This study was funded by the Department of Surgery University of Vermont, Danish Council for Independent Research, and by the Odense University Hospital.

동물들은 제도적 지침에 따라 University of Vermont Animal Care Facility에 보관되었습니다. 모든 동물 실험은 실험 동물의 관리와 사용을 위해 National Institutes of Health 안내서에 따라 수행되었습니다. 1. Intravesical Tube Implantation <ol><li> 외과 수술을위한 튜빙 및기구 준비 <ol><li> 삽입 용 카테터를 만들기 위해 PE-10 튜브 7cm 조각을 자릅니다. </li><li> 끝이 개방 된 화염쪽으로 천천히 전진하여 PE10 튜브의 한쪽 끝에 플레어를 만듭니다. 참고 : 플레어가 발생하자마자 튜브를 신속하게 회수하십시오. </li><li> PE10 튜브 외부의 플레어 끝에서 4.5, 5 및 5.5 cm의 아교 총에 낮은 열 설정을 사용하여 범용 핫 아교 세 방울을 바릅니다. 이것은 동물의 등에 튜브를 고정하는 데 도움이됩니다. ( 그림 1 ) </li><li> 70 %의 물에 담가서 소독하십시오.에탄올로 세척 한 후 사용하기 전에 멸균 0.9 % NaCl로 세척하십시오. 공기 방울이 시스템에 유입되지 않도록 튜브를 채우십시오. </li><li> 30 게이지 플러그를 만들어 허브에서 30 게이지 바늘을 손으로 조작하여 PE10 카테터 끝 부분을 밀봉합니다. 마지막에 뜨거운 접착제 한 방울을 바르십시오. 씰이 방수되었는지 확인하십시오. ( 그림 2 ) </li><li> 다음과 같은 미세 수술 도구를 사용하십시오 : Dumont # 7 곡선 microforceps 두 쌍, Dumont # 5 곡선 microforceps, 21G 바늘, ultrafine 직선 hemostat, 마이크로 가위, 작은 해부 가위 및 마이크로 바늘 홀더. </li><li> 절차를 시작하기 전에 모든기구를 소독하십시오. </li></ol></li><li> 동물의 준비 <ol><li> 동물을 마취 한 후 먼저 복부의 아래쪽 절반을 면도 한 다음 동물을 수그러 뜨려 면도기를 뒤집어 70 % 알코올로 베타 인으로 뒤에서 닦으십시오. 눈가에 베타 연고를 바르면 건조하지 않습니다. 다음으로, 직선형의 무딘 가위와 Dumont # 7 곡선 microforce의 쌍을 사용하여 견갑골 사이에 1.5cm 길이의 피부 절개를하고 멸균 용 커튼으로 덮인 난방 패드 (37 ° C) 위에 동물을 위로 놓습니다. </li><li> 마지막으로 복부를 알코올과 베타 딘으로 닦으십시오. </li></ol></li><li> 외과 적 시술 참고 : 확대경이 3.15X ~ 20X 인 수술 용 현미경으로 모든 수술 절차를 수행하십시오. 동물을 살균 커튼에 올려 놓은 후 살균 장갑을 착용하십시오. 전체 수술을 통해 멸균 절차를 계속 사용하십시오. <ol><li> 유도 상자에 동물을 넣고 산소 캐리어 (1 L / 분)와 2 % 흡입 isoflurane를 사용하여 마취. 동물의 머리를 노우즈 콘에 넣고 2 % 흡입 된 이소 플루 란을 산소 운반선 (1 L / 분)과 함께 사용하여 절차 전반에 걸쳐 마취를 유지하십시오. 부정을받은 후 수술을 시작하십시오.발가락 - 꼬집음 시험으로부터의 응답. </li><li> 한 쌍의 똑 바른 무딘 가위와 Dumont # 7 곡선 microforce을 사용하여 피부를 통해 1.5cm 하강, 중간 선 복부 절개를하십시오. 그 다음, 선형 방광의 돔과 상반부를 노출시키기 위해 선형 알바와 근육을 따라 근막을 통해 일치하는 절개 부를 만듭니다. Dumont # 7 곡선 마이크로 포셉 한 쌍을 사용하여 각 조직층에 상향 견인력을 적용하여 방광 손상을 피하십시오. 따뜻한 생리 식염수를 떨어 뜨려 복부 내장을 건조로부터 보호하십시오. </li><li> 동물을 옆으로 돌려 목덜미의 절개 부위에 접근하십시오. 절개를 통해 좁은 지혈을 피하로 밀어냅니다. 피하 채널은 뒤에서 시작해서 옆을 따라 계속해야합니다. </li><li> 악기의 끝이 흉곽 바닥에 도달하면 팁을 정중선과 복부쪽으로 돌리십시오 (복벽 근육을 뚫을 때 약간의 갑자기 튀어 나옵니다). 팁이 근육 층 아래의 복부 절개에 노출 될 때까지 지혈 재를 계속 전진시킵니다. ( 그림 3 ) </li><li> 지혈제로 튜브의 &quot;비 발화&quot;끝 부분을 잡고 천천히 공구를 후퇴시켜 목 뒤쪽의 절개를 통해 튜브의 끝을 당겨 빼내십시오. 튜브의 플레어 끝을 방광의 돔 바로 위에 놓 이도록 조정하십시오. </li><li> 6-0 모노 필라멘트 봉합사 (비 흡수성)를 느슨하게 묶어 방광 돔 꼭대기에 올려 놓습니다. 이 넥타이는 나중에 튜브를 방광에 고정시키는 데 사용됩니다. </li><li> 보풀이없는 천의 작은 롤을 복부와 방광 뒤에 두어 안정시키고 높이십시오. </li><li> 방광으로 PE10 카테터의 플레어 끝 부분을 삽입 할 준비를하십시오. <ol><li> 비 지배적 인 손에서 Dumont # 7 곡선 microforce로 방광의 돔을 잡고 카테터가 방광에 위치 할 때까지이 그립을 유지하십시오. </li><li> 21 게이지 바늘 사용o 돔 꼭대기에 생검을하십시오. 부드럽게 카테터가 구멍을 쉽게 통과 할 수 있도록 # 5 곡선 microforce의 폐쇄 쌍으로 cystotomy를 프로브. </li><li> 방광 돔을 비 지배적 인 손에 쥐고 PE10 카테터의 플레어 끝 부분을 방광에 넣으십시오 (방광 목을 아래로 밀어 방광이 튀어 나오지 않도록하십시오). </li><li> 방광과 튜브의 돔 주위에 6-0 모노 필라멘트 봉합사를 넥타이가 튜빙의 앞쪽에 위치하도록 묶으십시오. 인위적으로 방광 용량을 줄이려면 봉합사를 최대한 방광에 묶어야합니다. ( 그림 4 ) </li><li> 또는 다음과 같이 지갑 줄 봉합을 사용하여 카테터를 고정하십시오. 6-0 모노 필라멘트를 사용하여 방광의 돔에 느슨한 지갑 줄 봉합을하십시오. cystotomy를 수행하고 카테터를 삽입 1.3.8.1 - 1.3.8.3 단계를 수행하십시오. 지갑 줄 봉합을 묶어서 튜브를 고정시킵니다. ( 도 5 )</li></ol></li><li> 튜브의 말단부에 30 게이지 바늘로 0.5 ML 인슐린 주사기를 첨부하여 방광에 튜브의 개통과 인감을 테스트합니다. 요도 구멍에 물방울이 나타날 때까지 천천히 0.9 - 0.1 % NaCl 0.1 - 0.2 mL로 방광을 채운 다음 방광을 흡인으로 없앱니다. 방광을 채우거나 비울 수있는 것이 중요합니다. </li><li> 돔에서 누출이 발생하지 않은 경우, 한 쌍의 곡선 형 마이크로 포셉으로 방광을 받치고 플레어가 방광 돔의 안쪽에 닿을 때까지 부드럽게 튜브를 잡아 당깁니다. </li><li> 닫히기 전에 작은 티슈 롤을 꺼내고 방광이 정상 위치에 있는지 확인하십시오. </li><li> 6-0 달리기 봉합으로 두 층 (근육과 피부)의 복벽을 닫습니다. 앞 복부 근막 (직근의 전벽)의 가장자리 만 봉합하여 직근 복근을 근사하는 것이 좋습니다. </li><li> 동물들에게 튜브를 고정하려면 부드럽게 ro동물을 배에 태우십시오. interscapular 절개로 금속 앵커의 피하 부분을 삽입합니다. ( 그림 12 ) 6-0 봉합사를 사용하여 수직 매트리스 봉합사로 튜브와 앵커를 둘러싼 다. </li><li> 튜브가 빠지지 않도록 접착제 거품이 피부의 위와 아래에 남아 있는지 확인하십시오. 튜브를 피부 위에서 약 2cm 정도 잘라냅니다. </li><li> 소변이 누출되지 않도록 30 게이지 플러그 (1.1.5 단계)를 튜브 끝 부분에 부드럽게 삽입하십시오. </li></ol></li><li> 0.5 ML 0.9 % NaCl 피하 수화에 대한 주사. 수술 직후 수술후 진통제를주고 48 시간 동안 유지하십시오. <ol><li> 적외선 램프 아래에있는 새장에 동물을 넣으십시오. 동물이 새장 주위를 자유롭게 움직일 때까지 일정한 관찰을 유지하십시오. </li></ol></li><li> 동물을 매일 모니터링하고 기록하기 전에 5 일 동안 회복되도록하십시오. </li></ol> 2. 깨어있는 낭종ometry 녹음 <ol><li> 기록 프로그램, 압력 변환기 및 주입 펌프 준비. <ol><li> 동물을 마취하기 전에 PE50 튜빙을 사용하여 주입 펌프, 압력 변환기 및 22G 스위블을 연결하십시오. ( 그림 6 ) </li><li> 컴퓨터에서 시스템 압력을 보정하고 녹음 준비를하기 위해 녹음 프로그램 (예 : 재료 표 참조)을 엽니 다. 보정 및 녹음 중에 동일한 설정을 사용해야합니다. <ol><li> 실온 0.9 % NaCl 10 - 15 mL가 들어있는 20 mL 주사기를 채우고 주입 펌프에 넣습니다. 0.6 mL / h의 속도로 주입하도록 펌프를 프로그래밍하십시오. </li><li> 동물의 방광 또는 기록 케이지의 바닥과 같은 높이에서 압력 변환기를 고정시킵니다. </li><li> 22 게이지 스위블을 압력 변환기 끝에 연결하십시오 (PE50 - 튜빙 - 압력 변환기로 스위블하십시오) 참고 : 스위블은 튜브가 꼬이거나 꼬이는 것을 방지하기 위해 사용됩니다.동물이 움직입니다. </li><li> 시린지 펌프를 전진시켜 시스템을 통해 0.9 % NaCl을 세척하십시오. 보정하기 전에 모든 기포를 제거하십시오. </li><li> 기록 프로그램이 실행 중일 때 압력계 (cm / H2O)를 눈금자를 사용하여 보정하십시오. 천천히 PE50 테더 끝을 0에서 30cm로 이동하십시오. 필요한 경우 0을 조정하십시오. 참고 : 0cm 표시는 녹음 케이지 및 압력 변환기의 바닥과 동일한 높이에 있어야합니다. </li></ol></li><li> 녹음 케이지 중앙 위의 22 게이지 회전대를 정지시킵니다. 케이지 바닥이 케이지 아래에 위치한 저울의 수집 장치로 소변을 떨어 뜨릴 수 있도록하십시오. 테어의 높이를 조절하여 마우스가 튜브를 무리하게 당기거나 스트레칭하지 않고 케이지 주변을 자유롭게 움직일 수 있도록하십시오. ( 도 7 ) </li><li> 작업이 끝나면 시스템과 외장 PE50 튜브가 0.9 % NaCl로 가득 차고 모든 기포가 제거되었는지 확인하십시오. </li></ol></li><li> 예습녹음을위한 동물의 aration <ol><li> isoflurane 2 %를 흡입하여 동물에게 마취시키고 복부에 놓습니다. 30 게이지 플러그를 제거하고 PE10 테 더 (방광 카테터)를 PE50 테더의 끝으로 밀어 넣습니다. 뜨거운 접착제를 사용하여 방수 밀봉을하십시오. </li><li> 마취를 끄고 소변을 분석 용 저울 위에 놓인 수집 장치에 직접 떨어 뜨릴 수있는 평행선 바닥을 사용하여 동물을 기록 상자에 넣으십시오. ( 도 7 ) </li><li> 동물이 새장에 들어갔을 때 기록을 시작하되 주입을 시작하지 마십시오. 마취에서 완전히 회복 될 때까지 동물을 관찰하십시오. 방광 압력이 안정되면 0.6 mL / h의 속도로 0.9 % NaCl 주입을 시작하십시오. 참고 : 변경 사항이있을 때 녹음 프로그램에 메모하십시오. 주입 시작, 중단 또는 불규칙이 언제 발생했는지에 대한 기록을 갖는 것이 중요합니다. </li><li> 시스템에 누출이 있는지 점검하고 동물이 쉽게 누출되는지 확인하십시오물과 음식에. </li><li> 재현 할 수있는 배뇨주기가 3 회 발생할 때까지 조용한 방에서 계속 녹음하십시오. 참고 : 동물은 녹음 과정을 완전히 방해받지 않아야합니다. 바람직하게는 동작을 관찰하기 위해 원격 비디오 모니터링을 사용하십시오. </li></ol></li></ol>

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	<li>Perez, L. M., Webster, G. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+History+of+Urodynamics.">The History of Urodynamics.</a> Neurourol Urodyn. 11 (1), 1-21 (1992).</li><li>Fry, C. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Animal+models+and+their+use+in+understanding+lower+urinary+tract+dysfunction.">Animal models and their use in understanding lower urinary tract dysfunction.</a> Neurourol Urodyn. 29 (4), 603-608 (2010).</li><li>Maggi, C. A., Santicioli, P., Meli, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+nonstop+transvesical+cystometrogram+in+urethane-anesthetized+rats:+a+simple+procedure+for+quantitative+studies+on+the+various+phases+of+urinary+bladder+voiding+cycle.">The nonstop transvesical cystometrogram in urethane-anesthetized rats: a simple procedure for quantitative studies on the various phases of urinary bladder voiding cycle.</a> J Pharmacol Methods. 15 (2), 157-167 (1986).</li><li>Malmgren, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cystometrical+evaluation+of+bladder+instability+in+rats+with+infravesical+outflow+obstruction.">Cystometrical evaluation of bladder instability in rats with infravesical outflow obstruction.</a> J Urol. 137 (6), 1291-1294 (1987).</li><li>Pandita, R. K., Fujiwara, M., Alm, P., Andersson, K. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cystometric+evaluation+of+bladder+function+in+non-anesthetized+mice+with+and+without+bladder+outlet+obstruction.">Cystometric evaluation of bladder function in non-anesthetized mice with and without bladder outlet obstruction.</a> J Urol. 164 (4), 1385-1389 (2000).</li><li>Chang, H. Y., Havton, L. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Differential+effects+of+urethane+and+isoflurane+on+external+urethral+sphincter+electromyography+and+cystometry+in+rats.">Differential effects of urethane and isoflurane on external urethral sphincter electromyography and cystometry in rats.</a> Am J Physiol Renal Physiol. 295 (4), F1248-F1253 (2008).</li><li>Matsuura, S., Downie, J. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effect+of+anesthetics+on+reflex+micturition+in+the+chronic+cannula-implanted+rat.">Effect of anesthetics on reflex micturition in the chronic cannula-implanted rat.</a> Neurourol Urodyn. 19 (1), 87-99 (2000).</li><li>DePaul, M. A., Lin, C. Y., Silver, J., Lee, Y. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Peripheral+Nerve+Transplantation+Combined+with+Acidic+Fibroblast+Growth+Factor+and+Chondroitinase+Induces+Regeneration+and+Improves+Urinary+Function+in+Complete+Spinal+Cord+Transected+Adult+Mice.">Peripheral Nerve Transplantation Combined with Acidic Fibroblast Growth Factor and Chondroitinase Induces Regeneration and Improves Urinary Function in Complete Spinal Cord Transected Adult Mice.</a> PLoS One. 10 (10), e0139335 (2015).</li><li>Kadekawa, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Characterization+of+bladder+and+external+urethral+activity+in+mice+with+or+without+spinal+cord+injury--a+comparison+study+with+rats.">Characterization of bladder and external urethral activity in mice with or without spinal cord injury--a comparison study with rats.</a> Am J Physiol Regul Integr Comp Physiol. 310 (8), R752-R758 (2016).</li><li>Uvin, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+use+of+cystometry+in+small+rodents:+a+study+of+bladder+chemosensation.">The use of cystometry in small rodents: a study of bladder chemosensation.</a> J Vis Exp. (66), (2012).</li><li>Andersson, K. E., Soler, R., Fullhase, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Rodent+models+for+urodynamic+investigation.">Rodent models for urodynamic investigation.</a> Neurourol Urodyn. 30 (5), 636-646 (2011).</li><li>Smith, P. P., Kuchel, G. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Continuous+uroflow+cystometry+in+the+urethane-anesthetized+mouse.">Continuous uroflow cystometry in the urethane-anesthetized mouse.</a> Neurourol Urodyn. 29 (7), 1344-1349 (2010).</li><li>Aizawa, N., Homma, Y., Igawa, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Influence+of+High+Fat+Diet+Feeding+for+20+Weeks+on+Lower+Urinary+Tract+Function+in+Mice.">Influence of High Fat Diet Feeding for 20 Weeks on Lower Urinary Tract Function in Mice.</a> Low Urin Tract Symptoms. 5 (2), 101-108 (2013).</li><li>Bjorling, D. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Evaluation+of+voiding+assays+in+mice:+impact+of+genetic+strains+and+sex.">Evaluation of voiding assays in mice: impact of genetic strains and sex.</a> Am J Physiol Renal Physiol. 308 (12), F1369-F1378 (2015).</li><li>Morikawa, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effects+of+various+drugs+on+bladder+function+in+conscious+rats.">Effects of various drugs on bladder function in conscious rats.</a> Jpn J Pharmacol. 50 (4), 369-376 (1989).</li><li>Yaksh, T. L., Durant, P. A., Brent, C. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Micturition+in+rats:+a+chronic+model+for+study+of+bladder+function+and+effect+of+anesthetics.">Micturition in rats: a chronic model for study of bladder function and effect of anesthetics.</a> Am J Physiol. 251 (6 Pt 2), R1177-R1185 (1986).</li><li>Cornelissen, L. L., Misajet, B., Brooks, D. P., Hicks, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Influence+of+genetic+background+and+gender+on+bladder+function+in+the+mouse.">Influence of genetic background and gender on bladder function in the mouse.</a> Auton Neurosci. 140 (1-2), 53-58 (2008).</li><li>Lemack, G. E., Zimmern, P. E., Vazquez, D., Connell, J. D., Lin, V. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Altered+response+to+partial+bladder+outlet+obstruction+in+mice+lacking+inducible+nitric+oxide+synthase.">Altered response to partial bladder outlet obstruction in mice lacking inducible nitric oxide synthase.</a> J Urol. 163 (6), 1981-1987 (2000).</li></ol>

The authors have nothing to disclose.

intravesical tubing의 최적의 재료와 크기 튜빙의 직경이 압력 기록에 미치는 영향을 결정하기 위해, 우리는 다른 미세 유체 튜브를 테스트했습니다. PE50 (0.58 mm ID), 폴리 우레탄 PU027 (0.4 mm ID), PE25 (0.46 mm ID) 및 PE10 (0.28 mm ID). 각 튜브에 대해 1 mL / h로 작동하는 주입 펌프로 압력을 기록하면서 튜브를 0에서 30 cm까지 수직으로 빠르게 이동 시켰습니다. 초기 생체 내 실험은 PE50 튜빙을 ?...

Filling cystometry (FC)는 방광 충진이 완만 한 동안 압력을 기록하기 위해 카테터를 방광에 삽입하는 진단 방법입니다. 1927 년에 처음으로 하부 요로 기능을 평가하는 임상 진단 방법으로 소개되었지만 널리 사용되었습니다. 연구 응용에서 FC는 건강하고 질병이있는 동물 모델에서 방광 기능을 테스트하고 약리학 적 약제의 효과를 연구하는 데 사용할 수 있습니다. 설치류 동물 모델은 일반적으로 하부 요로 기능을 조사하는 데 사용됩니다. 2 이 포유류 그룹에서 FC는 처음에는 쥐에서 사용하기 위해 개발되었습니다. 3 방광 내로 튜브를 이식하고 FC를 수행하는 방법은 수용 가능한 수준의 재현성을 가진 많은 연구자들에 의해 잘 기술되고 사용되고있다. 4 트랜스 제닉 및 노크 아웃 균주의 이용 가능성은 수많은 연구 분야에서 쥐를 중요한 종으로 만들고 있으며,하부 요로 기능 장애의 분야를 포함한다. 마우스 방광 측정법을 수행하는 데 사용 된 방법론은 실험실 간 차이가있어 결과를 비교하기가 어렵습니다. 5 생체 외 모델과 비교하여 FC는 하부 요로 조직을 보존하여 배뇨 순환의 저장 및 배뇨 단계를 평가하는 동안 방광과 유출구 사이의 조정 된 기능을 평가할 수 있습니다. 이전의 연구에 따르면 흔히 사용되는 수많은 마취제가 배뇨 수축을 억제합니다. 소변 방광 평활근 수축 (우레탄, 알파 - 클로 라로 오스, 케타민 및 크 실라 진)을 보존하고 동물이 허약 해지도록하는 약제는 기능성 방광 기능을 현저히 감소시키고 신경 전달을 억제합니다. 6 , 7 , 8 , 9 기술적으로 더 도전적이지만, FC는동물을 걷는 것은 배뇨 반사의 기능적 완전성을 보존합니다. 하부 요로 기능은 수술후 방광 벽 팽창, 통증 및 불편 함으로 인한 스트레스 및 환경 영향을 포함한 여러 요인에 의해 영향을받습니다. 튜브 이식시 조직 손상을 최소화하는 외과 기술을 사용하고 튜브 이동을 줄이는 동시에 동물이 자유롭게 움직일 수있게하는 녹음 방법을 사용하면 정확하고 재현성있는 녹음을 얻는 데 필수적입니다. 적절하게 수행되면, 생체 내 자유롭게 움직이는 동물의 FC는 생리적 방광 기능을 확실하게 반영하는 데이터를 제공 할 수 있습니다. 10 자유롭게 움직이는 동물의 FC는 다음 매개 변수에 대한 데이터를 제공 할 수 있습니다. 기초 또는 기준 압력 : 두 개의 저혈압 사이의 최소 압력. Intermicturition pressure : 두 개의 배뇨 사이의 평균 압력. 임계 압력 : Intravesical 압력 imm배뇨 전에 ediately. 최대 압력 : 배뇨 사이클 중 최대 방광 압력. 자발적인 활동 (또는 평균 intermicturition 진동 압력) : intermicturition 압력 마이너스 기초 압력. 보이드가없는 수축 : 유체 방출과 관련이없는 충진 단계에서 방광 내 압력이 증가합니다. 방광 순응도 : 방광 용량을 임계 압력에서 기저 압력을 뺀 값으로 나눈 값. 배뇨 빈도 : 단위 시간당 배뇨 횟수. Intermicturition interval : 두 개의 최대 배뇨 압력 사이의 기간. 방광 용량 : 주입량을 배뇨 횟수로 나눈 값. 이러한 매개 변수 및 표준화 된 용어에 대한 자세한 설명은 이전에 출판되었습니다. 11 FC는 연속 또는 단일주기의 관내 주입 방법을 사용하여 수행 할 수 있습니다. 지속적인 방광 측정법은 여러 번의 방수 순환을 기록하고재현성에. 방광 용량 측정의 정확도는 잔여 부피가 알려지지 않아 제한적입니다. 또한, 자유롭게 움직이는 생쥐에서 작은 배설물 (30 ~ 184 μL 사이의 변형률 및 성별에 따라 다름)을 수집하는 것은 어렵습니다. 이 방법을 사용하여 기공 량을 기록하는 것은 마취 된 준비에 비해 덜 정확하지만 방광 기능에 대한 마취제의 억제 효과를 피할 수 있다는 점에서 우수합니다. 방광 용량을 평가하기 위해 단일주기 낭종 측정법을 사용해야합니다. 이 방법에서 방광은 주입 전에 흡입에 의해 비워지고 용량은 최대 압력에 대한 시간으로 곱한 주입 속도의 함수로 계산됩니다. 작은 설치류에서 체외 측정법을 수행하는 기술이 발표되었지만 쥐에서 수술이 수행되었으며 우레탄 마취 하에서 마우스 방광 측정이 수행되어야한다고 권고했다. 10 이 의사 소통의 목표는o 방광의 돔에 intravesical tube를 이식하는 데 사용되는 미세 수술 기술과 깨어지며 자유롭게 움직이는 마우스에서 지속적인 방광 충만 및 배뇨 중 하부 요로 기능, 생체 내 기록 실험에 사용되는 실험 설정을 설명합니다. 또한, 생체 내 FC를 수행하는 방법뿐만 아니라 튜빙 길이, 직경 및 재료가 기록에 어떻게 영향을 주는지 실험 하기 위해 수행되었습니다. 이 실험 프로토콜은 이전에 발표 된 기술을 요약하고 실험 결과를 기반으로 많은 수정을 제안합니다.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="946">
	<tbody>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:379px;">Polyethylene (PE) 10 tubing</td>
			<td style="width:259px;">Instech</td>
			<td style="width:119px;">BTPE-10</td>
			<td style="width:191px;">Fits 30G connectors/plugs</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:379px;">Polyethylene (PE) 50 tubing</td>
			<td style="width:259px;">Instech</td>
			<td style="width:119px;">BTPE-50</td>
			<td>Fits 22G connectors/plugs</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:379px;">22ga single channel stainless steel swivel</td>
			<td style="width:259px;">Instech</td>
			<td style="width:119px;">375/22</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:379px;">High Carbon Steel Utility Extension Spring (9/64&#34; OD)</td>
			<td style="width:259px;">Grainger</td>
			<td style="width:119px;">1NAH1</td>
			<td>Protects PE50 tubing - Cut to length</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:379px;">22G connector</td>
			<td style="width:259px;">Instech</td>
			<td style="width:119px;">SP22/12</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:379px;">Yutaoz Professional Hot Melt Adhesive Glue Gun</td>
			<td style="width:259px;">Yutaoz</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td>Use low temperature setting (100&#176;C) - Any hot melt glue gun with an adjustable temperature range will work</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:379px;">Surebonder DT-2010 all purpose glue stick</td>
			<td style="width:259px;">Surebonder</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td>Any all purpose hot glue will work</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:379px;">Dumont #5 curved microforceps</td>
			<td style="width:259px;">World Precision Instruments</td>
			<td align="right">500232</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:379px;">Dumont #7 curved microforceps</td>
			<td style="width:259px;">World Precision Instruments</td>
			<td align="right">14188</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Mini dissecting scissors - straight</td>
			<td style="width:259px;">World Precision Instruments</td>
			<td align="right">503240</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Micro mosquito forceps (12.5cm)</td>
			<td style="width:259px;">World Precision Instruments</td>
			<td align="right">500451</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Dissecting scissors - straight</td>
			<td style="width:259px;">World Precision Instruments</td>
			<td align="right">14393</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:379px;">Castroviejo Needle Holder</td>
			<td style="width:259px;">World Precision Instruments</td>
			<td align="right">503258</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:379px;">Isoflurane, USP</td>
			<td style="width:259px;">Phoenix</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td>2%, 1 L/min flow rate</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:379px;">Buprenorphine</td>
			<td style="width:259px;"></td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td>0.05mg/kg</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:379px;">0.9% Sodium Chloride Irrigation, USP</td>
			<td style="width:259px;">Baxter</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:379px;">6-0 Ethilon black monofilament, non-absorbable suture</td>
			<td style="width:259px;">Ethicon</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td>Bladder tie</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:379px;">6-0 Vicryl violet braided, absorbable suture</td>
			<td style="width:259px;">Ethicon</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td>Muscle suture, running</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:379px;">6-0 Prolene blue monofilament, non-absorbable suture</td>
			<td style="width:259px;">Ethicon</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td>Skin suture, vertical mattress, buried interrupted</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:379px;">KD Legato 210 infuse/withdraw pump</td>
			<td style="width:259px;">KD Scientific</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td>1.5ml/hr</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:379px;">Disposable pressure transducer</td>
			<td style="width:259px;">Digitimer</td>
			<td style="width:119px;">NL108T2</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:379px;">Pressure Amplifier</td>
			<td style="width:259px;">Digitimer</td>
			<td style="width:119px;">NL108A</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:379px;">Power1401-3 data acquisition interface</td>
			<td style="width:259px;">Digitimer</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:379px;">Spike2&#160;</td>
			<td style="width:259px;">Cambridge Electronic Design Limited</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td>PC pressure recording software</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:379px;">Leica MZ6 surgical operating microscope (3.2-20X)</td>
			<td style="width:259px;">Leica Microsystems</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td>Magnification</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

evaluating the procedure for performing awake cystometry in a mouse model

Awake filling cystometry는 자유롭게 움직이는 생쥐에서 방광 기능을 평가하기 위해 오랫동안 사용되어 왔지만 사용 된 특정 방법은 실험실마다 다릅니다. 이 연구의 목적은 깨어 있고 자유롭게 움직이는 마우스에서 방광 내강을 이식하는 데 사용 된 미세 수술 절차와 방광 압력을 기록하기위한 실험 기술을 설명하는 것이 었습니다. 또한, 수술 데이터뿐만 아니라 튜브 유형과 크기가 낮은 요로 기능과 녹음 감도에 영향을 보여주는 실험 데이터가 제공됩니다. 압력 기록에 대한 튜브 지름의 영향은 폴리에틸렌 및 폴리 우레탄 튜브 내에서 상이한 내경을 가지고 평가되었다. 결과적으로 두 재료의 최고 성능 튜브를 수컷 C57BL / 6 마우스 방광의 돔에 외과 적으로 이식 하였다. 수술 후 2, 3, 5, 7 일 동안 건강한 손상되지 않은 동식물에 12 시간 동안 밤새 배뇨 횟수가 기록되었다. 수확시 bladders w총 관찰을 사용하여 부종의 징후를 평가 한 후 병리학 적 분석을 위해 처리했다. 가장 큰 방광 팽창 정도가 2 및 3 일에 관찰되었으며, 이는 방광 기능이 현저하게 손상된 행동 배뇨 데이터와 상관 관계가 있었다. 5 일째, 방광 조직학 및 배뇨 빈도가 정상화되었다. 우리 연구에서 제공 한 문헌 및 증거에 근거하여, 우리는 깨어있는 마우스의 intravesical pressure와 void volume의 생체 내 기록을 위해 다음과 같은 단계를 제안합니다 : 1) 수술 현미경과 미세 수술 도구를 사용하여 수술 수행 2) 폴리에틸렌 -10 3) 수술 후 5 일째 방광 팽창이 해소되었을 때 방광 조영술을 시행하십시오.

tube occlusion 동안 시스템 내 압력 상승과 하강의 일관성에서 튜빙 재료와 직경 사이에는 유의 한 차이가 없었다. 폴리에틸렌 (PE)과 폴리 우레탄 (PU) 재료 모두에서 방광 내벽 팽창 포스트 삽관 튜브 삽입은 유의 적이었다. 2 일째, 심한 점막하 부종이 발생했습니다. 그것은 방광의 단면을 반으로 차지하여 루멘이 막혔습니다. 5 일째, 부종이 완전히 완결되어 점막 부분에 염?...

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Evaluating the Procedure for Performing Awake Cystometry in a Mouse Model

이 연구는 자유롭게 움직이는 마우스에서 깨어있는 낭종 측정법을 수행하기위한 수술 절차 및 실험 기술을 설명합니다. 또한 최적화 및 표준화를 지원하는 실험적 증거를 제공합니다.

마우스 모델에서 깨어나는 방광 측정을 수행하기위한 절차 평가

Awake filling cystometry has been used for a long time to evaluate bladder function in freely moving mice, however, the specific methods used, vary among ...

evaluating-procedure-for-performing-awake-cystometry-mouse

Research

JoVE Journal

Medicine

12.5K 조회수.  University of Vermont.  이 연구는 자유롭게 움직이는 마우스에서 깨어있는 낭종 측정법을 수행하기위한 수술 절차 및 실험 기술을 설명합니다. 또한 최적화 및 표준화를 지원하는 실험적 증거를 제공합니다. 

비디오: Evaluating the Procedure for Performing Awake Cystometry in a Mouse Model

Intra-Operative Behavioral Tasks in Awake Humans Undergoing Deep Brain Stimulation Surgery

Deep brain stimulation (DBS) is a surgical procedure that directs chronic, high frequency electrical stimulation to specific targets in the brain through implanted electrodes. Deep brain stimulation was first implemented as a therapeutic modality by Benabid et al. in the late 1980s, when he used this technique to stimulate the ventral intermediate nucleus of the thalamus for the treatment of tremor 1. Currently, the procedure is used to treat patients who fail to respond adequately to medical management for diseases such as Parkinson's, dystonia, and essential tremor. The efficacy of this procedure for the treatment of Parkinson's disease has been demonstrated in well-powered, randomized controlled trials 2. Presently, the U.S. Food and Drug Administration has approved DBS as a treatment for patients with medically refractory essential tremor, Parkinson's disease, and dystonia. Additionally, DBS is currently being evaluated for the treatment of other psychiatric and neurological disorders, such as obsessive compulsive disorder, major depressive disorder, and epilepsy. 
DBS has not only been shown to help people by improving their quality of life, it also provides researchers with the unique opportunity to study and understand the human brain. Microelectrode recordings are routinely performed during DBS surgery in order to enhance the precision of anatomical targeting. Firing patterns of individual neurons can therefore be recorded while the subject performs a behavioral task. Early studies using these data focused on descriptive aspects, including firing and burst rates, and frequency modulation 3. More recent studies have focused on cognitive aspects of behavior in relation to neuronal activity 4,5. This article will provide a description of the intra-operative methods used to perform behavioral tasks and record neuronal data with awake patients during DBS cases. Our exposition of the process of acquiring electrophysiological data will illuminate the current scope and limitations of intra-operative human experiments.

Deep brain stimulation surgery offers a unique opportunity to examine information encoding in the awake human brain. This article will describe intra-operative methods used to perform cognitive and behavioral tasks while simultaneously acquiring physiological data such as EMG, single-unit neuronal activity and/or local field potentials.

딥 뇌 자극 수술을받은 깨어 인간 내부 수술 행동 작업

Deep brain stimulation (DBS) is a surgical procedure that directs chronic, high frequency electrical stimulation to specific targets in the brain through ...

연구

의학

The Use of Cystometry in Small Rodents: A Study of Bladder Chemosensation

The lower urinary tract (LUT) functions as a dynamic reservoir that is able to store urine and to efficiently expel it at a convenient time. While storing urine, however, the bladder is exposed for prolonged periods to waste products. By acting as a tight barrier, the epithelial lining of the LUT, the urothelium, avoids re-absorption of harmful substances. Moreover, noxious chemicals stimulate the bladder's nociceptive innervation and initiate voiding contractions that expel the bladder's contents. Interestingly, the bladder's sensitivity to noxious chemicals has been used successfully in clinical practice, by intravesically infusing the TRPV1 agonist capsaicin to treat neurogenic bladder overactivity1. This underscores the advantage of viewing the bladder as a chemosensory organ and prompts for further clinical research. However, ethical issues severely limit the possibilities to perform, in human subjects, the invasive measurements that are necessary to unravel the molecular bases of LUT clinical pharmacology. A way to overcome this limitation is the use of several animal models2. Here we describe the implementation of cystometry in mice and rats, a technique that allows measuring the intravesical pressure in conditions of controlled bladder perfusion.
	After laparotomy, a catheter is implanted in the bladder dome and tunneled subcutaneously to the interscapular region. Then the bladder can be filled at a controlled rate, while the urethra is left free for micturition. During the repetitive cycles of filling and voiding, intravesical pressure can be measured via the implanted catheter. As such, the pressure changes can be quantified and analyzed. Moreover, simultaneous measurement of the voided volume allows distinguishing voiding contractions from non-voiding contractions3.
	Importantly, due to the differences in micturition control between rodents and humans, cystometric measurements in these animals have only limited translational value4. Nevertheless, they are quite instrumental in the study of bladder pathophysiology and pharmacology in experimental pre-clinical settings. Recent research using this technique has revealed the key role of novel molecular players in the mechano- and chemo-sensory properties of the bladder.

Cystometry is an efficient technique to measure bladder function of small animals in vivo. The bladder is continuously infused at rates controlled through an intravesical catheter, whereas the urethra is left free for micturition. This allows for repetitive filling and emptying of the bladder, while intravesical pressure and voided volume are recorded.

작은 쥐의 Cystometry의 사용 : 방광 Chemosensation의 연구

	The lower urinary tract (LUT) functions as a  dynamic reservoir that is able to store urine and to efficiently expel it at a  convenient time. While ...

Clinical Testing and Spinal Cord Removal in a Mouse Model for Amyotrophic Lateral Sclerosis (ALS)

Amyotrophic lateral sclerosis (ALS) is a fatal neurodegenerative disorder resulting in progressive degeneration of motoneurons. Peak of onset is around 60 years for the sporadic disease and around 50 years for the familial disease. Due to its progressive course, 50% of the patients die within 30 months of symptom onset. In order to evaluate novel treatment options for this disease, genetic mouse models of ALS have been generated based on human familial mutations in the SOD gene, such as the SOD1 (G93A) mutation. Most important aspects that have to be evaluated in the model are overall survival, clinical course and motor function. Here, we demonstrate the clinical evaluation, show the conduction of two behavioural motor tests and provide quantitative scoring systems for all parameters. Because an in depth analysis of the ALS mouse model usually requires an immunohistochemical examination of the spinal cord, we demonstrate its preparation in detail applying the dorsal laminectomy method. Exemplary histological findings are demonstrated. The comprehensive application of the depicted examination methods in studies on the mouse model of ALS will enable the researcher to reliably test future therapeutic options which can provide a basis for later human clinical trials.

Clinical Testing and Spinal Cord Removal in a Mouse Model for Amyotrophic Lateral Sclerosis ALS

A mouse model for amyotrophic lateral sclerosis (ALS) is examined clinically and behaviorally. As a prerequisite for an accompanying immunohistological analysis the preparation of the spinal cord is depicted in detail.

루게릭병에 대한 마우스 모델 (ALS)의 임상 시험 및 척수 제거

Amyotrophic lateral sclerosis (ALS) is a fatal neurodegenerative disorder resulting in progressive degeneration of motoneurons. Peak of onset is around 60 ...

Intranasal Administration of CNS Therapeutics to Awake Mice

Intranasal administration is a method of delivering therapeutic agents to the central nervous system (CNS). It is non-invasive and allows large molecules that do not cross the blood-brain barrier access to the CNS. Drugs are directly targeted to the CNS with intranasal delivery, reducing systemic exposure and thus unwanted systemic side effects1. Delivery from the nose to the CNS occurs within minutes along both the olfactory and trigeminal neural pathways via an extracellular route and does not require drug to bind to any receptor or axonal transport2. Intranasal delivery is a widely publicized method and is currently being used in human clinical trials3.
Intranasal delivery of drugs in animal models allows for initial evaluation of pharmacokinetic distribution and efficacy. With mice, it is possible to administer drugs to awake (non-anesthetized) animals on a regular basis using a specialized intranasal grip. Awake delivery is beneficial because it allows for long-term chronic dosing without anesthesia, it takes less time than with anesthesia, and can be learned and done by many people so that teams of technicians can dose large numbers of mice in short periods. Efficacy of therapeutics administered intranasally in this way to mice has been demonstrated in a number of studies including insulin in diabetic mouse models 4-6 and deferoxamine in Alzheimer's mouse models. 7,8
The intranasal grip for mice can be learned, but is not easy and requires practice, skill, and a precise grip to effectively deliver drug to the brain and avoid drainage to the lung and stomach. Mice are restrained by hand using a modified scruff in the non-dominant hand with the neck held parallel to the floor, while drug is delivered with a pipettor using the dominant hand. It usually takes 3-4 weeks of acclimating to handling before mice can be held with this grip without a stress response. We have prepared this JoVE video to make this intranasal delivery technique more accessible.

A method to intranasally administer drugs to awake mice for the purpose of targeting the brain is described. This method allows for repeat dosing over long periods using intranasal administration of drug without anesthesia, and nose-to-brain delivery with minimal systemic exposure.

깨어 마우스로 CNS의 치료학의 비강 관리

Intranasal administration is a method of delivering  therapeutic agents to the central nervous system (CNS). It is  non-invasive and allows large ...

Performing Subretinal Injections in Rodents to Deliver Retinal Pigment Epithelium Cells in Suspension

The conversion of light into electrical impulses occurs in the outer retina and is accomplished largely by rod and cone photoreceptors and retinal pigment epithelium (RPE) cells. RPE provide critical support for photoreceptors and death or dysfunction of RPE cells is characteristic of age-related macular degeneration (AMD), the leading cause of permanent vision loss in people age 55 and older. While no cure for AMD has been identified, implantation of healthy RPE in diseased eyes may prove to be an effective treatment, and large numbers of RPE cells can be readily generated from pluripotent stem cells. Several interesting questions regarding the safety and efficacy of RPE cell delivery can still be examined in animal models, and well-accepted protocols used to inject RPE have been developed. The technique described here has been used by multiple groups in various studies and involves first creating a hole in the eye with a sharp needle. Then a syringe with a blunt needle loaded with cells is inserted through the hole and passed through the vitreous until it gently touches the RPE. Using this injection method, which is relatively simple and requires minimal equipment, we achieve consistent and efficient integration of stem cell-derived RPE cells in between the host RPE that prevents significant amount of photoreceptor degeneration in animal models. While not part of the actual protocol, we also describe how to determine the extent of the trauma induced by the injection, and how to verify that the cells were injected into the subretinal space using in vivo imaging modalities. Finally, the use of this protocol is not limited to RPE cells; it may be used to inject any compound or cell into the subretinal space.

Here we present a community accepted protocol in multimedia format for subretinally injecting a bolus of RPE cells in rats and mice. This approach can be used for determining rescue potentials, safety profiles, and survival capacities of grafted RPE cells upon implantation in animal models of retinal degeneration.

서스펜션에 망막 색소 상피 세포를 제공하기 위해 설치류에서 망막 주사를 수행

The conversion of light into electrical impulses occurs in the outer retina and is accomplished largely by rod and cone photoreceptors and retinal pigment ...

A Surgical Procedure for Resecting the Mouse Rib: A Model for Large-Scale Long Bone Repair

This protocol introduces researchers to a new model for large-scale bone repair utilizing the mouse rib. The procedure details the following: preparation of the animal for surgery, opening the thoracic body wall, exposing the desired rib from the surrounding intercostal muscles, excising the desired section of rib without inducing a pneumothorax, and closing the incisions. Compared to the bones of the appendicular skeleton, the ribs are highly accessible. In addition, no internal or external fixator is necessary since the adjacent ribs provide a natural fixation. The surgery uses commercially available supplies, is straightforward to learn, and well-tolerated by the animal. The procedure can be carried out with or without removing the surrounding periosteum, and therefore the contribution of the periosteum to repair can be assessed. Results indicate that if the periosteum is retained, robust repair occurs in 1 - 2 months. We expect that use of this protocol will stimulate research into rib repair and that the findings will facilitate the development of new ways to stimulate bone repair in other locations around the body.

The overall goal of this procedure is to successfully resect a portion of bone from the rib of a mouse. The procedure was developed as a model to study large-scale long bone repair.

마우스 리브를 절제하는 수술 : 대규모 긴 뼈 수리에 대한 모델

This protocol introduces researchers to a new model for large-scale bone repair utilizing the mouse rib. The procedure details the following: preparation ...

A Quick Phenotypic Neurological Scoring System for Evaluating Disease Progression in the SOD1-G93A Mouse Model of ALS

The SOD1-G93A transgenic mouse is the most widely used animal model of amyotrophic lateral sclerosis (ALS). At ALS TDI we developed a phenotypic screening protocol, demonstrated in video herein, which reliably assesses the neuromuscular function of SOD1-G93A mice in a quick manner. This protocol encompasses a simple neurological scoring system (NeuroScore) designed to assess hindlimb function. NeuroScore is focused on hindlimb function because hindlimb deficits are the earliest reported neurological sign of disease in SOD1-G93A mice. The protocol developed by ALS TDI provides an unbiased assessment of onset of paresis (slight or partial paralysis), progression and severity of paralysis and it is sensitive enough to identify drug-induced changes in disease progression. In this report, the combination of a detailed manuscript with video minimizes scoring ambiguities and inter-experimenter variability thus allowing for the protocol to be adopted by other laboratories and enabling comparisons between studies taking place at different settings. We believe that this video protocol can serve as an excellent training tool for present and future ALS researchers.

This video protocol describes a sensitive, reliable, and quick method for evaluating the neuromuscular deficits in a transgenic mouse model of amyotrophic lateral sclerosis.

ALS의 SOD1-G93A 마우스 모델에서 질병의 진행을 평가하기위한 빠른 표현형 신경 채점 시스템

The SOD1-G93A transgenic mouse is the most widely used animal model of amyotrophic lateral sclerosis (ALS). At ALS TDI we developed a phenotypic screening ...

A Novel Murine Model of Arteriovenous Fistula Failure: The Surgical Procedure in Detail

The arteriovenous fistula (AVF) still suffers from a high number of failures caused by insufficient remodeling and intimal hyperplasia from which the exact pathophysiology remains unknown. In order to unravel the pathophysiology a murine model of AVF-failure was developed in which the configuration of the anastomosis resembles the preferred situation in the clinical setting. A model was described in which an AVF is created by connecting the venous end of the branch of the external jugular vein to the side of the common carotid artery using interrupted sutures. At a histological level, we observed progressive stenotic intimal lesions in the venous outflow tract that is also seen in failed human AVFs. Although this procedure can be technically challenging due to the small dimensions of the animal, we were able to achieve a surgical success rate of 97% after sufficient training. The key advantage of a murine model is the availability of transgenic animals. In view of the different proposed mechanisms that are responsible for AVF failure, disabling genes that might play a role in vascular remodeling can help us to unravel the complex pathophysiology of AVF failure.

Here we present a murine model of arteriovenous fistula (AVF) failure in which a clinically relevant anastomotic configuration is incorporated. This model can be used to study the pathophysiology and to test possible therapeutic interventions.

동정맥루 실패의 소설 쥐 모델 : 세부 수술

The arteriovenous fistula (AVF) still suffers from a high number of failures caused by insufficient remodeling and intimal hyperplasia from which the ...

The Monoiodoacetate Model of Osteoarthritis Pain in the Mouse

A major symptom of patients with osteoarthritis (OA) is pain that&#160;is triggered by peripheral as well as central changes within the pain pathways. The current treatments for OA pain such as NSAIDS or opiates are neither sufficiently effective nor devoid of detrimental side effects. Animal models of OA are being developed to improve our understanding of OA-related pain mechanisms and define novel pharmacological targets for therapy. Currently available models of OA in rodents include surgical and chemical interventions into one knee joint. The monoiodoacetate (MIA) model has become a standard for modelling joint disruption in OA in both rats and mice. The model, which is easier to perform in the rat, involves injection of MIA into a knee joint that induces rapid pain-like responses in the ipsilateral limb, the level of which can be controlled by injection of different doses. Intra-articular injection of MIA disrupts chondrocyte glycolysis by inhibiting glyceraldehyde-3-phosphatase dehydrogenase and results in chondrocyte death, neovascularization, subchondral bone necrosis and collapse, as well as inflammation. The morphological changes of the articular cartilage and bone disruption are reflective of some aspects of patient pathology. Along with joint damage, MIA injection induces referred mechanical sensitivity in the ipsilateral hind paw and weight bearing deficits that are measurable and quantifiable. These behavioral changes resemble some of the symptoms reported by the patient population, thereby validating the MIA injection in the knee as a useful and relevant pre-clinical model of OA pain.
The aim of this article is to describe the methodology of intra-articular injections of MIA and the behavioral recordings of the associated development of hypersensitivity with a mind to highlight the necessary steps to give consistent and reliable recordings.

Osteoarthritis (OA), or degenerative joint disease, is a debilitating condition associated with pain that remains only partially controlled by available analgesics. Animal models are being developed to improve our understanding of OA-related pain mechanisms. Here we describe the methodology for the monoiodoacetate model of OA pain in the mouse.

마우스에서 관절염 통증의 Monoiodoacetate 모델

A major symptom of patients with osteoarthritis (OA) is pain that&#160;is triggered by peripheral as well as central changes within the pain pathways. The ...

Topical Airway Anesthesia for Awake-endoscopic Intubation Using the Spray-as-you-go Technique with High Oxygen Flow

A patient&#39;s willingness to cooperate is an absolute precondition for successful awake intubation of the trachea. Whilst drug-sedation of patients can jeopardize their spontaneous breathing, topical anesthesia of the airway is a popular technique. The spray-as-you-go technique represents one of the simplest opportunities to anesthetize the airway mucosa. The application of local anesthetic through the working channel of the flexible endoscope is a widespread practice for anesthetists as well as pulmonologists. There is neither need for additional devices nor special training as a pre-requisite to perform this technique. However, a known clinical problem is the coughing and gagging reflex that may occur when the liquid anesthetic strikes the airway mucosa and other sensitive structures like the vocal cords. This can be avoided by the use of oxygen applied through the working channel with the aim of fogging the local anesthetic into finer particles. Furthermore, the oxygen flow provides a higher oxygen supply and contributes to a better view, dispersing mucus secretions and blood away from the lens. Using an atomizer with a high oxygen flow of 10 L/min we maximized these benefits, caused less coughing and had more satisfied and therefore cooperative patients. Possible, but very rare complications of using oxygen flow including gastric insufflation, organ rupture or barotrauma did not arise. We attribute the complication-free use of high oxygen flow to the design of the set, which permits flow and pressure release.

The topical anesthetic lidocaine was atomized using a high oxygen flow through the working channel of a flexible intubating endoscope to achieve topical airway anesthesia for awake endotracheal intubation. We prefer this modified spray-as-you-go technique for endoscopic intubation to classical bolus application because of higher patient satisfaction and better compliance.

화제기도 마취는 사용 깨어 내시경 삽관에 대한 높은 산소의 흐름과 기술을 스프레이 것과 같이 당신은-이동

A patient&#39;s willingness to cooperate is an absolute precondition for successful awake intubation of the trachea. Whilst drug-sedation of patients can ...