3-Nitrotyrosine 대기 환경을 통해 고성능 액체 착 색 인쇄기-전기 화학 검출기 시스템에서의 탐지

이 방법은 니트라피린과 3 니트로티로신에 대한 환경 연구의 핵심 질문에 답하는 데 도움이 될 수 있습니다. 이 기술의 주요 장점은 공기 샘플 필터에서 3 니트로티로신을 검출하는 독특하고 매우 민감한 방법입니다. 7미크론 미만의 총 부유 입자 또는 미립자 물질을 수집하기 위해 먼저 바인더 3 석영 필터의 무게를 측정하고 대량 공기 샘플러에 고정합니다. PM7을 수집하거나 수집된 총 일시 중단 된 입자에 대해 필터를 덮으십시오. 공기 샘플러를 분당 1,000리터로 7일 동안 지속적으로 실행합니다. 사전 필터를 크기 분류 장치에 로드하고 저용량 공기 샘플러에 크기 분류 장치 및 백업 필터를 설치합니다. 7일 동안 분당 116개의 쓰레기에서 공기 샘플러를 실행하여 백업 필터에서 PM2.5를 수집합니다. 샘플링이 완료되면 총 유량 볼륨을 기록합니다. 필터의 무게를 측정하고 수집된 파티클의 무게를 계산합니다. 필터를 비닐 봉지에 밀봉하여 섭씨 30도에 보관하십시오.Next는 6X 비특이적 프로테아제 칵테일과 아세테이트 버퍼 500마이크로리터를 준비하고 5000달톤의 분자량 차단으로 달라시스 멤브레인에 놓습니다. 채워진 멤브레인을 아세테이트 완충제의 1L에 담그고 24~36시간 동안 섭씨 4도에서 저어주며, 12시간마다 완충제를 교체하여 인인성 3-니트로티로신과 질산염을 제거합니다.그런 다음 투석 된 프로테아제용의 단백질 농도를 아빅콘시닌산 단백질 분석으로 측정합니다. 그 후 냉동실에서 필터를 제거하고 가방에 밀봉하면서 실온으로 따뜻하게 할 수 있습니다. 그런 다음 필터의 미립자 커버 영역에서 최대 5 6 밀리미터 너비의 원을 펀치하고 1.5 밀리리터 마이크로 원심 분리 튜브에 원을 배치합니다. 50을 포함하는 아세테이트 버퍼 300마이크로리터 준비