및 인터치료식이 요법과 행동 (F (1.24) = 9.5, p = 0.005) 다음 보용 분석 발견되었다. 보용의 지연 취득 염에 비해 LPS 새끼 (9.7 ± 0.4 일)에서 검출 하였다 (7.5 ± 0.3 일 Tukey에의 p &lt;0.001), 식염수 + 브로콜리 콩나물 (7.7 ± 0.3 일 Tukey에의 p &lt;0.001), 및 LPS + 브로콜리 콩나물 새끼 (7.9 ± 0.2 일의 Tukey에 p &lt;0.01). 청각 놀람 차이는 관찰되지 않았다. 바로 잡고 성 효과가 발견되었다 (F (1,43) = 16.3, p = 0.0002)는 바로 잡고 들어 따라서, 암수 새끼 별도로 조사 하였다. 차이는 남성이 감지되지 않았다. 암컷, 다이어트 (F (1,21) = 11.8, p = 0.002)의 주요 효과 및 상호 작용 효과 (F (1,21) = 15.6,p = 0.0007)이 발견되었다. LPS + 브로콜리 콩나물 새끼 (4.9 ± 0.4 일) LPS 새끼 (6.7 ± 0.6 일, Tukey에의 P &lt;0.05)에 비해 권리 이전을 할 수 있었다. 가속 바로 잡고 가속 바로 잡고 시험이 치료의 중요한 주요 효과를 밝혀 (F (1,25) = 4.51, P = 0.04). LPS (17.4 ± 0.6 일)과 LPS + 브로콜리 콩나물 새끼 (16.9 ± 0.2 일)를 수행하는 지연되었다 가속 염 (16.0 ± 0.4 일)과 식염수 + 브로콜리 콩나물 (16.4 ± 0.5 일)에 비해 바로 잡고. 자세 처리 및식이의 유의 한 상호 작용 효과 (F (1.24) = 5.8, p = 0.02)의 자세 분석 다음 검출되었다. LPS + 브로콜리 콩나물 새끼 (14.9 ± 0.4 일) LP보다 일찍 성숙한 자세를 가지고 있었다S (17.0 ± 0.4 일, Tukey에의 P &lt;0.05). 눈 열기 다이어트의 중요한 주요 효과 (F (1,23) = 4.71는 P는 0.04) 아이 오프닝에 관해서 관찰되었다. 두 식염수 + BrSp (15.9 ± 0.1 일)과 LPS + 브로콜리 콩나물 새끼 (15.4 ± 0.2 일) 염 (16.0 ± 0.2 일)과 LPS 새끼 (16.0 ± 0.1 일)에 비해 일찍 반사를 획득. 전반적으로, 임신 후기와 preweaning 기간 동안 브로콜리 새싹 소비 조사한 반사 신경의 여러에 LPS 유발 발달 지연에 대한 보호를 감당할 수 있었다. 더 세부 사항에 대한 참조 문서를 참조하십시오. (30) <img alt="그림 1" src="/files/ftp_upload/55261/55261fig1.jpg" /> 그림 1. 포질 얼룩을 sitive. 질 스미어의 예는 광학 현미경으로 10 개 배의 대물 렌즈로 이미지화. 이 슬라이드는 정자 (화살표)의 존재로 나타낸 양의 슬라이드를 나타낸다. 질 스미어를 수행 할 때 쥐의 발정주기는 하나 발정, 발정, metestrus 또는 diestrus으로 평가 될 수있다. 이것은 정확하게 높은 임신 성공률에 대한 번식 타이밍에 도움이됩니다. <img alt="그림 2" src="/files/ftp_upload/55261/55261fig2.jpg" /> 2. 실험 디자인 타임 라인을 그림. LPS의 복강 내 주사 주어진 댐 태어난 자손을 평가하기위한 실험 타임 라인. 브로콜리 콩나물식이 보충 PD21까지 E14에 시작됩니다. 댐 E19 및 E20 (노란 화살표로 표시) 매 12 시간에 주입된다. 산모 가중치 윤활제로 덮여 직장 온도 프로브 체중 규모 체온으로 기록된다. 새끼는 naturall을 탄생E23에 Y (검은 화살표로 표시됨). PD3 일부터 새끼는 여러 반응 시험을받을. PD21에, 새끼는 행동 반응을 평가하기 오픈 필드 테스트를 받아야. <img alt="그림 3" src="/files/ftp_upload/55261/55261fig3.jpg" /> 그림 신경 발달 반사 신경의 평가를위한 타임 라인] 3. 예. 반사 신경이 반사의 인수 시험 전에 몇 일을 시작해야 캡처, 따라서 개발의 여러 단계에 나타납니다. 따라서 예비 실험은 일반적인 가이드로이 날짜를 사용하여 수행해야한다,이 연구는 긴 에반스 쥐 새끼를 사용하지만 변종과 종 사이의 차이가 존재한다. 앞다리 파악, 뒷다리 파악하고 바로 잡기는 PD3, PD6에 뒷다리 배치와 절벽 회피 PD4에, 그리고 보행으로 평가된다. 청각 깜짝 놀라는 PD12에 PD10, 자세와 눈 구멍에 평가하고, PD14에 바로 잡고 가속. 발달 반사 신경 4. 이미지를 그림. 반응 시험의 이미지는 긴 에반스 쥐 새끼에 PD3에서 수행. 앞다리 파 (A), 뒷다리 파 (B)을 바로 잡고 (C) 검사 PD3에 시작된다. 절벽 회피 (D) 및 사지 배치 (E) 테스트 PD4 시작됩니다. (F)는 분석 보행는 PD6 시작됩니다. 가속 바로 잡기위한 장치 (G)에 도시된다. <a href="http://ecsource.jove.com/files/ftp_upload/55261/55261fig4large.jpg" target="_blank">이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭하십시오.</a> <table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always"><tbody><tr><td> 시험 매개 변수 </td><td> 그룹 (± SEM을 의미) </td><td></td><td></td><td></td><td> 주요 효과 (p 값) </td><td></td><td></td></tr><tr><td> 쓰레기 크기와 무게 </td><td> 식염 </td><td> 생리 식염수 + 브로콜리 콩나물 </td><td> LPS </td><td> LPS + 브로콜리 콩나물 </td><td> 치료 </td><td> 다이어트 </td><td> 상호 작용 </td></tr><tr><td> 쓰레기 크기 (새끼의 수) </td><td> 13.3 ± 1.0 </td><td> 13.1 ± 1.0 </td><td> 10.3 ± 1.5 </td><td> 11 ± 1.2 </td><td> 0.03 </td><td> 0.8 </td><td> 0.7 </td></tr><tr><td> 출생 무게 * # D </td><td> 6.3 ± 0.2 </td><td> 6.2 ± 0.2 </td><td> 5.1 ± 0.2 </td><td> 6.0 ± 0.1 </td><td> 0.0003 </td><td> 0.02 </td><td> 0.01 </td></tr><tr><td> PD7 가중치 * D </td><td> 15.0 ± 0.5 </td><td> 15.5 ± 0.4 </td><td> 11.4 ± 1.1 </td><td> 13.6 ± 0.3</td><td> 0.0006 </td><td> 0.09 </td><td> 0.2 </td></tr><tr><td> PD21 가중치 거라고 </td><td> 50.0 ± 1.4 </td><td> 48.7 ± 1.6 </td><td> 46.4 ± 1.2 </td><td> 48.2 ± 1.4 </td><td> 0.2 </td><td> 0.9 </td><td> 0.3 </td></tr><tr><td> Neurodevelop- 정신 반사 신경 </td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td> 앞다리를 잡고 A를 </td><td> 3.0 ± 0.0 </td><td> 3.0 ± 0.0 </td><td> 3.0 ± 0.0 </td><td> 3.0 ± 0.0 </td><td> N / A </td><td> N / A </td><td> N / A </td></tr><tr><td> 뒷다리를 잡고 A를 </td><td> 3.6 ± 0.3 </td><td> 3.5 ± 0.3 </td><td> 4.6 ± 0.6 </td><td> 3.3 ± 0.1 </td><td> 0.3 </td><td> 0.1 </td><td> 0.1 </td></tr><tr><td> 뒷다리 걸기 *는 </td><td> 4.3 ± 0.1 </td><td> 4.3 ± 0.0 </td><td> 5.1 ± 0.3 </td><td> 4.5 ± 0.2 </tD&gt; <td> 0.02 </td><td> 0.07 </td><td> 0.2 </td></tr><tr><td> 절벽 회피 *는 </td><td> 4.4 ± 0.2 </td><td> 4.7 ± 0.2 </td><td> 5.8 ± 0.4 </td><td> 5.0 ± 0.4 </td><td> 0.02 </td><td> 0.4 </td><td> 0.1 </td></tr><tr><td> 보행 * # a를 </td><td> 7.5 ± 0.3 </td><td> 7.7 ± 0.3 </td><td> 9.7 ± 0.4 </td><td> 7.9 ± 0.2 </td><td> 0.0007 </td><td> 0.02 </td><td> 0.005 </td></tr><tr><td> 청각 놀라게 a를 </td><td> 11.5 ± 0.3 </td><td> 11.5 ± 0.1 </td><td> 12.0 ± 0.5 </td><td> 11.8 ± 0.2 </td><td> 0.2 </td><td> 0.8 </td><td> 0.9 </td></tr><tr><td> 자세 #A </td><td> 15.6 ± 0.5 </td><td> 15.9 ± 0.6 </td><td> 17.0 ± 0.4 </td><td> 14.9 ± 0.4 </td><td> 0.8 </td><td> 0.08 </td><td> 0.02 </td></tr><tr><td> 눈 개구부 </td><td> 16.0 ± 0.2 </td><td> 15.9 ± 0.1 </td><td> 16.0 ± 0.1 </td><td> 15.4 ± 0.2 </td><td> 0.08 </td><td> 0.04 </td><td> 0.2 </td></tr><tr><td> 가속 바로 잡고 </td><td> 16.0 ± 0.4 </td><td> 16.4 ± 0.5 </td><td> 17.4 ± 0.6 </td><td> 16.9 ± 0.2 </td><td> 0.04 </td><td> 1 </td><td> 0.3 </td></tr><tr><td> #A (여성)을 바로 잡고 </td><td> 4.9 ± 0.5 </td><td> 5.1 ± 0.4 </td><td> 6.7 ± 0.6 </td><td> 4.6 ± 0.4 </td><td> 0.09 </td><td> 0.003 </td><td> 0.0007 </td></tr><tr><td> A (수컷)를 바로 잡고 </td><td> 3.9 ± 0.2 </td><td> 4.6 ± 0.3 </td><td> 5.9 ± 1.9 </td><td> 4.2 ± 0.6 </td><td> 0.4 </td><td> 0.6 </td><td> 0.2 </td></tr><tr><td> 외관의 날 </td><td colspan="2"> LPS와 식염수 사이에서 유의 한 차이 * </td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td> 시간 활동 B 번호 하였다 </td><td colspan=LPS 및 LPS + BrSp 사이에 &quot;3&quot;&gt; # 큰 차이 </td><td></td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td> C (초) </td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td> D 그램 </td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td></tr></tbody></table> 표 1. 중량 및 신경 발달 반사 성과. 자궁 염증 및 / 또는식이 브로콜리 콩나물 보충에 노출 자손에서 얻은 결과. 여기에 제시된 30 가중치는 출생, PD7 및 PD21에서입니다. 시간 포인트는 조산, 용어, 1-2 세의 유아를 표현하기 위해 선택되었다. 데이터는 SEM ± 평균으로 표시하고 있습니다. 통계는 연구에 Tukey에의 포스트 특별 검사에 이어 양방향 ANOVA를 사용 하였다 분석.외관 A = 일 경우, b = 활동이 수행 된 시간, 및 (C)의 수 = 시간 (들)이 활성 * = 하였다 LPS 및 제어 # = LPS 및 LPS + 브로콜리 콩나물 사이에 유의 한 차이들 사이에 유의 한 차이. N = 5 - 그룹당 7 리터의 (a 쓰레기 새끼 내의 네 개의 수컷 개의 암컷의 값은 쓰레기를 나타내는 평균 하였다).

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Neurodevelopmental Reflex Testing in Neonatal Rat Pups

행동 검사는 뇌 손상 다음과 같은 결과를 결정하기위한 황금 표준이며, 유아와 아동의 발달 장애의 존재를 식별 할 수 있습니다. 신경 발달 반사 신경이 이상의 초기 지표입니다. 신생아 설치류에서 쉽게 달성 발달 반사 검사의 호스트가 개발하고 여기에 설명했다.

신생아 쥐 새끼들까지 잔치에서 신경 발달 반사 테스트

Neurodevelopmental reflex testing is commonly used in clinical practice to assess the maturation of the nervous system. Neurodevelopmental reflexes are ...

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Nanyang Technological University

Research

JoVE Journal

Behavior

19.7K 조회수.  University of Alberta.  행동 검사는 뇌 손상 다음과 같은 결과를 결정하기위한 황금 표준이며, 유아와 아동의 발달 장애의 존재를 식별 할 수 있습니다. 신경 발달 반사 신경이 이상의 초기 지표입니다. 신생아 설치류에서 쉽게 달성 발달 반사 검사의 호스트가 개발하고 여기에 설명했다. 

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Assessment and Evaluation of the High Risk Neonate: The NICU Network Neurobehavioral Scale

There has been a long-standing interest in the assessment of the neurobehavioral integrity of the newborn infant. The NICU Network Neurobehavioral Scale (NNNS) was developed as an assessment for the at-risk infant. These are infants who are at increased risk for poor developmental outcome because of insults during prenatal development, such as substance exposure or prematurity or factors such as poverty, poor nutrition or lack of prenatal care that can have adverse effects on the intrauterine environment and affect the developing fetus. The NNNS assesses the full range of infant neurobehavioral performance including neurological integrity, behavioral functioning, and signs of stress/abstinence. The NNNS is a noninvasive neonatal assessment tool with demonstrated validity as a predictor, not only of medical outcomes such as cerebral palsy diagnosis, neurological abnormalities, and diseases with risks to the brain, but also of developmental outcomes such as mental and motor functioning, behavior problems, school readiness, and IQ. The NNNS can identify infants at high risk for abnormal developmental outcome and is an important clinical tool that enables medical researchers and health practitioners to identify these infants and develop intervention programs to optimize the development of these infants as early as possible. The video shows the NNNS procedures, shows examples of normal and abnormal performance and the various clinical populations in which the exam can be used.

The NICU Network Neurobehavioral Scale (NNNS) was developed as an assessment for the at-risk infant. The purpose of this article is to describe the NNNS, provide video examples of the NNNS procedures and discuss the ways in which the exam has been used.

평가 및 고위험 신생아의 평가 : 신생아 중환자 실 네트워크 신경 행동 학적 규모

There has been a long-standing interest in the assessment of the neurobehavioral integrity of the newborn infant.  The NICU Network Neurobehavioral Scale ...

연구

행동분석학

Detecting Behavioral Deficits in Rats After Traumatic Brain Injury

With the increasing incidence of traumatic brain injury (TBI) in both civilian and military populations, TBI is now considered a chronic disease; however, few studies have investigated the long-term effects of injury in rodent models of TBI. Shown here are behavioral measures that are well-established in TBI research for times early after injury, such as two weeks, until two months. Some of these methods have previously been used at later times after injury, up to one year, but by very few laboratories. The methods demonstrated here are a short neurological assessment to test reflexes, a Beam-Balance to test balance, a Beam-Walk to test balance and motor coordination, and a working memory version of the Morris water maze that can be sensitive to deficits in reference memory. Male rats were handled and pre-trained to neurological, balance, and motor coordination tests prior to receiving parasagittal fluid percussion injury (FPI) or sham injury. Rats can be tested on the short neurological assessment (neuroscore), the beam-balance, and the Beam-Walk multiple times, while testing on the water maze can only be done once. This difference is because rats can remember the task, thus confounding the results if repeated testing is attempted in the same animal. When testing from one to three days after injury, significant differences are detected in all three non-cognitive tasks. However, differences in the Beam-Walk task were not detectable at later time points (after 3 months). Deficits were detected at 3 months in the Beam-Balance and at 6 months in the neuroscore. Deficits in working memory were detected out to 12 months after injury, and a deficit in a reference memory first appeared at 12 months. Thus, standard behavioral tests can be useful measures of persistent behavioral deficits after FPI.

The goal of the behavioral tests presented here is to detect functional deficits in rats after traumatic brain injury. Four specific tests are presented that detect deficits in behaviors to reflect the damage to specific brain areas at times extending to one year after injury.

외상 성 뇌 손상 후 쥐에서 행동 적자를 감지

With the increasing incidence of traumatic brain injury (TBI) in both civilian and military populations, TBI is now considered a chronic disease; however, ...

A Battery of Motor Tests in a Neonatal Mouse Model of Cerebral Palsy

As the sheer number of transgenic mice strains grow and rodent models of pediatric disease increase, there is an expanding need for a comprehensive, standardized battery of neonatal mouse motor tests. These tests can validate injury or disease models, determine treatment efficacy and/or assess motor behaviors in new transgenic strains. This paper presents a series of neonatal motor tests to evaluate general motor function, including ambulation, hindlimb foot angle, surface righting, negative geotaxis, front- and hindlimb suspension, grasping reflex, four limb grip strength and cliff aversion. Mice between the ages of post-natal day 2 to 14 can be used. In addition, these tests can be used for a wide range of neurological and neuromuscular pathologies, including cerebral palsy, hypoxic-ischemic encephalopathy, traumatic brain injury, spinal cord injury, neurodegenerative diseases, and neuromuscular disorders. These tests can also be used to determine the effects of pharmacological agents, as well as other types of therapeutic interventions. In this paper, motor deficits were evaluated in a novel neonatal mouse model of cerebral palsy that combines hypoxia, ischemia and inflammation. Forty-eight hours after injury, five tests out of the nine showed significant motor deficits: ambulation, hindlimb angle, hindlimb suspension, four limb grip strength, and grasping reflex. These tests revealed weakness in the hindlimbs, as well as fine motor skills such as grasping, which are similar to the motor deficits seen in human cerebral palsy patients.

Presented is a concise battery of mouse neonatal motor tests. Using these tests, neonatal motor deficits can be demonstrated in a variety of neonatal motor disorders. By having a standardized set of tests, results from different studies can be compared, allowing for better and accurate reporting between groups.

뇌성 마비의 신생아 마우스 모델에서 모터 테스트의 배터리

As the sheer number of transgenic mice strains grow and rodent models of pediatric disease increase, there is an expanding need for a comprehensive, ...

의학

The Use of Trace Eyeblink Classical Conditioning to Assess Hippocampal Dysfunction in a Rat Model of Fetal Alcohol Spectrum Disorders

Neonatal rats were administered a relatively high concentration of ethyl alcohol (11.9% v/v) during postnatal days 4-9, a time when the fetal brain undergoes rapid organizational change and is similar to accelerated brain changes that occur during the third trimester in humans. This model of fetal alcohol spectrum disorders (FASDs) produces severe brain damage, mimicking the amount and pattern of binge-drinking that occurs in some pregnant alcoholic mothers. We describe the use of trace eyeblink classical conditioning (ECC), a higher-order variant of associative learning, to assess long-term hippocampal dysfunction that is typically seen in alcohol-exposed adult offspring. At 90 days of age, rodents were surgically prepared with recording and stimulating electrodes, which measured electromyographic (EMG) blink activity from the left eyelid muscle and delivered mild shock posterior to the left eye, respectively. After a 5 day recovery period, they underwent 6 sessions of trace ECC to determine associative learning differences between alcohol-exposed and control rats. Trace ECC is one of many possible ECC procedures that can be easily modified using the same equipment and software, so that different neural systems can be assessed. ECC procedures in general, can be used as diagnostic tools for detecting neural pathology in different brain systems and different conditions that insult the brain.

Trace eyeblink classical conditioning (ECC) was used to assess hippocampal-dependent associative learning in adult rats that were administered a high concentration (11.9% v/v) of alcohol during early neonatal brain development. In general, ECC procedures are sound diagnostic tools for detecting brain dysfunction across many psychological and biomedical settings.

태아 알코올 스펙트럼 장애의 쥐 모델에서 Hippocampal 기능 장애를 평가 하기 위해 추적 Eyeblink 클래식 컨디셔닝의 사용

Neonatal rats were administered a relatively high concentration of ethyl alcohol (11.9% v/v) during postnatal days 4-9, a time when the fetal brain ...

신경과학

Recording EEG in Freely Moving Neonatal Rats Using a Novel Method

EEG is a useful method to detect electrical activity in the brain. Moreover, it is a widely used diagnostic tool for various neurological conditions, such as epilepsy and neurodegenerative disorders. However, it is technically difficult to obtain EEG recordings in neonates as it requires specialized handling and great care. Here, we present a novel method to record EEG in neonatal rat pups (P8-P15). We designed a simple and reliable electrode using computer pin loci; it can be easily implanted into the skull of a rat pup to record high-quality EEG signals in the normal and epileptic brain. Pups were given an intraperitoneal (i.p.) injection of the neurotoxin kainic acid (KA) to induce epileptic seizures. The surgical implantation performed in this procedure is less expensive than other EEG procedures for neonates. This method allows one to record high-quality and stable EEG signals for more than 1 week. Furthermore, this procedure can also be applied to adult rats and mice to study epilepsy or other neurological disorders.

Here, we introduce a novel technique designed to record electroencephalography (EEG) in freely moving neonatal epileptic pups and describe its procedures, features, and applications. This method allows one to record EEG for more than 1 week.

새로운 방법으로 자유롭게 움직이는 신생아 쥐의 뇌파 기록

EEG is a useful method to detect electrical activity in the brain. Moreover, it is a widely used diagnostic tool for various neurological conditions, such ...

Neurobehavioral Assessments in a Mouse Model of Neonatal Hypoxic-ischemic Brain Injury

We performed unilateral carotid artery occlusion on CD-1 mice to create a neonatal hypoxic-ischemic (HI) model and investigated the effects of neonatal HI brain injury by studying neurobehavioral functions in these mice compared to non-operated (i.e., normal) mice. During the study, Rice-Vannucci&#39;s method was used to induce neonatal HI brain damage in postnatal day 7-10 (P7-10) mice. The HI operation was performed on the pups by unilateral carotid artery ligation and exposure to hypoxia (8% O2 and 92% N2 for 90 min). One week after the operation, the damaged brains were evaluated with the naked eye through the semi-transparent skull and were categorized into subgroups based on the absence (&#34;no cortical injury&#34; group) or presence (&#34;cortical injury&#34; group) of cortical injury, such as a lesion in the right hemisphere. On week 6, the following neurobehavioral tests were performed to evaluate the cognitive and motor functions: passive avoidance task (PAT), ladder walking test, and grip strength test. These behavioral tests are helpful in determining the effects of neonatal HI brain injury and are used in other mouse models of neurodegenerative diseases. In this study, neonatal HI brain injury mice showed motor deficits that corresponded to right hemisphere damage. The behavioral test results are relevant to the deficits observed in human neonatal HI patients, such as cerebral palsy or neonatal stroke patients. In this study, a mouse model of neonatal HI brain injury was established and showed different degrees of motor deficits and cognitive impairment compared to non-operated mice. This work provides basic information on the HI mouse model. MRI images demonstrate the different phenotypes, separated according to the severity of brain damage by motor and cognitive tests.

We performed unilateral carotid artery occlusion on postnatal day 7-10 CD-1 mouse pups to create a neonatal hypoxic-ischemic (HI) model and investigated the effects of HI brain injury. We studied neurobehavioral functions in these mice compared to non-operated normal mice.

신생아 Hypoxic-허 혈 성 뇌 손상의 마우스 모델에서 Neurobehavioral 평가

We performed unilateral carotid artery occlusion on CD-1 mice to create a neonatal hypoxic-ischemic (HI) model and investigated the effects of neonatal HI ...

Electrophysiological Measurement of Noxious-evoked Brain Activity in Neonates Using a Flat-tip Probe Coupled to Electroencephalography

Pain is an unpleasant sensory and emotional experience. In non-verbal patients, it is very difficult to measure pain, even with pain assessment tools. Those tools are subjective or determine secondary physiological indicators which also have certain limitations particularly when exploring the effectiveness of analgesia. As cortical processing is essential for pain perception, brain activity measures may provide a useful approach to assess pain in infants. Here we present a method to assess nociception with electrophysiological brain activity recordings optimized for the use in newborn infants. To produce highly standardized and reproducible noxious stimuli we applied mechanical stimulation with a flat-tip probe, e.g., PinPrick, which is not skin-breaking and does not cause behavioral distress. The noxious-evoked potential allows the objective measurement of nociception in non-verbal patients. This method can be used in newborn infants as early as 34 weeks of gestational age. Moreover, it could be applied in different situations such as measuring the efficacy of analgesic or anesthetic drugs.

Measuring pain in non-verbal patients is a challenge. In this study we combine EEG recording with stimulation using a flat-tip probe to detect noxious-evoked brain activity in an objective manner.

Electroencephalography 결합 플랫 팁 프로브를 사용 하 여 신생아에 갖는 유해 두뇌 활동의 electrophysiological 측정

Pain is an unpleasant sensory and emotional experience. In non-verbal patients, it is very difficult to measure pain, even with pain assessment tools. ...

Objective Nociceptive Assessment in Ventilated ICU Patients: A Feasibility Study Using Pupillometry and the Nociceptive Flexion Reflex

The concept of objective nociceptive assessment and optimal pain management have gained increasing attention. Despite the known negative short- and long-term consequences of unresolved pain or excessive analgosedation, adequate nociceptive monitoring remains challenging in non-communicative, critically ill adults. In the intensive care unit (ICU), routine nociceptive evaluation is carried out by the attending nurse using the Behavior Pain Scale (BPS) in mechanically ventilated patients. This assessment is limited by medication use (e.g., neuromuscular blocking agents) and the inherent subjective character of nociceptive evaluation by third parties.
Here, we describe the use of two nociceptive reflex testing devices as tools for objective pain evaluation: the pupillary dilation reflex (PDR) and nociception flexion reflex (NFR). These measurement tools are non-invasive and well tolerated, providing clinicians and researchers with objective information regarding two different nociceptive processing pathways: (1)&#160;the pain-related autonomic reactivity&#160;and (2) the ascending component of the somatosensory system. The use of PDR and NFR measurements are currently limited to specialized pain clinics and research institutions because of impressions that these are technically demanding or time-consuming procedures, or even because of a lack of knowledge regarding their existence.
By focusing on the two abovementioned nociceptive reflex assessments, this study evaluated their feasibility as a physiological pain measurement method in daily practice. Pursuing novel technologies for evaluating the analgesia level in unconscious patients may further improve individual pharmacological treatment and patient related outcome measures. Therefore, future research must include large well-designed clinical trials in a real-life environment.

Pain assessment in anesthetized patients who cannot communicate with the outside world in any way remains challenging despite the development of innovative objective pain evaluation tools. In this project, the pupillary dilation reflex and the nociception flexion reflex are assessed in critically ill, mechanically ventilated adult patients.

The concept of objective nociceptive assessment and optimal pain management have gained increasing attention. Despite the known negative short- and ...

<meta charset="utf8"></head><body>척추 조작을 통한 뇌성마비 쥐의 발달 향상(Developmental Enhancement in Cerebral Palsy Rats via Spinal Manipulations)

Enhancing the Development and Growth of Infant Cerebral Palsy Rats Using Selective Spinal Manipulations

Cerebral palsy (CP) is a refractory pediatric disease with a high prevalence, high disability rate, and difficult treatment. A variety of treatments are currently used for CP. The treatment involves drug and non-drug therapy. Traditional Chinese medicine external therapy is a very distinctive treatment method in non-drug therapy. As one of the external therapies of traditional Chinese medicine, massage is used in treating cerebral palsy and has good efficacy, small side effects, and strong operability. As a part of TCM external therapy, selective spinal manipulation can effectively promote the growth and development of infant rats with cerebral palsy.The operation was mainly divided into four steps: first, the rubbing method was applied to the spine and both sides of the spine for 1 min. The pressing and kneading method was applied to the spine for 5 min, and the muscles on both sides of the spine for 5 min. Second, pressing and kneading the sensitive local acupoints in the spine for 2 min were performed. Thirdly, the affected limb was treated by twisting method for 1 min. Fourth, the rubbing method was applied to a midline from the forehead to the back of the brain for 1 min. This study aimed to use selective spinal manipulation to treat infant rats with cerebral palsy. The weight, Rotarod test, Foot-fault score, and growth hormone of infant rats with cerebral palsy were detected to understand the effect of selective spinal manipulation on the growth and development of infant rats with cerebral palsy. The results showed that it can promote weight gain, improve balance ability and motor function, promote growth and development of infant cerebral palsy rats, promote growth hormone secretion, and increase the temperature of sensitive parts of the back.

<meta charset="utf8"></head><body>Enhancing the Development and Growth of Infant Cerebral Palsy Rats Using Selective Spinal Manipulations

This study illustrates the effect of selective spinal manipulation on the growth and development of infant rats with cerebral palsy, emphasizing the specific procedure and standardized protocol. Body weight measurement, Rotarod test, Foot-fault score, other behavioral tests, and growth hormone detection were performed to evaluate the protocol.

Cerebral palsy (CP) is a refractory pediatric disease with a high prevalence, high disability rate, and difficult treatment. A variety of treatments are ...

신생아 쥐 새끼들까지 잔치에서 신경 발달 반사 테스트

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평가 및 고위험 신생아의 평가 : 신생아 중환자 실 네트워크 신경 행동 학적 규모

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뇌성 마비의 신생아 마우스 모델에서 모터 테스트의 배터리

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신생아 Hypoxic-허 혈 성 뇌 손상의 마우스 모델에서 Neurobehavioral 평가

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