저자는 스마트 재료 설계, 분석 및 처리 컨소시엄 (SMATDAP)에 의해 자금 국립 과학 재단 협력 계약 IIA-1430280와 라 보드 Regents의 대학원 친교 (MEP)에 대 한 인정 합니다. 이러한 실험에 대 한 폴리머 샘플 MilliporeSigma (시그마-올드 리치)에 의해 제공 되었다.  오픈 엑세스 출판이 문서는 MilliporeSigma에 의해 후원 됩니다.

주의: 모든 반응 증기 두건에서 실행 되었습니다. 모든 재료 안전 데이터 시트 (MSDS)를 어떤 화학 사용 및 적절 한 예방 조치를 참조 하십시오.
1. 샘플 준비
<ol><li>매트릭스 재고 솔루션의 준비<ol>
<li>Tetrahydrofuran-unstabilized (THF), 그리고 해산 때까지 소용돌이의 1 mL에 α-cyano-4-hydroxycinnamic 산 (HCCA)의 20 밀리 그램을 디졸브.</li>
		<li>THF, 그리고 해산 때까지 소용돌이의 1 mL에 2, 5-dihydroxybenzoic 산 (DHB)의 20 밀리 그램을 디졸브.</li>
	</ol>
</li>
	<li>알칼리 양이온 재고 솔루션의 준비<ol>
<li>THF, 그리고 해산 때까지 소용돌이의 1 mL에 2 밀리 그램의 나트륨 trifluoroacetate (NaTFA)을 용 해.</li>
		<li>THF, 그리고 해산 때까지 소용돌이의 1 mL에 2 밀리 그램의 칼륨 trifluoroacetate (KTFA)을 분해.</li>
	</ol>
</li>
	<li>분석 재고 솔루션의 준비<ol>
<li>예제 1: 분해 폴 리 (에틸렌 글리콜) 2 aminoethyl 에테르 아세트산의 2 밀리 그램 (Mn = 5000) THF, 그리고 해산 때까지 소용돌이의 0.5 ml.</li>
		<li>샘플 2: 2 mg polyoxyethylene bis(azide)의 분해 (Mn = 2000) THF, 그리고 해산 때까지 소용돌이의 0.5 ml.</li>
		<li>샘플 3: 2 mg poly(L-lactide), 종료 thiol의 분해 (Mn = 2500) THF, 그리고 해산 때까지 소용돌이의 0.5 ml.</li>
	</ol>
</li>
	<li>분석을 위해 샘플 혼합물의 준비<ol>
<li>9 독특한 샘플 혼합물 만들어집니다 그런 구성의 상대적 비율을 변화 하는 동안 행렬, 분석 및 양이온 솔루션을 혼합 하 여 일련의 해결책을 준비 합니다. 예를 들어, 추가 된 매트릭스 재고 솔루션 일정 금액 유지 (예., 10 µ L), 3의 요인에 의해 분석 솔루션의 양을 다 (예., 45, 15, 및 5 µ L), 또한 3의 요인에 의해 양이온 솔루션의 양을 변화 하는 동안 (예: ., 9, 3, 고 1 µ L). 이 샘플은 효과적으로 다른 농도 두 변수 x와 y와 3 x 3 격자 항복 축 (그림 1).</li>
		<li>대표적인 예 DHB 솔루션의 15 µ L 함께 poly(L-lactide) 솔루션의 15 µ L NaTFA 솔루션의 1 µ L을 결합.</li>
		<li>MALDI 표적 격판덮개 (그림 2)에 개별 샘플에 각 솔루션 혼합물의 1 μ 플라스틱 증분 추가 샘플을 추가 하기 전에 건조를 증발을 각 약 수 있도록 샘플 잘 밖으로 흐르는에서 샘플을 방지 하기 위해 작은 부분에 샘플을 추가 합니다. 주: 더 높은 비등 점 용 제에 대 한 공기 총 필요할 수 있습니다 용 매 증발, 신속 하 게 주의 워프 수 접시를 발생할 수 있습니다 샘플 접시가 열 방지에 사용 한다.</li>
	</ol>
</li>
	<li>보정을 위한 표준 시료의 준비<ol>
<li>교정 표준 제안된 공급 업체 프로토콜을 사용 하 여 준비 합니다. 참고: Dendrimer calibrants이이 연구에 대 한 선정 됐다 고 순수한 dendrimers로 사용할 수 있습니다 또는 매트릭스, calibrant, 최적화 된 비율에서 양이온과 혼합.</li>
	</ol>
</li>
</ol>2. 데이터 수집 최적화
<ol><li>데이터 수집을 시작<ol>
<li>데이터 수집 소프트웨어 "FlexControl"를 엽니다.</li>
		<li>꺼내기 눌러 대상 플레이트의 로드를 사용할 수 있는 플랫폼은 "<img alt="Equation 1" src="/files/ftp_upload/57174/57174eq1v2.jpg">" 버튼.</li>
		<li>부드럽게 적절 한 방향에 플랫폼에 로드 calibrant 및 분석 샘플 대상 접시를 놓습니다.</li>
		<li>수집 소프트웨어를 사용 하 여 눌러 플랫폼 대상 플레이트를 삽입 하는 "<img alt="Equation 1" src="/files/ftp_upload/57174/57174eq1v2.jpg">" 버튼을 다시.</li>
		<li>파일을 눌러 적절 한 데이터 수집 방법 (긍정적인 모드 수집 방법)를 선택 합니다. | 선택 하는 방법. 참고: 우리의 대표 analytes를 포함 하 여 대부분의 폴리머 샘플에 대 한 이온화는 양이온으로 complexation를 통해와, 그러므로, 긍정적인 모드 인수 메서드는 가장 적합 한. 낮은 질량 범위 (500-10000 다) 또는 더 높은 해상도, 원하는 때에 대 한 악기에 따라 반사 모드 방법 파일을 선택 합니다. 높은 분자량에 대 한 샘플 또는 때 높은 신호 감도 필요, 및 낮은 해상도 허용, 선형 모드 방법 파일을 선택 합니다.</li>
		<li>데이터를 취득 하기 전에 있는지 확인 데이터 수집에 대 한 적절 한 질량 범위 선택-이상적으로 대량 범위 예상된 분포 예상된 분포에서 두 배 높은 질량에 있는 낮은 질량의 절반을 포함 됩니다. 검색 탭을 클릭 하 고 질량 범위보기 이것을 확인 합니다. 참고: 이렇게 하면 낮은 분자량 저하 조각에서 그 신호 또는 더 높은 분자량 집계 (dimer) 샘플에 있을 수 있는 데이터 집합에 포함 됩니다. 또한, note 매트릭스 올리고 대부분 MALDI TOF 질량 스펙트럼에 대 중 1000 다,이 질량 아래 복잡 한 분석으로 높은 강도 높은 잡음을 제공 하 고 신호 강도를 자주 발견 됩니다. 보정은 최종 데이터 세트를 얻기 전에 요구 될 것 이다, 비록 동일한 인수 매개 변수는 특정 분석에 최적화 된 그 사용 하는 경우는 정확한 교정 파일 취득만 수 있습니다. 따라서, 분석 질량 스펙트럼의 예비 최적화 보정된 실정이 질량 스펙트럼의 획득 뒤 교정 하기 전에 필요 합니다.</li>
	</ol>
</li>
	<li>예비 데이터 수집<ol>
<li>수집 소프트웨어에서 해당 원하는 분석 하는 대상에 위치를 선택 합니다.</li>
		<li>레이저 표적 신호를 최대화 하기 위해 샘플 주위를 이동 하는 동안 데이터 수집을 시작 합니다. 데이터 수집을 시작 하려면 시작을 누릅니다. 참고: 레이저 반복된 샘플링 후 특정 위치에 매트릭스를 배출 수 있습니다.</li>
		<li>동위 원소 해상도 달성 하는 데 필요한 최소 전력 달성 되도록 카메라 창의 왼쪽에 슬라이드 막대를 사용 하 여, 레이저 파워를 조정 합니다. 참고: 확인 분석, 양이온, 그리고 매트릭스의 최적 비율에 여러 샘플을 분석할 때 사용 하 여 동일한 레이저 전원 분석 샘플의 각각에 샘플 전시 그 인수 매개 변수에 대 한 최상의 신호/잡음 비율을 결정 하. 최상의 신호 대 잡음 비를 전시에 표시 되는 샘플 함께 미래의 수집 최적화를 계속 합니다.</li>
	</ol>
</li>
	<li>데이터 수집 최적화<ol>
<li>가속 전압에 차이 조정 하 여 해상도 최적화 하는 관심의 대량 범위 가운데 개별 피크에 확대 (이 연구에서 악기에 대 한이 포함 "IS2" 값 조정), 분석기에에서 있다는 탭. 참고: 이것은 가장 빠르게 최적화 된 큰 단계, 노트는 값 생성 최고의 해상도 IS2 값을 변화 하 여 (즉,., 작은 피크 폭 절반 최대 신호 강도 전체), 및 다음 더 작은 단계에서 최적화 IS2 값입니다. 일반적으로, 최적의 IS2 값 높은 (가까이 IS1) 낮은 대량 폴리머, 그리고 낮은 높은 대량 폴리머입니다.</li>
		<li>원하는 경우 reflectron 모드를 사용 하 여 해상도 증가. 참고: Reflectron 모드는 검출기에 더 긴 경로에 같은 m/z 값의 더 높은 속도 이온을 강요 하 여 동일한 m/z 의 이온의 초기 속도에 불일치의 보상에 대 한 수 있습니다. 검출기에 경로 있는이 증가 수 있습니다 같은 m/z 값의 느린 이온 동시에 검출기에 도착을 증가 해상도 대 한 이온을 효과적으로 집중. 비록 reflectron 모드는 일반적으로 약한 신호 강도, 샘플에 대 한 신호 해상도 향상 선형 모드 데이터를 시각화 하기 위해 필요할.</li>
		<li>마지막으로, 아직도 적당 한 신호 대 잡음 비를 생성 하는 동안 가능한 한 낮은 레이저 파워를 감소 시켜 레이저 파워를 최적화 (예., 신호 대 잡음 비율 약 10의). 참고: 높은 레이저 능력 일반적으로 해상도 조각화를 일으킬 수 있기 때문에 최고의 품질을 가진 질량 스펙트럼은 인수 감소 레이저 파워 하지만 검사의 높은 번호를 사용 하 여.</li>
		<li>일단 인수 매개 변수 최적화 된 파일 을 다음 파일 이름으로 저장 스펙트럼을 선택 하 여 보정 되지 않은 질량 스펙트럼을 저장 합니다. 새로운 인수는 분석의 보정된 질량 스펙트럼을 생성을 시작 하기 전에 외부 교정에 대 한 이러한 동일한, 최적화 된 매개 변수에서 calibrant의 새로운 수집 실행 한다.</li>
	</ol>
</li>
</ol>3. MALDI 교정
<ol><li>보정 질량 스펙트럼의 취득<ol>
<li>이미는 분석에 최적화 된 인수 매개 변수를 사용 하 여 대량 표준 샘플의 최적화 된 질량 스펙트럼 획득. 참고: 이상적으로, 교정 세트 포함 해야 합니다, 아래의 관심과 관심의 범위에서 하나 이상의 범위 위에 한 표준. 교정의 정확도 모든 인수 매개 변수는 모두 샘플에 대 한 동일한 경우에 최상 이다.</li>
	</ol>
</li>
	<li>교정 파일 만들기<ol>
<li>모든 기존 교정은 무효 또는 무효화 교정 분석기 아래를 누르면 덮어쓸 수 있는 위치에 탭을 확인 하십시오.</li>
		<li>동일한 수집 매개 변수를 사용 하 여 (예., 레이저 출력, IS2 전압), 포함 하는 calibrant 샘플 잘 레이저 이동 (예., dendrimer 표준, 펩 티 드) 해당 선택 하 여 커서를 잘 하 고 취득 한 시작을 누르면 스펙트럼입니다.</li>
	</ol>
</li>
	<li>충분 한 신호를 획득 하는 일단 데이터 획득 완료 시작 을 누릅니다.</li>
	<li>calibrant의 질량 스펙트럼 획득 되 면 그 보정 표준에 해당 하는 보정 탭에서 질량 제어 목록 드롭다운 메뉴를 선택 합니다. 적절 한 질량 제어 목록 참조 대 중 calibrant 선택/적절 한 양이온의 있을 것 이다. 참고: 이러한 한다 calibrant 공급 업체에서 사용할 수와 동위 원소 해상도 달성 monoisotopic 질량 값을 사용할 수 있는지 확인 (예., m/z 아래 반사 모드 = 5000), 그리고 평균 질량 값 때 동위 해상도 얻을 수 없습니다 (예를 들어, m/z 위에 선형 모드 = 5000),</li>
	<li>일치 하기 전에 각 선택한 calibrant 피크를 해당 참조 피크 프로토콜을 선택 하는 적절 한 피크 처리 탭을 선택 하 여 사용 되 고 있는지 확인 합니다. 참고: 최대 따기 프로토콜 스펙트럼 분해능에 따라 달라질 수 있습니다. 평균 질량 계산에 대 한 소프트웨어 동위 원소 봉우리의 전체 시리즈에 걸쳐 대량 평균을 소요 됩니다. Monoisotopic 질량 계산에 대 한 첫 번째 동위 피크의 정확한 질량을 계산 하는 소프트웨어를 설정 해야 합니다.</li>
	<li>관심의 피크의 왼쪽 영역을 선택 하 고 적용할 컨트롤 목록에 해당 질량에 클릭 하 여 대량 제어 목록에서 calibrant 질량 스펙트럼에 대 한 해당 신호 참조 질량을 적용 됩니다. 나머지 calibrant 피크에 대 한 프로세스를 계속 합니다. 참고: 가장 정확 하 고 정밀한 교정 장소 분석 및 calibrant 샘플 가깝게 가능한 대상 접시에 대상 플레이트 높이에 미묘한 변화는 교정의 정확성에 영향을 미칠 수 있기 때문에.</li>
	<li>최적화 된 인수 매개 변수에 대 한 대량 규모 조정 되었습니다 일단 분석 스펙트럼을 다시.</li>
</ol>4. 데이터 분석 및 해석
<ol><li>따기 피크<ol>
<li>데이터 분석 소프트웨어 (FlexAnalysis)에서 분석 스펙트럼을 엽니다.</li>
		<li>X 범위 확대 버튼을 선택 하 여 동위 원소 해상도 달성 하는 경우를 식별 하는 피크에 확대.</li>
		<li>대량 목록을 눌러 | 찾을 봉우리를 선택. Monoisotopic 피크 해결 되 면 monoisotopic 피크 따기 프로토콜을 사용 하 여 질량을 결정 하기 위해 동위 원소 배급에이 첫 번째 피크를 선택 합니다. Monoisotopic 최대 해결 되지 않은 경우 평균 질량 피크 따기 프로토콜을 사용 하 고 전체 동위 원소 분포의 평균 질량을 결정.</li>
		<li>계속이 피크 폴리머 분포에서 각 n-메 르에 대 한 프로세스를 선택 합니다.</li>
	</ol>
</li>
	<li>고분자 특성화 및 끝 그룹 분석 계산 참고: 정확 하 게 사용 하는 경우 MALDI TOF MS 제공할 수 있습니다 귀중 한, 정확한 데이터 고분자의 질량 분포 계산을 위한. 대량 유통 데이터입니다만 정확한 폴리머 샘플의 dispersity은 상대적으로 낮은 때 주목 해야 한다 (예., 약 Đ= 1.3 또는 아래).<ol>
<li>수 평균 분자량, 수식을 사용 하 여 각 대량 분수의 두더지의 수에 관하여 대량 평균 계산: <img alt="Equation 2" src="/files/ftp_upload/57174/57174eq2v2.jpg"> 여기서 N나 특정 분자량 및 Mi 의 분자의 수 = 그 분자의 특정 분자량 =.</li>
		<li>무게 평균 분자량, 수식을 사용 하 여 각 질량 분 율의 무게에 관하여 대량 평균 계산: <img alt="Equation 3" src="/files/ftp_upload/57174/57174eq3v2.jpg"> 여기서 N 나 특정 분자량 및 M i 의 분자의 수 = 그 분자의 특정 분자량 =.</li>
		<li>일단 Mw 와 Mn 계산 되는 비율 Mw/Mn dispersity, Đ라는 사용 하 여 분자량 분포의 폭 계량.</li>
		<li>MALDI TOF MS 데이터 분석의 가장 유일 하 고 강력한 기능 확인 또는 homopolymers의 끝 그룹을 확인 하는 기능입니다. 질량 스펙트럼 (Mn-메 르)에 n-메 르의 관찰 된 질량에 대 한 다음 수식을 다시 배열 하 여 끝 그룹을 확인 합니다. Mn-메 르 = n (MRU ) + MEG1 + MEG2 + M이온 여기서 n = 중 합도 MEG1 = α 끝 그룹의 질량 MEG2 = ω-끝 그룹의 질량 MRU 는 고분자의 반복 단위의 질량 = 그리고 M이온 폴리머와 그 단지 이온의 질량 =.</li>
	</ol>
</li>
</ol>

<ol>
	<li>Wu, K. J., Odom, R. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Peer+Reviewed:+Characterizing+Synthetic+Polymers+by+MALDI+MS.">Peer Reviewed: Characterizing Synthetic Polymers by MALDI MS.</a> Anal. Chem. 70, 456A-461A (1998).</li><li>Lowe, A. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Thiol-ene+&amp;#34;click&amp;#34;+reactions+and+recent+applications+in+polymer+and+materials+synthesis:+a+first+update.">Thiol-ene &amp;#34;click&amp;#34; reactions and recent applications in polymer and materials synthesis: a first update.</a> Polym. Chem. 5, 4820-4870 (2014).</li><li>Shi, Y., Cao, X., Gao, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+use+of+azide-alkyne+click+chemistry+in+recent+syntheses+and+applications+of+polytriazole-based+nanostructured+polymers.">The use of azide-alkyne click chemistry in recent syntheses and applications of polytriazole-based nanostructured polymers.</a> Nanoscale. 8, 4864-4881 (2016).</li><li>Lutz, J. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=1,3-dipolar+cycloadditions+of+azides+and+alkynes:+a+universal+ligation+tool+in+polymer+and+materials+science.">1,3-dipolar cycloadditions of azides and alkynes: a universal ligation tool in polymer and materials science.</a> Angew. Chem. Int. Ed. 46, 1018-1025 (2007).</li><li>Montaudo, G., Samperi, F., Montaudo, M. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Characterization+of+synthetic+polymers+by+MALDI-MS.">Characterization of synthetic polymers by MALDI-MS.</a> Prog. Polym. Sci. 31, 277-357 (2006).</li><li>Weidner, S. M., Trimpin, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mass+spectrometry+of+synthetic+polymers.">Mass spectrometry of synthetic polymers.</a> Anal. Chem. 80, 4349-4361 (2008).</li><li>Zhu, H., Yalcin, T., Li, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Analysis+of+the+accuracy+of+determining+average+molecular+weights+of+narrow+polydispersity+polymers+by+matrix-assisted+laser+desorption+ionization+time-of-flight+mass+spectrometry.">Analysis of the accuracy of determining average molecular weights of narrow polydispersity polymers by matrix-assisted laser desorption ionization time-of-flight mass spectrometry.</a> J. Am. Soc. Mass Spectr. 9, 275-281 (1998).</li><li>Cortez, M. A., Grayson, S. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Application+of+time-dependent+MALDI-TOF+mass+spectral+analysis+to+elucidate+chain+transfer+mechanism+during+cationic+polymerization+of+oxazoline+monomers+containing+thioethers.">Application of time-dependent MALDI-TOF mass spectral analysis to elucidate chain transfer mechanism during cationic polymerization of oxazoline monomers containing thioethers.</a> Macromolecules. 43, 10152-10156 (2010).</li><li>Liu, J., Loewe, R. S., McCullough, R. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Employing+MALDI-MS+on+poly(alkylthiophenes):+analysis+of+molecular+weights,+molecular+weight+distributions,+end-group+structures,+and+end-group+modifications.">Employing MALDI-MS on poly(alkylthiophenes): analysis of molecular weights, molecular weight distributions, end-group structures, and end-group modifications.</a> Macromolecules. 32, 5777-5785 (1999).</li><li>Zhang, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Determination+of+polyethylene+glycol+end+group+functionalities+by+combination+of+selective+reactions+and+characterization+by+matrix+assisted+laser+desorption/ionization+time-of-flight+mass+spectrometry.">Determination of polyethylene glycol end group functionalities by combination of selective reactions and characterization by matrix assisted laser desorption/ionization time-of-flight mass spectrometry.</a> Anal. Chim. Acta. 816, 28-40 (2014).</li><li>Li, Y., Hoskins, J. N., Sreerama, S. G., Grayson, M. A., Grayson, S. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+identification+of+synthetic+homopolymer+end+groups+and+verification+of+their+transformations+using+MALDI-TOF+mass+spectrometry.">The identification of synthetic homopolymer end groups and verification of their transformations using MALDI-TOF mass spectrometry.</a> J. Mass Spectrom. 45, 587-611 (2010).</li><li>Enjalbal, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=MALDI-TOF+MS+analysis+of+soluble+PEG+based+multi-step+synthetic+reaction+mixtures+with+automated+detection+of+reaction+failure.">MALDI-TOF MS analysis of soluble PEG based multi-step synthetic reaction mixtures with automated detection of reaction failure.</a> J. Am. Soc. Mass Spectr. 16, 670-678 (2005).</li><li>Laurent, B. A., Grayson, S. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=An+efficient+route+to+well-defined+macrocyclic+polymers+via+"click"+cyclization.">An efficient route to well-defined macrocyclic polymers via "click" cyclization.</a> J. Am. Chem. Soc. 128, 4238-4239 (2006).</li><li>Owens, K. G., Hanton, S., Li, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Conventional+MALDI+sample+preparation.">Conventional MALDI sample preparation.</a> Maldi Mass Spectrometry for Synthetic Polymer Analysis. , 129-158 (2009).</li><li>Hanton, S. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mass+spectrometry+of+polymers+and+polymer+surfaces.">Mass spectrometry of polymers and polymer surfaces.</a> Chem. Rev. 101, 527-570 (2001).</li><li>Samperi, F., Montaudo, G., Montaudo, M. S., Montaudo, G., Lattimer, R. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Matrix-assisted+laser+desorption/ionization+mass+spectrometry+of+polymers+(MALDI-MS).">Matrix-assisted laser desorption/ionization mass spectrometry of polymers (MALDI-MS).</a> Mass Spectrometry of Polymers. , 419-500 (2001).</li><li>Nielen, M. W. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Maldi+time-of-flight+mass+spectrometry+of+synthetic+polymers.">Maldi time-of-flight mass spectrometry of synthetic polymers.</a> Mass Spectrom. Rev. 18, 309-344 (1999).</li><li>Hanton, S. D., Owens, K. G., Barner-Kowollik, C., Gr&#252;ndling, T., Falkenhagen, J., Weidner, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Polymer+MALDI+sample+preparation.">Polymer MALDI sample preparation.</a> Mass Spectrometry in Polymer Chemisty. , 119-147 (2011).</li><li>Vestal, M. L., Juhasz, P., Martin, S. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Delayed+extraction+matrix-assisted+laser+desorption+time-of-flight+mass+spectrometry.">Delayed extraction matrix-assisted laser desorption time-of-flight mass spectrometry.</a> Rapid Commun. Mass Spectrom. 9, 1044-1050 (1995).</li><li>Kaufmann, R., Spengler, B., Lutzenkirchen, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mass+spectrometric+sequencing+of+linear+peptides+by+product-ion+analysis+in+a+reflectron+time-of-flight+mass+spectrometer+using+matrix-assisted+laser+desorption+ionization.">Mass spectrometric sequencing of linear peptides by product-ion analysis in a reflectron time-of-flight mass spectrometer using matrix-assisted laser desorption ionization.</a> Rapid Commun. Mass Sp. 7, 902-910 (1993).</li><li>Mamyrin, B. A., Karataev, V. I., Shmikk, D. V., Zagulin, V. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+mass-reflectron,+a+new+nonmagnetic+time-of-flight+mass+spectrometer+with+high+resolution.">The mass-reflectron, a new nonmagnetic time-of-flight mass spectrometer with high resolution.</a> Sov. Phys. JETP. 37, 45 (1973).</li><li>Belu, A. M., DeSimone, J. M., Linton, R. W., Lange, G. W., Friedman, R. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Evaluation+of+matrix-assisted+laser+desorption+ionization+mass+spectrometry+for+polymer+characterization.">Evaluation of matrix-assisted laser desorption ionization mass spectrometry for polymer characterization.</a> J. Am. Soc. Mass Spectr. 7, 11-24 (1996).</li><li>Kaufmann, R., Chaurand, P., Kirsch, D., Spengler, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Post-source+decay+and+delayed+extraction+in+matrix-assisted+laser+desorption/ionization-reflectron+time-of-flight+mass+spectrometry.+Are+there+trade-offs?.">Post-source decay and delayed extraction in matrix-assisted laser desorption/ionization-reflectron time-of-flight mass spectrometry. Are there trade-offs?.</a> Rapid Commun. Mass Sp. 10, 1199-1208 (1996).</li><li>Grayson, S. M., Myers, B. K., Bengtsson, J., Malkoch, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Advantages+of+monodisperse+and+chemically+robust+&amp;#34;SpheriCal&amp;#34;+polyester+dendrimers+as+a+&amp;#34;universal&amp;#34;+MS+calibrant.">Advantages of monodisperse and chemically robust &amp;#34;SpheriCal&amp;#34; polyester dendrimers as a &amp;#34;universal&amp;#34; MS calibrant.</a> J. Am. Soc. Mass Spectr. 25, 303-309 (2014).</li><li>McEwen, C. N., Larsen, R. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Accurate+mass+measurement+of+proteins+using+electrospray+ionization+on+a+magnetic+sector+instrument.">Accurate mass measurement of proteins using electrospray ionization on a magnetic sector instrument.</a> Rapid Commun. Mass Sp. 6, 173-178 (1992).</li><li>Anacleto, J. F., Pleasance, S., Boyd, R. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Calibration+of+ion+spray+mass+spectra+using+cluster+ions.">Calibration of ion spray mass spectra using cluster ions.</a> J. Mass Spectrom. 27, 660-666 (1992).</li><li>Fales, H. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Calibration+of+mass+ranges+up+to+m/z+10,000+in+electrospray+mass+spectrometers.">Calibration of mass ranges up to m/z 10,000 in electrospray mass spectrometers.</a> J. Am. Soc. Mass Spectrom. 10, 273-276 (1999).</li><li>Hop, C. E. C. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Generation+of+high+molecular+weight+cluster+ions+by+electrospray+ionization;+implications+for+mass+calibration.">Generation of high molecular weight cluster ions by electrospray ionization; implications for mass calibration.</a> J. Mass Spectrom. 31, 1314-1316 (1996).</li><li>Xiang, B., Prado, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=An+accurate+and+clean+calibration+method+for+MALDI-MS.">An accurate and clean calibration method for MALDI-MS.</a> J. Biomol. Tech. 21, 116-119 (2010).</li><li>Li, Y., Hoskins, J. N., Sreerama, S. G., Grayson, S. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=MALDI&#8722;TOF+mass+spectral+characterization+of+polymers+containing+an+azide+group:+evidence+of+metastable+ions.">MALDI&#8722;TOF mass spectral characterization of polymers containing an azide group: evidence of metastable ions.</a> Macromolecules. 43, 6225-6228 (2010).</li><li>Zenobi, R., Li, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ionization+processes+and+detection+in+MALDI-MS+of+polymers.">Ionization processes and detection in MALDI-MS of polymers.</a> MALDI Mass Spectrometry for Synthetic Polymer Analysis. , 9-26 (2009).</li></ol>

저자는이 연구에 사용 된 구형 calibrants 관련 금융 관심을가지고.

TOF MALDI 질량 분석은 최소한의 조각화와 단독으로 충전된 상태에서 폴리머 이온을 생성 하는 기능 고분자 특성에 대 한 귀중 한 분석 도구. 이 부드러운 이온화 기술을 복합 가스 단계에서 폴리머 이온을 생성 하는 매트릭스에 포함 된 고분자 분석의 고체 샘플을 desorb를 짧은 레이저 펄스를 사용 합니다. 고분자는 질량 분석에 의해 그들의 분석 매트릭스에 추가 된 양이온과 complexation에 의해 일반적으로 이온화 된다. 이 고분자 이온은 다음 그들의 시간--비행의 이온 소스 및 탐지기5 사이 따라 결정 됩니다 그들의 m/z 를 사용할 수 있는 비행 관의 분야 자유로운 지역으로 그들을가지고 추출 전압에 의해 가속 , 32.
다른 폴리머 특성화 기법에 비해, MALDI TOF MS 스펙트럼 품질이 데이터 수집 매개 변수 및 예제 준비에 크게 의존 합니다. 샘플 준비를 위한 설정 공식은 없습니다, 비록 샘플 준비의 각 부품의 기능을 이해 더 빠른 경험적 최적화 할 수 있습니다. MALDI 시료 준비의 가장 중요 한 요소 이므로 매트릭스의 선택을 호환성 매트릭스의 폴리머 분석을 흥분된 매트릭스 이온된 상태5, 싱글, desorbed 고분자를 생성 하는 허용을 위한 중요 한 15,,1719. 일단 적절 한 매트릭스 및 cationization 에이전트를 선택 분석, 매트릭스, 그리고 cationization 에이전트의 올바른 비율을 결정 합니다. 이것은 경험적으로 한 축에 매트릭스 농도 증가에 cationization 에이전트 농도 증가와 MALDI TOF MS 대상 접시 (그림 2)에 (그림 1) 샘플의 2 차원 격자를 생성 하 여 얻을 수 있는 다른.
MALDI 시료 준비와 마찬가지로, 공식은 설정 데이터 수집 지정 매개 변수를 결정 하기 위한 그러나, 특정 동향 스펙트럼 최적화를 신속 하 게 고려해 야 합니다. Reflectron 모드, 해상도 증가 하지만 전반적인 신호 감소, 일반적으로 동위 해상도 얻을 수 있습니다 (이 예제에서 4000 다 아래)에 낮은 질량 범위에 대 한 선택 됩니다. 이러한 경우 monoisotopic 질량 계산 및 피크 따기 방법 사용 되었다. 4000 다 위에 질량을 가진 폴리머 샘플에 대 한 선형 모드 평균 질량 계산 및 피킹 따기 방법 사용 되었다. 신호 해상도 개선, 더 큰 전압 차동 데 큰 대량 고분자의 일반적인 추세와 작은 단위로 이온 소스 전압을 조정 (IS1 IS2 대).
샘플 준비 및 수집을 최적화 하는 동안 매개 변수는 정밀도 제공할 수 있습니다, 대량 정확도 효과적인 교정을 통해 달성 될 수 있다. 주어진된 질량에 대 한 비행의 시간 가변 인수 매개 변수 및 심지어 접시 위치 미묘 하 게 다를 수 있습니다, 그리고 따라서는 보정을 수행 각 최적화 된 인수 매개 변수 집합에 대 한 정확한 질량을 산출 하기 위해 결정5,30. 일단 인수 매개 변수 및 예제 준비 최적화 되어, 스펙트럼이 정확한 동일한 조건을 사용 하 여 보정 한다.
뛰어난 해상도 고분자의 최적화 된 MALDI TOF 질량 스펙트럼에서 관찰 하는 대량 정확도 때문에이 기술은 폴리머 대량 유통 데이터를 결정 하기 위한 유용한 무료 도구 되고있다. 그러나, 폴리머 대량 유통 내 개별 반복 단위를 해결 하는 능력 특정 이점 분석을 위한 제공 끝 그룹 다른 폴리머를 기준으로 젤 투과 크로마토그래피 (GPC) 등 특성화 기법 및 핵 자기 공명 (NMR) 이것은 특히 끝 그룹 기능화 반응의 충실도 및 끝 그룹 활용형 반응의 양적 성격을 결정 하기 위한 중요 합니다. 이 원고는 대량 정확도, 신뢰의 높은 수준의 끝 그룹 수정 확인 가능 최대 두 개의 소수 포인트로 개별 고분자 반복 단위의 질량을 해결 하는 능력을 보여 주었다. 정밀 고분자 합성 분야에서 최근 수행 된 실질적인 진보 MALDI TOF MS는 점점 더 중요 한 도구가 되고있다 결정 고분자 구조와 기능.

생활 개선 중 합 기술, 정밀 고분자 양적 기능성된 끝 그룹은 점점 더 사용할 수 있는1. 아 지 드 alkyne 및 thiolene 클릭 화학의 동시 개발 활성화 고분자 하이브리드 재료2,3,4의 범위에 대 한 액세스를 제공 하는 다른 moieties에의 약 양적 커플링 . 그러나, 정확한 분석 기법 모두 시작 자료와이 폴리머 활용 반응의 제품을 특성화 해야 합니다. 매트릭스 보조 레이저 탈 착/이온화 시간의 비행 질량 분석 (MS MALDI TOF)은 최소 하나의 충전 상태에서 폴리머 이온을 생성할 수 있기 때문에 고분자 특성화에 대 한 귀중 한 부드러운 이온화 분석 기술 조각화5,6. MALDI TOF MS 폴리머 대량 유통 내 개별 n mers의 해상도 가진 질량 스펙트럼을 제공할 수 있기 때문에 고분자 특성의 다른 기존의 방법에 비해 주요 이점이 있다. 결과적으로, 같은 질량 스펙트럼 평균 분자량에 대 한 정확한 정보를 제공할 수, 단위 질량, 및 분자량 dispersity7, 차례로 전송 체인8 등 경쟁 중 합 메커니즘을 명료 수 있는 반복 . 그러나, MALDI TOF MS는 특히 강력한 폴리머 끝 그룹9,10, 끝 그룹 수정10,11 를 확인 하는 데 사용할 수 있습니다에 대 한 정보를 제공 하 고 다른 변환12 폴리머 cyclizations11,13등. 똑같이 중요 한, 상대적으로 적은 양의 분석 (서브-마이크로 그램)에 필요한 대량 spectrometric 분석 하면이 기술을 특성화에 대 한 유용한 유일한 재료 양의 추적 사용할 수 있습니다.
고분자의 MALDI TOF MS 분석 4 명료한 단계로 분할 될 수 있다: 준비, 장비 교정, 스펙트럼 수집 및 데이터 분석. 샘플 준비 이며 생성 하기 위한 가장 중요 한 단계 MALDI TOF 질량 스펙트럼에 최적화 된 샘플은 악기14,15에 도입 되기 전에 발생 합니다. 고분자 분석으로 유사한 가용성 매개 변수를 적절 한 매트릭스의 선택은 고품질 MALDI TOF 질량 스펙트럼을 얻기 위해 중요 한 고 매트릭스 선택에 대 한 지침14,15, 다른 곳에서 보고 16,17. 폴리머 MALDI 시료 준비에 대 한 "조리법"의 데이터베이스 또한 출판된 온라인18있다. 새로운 폴리머 매트릭스 선택 첫 번째 고분자의 용 해도 이해 유사한 가용성 매개 변수14,19행렬을 선택 하 여 접근 수 있다. 높은 양성자 선호도 고분자 protonated 대부분 행렬14 (이 자주 carboxylic 산 그룹 포함), 수 있지만 다른 폴리머 cationization 에이전트는 필요한14. 알칼리 이온 포함 하는 산소와 잘 adduct 종 (예. 폴리에스터 및 polyethers), 불포화 탄화수소 (예. 폴리스 티 렌) 전이 금속은과 구리 이온14, 와 adduct 19. 등뼈에 산소 원자를 포함 하는이 실험에서 폴리머 샘플, 때문에 나트륨 또는 칼륨 trifluoroacetate (TFA) cationization 요원으로 사용 되었다. 일단 행렬 및 cationization 에이전트를 선택 분석, 양이온 에이전트, 그리고 매트릭스의 상대적 비율 높은 신호 잡음을 보장 하기 위해 신중 하 게 낙관 되어야 한다. 그러나이 절차에서는 샘플 준비에 대 한 매개 변수는 이미 최적화 된, 실험 샘플 최적화 절차 (단계 1.4.1., 그림 1)을 체계적으로 세 가지 구성 요소 (분석의 농도 변화 매트릭스와 양이온) 급속 하 게 그들의 최적 비율을 결정 하는 데 효과적 이다.
데이터 수집에는 매개 변수 수의 최적화를 필요합니다. 가장 중요 한 매개 변수는 분석기의 포지티브 또는 네거티브 이온 모드, 악기의 동작 모드 (선형 반사 체 대), 가속 전압 및 추출 지연 시간을 포함합니다. 해상도 증가 시킬 수 있다 또 다른 방법은 "reflectron" 모드20,21,,2223의 활용을 통해 이다. Reflectron 모드 본질적으로 다시 바꾸고 이온 다른 momentums와 함께 하는 동안 소스 근처 검출기 향해 비행 튜브의 끝에 이온을 반영 하 고 따라서 비록 해상도 증가 하 여 검출기에 이온의 비행 경로 두 배로 신호 강도 감소. 또한, 더 높은 해상도 스펙트럼 수와 충돌의 에너지를 감소 시키고 따라서 조각화 및 키네틱 이질성24신호 대 잡음 비율을 최소화 하는 레이저 파워를 감소 하 여 얻을 수 있습니다. 모든 이러한 매개 변수를 조정, 이온 초기 위치 또는 레이저 탈 착 과정에서 발생 하는 속도에 있는 이질성의 효과 최소화 하기 위해 집중 될 수 있습니다. 인수 매개 변수는 최적화 될 때 동위 해상도 자주 얻을 수 있습니다 10000 다 이상의 질량을 가진 이온에 대 한 비록 이것이 또한 악기 디자인과 비행 튜브의 길이 따라 다릅니다. 적어도 하나의 heteroatom 포함 하는 대부분의 유기 화합물 complexing 리튬, 나트륨, 칼륨 등 알칼리 양이온으로 하는 경향이 있다. 알칼리 금속 많은 monoisotopes 또는 제한 된 동위의 따라서 분포 확대 하지 않습니다.
악기 매개 변수 데이터 정밀도 최적화 하기 위해 조정 될 수 있다, 하는 동안 데이터 정확도 적절 한 교정11만 달성 된다. 단백질 및 펩 티 드 그들의 monodispersity 및 가용성, calibrants로 원래 이용 되었다 그러나 가변 안정성과 불순물25의 유행에서. 더 비용 효율적이 고 안정적인 대안 무기 클러스터와 polydisperse 고분자26,27,,2829를 포함 했다. 불행히도, 이러한 대안 기능 복잡 하 게 더 작은 질량으로 대량 할당, 전반적으로, 그들을 교정 10000 다 아래에 유용 하 중 분산. 이 대처 하기 위해, 그레이 외문제. 25 는 dendrimer 기반, 폴 리 에스테 MS 교정 시스템을 개발 단 분산, 그리고 둘 다 광범위 한 매트릭스 및 용 매 호환성, 선반 수명 안정성 (> 8 년), 그리고 낮은 생산 비용을 자랑. 이 시스템의 강점을 바탕으로, 그것은 이러한 실험에 대 한 calibrant로 선정 됐다.
교정의 두 가지 주요 유형이 있다: 내부와 외부30. 외부 보정, 대괄호는 분석의 질량을 가진 표준 교정 파일을 생성할 수 있는 별도 질량 스펙트럼을 생성 하는 분석 보다 다른 샘플 위치에 MALDI 표적 격판덮개에 배치 됩니다. 다른 한편으로, 높은 정확도를 calibrant 및 분석 신호 하이브리드 스펙트럼 분석으로는 calibrant 혼합을 포함 하는 내부 캘리브레이션 자주 얻을 수 있습니다. 아래 설명 된 절차에는 외부 교정 구현 되었습니다. 대량 규모의 적절 한 교정, 후 정확한 분석 대량 데이터 취득 될 수 있다. 가장 정확한 구경 측정을 위해 데이터 수집 보정 후 곧 발생 하는 것 중요 하다.
마지막으로, 일단 최적화, 보정 데이터 세트 인수 했다, 그리고 폴리머 샘플에 대 한 구조 정보를 제공 하는 데이터 분석 했다. 폴리머 분포 내에서 n-메 사이의 간격 반복 단위의 정확한 측정을 제공할 수 있다 질량. 수 평균 분자량 (Mn) 및 기타 대량 메일 계산 (예를 들어, Mw (중량 평균 분자량) 및 Đ (dispersity)) 또한 질량 스펙트럼 (에서 신호 분배에서 결정 될 수 있다 4.2 계산 단계). 아마도 가장 독특한, homopolymers, 경우 끝 그룹의 합계 확인할 수 있습니다 혼자 반복 단위의 질량에 관하여 폴리머 분포의 오프셋을 결정 하 여. 크기 배제 크로마토그래피, 푸리에 변환 적외선 분광학, 등 전통적인 폴리머 특성화 기법을 보완 하는 귀중 한 특성 데이터를 제공 하는 풍부한 정보 MALDI TOF 질량 스펙트럼 및 핵 자기 공명입니다.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" style="width:1077px;" width="1076">
	<tbody>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:273px;">polyoxyethylene bis(azide) (Mn=2000)</td>
			<td style="width:119px;">MilliporeSigma (Aldrich)</td>
			<td style="width:119px;">689696</td>
			<td style="width:567px;">http://www.sigmaaldrich.com/catalog/product/aldrich/689696?lang=en&#38;region=US</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:273px;">poly(ethylene glycol) 2-amino-ethyl ether acetic acid (Mn= 5000)</td>
			<td style="width:119px;">MilliporeSigma (Aldrich)</td>
			<td style="width:119px;">757918</td>
			<td>http://www.sigmaaldrich.com/catalog/product/aldrich/757918?lang=en&#38;region=US</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:273px;">poly(L-lactide), thiol terminated (Mn=2500)</td>
			<td style="width:119px;">MilliporeSigma (Aldrich)</td>
			<td style="width:119px;">747386</td>
			<td>http://www.sigmaaldrich.com/catalog/product/aldrich/747386?lang=en&#38;region=US</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:273px;">SpheriCal&#174;&#160; peptide low</td>
			<td style="width:119px;">MilliporeSigma (Sigma-Aldrich)</td>
			<td style="width:119px;">PFS20</td>
			<td>http://www.sigmaaldrich.com/catalog/product/sial/pfs20?lang=en&#38;region=US</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:273px;">SpheriCal&#174;&#160; peptide medium</td>
			<td style="width:119px;">MilliporeSigma (Sigma-Aldrich)</td>
			<td style="width:119px;">PFS21</td>
			<td>http://www.sigmaaldrich.com/catalog/product/sial/pfs21?lang=en&#38;region=US</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:273px;">SpheriCal&#174;&#160; peptide high</td>
			<td style="width:119px;">MilliporeSigma (Sigma-Aldrich)</td>
			<td style="width:119px;">PFS22</td>
			<td>http://www.sigmaaldrich.com/catalog/product/sial/pfs22?lang=en&#38;region=US</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:273px;">2,4 dinitrofluorobenzene</td>
			<td style="width:119px;">TCI</td>
			<td style="width:119px;">A5512</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:273px;">maleimide</td>
			<td style="width:119px;">MilliporeSigma (Aldrich)</td>
			<td style="width:119px;">129585</td>
			<td>http://www.sigmaaldrich.com/catalog/product/aldrich/129585?lang=en&#38;region=US</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:273px;">1-ethynylfluorobenzene&#160;</td>
			<td style="width:119px;">Fisher Scientific</td>
			<td style="width:119px;">766-98-3</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:273px;">triethylamine</td>
			<td style="width:119px;">MilliporeSigma (Sigma-Aldrich)</td>
			<td style="width:119px;">471283</td>
			<td>http://www.sigmaaldrich.com/catalog/product/sial/471283?lang=en&#38;region=US</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:273px;">N,N,N&#39;,N&#34;,N&#34;-pentamethyldiethylenetriamine</td>
			<td style="width:119px;">MilliporeSigma (Aldrich)</td>
			<td style="width:119px;">369497</td>
			<td>http://www.sigmaaldrich.com/catalog/product/aldrich/369497?lang=en&#38;region=US</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:273px;">Copper(I)Bromide</td>
			<td style="width:119px;">MilliporeSigma (Aldrich)</td>
			<td style="width:119px;">254185</td>
			<td>http://www.sigmaaldrich.com/catalog/product/aldrich/254185?lang=en&#38;region=US</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:273px;">glacial acetic acid</td>
			<td style="width:119px;">Fisher Scientific</td>
			<td style="width:119px;">A38212</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:273px;">sodium metabisulfite</td>
			<td style="width:119px;">MilliporeSigma (Sigma-Aldrich)</td>
			<td style="width:119px;">13459</td>
			<td>http://www.sigmaaldrich.com/catalog/product/sigald/13459?lang=en&#38;region=US</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:273px;">potassium trifluoroacetate</td>
			<td style="width:119px;">MilliporeSigma (Aldrich)</td>
			<td style="width:119px;">281883</td>
			<td>http://www.sigmaaldrich.com/catalog/product/aldrich/281883?lang=en&#38;region=US</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:273px;">trans-2-[3-(tert-butylphenyl)-2-methyl-2-properylidene]malononitrile</td>
			<td style="width:119px;">MilliporeSigma (Aldrich)</td>
			<td style="width:119px;">727881</td>
			<td>http://www.sigmaaldrich.com/catalog/product/aldrich/727881?lang=en&#38;region=US</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:273px;">a-cyano-4-hydroxycinnamic acid</td>
			<td style="width:119px;">MilliporeSigma (Sigma)</td>
			<td style="width:119px;">C8982</td>
			<td>http://www.sigmaaldrich.com/catalog/product/sigma/c8982?lang=en&#38;region=US</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:273px;">tetrahydrofuran</td>
			<td style="width:119px;">Fisher Scientific</td>
			<td style="width:119px;">T425-1</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:273px;">dichloromethane</td>
			<td style="width:119px;">VWR Analytical</td>
			<td style="width:119px;">BDH1113-4LG</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

characterization of synthetic polymers via matrix assisted laser desorption ionization time of flight (maldi-tof) mass spectrometry

합성 homopolymers의 특성에 사용할 수 있는 많은 기술이 있다 그러나 몇 가지 유용한 매트릭스 보조 레이저 탈 착 이온화 시간의 비행 질량 분석 (MS MALDI TOF) 끝 그룹 분석에 대 한 정보 제공. 이 자습서의 샘플 준비, 스펙트럼 수집, 최적화에 대 한 메서드를 보여 줍니다 및 견본 준비 동안 MALDI TOF 양 중요 한 매개 변수를 사용 하 여 합성 고분자의 데이터 분석, 매트릭스의 선택을 포함 적절 한 cationization 소금 및 행렬, 양이온, 및 분석의 상대적 비율 조정의 식별. 인수 매개 변수 모드 등 (선형 또는 반사), 편광 (양수 또는 음수), 가속 전압 및 지연 시간, 중요 한도 있습니다. 화학 합성 고분자 및 데이터 수집 매개 변수 및 예제 준비 조건 최적화 관련 된 지식이 주어진 스펙트럼 얻을 수 있어야 충분 한 해상도와 대량 정확도 명확한 수 있도록 반복 단위 뿐만 아니라 대부분 homopolymers (10000 아래 대 중)의 끝 그룹의 질량 및 전반적인 분자량 분포. 고분자의 제한 된 집합에 설명, 비록 끝 그룹 결정은 좁은 dispersity와 homopolymers에 대 한 가능 하지만 이러한 일반적인 기법을 질량 분포를 결정 하기 위한 합성 고분자의 훨씬 넓은 범위에 적용 됩니다.

Watch this Scientific Journal Video about Characterization of Synthetic Polymers via Matrix Assisted Laser Desorption Ionization Time of Flight MALDI-TOF Mass Spectrometry at JoVE.com

Characterization of Synthetic Polymers via Matrix Assisted Laser Desorption Ionization Time of Flight MALDI-TOF Mass Spectrometry

샘플 준비, 스펙트럼 획득 및 데이터 분석의 최적화를 포함 하 여 합성 고분자의 질량 분석 (MS MALDI TOF) 특성을 설명 하는 비행의 매트릭스 보조 레이저 탈 착 이온화 시간에 대 한 프로토콜.

매트릭스를 통해 합성 고분자의 특성화 지원 레이저 탈 착 이온화 시간의 비행 (TOF MALDI) 질량 분석

There are many techniques that can be employed in the characterization of synthetic homopolymers, but few provide as useful of information for end group ...

characterization-synthetic-polymers-via-matrix-assisted-laser

Research

Education

JoVE Core

JoVE Journal

Organic Chemistry

Chemistry

Unit 1

Characterization of Synthetic Polymers via Matrix Assisted Laser Desorption Ionization Time of Flight (MALDI-TOF) Mass Spectrometry

Synthetic Polymers

SCIENTISTS IN ACTION

24.8K 조회수.  Tulane University. 샘플 준비, 스펙트럼 획득 및 데이터 분석의 최적화를 포함 하 여 합성 고분자의 질량 분석 (MS MALDI TOF) 특성을 설명 하는 비행의 매트릭스 보조 레이저 탈 착 이온화 시간에 대 한 프로토콜.

비디오: Characterization of Synthetic Polymers via Matrix Assisted Laser Desorption Ionization Time of Flight MALDI-TOF Mass Spectrometry

Matrix-assisted Laser Desorption/Ionization Time of Flight (MALDI-TOF) Mass Spectrometric Analysis of Intact Proteins Larger than 100 kDa

Effectively determining masses of proteins is critical to many biological studies (e.g. for structural biology investigations). Accurate mass determination allows one to evaluate the correctness of protein primary sequences, the presence of mutations and/or post-translational modifications, the possible protein degradation, the sample homogeneity, and the degree of isotope incorporation in case of labelling (e.g. 13C labelling).
Electrospray ionization (ESI) mass spectrometry (MS) is widely used for mass determination of denatured proteins, but its efficiency is affected by the composition of the sample buffer. In particular, the presence of salts, detergents, and contaminants severely undermines the effectiveness of protein analysis by ESI-MS. Matrix-assisted laser desorption/ionization (MALDI) MS is an attractive alternative, due to its salt tolerance and the simplicity of data acquisition and interpretation. Moreover, the mass determination of large heterogeneous proteins (bigger than 100 kDa) is easier by MALDI-MS due to the absence of overlapping high charge state distributions which are present in ESI spectra.
Here we present an accessible approach for analyzing proteins larger than 100 kDa by MALDI-time of flight (TOF). We illustrate the advantages of using a mixture of two matrices (i.e. 2,5-dihydroxybenzoic acid and &#945;-cyano-4-hydroxycinnamic acid) and the utility of the thin layer method as approach for sample deposition. We also discuss the critical role of the matrix and solvent purity, of the standards used for calibration, of the laser energy, and of the acquisition time. Overall, we provide information necessary to a novice for analyzing intact proteins larger than 100 kDa by MALDI-MS.

Matrix-assisted Laser Desorption/Ionization Time of Flight MALDI-TOF Mass Spectrometric Analysis of Intact Proteins Larger than 100 kDa

Accurate mass measurement represents an important step during the investigation of proteins. Matrix-assisted laser desorption/ionization (MALDI) mass spectrometry (MS) can be used for such determination and its key advantage is the tolerance to salts, detergents and contaminants. Here we illustrate an accessible approach for the analysis of proteins larger than 100 kDa by MALDI-MS.

비행의 레이저 탈착 / 이온화 시간 본래대로 단백질의 (MALDI-TOF) 질량 분광 분석 매트릭스를 이용한 큰 100 kDa의

Effectively determining masses of proteins is critical to many biological studies (e.g. for structural biology investigations). Accurate mass ...

연구

화학

Profiling the Triacylglyceride Contents in Bat Integumentary Lipids by Preparative Thin Layer Chromatography and MALDI-TOF Mass Spectrometry

The mammalian integument includes sebaceous glands that secrete an oily material onto the skin surface. Sebum production is part of the innate immune system that is protective against pathogenic microbes. Abnormal sebum production and chemical composition are also a clinical symptom of specific skin diseases. Sebum contains a complex mixture of lipids, including triacylglycerides, which is species-specific. The broad chemical properties exhibited by diverse lipid classes hinder the specific determination of sebum composition. Analytical techniques for lipids typically require chemical derivatizations that are labor-intensive and increase sample preparation costs. This paper describes how to extract lipids from mammalian integument, separate broad lipid classes by thin-layer chromatography, and profile the triacylglyceride contents using matrix-assisted laser desorption/ionization time-of-flight mass spectrometry. This robust method enables a direct determination of the triacylglyceride profiles among species and individuals, and it can be readily applied to any taxonomic group of mammals.

Mammalian integument contains solvent-extractable lipids that can provide chemical compositions characteristic of individual species. This paper presents a routine method for separating broad lipid classes isolated from integumentary tissues using thin layer chromatography and determining the triacylglyceride profile by matrix-assisted laser desorption/ionization time-of-flight mass spectrometry.

제조 박층 크로마토 그래피 및 MALDI-TOF 질량 분석에 의해 박쥐 외피 지질의 Triacylglyceride 내용을 프로파일 링

The mammalian integument includes sebaceous glands that secrete an oily material onto the skin surface. Sebum production is part of the innate immune ...

A Study of the Complexation of Mercury(II) with Dicysteinyl Tetrapeptides by Electrospray Ionization Mass Spectrometry

In this study we evaluated a method for the characterization of complexes, formed in different relative ratios of mercury(II) to dicysteinyl tetrapeptide, by electrospray ionization orbitrap mass spectrometry. This strategy is based on previous successful characterization of mercury-dicysteinyl complexes involving tripeptides by utilizing mass spectrometry among other techniques. Mercury(II) chloride and a dicysteinyl tetrapeptide were incubated in a degassed buffered medium at varying stoichiometric ratios. The complexes formed were subsequently analyzed on an electrospray mass spectrometer consisting of a hybrid linear ion- and orbi- trap mass analyzer. The electrospray ionization mass spectrometry (ESI-MS) spectra were acquired in the positive mode and the observed peaks were then analyzed for distinct mercury isotopic distribution patterns and associated monoisotopic peak. This work demonstrates that an accurate stoichiometry of mercury and peptide in the complexes formed under specified electrospray ionization conditions can be determined by using high resolution ESI MS based on distinct mercury isotopic distribution patterns.

A Study of the Complexation of MercuryII with Dicysteinyl Tetrapeptides by Electrospray Ionization Mass Spectrometry

The characterization of complexes formed in different relative ratios of mercury(II) to dicysteinyl tetrapeptides by electrospray ionization orbitrap mass spectrometry is presented.

전자 분무 이온화 질량 분석에 의해 Dicysteinyl Tetrapeptides와 수은 (II)의 복합체 형성에 관한 연구

In this study we evaluated a method for the characterization of complexes, formed in different relative ratios of mercury(II) to dicysteinyl tetrapeptide, ...

Visualization of Ambient Mass Spectrometry with the Use of Schlieren Photography

This manuscript outlines how to visualize mass spectrometry ambient ionization sources using schlieren photography. In order to properly optimize the mass spectrometer, it is necessary to characterize and understand the physical principles of the source. Most commercial ambient ionization sources utilize jets of nitrogen, helium, or atmospheric air to facilitate the ionization of the analyte. As a consequence, schlieren photography can be used to visualize the gas streams by exploiting the differences in refractive index between the streams and ambient air for visualization in real time. The basic setup requires a camera, mirror, flashlight, and razor blade. When properly configured, a real time image of the source is observed by watching its reflection. This allows for insight into the mechanism of action in the source, and pathways to its optimization can be elucidated. Light is shed on an otherwise invisible situation.

This paper presents a protocol for the visualization of gaseous streams of an ambient ionization source using schlieren photography and mass spectrometry.

슐 리렌 사진의 사용과 주변 질량 분석의 시각화

This manuscript outlines how to visualize mass spectrometry ambient ionization sources using schlieren photography. In order to properly optimize the mass ...

Fizzy Extraction of Volatile Organic Compounds Combined with Atmospheric Pressure Chemical Ionization Quadrupole Mass Spectrometry

Chemical analysis of volatile and semivolatile compounds dissolved in liquid samples can be challenging. The dissolved components need to be brought to the gas phase, and efficiently transferred to a detection system. Fizzy extraction takes advantage of the effervescence phenomenon. First, a carrier gas (here, carbon dioxide) is dissolved in the sample by applying overpressure and stirring the sample. Second, the sample chamber is decompressed abruptly. Decompression leads to the formation of numerous carrier gas bubbles in the sample liquid. These bubbles assist the release of the dissolved analyte species from the liquid to the gas phase. The released analytes are immediately transferred to the atmospheric pressure chemical ionization interface of a triple quadrupole mass spectrometer. The ionizable analyte species give rise to mass spectrometric signals in the time domain. Because the release of the analyte species occurs over short periods of time (a few seconds), the temporal signals have high amplitudes and high signal-to-noise ratios. The amplitudes and areas of the temporal peaks can then be correlated with concentrations of the analytes in the liquid samples subjected to fizzy extraction, which enables quantitative analysis. The advantages of fizzy extraction include: simplicity, speed, and limited use of chemicals (solvents).

Fizzy extraction is a new laboratory technique for analysis of volatile and semivolatile compounds. A carrier gas is dissolved in the liquid sample by applying overpressure and stirring the sample. The sample chamber is then decompressed. The analyte species are liberated to the gas phase due to effervescence.

Chemical analysis of volatile and semivolatile compounds dissolved in liquid samples can be challenging. The dissolved components need to be brought to ...

Real-time Breath Analysis by Using Secondary Nanoelectrospray Ionization Coupled to High Resolution Mass Spectrometry

Exhaled volatile organic compounds (VOCs) have aroused considerable interest, since they can serve as biomarkers for disease diagnosis and environmental exposure in a non-invasive manner. In this work, we present a protocol to characterize the exhaled VOCs in real time by using secondary nanoelectrospray ionization coupled to high resolution mass spectrometry (Sec-nanoESI-HRMS). The homemade Sec-nanoESI source was readily set up based on a commercial nanoESI source. Hundreds of peaks were observed in the background-subtracted mass spectra of exhaled breath, and the mass accuracy values are -4.0-13.5 ppm and -20.3-1.3 ppm in the positive and negative ion detection modes, respectively. The peaks were assigned with accurate elemental composition according to the accurate mass and isotopic pattern. Less than 30 s is used for one exhalation measurement, and it takes approximately 7 min for six replicated measurements.

A protocol for characterizing chemical composition of exhaled breath in real time by using secondary nanoelectrospray ionization coupled to high resolution mass spectrometry is demonstrated.

고 분해능 질량 분석을 결합 하는 보조 Nanoelectrospray 이온화를 사용 하 여 실시간 호흡 분석

Exhaled volatile organic compounds (VOCs) have aroused considerable interest, since they can serve as biomarkers for disease diagnosis and environmental ...

Synthesis and Mass Spectrometry Analysis of Oligo-peptoids

Peptoids are sequence-controlled peptide-mimicking oligomers consisting of N-alkylated glycine units. Among many potential applications, peptoids have been thought of as a type of molecular information storage. Mass spectrometry analysis has been considered the method of choice for sequencing peptoids. Peptoids can be synthesized via solid phase chemistry using a repeating two-step reaction cycle. Here we present a method to manually synthesize oligo-peptoids and to analyze the sequence of the peptoids using tandem mass spectrometry (MS/MS) techniques. The sample peptoid is a nonamer consisting of alternating N-(2-methyloxyethyl)glycine (Nme) and N-(2-phenylethyl)glycine (Npe), as well as an N-(2-aminoethyl)glycine (Nae) at the N-terminus. The sequence formula of the peptoid is Ac-Nae-(Npe-Nme)4-NH2, where Ac is the acetyl group. The synthesis takes place in a commercially available solid-phase reaction vessel. The rink amide resin is used as the solid support to yield the peptoid with an amide group at the C-terminus. The resulting peptoid product is subjected to sequence analysis using a triple-quadrupole mass spectrometer coupled to an electrospray ionization source. The MS/MS measurement produces a spectrum of fragment ions resulting from the dissociation of charged peptoid. The fragment ions are sorted out based on the values of their mass-to-charge ratio (m/z). The m/z values of the fragment ions are compared against the nominal masses of theoretically predicted fragment ions, according to the scheme of peptoid fragmentation. The analysis generates a fragmentation pattern of the charged peptoid. The fragmentation pattern is correlated to the monomer sequence of the neutral peptoid. In this regard, MS analysis reads out the sequence information of the peptoids.

A protocol is described for the manual synthesis of oligo-peptoids followed by sequence analysis by mass spectrometry.

합성 및 올리고 peptoids의 질량 분석 분석

Peptoids are sequence-controlled peptide-mimicking oligomers consisting of N-alkylated glycine units. Among many potential applications, peptoids have ...

An Efficient Sample Preparation Method to Enhance Carbohydrate Ion Signals in Matrix-assisted Laser Desorption/Ionization Mass Spectrometry

Sample preparation is a critical process in mass spectrometry (MS) analysis of carbohydrates. Although matrix-assisted laser desorption/ionization (MALDI) MS is the method of choice in carbohydrate analysis, poor ion signal and data reproducibility of carbohydrate samples continue to be severe problems. For quantitative analysis of carbohydrates, an effective analytical protocol providing superior data quality is necessary. This video demonstrates sample preparation protocols to improve signal intensity and minimize data variation of carbohydrates in MALDI-MS. After drying and crystallization of sample droplets, the crystal morphology is reformed by methanol before mass spectrometric analysis. The enhancement in carbohydrate signal is examined with MALDI imaging mass spectrometry (IMS). Experimental results show that crystal reformation adjusts crystalline structures and redistributes carbohydrate analytes. In comparison with the dried droplet preparation method in conventional MALDI-MS, reforming carbohydrate crystal morphologies with methanol shows significantly better signal intensity, ion image distribution, and data stability. Since the protocols demonstrated herein do not involve changes in sample composition, they are generally applicable to various carbohydrates and matrixes.

A protocol for enhancing carbohydrate ion signals in MALDI mass spectrometry by reforming crystalline structures during sample preparation processes is demonstrated.

매트릭스 보조 레이저 탈 착/이온화 질량 분석에서 탄수화물 이온 신호를 강화 하는 효율적인 샘플 준비 방법

Sample preparation is a critical process in mass spectrometry (MS) analysis of carbohydrates. Although matrix-assisted laser desorption/ionization (MALDI) ...

Imaging Corrosion at the Metal-Paint Interface Using Time-of-Flight Secondary Ion Mass Spectrometry

Corrosion developed at the paint and aluminum (Al) metal-paint interface of an aluminum alloy is analyzed using time-of-flight secondary ion mass spectrometry (ToF-SIMS), illustrating that SIMS is a suitable technique to study the chemical distribution at a metal-paint interface. The painted Al alloy coupons are immersed in a salt solution or exposed to air only. SIMS provides chemical mapping and 2D molecular imaging of the interface, allowing direct visualization of the morphology of the corrosion products formed at the metal-paint interface and mapping of the chemical after corrosion occurs. The experimental procedure of this method is presented to provide technical details to facilitate similar research and highlight pitfalls that may be encountered during such experiments.

Time-of-flight secondary ion mass spectrometry is applied to demonstrate the chemical mapping and corrosion morphology at the metal-paint interface of an aluminum alloy after being exposed to a salt solution compared with a specimen exposed to air.

비행 시간 보조 이온 질량 분석기를 사용 하 여 금속 페인트 인터페이스의 이미징 부식

Corrosion developed at the paint and aluminum (Al) metal-paint interface of an aluminum alloy is analyzed using time-of-flight secondary ion mass ...

Analysis of Complex Molecules and Their Reactions on Surfaces by Means of Cluster-Induced Desorption/Ionization Mass Spectrometry

Desorption/Ionization Induced by Neutral SO2 Clusters (DINeC) is employed as a very soft and efficient desorption/ionization technique for mass spectrometry (MS) of complex molecules and their reactions on surfaces. DINeC is based on a beam of SO2 clusters impacting on the sample surface at low cluster energy. During cluster-surface impact, some of the surface molecules are desorbed and ionized via dissolvation in the impacting cluster; as a result of this dissolvation-mediated desorption mechanism, low cluster energy is sufficient and the desorption process is extremely soft. Both surface adsorbates and molecules of which the surface is composed of can be analyzed. Clear and fragmentation-free spectra from complex molecules such as peptides and proteins are obtained. DINeC does not require any special sample preparation, in particular no matrix has to be applied. The method yields quantitative information on the composition of the samples; molecules at a surface coverage as low as 0.1 % of a monolayer can be detected. Surface reactions such as H/D exchange or thermal decomposition can be observed in real-time and the kinetics of the reactions can be deduced. Using a pulsed nozzle for cluster beam generation, DINeC can be efficiently combined with ion trap mass spectrometry. The matrix-free and soft nature of the DINeC process in combination with the MSn capabilities of the ion trap allows for very detailed and unambiguous analysis of the chemical composition of complex organic samples and organic adsorbates on surfaces.

Neutral SO2 clusters of low kinetic energy (&#60; 0.8 eV/constituent) are used to desorb complex surface molecules such as peptides or lipids for further analysis by means of mass spectrometry using an ion trap mass spectrometer. No special sample preparation is required, and real-time observation of reactions is possible.