Name: quantitative sers detection of uric acid via formation of precise plasmonic nanojunctions within aggregates of gold nanoparticles and cucurbit[n]uril
Uploaded: 2020-10-03T13:00:00.000+00:00
Duration: 10 min 2 s
Description: Watch this Scientific Journal Video about Quantitative SERS Detection of Uric Acid via Formation of Precise Plasmonic Nanojunctions within Aggregates of Gold Nanoparticles and Cucurbit[n]uril at JoVE.

TCL은 Royal Society Research Grant 2016 R1 (RG150551)과 EPSRC (EP / P511262 / 1)의 기관 후원 상을 통해 자금을 지원 한 UCL BEAMS Future Leader Award의 지원에 감사드립니다. WIKC, TCL 및 IPP는 EPSRC M3S CDT (EP / L015862 / 1)를 통해 A * STAR-UCL 연구 첨부 프로그램이 자금을 지원하는 학생회에 감사드립니다. GD와 TJ는 학생들을 후원해 주신 EPSRC M3S CDT (EP/L015862/1)에 감사드립니다. TJ와 TCL은 TJ의 학생들에 기여한 Camtech Innovations를 인정합니다. 모든 저자는 UCL Open Access Fund에 감사드립니다.

1. Au NPs의 합성
<ol><li>종래의 투르케비치 방법을 통한 Au 종자의 합성26<ol>
<li>98.5 mg의 HAuCl4· 3H2O전구체와 유리 바이알에 탈이온수 10 mL. 참고: 소량의 HAuCl4 전구체를 계량 보트로 옮기고 HAuCl4 전구체가 금속 실험실을 부식시키기 때문에 금속 주걱 대신 플라스틱 주걱을 사용하여 결정을 계량합니다. HAuCl4는 흡습성이므로 가능한 한 신속하게 칭량 단계를 수행해야하므로 대기에서 물을 흡수하여 시간이 지남에 따라 무게가 증가합니다. HAuCl4는 부식성이 강하고 심한 피부 화상과 눈 손상을 일으킬 수 있습니다. 그것을 취급 할 때 특별한주의를 기울이십시오.</li>
		<li>구연산나트륨 분말 64.5 mg을 유리 바이알에 탈이온수 0.5 mL와 함께 용해시켜 500 mM 시트르산나트륨 용액 0.5 mL를 제조하였다.</li>
		<li>25 mM HAuCl4 용액 1 mL를 250 mL 청색 캡핑된 병에 99 mL의 물로 희석하여 0.25 mM HAuCl4 용액 100 mL를 수득하였다.</li>
		<li>0.25 mM HAuCl4 용액 99.5 mL를 콘덴서가 장착된 250 mL 삼구 둥근 바닥 플라스크에 첨가한다. 용액을 격렬한 교반 하에 90°C로 가열하고 15분 동안 온도를 유지한다.</li>
		<li>500 mM 시트르산 나트륨 용액 0.5 mL를 반응 혼합물에 주입하고 온도를 유지하고 용액의 색이 루비 레드로 변할 때까지 교반한다. 참고 : 반응은 약 30 분이 걸립니다.</li>
	</ol></li>
	<li>운동학적으로 조절된 방법13을 통한 Au NPs의 시딩된 성장
	<ol>
<li>합성된 Au 시드 용액을 70°C로 냉각시킨다.</li>
		<li>10 mL의 시트르산나트륨 분말 154.8 mg을 유리 바이알에 탈이온수 10 mL와 함께 용해시켜 60 mM 시트르산나트륨 용액을 준비한다.</li>
		<li>0.67 mL의 25 mM HAuCl4 용액 및 0.67 mL의 60 mM 시트르산나트륨 용액을 2분의 시간 간격으로 Au 종자에 주입한다.</li>
		<li>단계 1.2.3을 반복하여 Au NP의 크기를 점진적으로 40nm로 증가시킨다. 참고 : 40nm에 도달하려면 약 10 개의 성장 단계가 필요합니다. 필요한 실제 단계 수는 정확한 설정에 따라 달라질 수 있습니다.</li>
	</ol></li>
	<li>자동 합성기를 사용한 Au NP의 시드 성장(그림 2)
	<ol>
<li>섹션 1에서 제조된 Au 시드 용액 25 mL를 50 mL 원뿔형 원심분리 튜브로 옮기고 열믹서에서 70°C로 냉각시킨다. 참고: 물 25mL가 들어있는 50mL 원심분리 튜브에 넣은 열전대 온도계를 사용하여 열전대 온도계를 사용하여 열믹서 내부의 온도를 모니터링하십시오.</li>
		<li>3 mL 루어락 일회용 주사기를 2.5 mL의 25 mM HAuCl4 용액으로 채운다. 또 다른 3 mL 루어락 일회용 주사기를 2.5 mL의 60 mM 소듐 시트레이트 용액으로 채운다.</li>
		<li>주사기를 시린지 펌프에 넣고 Luer-to-MicroTight 어댑터를 사용하여 PEEK 튜브(150μm 내부 직경)를 주사기에 연결합니다. 튜빙을 열믹서 내의 Au 시드 용액을 포함하는 원심분리 튜브에 삽입한다.</li>
		<li>두 시린지 펌프를 모두 설정하여 0.1675mL의 용액을 20분에 걸쳐 분배합니다(분당 8.357μL).</li>
		<li>써모믹서 회전 속도를 700rpm으로 설정하고 25mM HAuCl4 용액이 포함된 시린지 펌프에서 시작을 누릅니다.</li>
		<li>2분 후, 60 mM 시트르산나트륨 용액을 함유하는 시린지 펌프 상에서 시작 을 누른다.</li>
		<li>HAuCl4 용액 주입을 시작한 지 30분 후, 분석을 위해 Au NP 용액의 분취량을 제거하였다.</li>
		<li>1.3.5 – 1.3.7단계를 반복하여 Au NP의 직경을 최대 40nm까지 점진적으로 늘립니다. 참고: 이 설정은 1.3.4단계에서 추가된 반응물의 부피를 증가시켜 한 단계에서 Au NP를 최대 40nm까지 성장시키는 데 사용할 수 있습니다. 이것은 동일한 주사 속도를 유지하면서 분배 시간을 증가시킴으로써 달성됩니다.</li>
	</ol></li>
</ol>2. Au NP의 특성화
<ol><li>UV-Vis 분광법<ol>
<li>Au NP 용액 1 mL를 세미 마이크로 석영 큐벳에 첨가한다.</li>
		<li>분광계를 켭니다.</li>
		<li>파장 범위를 400 - 800 nm로 설정합니다.</li>
		<li>각 샘플에 대한 UV-Vis 스펙트럼을 획득한다.</li>
	</ol>
</li>
	<li>동적 광산란(DLS)<ol>
<li>샘플 용액을 0.22 μm 필터가 있는 플라스틱 세미 마이크로 큐벳으로 필터링합니다.</li>
		<li>DLS 계측기를 켭니다.</li>
		<li>온도를 25°C로 설정하고 60초 동안 평형을 이룹니다.</li>
		<li>각 샘플의 유체역학적 크기를 측정합니다.</li>
	</ol>
</li>
	<li>투과 전자 현미경 (TEM)<ol>
<li>샘플 용액의 5 μL 액적을 C-코팅된 300-메쉬 Cu 그리드 상에 드롭-캐스팅하고 공기 중에서 건조시킨다. 참고: 희석은 TEM 그리드 상에 잘 분산된 Au NP를 얻기 위해 더 농축된 Au NP 용액 샘플을 위해 필요하다.</li>
		<li>200kV 가속 전압에서 TEM을 사용하여 각 샘플에 대해 여러 TEM 이미지를 획득합니다.</li>
		<li>ImageJ를 사용하여 각 샘플에 대한 200Au NP의 직경을 측정하여 평균 크기 및 표준 편차를 계산합니다.</li>
	</ol>
</li>
</ol>3. CB7-UA 복합체의 형성
<ol><li>0.4 mM CB7 용액의 제조<ol>
<li>4.65 mg의 CB7을 15 mL 유리 바이알에 첨가하십시오. 참고 : CB7의 양은 문헌의 대부분의 보고서에 의해 사용 된 CB7 (= 1163 Da)의 공식 중량을 기준으로 계산됩니다. 그럼에도 불구하고 CB7 고체 샘플은 일반적으로 합성 및 정제 단계에서 남아있는 물, HCl, 메탄올 및 기타 염을 함유하여 샘플에서 ~ 10 - 20 %의 죽은 중량에 기여합니다. 포획된 용매 및 염은 진공 오븐 또는 다른 수단에서 가열함으로써 제거될 수 없었다. 그들의 양은 샘플의 다른 배치에 따라 다르지만 원소 분석을 사용하여 정량화 할 수 있습니다. 그러나, 제시된 프로토콜은 CB7 샘플 내의 용매 및 염의 정량화되지 않은 양의 존재에 민감하지 않다.</li>
		<li>바이알에 물 10mL를 넣고 뚜껑을 조이십시오.</li>
		<li>CB7 고체가 완전히 용해 될 때까지 실온에서 샘플을 초음파 처리하십시오. 참고: CB7은 문헌27 에 따라 합성되었지만 상업적으로 입수가능하다.</li>
	</ol>
</li>
	<li>0.4 mM UA 용액의 제조<ol>
<li>2.69 mg의 UA를 50 mL 원심분리 튜브에 첨가한다.</li>
		<li>튜브에 물 40mL를 넣고 뚜껑을 조이십시오.</li>
		<li>열믹서를 사용하여 온도를 70°C, 속도를 800rpm, 시간을 2h로 설정하여 시료 용액을 소용돌이친다. 용액을 실온으로 식히십시오. 참고: UA는 물에 대한 용해도가 낮음(0.40 mM)5. UA 분말이 완전히 용해되지 않은 경우 더 오래 소용돌이치십시오. 대안적으로, 초음파는 용해를 용이하게 하기 위해 사용될 수 있다.</li>
	</ol>
</li>
	<li>0.4 mM UA 용액의 순차적 희석<ol>
<li>0.4 mM UA 용액 5 mL를 15 mL 유리 바이알에 물 5 mL로 희석하여 0.2 mM UA 용액 10 mL를 수득하였다. 뚜껑을 조이고 30 초 동안 초음파 처리하십시오.</li>
		<li>표 1에 설명된 대로 적절한 양의 UA 및 물을 사용하여 3.3.1단계를 반복합니다.</li>
	</ol>
</li>
	<li>CB7-UA 복합체의 제조<ol>
<li>0.75 mL의 0.4 mM CB7 용액 및 0.75 mL의 0.4 mM UA 용액을 1.5 mL 튜브에 첨가한다. 뚜껑을 고정하고 30 초 동안 초음파 처리하십시오.</li>
		<li>호스트 - 게스트 단지의 형성을 보장하기 위해 30 분 동안 기다리십시오.</li>
		<li>농도가 다른 UA 솔루션을 사용하여 3.4.1 – 3.4.2 단계를 반복합니다.</li>
	</ol>
</li>
</ol>4. UA의 SERS 감지
<ol><li>라만 시스템의 실험 설정(그림 3)<ol>
<li>633nm He-Ne 레이저(22.5mW)를 켭니다.</li>
		<li>모듈식 라만 분광계를 켭니다.</li>
		<li>컴퓨터를 켜고 소프트웨어를 시작합니다.</li>
		<li>분광기 응용 프로그램 마법사 아이콘을 클릭한 다음 Raman을 선택합니다.</li>
		<li>새로운 인수를 시작하십시오. 통합 시간을 30초로 설정하고, 스캔을 평균으로 5초로, 박스카를 0으로 설정합니다.</li>
		<li>배경 스펙트럼을 저장하고 레이저 파장(즉, 633nm)을 입력합니다. 참고: 통합 시간은 각 스캔의 시간이며, 평균에 대한 스캔은 각 스펙트럼을 만들기 위해 평균화된 스캔 수이며, boxcar는 평균28개의 인접 픽셀 수입니다.</li>
	</ol>
</li>
	<li>SERS 기판의 형성<ol>
<li>0.9 mL의 40 nm Au NP 용액 및 0.1 mL의 예비-형성된 CB7-UA 복합체 용액을 1.5 mL 튜브에 첨가한다. 뚜껑을 고정하고 용액이 루비 레드에서 보라색으로 바뀔 때까지 초음파 처리하십시오. 참고: 상업적인 시트레이트-안정화된 40 nm Au NP 용액 샘플이 또한 사용될 수 있다. 전형적으로, 국부적인 표면 플라즈몬 공명 (LSPR) 피크의 광학 밀도는 농축된 원액 샘플로부터의 희석을 통해 1로 조정된다. 샘플 중의 시트레이트 농도는 전형적으로 2 mM로 유지된다.</li>
		<li>샘플 용액을 세미 마이크로 큐벳으로 옮깁니다. 큐벳을 라만 샘플 홀더에 넣고 덮개를 닫습니다.</li>
		<li>측정을 시작합니다.</li>
		<li>자동 저장을 설정하여 다섯 개의 연속 SERS 스펙트럼을 기록합니다.</li>
		<li>측정을 중지하고 샘플을 변경합니다.</li>
		<li>다양한 농도의 CB7-UA 용액을 사용하여 4.2.1 – 4.2.5 단계를 반복하십시오. 참고: 응집 시간은 Au NP의 응집을 매개하는 데 큰 기여를 하는 빈 CB7의 농도의 차이로 인해 0.1 μM UA의 경우 30 초에서 20 μM UA의 경우 30분에 이르는 나노응집체 내의 UA의 농도에 의존하는 것으로 밝혀졌다. CB7-UA 복합체의 경우, 하나의 포털은 부피가 큰 UA 분자에 의해 차단되어, Au NP 표면에 결합하는 것을 사용할 수 없게 되고, 따라서 NP 응집(21)을 매개할 수 없게 된다. 샘플은 용액의 색상이 루비 레드에서 보라색으로 변할 때 측정 할 준비가되었습니다.</li>
	</ol>
</li>
</ol>5. 데이터 분석
<ol><li>데이터 처리<ol>
<li>비대칭 최소 제곱(ALS) 플러그인을 사용하여 베이스라인을 다운로드하여 Origin에 설치합니다. 참고: ALS 플러그인에는 OriginPro가 필요합니다.</li>
		<li>원시 데이터를 원본에 삽입합니다.</li>
		<li>각 샘플의 다섯 SERS 스펙트럼에서 평균값을 계산합니다. 값을 레이저의 힘(즉, 22.5mW)과 통합 시간(즉, 30초)으로 나눕니다.</li>
		<li>ALS 아이콘을 클릭하여 대화 상자를 엽니다. 비대칭 계수를 0.001로, 임계값을 0.03%로, 평활 계수를 2로, 반복 횟수를 20으로 설정하여 각 평균 스펙트럼의 기준선을 수정합니다.</li>
		<li>y 오프셋으로 누적된 선을 사용하여 다른 UA 농도의 SERS 스펙트럼을 플로팅합니다. 출력은 라만 시프트 (cm-1)에 대한 강도 (카운트 s-1 mW-1)이어야합니다.</li>
	</ol>
</li>
</ol>

<ol>
	<li>Villa, J. E. L., Poppi, R. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+portable+SERS+method+for+the+determination+of+uric+acid+using+a+paper-based+substrate+and+multivariate+curve+resolution.">A portable SERS method for the determination of uric acid using a paper-based substrate and multivariate curve resolution.</a> Analyst. 141 (6), 1966-1972 (2016).</li><li>Westley, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Absolute+Quantification+of+Uric+Acid+in+Human+Urine+Using+Surface+Enhanced+Raman+Scattering+with+the+Standard+Addition+Method.">Absolute Quantification of Uric Acid in Human Urine Using Surface Enhanced Raman Scattering with the Standard Addition Method.</a> Analytical Chemistry. 89 (4), 2472-2477 (2017).</li><li>Zhao, L., Blackburn, J., Brosseau, C. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Quantitative+Detection+of+Uric+Acid+by+Electrochemical-Surface+Enhanced+Raman+Spectroscopy+Using+a+Multilayered+Au/Ag+Substrate.">Quantitative Detection of Uric Acid by Electrochemical-Surface Enhanced Raman Spectroscopy Using a Multilayered Au/Ag Substrate.</a> Analytical Chemistry. 87 (1), 441-447 (2015).</li><li>Goodall, B. L., Robinson, A. M., Brosseau, C. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Electrochemical-surface+enhanced+Raman+spectroscopy+(E-SERS)+of+uric+acid:+a+potential+rapid+diagnostic+method+for+early+preeclampsia+detection.">Electrochemical-surface enhanced Raman spectroscopy (E-SERS) of uric acid: a potential rapid diagnostic method for early preeclampsia detection.</a> Physical Chemistry Chemical Physics. 15 (5), 1382-1388 (2013).</li><li>Lytvyn, Y., Perkins, B. A., Cherney, D. Z. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Uric+Acid+as+a+Biomarker+and+a+Therapeutic+Target+in+Diabetes.">Uric Acid as a Biomarker and a Therapeutic Target in Diabetes.</a> Canadian Journal of Diabetes. 39 (3), 239-246 (2015).</li><li>Ali, S. M. U., Ibupoto, Z. H., Kashif, M., Hashim, U., Willander, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+Potentiometric+Indirect+Uric+Acid+Sensor+Based+on+ZnO+Nanoflakes+and+Immobilized+Uricase.">A Potentiometric Indirect Uric Acid Sensor Based on ZnO Nanoflakes and Immobilized Uricase.</a> Sensors. 12 (3), 2787-2797 (2012).</li><li>Yu, J., Wang, S., Ge, L., Ge, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+novel+chemiluminescence+paper+microfluidic+biosensor+based+on+enzymatic+reaction+for+uric+acid+determination.">A novel chemiluminescence paper microfluidic biosensor based on enzymatic reaction for uric acid determination.</a> Biosensors and Bioelectronics. 26 (7), 3284-3289 (2011).</li><li>Yang, Y. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Simultaneous+determination+of+creatine,+uric+acid,+creatinine+and+hippuric+acid+in+urine+by+high+performance+liquid+chromatography.">Simultaneous determination of creatine, uric acid, creatinine and hippuric acid in urine by high performance liquid chromatography.</a> Biomedical Chromatography. 12 (2), 47-49 (1999).</li><li>Zhao, S., Wang, J., Ye, F., Liu, Y. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Determination+of+uric+acid+in+human+urine+and+serum+by+capillary+electrophoresis+with+chemiluminescence+detection.">Determination of uric acid in human urine and serum by capillary electrophoresis with chemiluminescence detection.</a> Analytical Biochemistry. 378 (2), 127-131 (2008).</li><li>Fang, Y., Seong, N. H., Dlott, D. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Measurement+of+the+Distribution+of+Site+Enhancements+in+Surface-Enhanced+Raman+Scattering.">Measurement of the Distribution of Site Enhancements in Surface-Enhanced Raman Scattering.</a> Science. 321 (5887), 388-392 (2008).</li><li>Jeong, H. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dispersion+and+shape+engineered+plasmonic+nanosensors.">Dispersion and shape engineered plasmonic nanosensors.</a> Nature Communications. 7, 11331 (2016).</li><li>Alula, M. T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Preparation+of+silver+nanoparticles+coated+ZnO/Fe3O4+composites+using+chemical+reduction+method+for+sensitive+detection+of+uric+acid+via+surface-enhanced+Raman+spectroscopy.">Preparation of silver nanoparticles coated ZnO/Fe3O4 composites using chemical reduction method for sensitive detection of uric acid via surface-enhanced Raman spectroscopy.</a> Analytica Chimica Acta. 1073, 62-71 (2019).</li><li>Bast&#250;s, N. G., Comenge, J., Puntes, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Kinetically+Controlled+Seeded+Growth+Synthesis+of+Citrate-Stabilized+Gold+Nanoparticles+of+up+to+200+nm:+Size+Focusing+versus+Ostwald+Ripening.">Kinetically Controlled Seeded Growth Synthesis of Citrate-Stabilized Gold Nanoparticles of up to 200 nm: Size Focusing versus Ostwald Ripening.</a> Langmuir. 27 (17), 11098-11105 (2011).</li><li>Jeong, H. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Selectable+Nanopattern+Arrays+for+Nanolithographic+Imprint+and+Etch-Mask+Applications.">Selectable Nanopattern Arrays for Nanolithographic Imprint and Etch-Mask Applications.</a> Advanced Science. 2 (7), 1500016 (2016).</li><li>Loh, X. J., Lee, T. C., Dou, Q., Deen, G. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Utilising+inorganic+nanocarriers+for+gene+delivery.">Utilising inorganic nanocarriers for gene delivery.</a> Biomaterials Science. 4 (1), 70-86 (2016).</li><li>Celiz, A. D., Lee, T. C., Scherman, O. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Polymer-Mediated+Dispersion+of+Gold+Nanoparticles:+Using+Supramolecular+Moieties+on+the+Periphery.">Polymer-Mediated Dispersion of Gold Nanoparticles: Using Supramolecular Moieties on the Periphery.</a> Advanced Materials. 21 (38), 3937-3940 (2009).</li><li>Lee, T. C., Scherman, O. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Formation+of+Dynamic+Aggregates+in+Water+by+Cucurbit[5]uril+Capped+with+Gold+Nanoparticles.">Formation of Dynamic Aggregates in Water by Cucurbit[5]uril Capped with Gold Nanoparticles.</a> ChemComm. 46 (14), 2438-2440 (2010).</li><li>Lee, T. C., Scherman, O. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+Facile+Synthesis+of+Dynamic+Supramolecular+Aggregates+of+Cucurbit[n]uril+(n+=+5-8)+Capped+with+Gold+Nanoparticles+in+Aqueous+Media.">A Facile Synthesis of Dynamic Supramolecular Aggregates of Cucurbit[n]uril (n = 5-8) Capped with Gold Nanoparticles in Aqueous Media.</a> Chemistry-A European Journal. 18 (6), 1628-1633 (2012).</li><li>Taylor, R. W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Precise+Subnanometer+Plasmonic+Junctions+for+SERS+within+Gold+Nano-+particle+Assemblies+Using+Cucurbit[n]uril+"Glue".">Precise Subnanometer Plasmonic Junctions for SERS within Gold Nano- particle Assemblies Using Cucurbit[n]uril "Glue".</a> ACS Nano. 5 (5), 3878-3887 (2011).</li><li>Peveler, W. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cucurbituril-mediated+quantum+dot+aggregates+formed+by+aqueous+self-assembly+for+sensing+applications.">Cucurbituril-mediated quantum dot aggregates formed by aqueous self-assembly for sensing applications.</a> ChemComm. 55 (38), 5495-5498 (2019).</li><li>Chio, W. I. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Selective+Detection+of+Nitroexplosives+Using+Molecular+Recognition+within+Self-Assembled+Plasmonic+Nanojunctions.">Selective Detection of Nitroexplosives Using Molecular Recognition within Self-Assembled Plasmonic Nanojunctions.</a> The Journal of Physical Chemistry C. 123 (25), 15769-15776 (2019).</li><li>Kasera, S., Biedermann, F., Baumberg, J. J., Scherman, O. A., Mahajan, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Quantitative+SERS+Using+the+Sequestration+of+Small+Molecules+Inside+Precise+Plasmonic+Nanoconstructs.">Quantitative SERS Using the Sequestration of Small Molecules Inside Precise Plasmonic Nanoconstructs.</a> Nano Letters. 12 (11), 5924-5928 (2012).</li><li>Taylor, R. W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+Situ+SERS+Monitoring+of+Photochemistry+within+a+Nanojunction+Reactor.">In Situ SERS Monitoring of Photochemistry within a Nanojunction Reactor.</a> Nano Letters. 13 (12), 5985-5990 (2013).</li><li>Kasera, S., Herrmann, L. O., Barrio, J. d., Baumberg, J. J., Scherman, O. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Quantitative+Multiplexing+with+Nano-Self-Assemblies+in+SERS.">Quantitative Multiplexing with Nano-Self-Assemblies in SERS.</a> Scientific Reports. 4, 6785 (2014).</li><li>Chio, W. I. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dual-triggered+nanoaggregates+of+cucurbit[7]uril+and+gold+nanoparticles+for+multi-spectroscopic+quantification+of+creatinine+in+urinalysis.">Dual-triggered nanoaggregates of cucurbit[7]uril and gold nanoparticles for multi-spectroscopic quantification of creatinine in urinalysis.</a> Journal of Materials Chemistry C. 8, 7051-7058 (2020).</li><li>Turkevich, J., Stevenson, P. C., Hillier, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+study+of+the+nucleation+and+growth+processes+in+the+synthesis+of+colloidal+gold.">A study of the nucleation and growth processes in the synthesis of colloidal gold.</a> Discussions of the Faraday Society. 11, 55-75 (1951).</li><li>Lagona, J., Mukhopadhyay, P., Chakrabarti, S., Issacs, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+cucurbit[n]uril+family.">The cucurbit[n]uril family.</a> Angewandte Chemie International Edition. 44 (31), 4844-4870 (2005).</li><li>. OceanView Installation and Operation Manual Available from: <a target="_blank" href="https://www.oceaninsight.com/globalassets/catalog-blocks-and-images/manuals--instruction-old-logo/software/oceanviewio.pdf">https://www.oceaninsight.com/globalassets/catalog-blocks-and-images/manuals--instruction-old-logo/software/oceanviewio.pdf</a> (2013)</li><li>Mahajan, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Raman+and+SERS+spectroscopy+of+cucurbit[n]urils.">Raman and SERS spectroscopy of cucurbit[n]urils.</a> Physical Chemistry Chemical Physics. 12 (35), 10429-10433 (2010).</li><li>Langer, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Present+and+Future+of+Surface-Enhanced+Raman+Scattering.">Present and Future of Surface-Enhanced Raman Scattering.</a> ACS Nano. 14 (1), 28-117 (2020).</li><li>Pilot, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+Review+on+Surface-Enhanced+Raman+Scattering.">A Review on Surface-Enhanced Raman Scattering.</a> Biosensors. 9 (2), 57 (2019).</li><li>Bantz, K. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Recent+progress+in+SERS+biosensing.">Recent progress in SERS biosensing.</a> Physical Chemistry Chemical Physics. 13 (24), 11551-11567 (2011).</li><li>Moore, T. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+Vitro+and+In+Vivo+SERS+Biosensing+for+Disease+Diagnosis.">In Vitro and In Vivo SERS Biosensing for Disease Diagnosis.</a> Biosensors. 8 (2), 46 (2018).</li><li>Bonifacio, A., Cervo, S., Sergo, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Label-free+surface-enhanced+Raman+spectroscopy+of+biofluids:+fundamental+aspects+and+diagnostic+applications.">Label-free surface-enhanced Raman spectroscopy of biofluids: fundamental aspects and diagnostic applications.</a> Analytical and Bioanalytical Chemistry. 407 (27), 8265-8277 (2015).</li><li>Jeong, H. H., Choi, E., Ellis, E., Lee, T. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Recent+advances+in+gold+nanoparticles+for+biomedical+applications:+from+hybrid+structures+to+multi-functionality.">Recent advances in gold nanoparticles for biomedical applications: from hybrid structures to multi-functionality.</a> Journal of Materials Chemistry B. 7 (22), 3480-3496 (2019).</li><li>Premasiri, W. R., Clarke, R. H., Womble, M. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Urine+Analysis+by+Laser+Raman+Spectroscopy.">Urine Analysis by Laser Raman Spectroscopy.</a> Lasers in Surgery and Medicine. 28 (4), 330-334 (2001).</li><li>Lu, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Superhydrophobic+silver+film+as+a+SERS+substrate+for+the+detection+of+uric+acid+and+creatinine.">Superhydrophobic silver film as a SERS substrate for the detection of uric acid and creatinine.</a> Biomedical Optics Express. 9 (10), 4988-4997 (2018).</li><li>Feig, D. I., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Serum+Uric+Acid:+A+Risk+Factor+and+a+Target+for+Treatment.">Serum Uric Acid: A Risk Factor and a Target for Treatment.</a> Journal of the American Society of Nephrology. 17 (4), 69-73 (2006).</li><li>Maiuolo, J., Oppedisano, F., Gratteri, S., Muscoli, C., Mollace, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Regulation+of+uric+acid+metabolism+and+excretion.">Regulation of uric acid metabolism and excretion.</a> International Journal of Cardiology. 213, 8-14 (2016).</li></ol>

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프로토콜에 설명된 자동화된 합성 방법을 통해 크기가 증가하는 Au NP를 재현 가능하게 합성할 수 있습니다. 종자 합성 중에 구연산 나트륨을 빠르게 첨가하고 PEEK 튜브가 안전한지 확인하기 위해 주기적으로 검사하는 것과 같이 수동으로 수행해야하는 몇 가지 요소가 있지만,이 방법을 사용하면 일반적으로 HAuCl4 및 구연산 나트륨을 여러 번 수동으로 주입해야하는 큰 크기 (최대40nm )의 Au ...

퓨린 뉴클레오티드의 신진 대사의 최종 산물 인 요산은 통풍, 자간전증, 신장 질환, 고혈압, 심혈관 질환 및 당뇨병 1,2,3,4,5와 같은 질병의 진단을위한 혈액 혈청 및 소변의 중요한 바이오 마커입니다. 요산 검출을위한 현재의 방법에는 비색 효소 분석, 고성능 액체 크로마토그래피 및 모세관 전기 영동이 포함되며, 이는 시간이 많이 걸리고 비용이 많이 들며 정교한 샘플 준비 6,7,8,9가 필요합니다.
표면 강화 라만 분광법은 진동 지문을 통해 생체 분자를 선택적으로 검출 할 수 있고 고감도, 신속한 반응, 사용 편의성 및 시료 준비 없음 또는 최소와 같은 수많은 이점을 제공하므로 일상적인 진료 시점 진단을위한 유망한 기술입니다. 귀금속 나노입자(예를 들어, Au NPs)에 기초한 SERS 기판은 표면 플라즈몬 공명(11)에 의해 야기된 강한 전자기 향상을 통해 분석물 분자의 라만 신호를 크기10의 4 내지10 차수만큼 향상시킬 수 있다. 맞춤형 크기의 Au NP는 복잡한 금속 나노복합체(12)의 제조에 시간이 많이 걸리는 것과는 달리 쉽게 합성될 수 있으며, 따라서 이들의 우수한 특성(13,14,15,16)으로 인해 생물 의학 응용에 널리 사용된다. Au NPs의 표면 상에 거대고리 분자인 cucurbit[n]urils(CBn, 여기서 n=5-8, 10)의 부착은 고도로 대칭적이고 단단한 CB 분자가 Au NP 사이의 정확한 간격을 제어하고 숙주-게스트 복합체의 형성을 통해 플라즈몬 핫스팟에 중심 또는 근접하게 분석물 분자를 국부화할 수 있기 때문에 분석물 분자의 SERS 신호를 더욱 강화할 수 있다(도 1)17, 18,19,20. Au NP를 사용한 SERS 연구의 이전 예: CBn 나노응집체에는 니트로폭발물, 다환식 방향족제, 디아미노스틸벤, 신경전달물질 및 크레아티닌 21,22,23,24,25 가 포함되며, SERS 측정은 큐벳에서 수행되거나 맞춤형 샘플 홀더에 작은 물방울을 적재하여 수행됩니다. 이러한 검출 스킴은 높은 재현성을 갖는 복잡한 매트릭스에서 바이오마커를 신속하게 정량화하는데 특히 유용하다.
본원에서, CB7 및 중요한 바이오마커 UA의 숙주-게스트 복합체를 형성하고, 수성 매질에서 Au NPs의 CB7 매개된 응집을 통해 0.2 μM의 검출 한계로 UA를 정량화하는 용이한 방법이 모듈형 분광계를 사용하여 입증되었으며, 이는 진단 및 임상 적용에 유망하다.

<table><tbody><tr><td>40 nm gold nanoparticles</td><td>NanoComposix</td><td>AUCN40-100M</td><td>NanoXact, 0.05 mg/ mL, bare (citrate)</td></tr><tr><td>Centrifuge tube</td><td>Corning Falcon</td><td>14-432-22</td><td>50 mL volume</td></tr><tr><td>Cucurbit[7]uril</td><td>Lab-made</td><td></td><td>see ref. 19</td></tr><tr><td>Gold(III) chloride trihydrate</td><td>Sigma aldrich</td><td>520918</td><td>&amp;ge;99.9% trace metals basis</td></tr><tr><td>Luer lock disposable syringe</td><td>Cole-Parmer</td><td>WZ-07945-15</td><td>3 mL volume</td></tr><tr><td>Luer-to-MicroTight adapter</td><td>LuerTight</td><td>P-662</td><td>360 &amp;mu;m outer diameter Tubing to Luer Syringe</td></tr><tr><td>PEEK tubing</td><td>IDEX</td><td>1572</td><td>360 &amp;mu;m outer diameter, 150 &amp;mu;m inner diameter</td></tr><tr><td>PEEK tubing cutter</td><td>IDEX</td><td>WZ-02013-30</td><td>Capillary Polymer Chromatography Tubing Cutter For 360 &amp;micro;m to 1/32&quot; OD tubing</td></tr><tr><td>Raman spectrometer</td><td>Ocean Optics</td><td>QE pro</td><td></td></tr><tr><td>Sodium citrate tribasic dihydrate</td><td>Sigma aldrich</td><td>S4641</td><td>ACS reagent, &amp;ge;99.0%</td></tr><tr><td>Sonicator</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Standard Probe</td><td>Digi-Sense</td><td>WZ-08516-55</td><td>Type-K</td></tr><tr><td>Syringe pump</td><td>Aladdin</td><td>ALADDIN2-220</td><td>2 syringes, maximum syringe volume 60 mL</td></tr><tr><td>Thermocouple thermometer</td><td>Digi-Sense</td><td>WZ-20250-91</td><td>Single-Input Thermocouple Thermometer with NIST-Traceable Calibration</td></tr><tr><td>ThermoMixer</td><td>Eppendorf</td><td>5382000031</td><td>With an Eppendorf SmartBlock for 50 mL tubes</td></tr><tr><td>Uric acid</td><td>Sigma aldrich</td><td>U2625</td><td>&amp;ge;99%, crystalline</td></tr></tbody></table>

quantitative sers detection of uric acid via formation of precise plasmonic nanojunctions within aggregates of gold nanoparticles and cucurbit[n]uril

이 연구는 모듈형 분광계를 사용하여 지문 영역의 여러 특성 피크에 대해 ~0.2μM의 낮은 검출 한계로 표면 강화 라만 분광법(SERS)을 통해 중요한 바이오마커인 요산(UA)의 정량적 검출을 위한 신속하고 매우 민감한 방법을 설명합니다. 이러한 바이오센싱 기법은 매크로사이클, cucurbit[7]uril (CB7) 및 UA 사이의 숙주-게스트 복합체화에 의해 매개되고, 이후 자체 조립된 Au NP:CB7 나노응집체 내에서 정확한 플라즈몬 나노접합의 형성에 의해 매개된다. SERS 기질에 대해 바람직한 크기의 용이한 Au NP 합성은 또한 실험실에서 제작한 자동 합성기를 사용하여 촉진될 수 있는 옵션을 갖는 고전적인 시트레이트 환원 접근법에 기초하여 수행되었다. 이 프로토콜은 임상 적용을 위해 체액에서 바이오마커의 다중화 검출로 쉽게 확장될 수 있다.

제시된 Au NP 합성에서 UV-Vis 스펙트럼은 10 성장 단계 (그림 4 A, B) 후에 LSPR 피크의 521 nm에서 529 nm로 이동을 보여 주며 DLS 데이터는 Au NP의 크기가 25.9 nm에서 42.8 nm로 증가함에 따라 좁은 크기 분포를 보여줍니다 (그림 4C, D). TEM 이미지에서 측정된 G0, G5 및 G10의 평균 크기(그림 4E)는 각각 20.1nm, 2.1nm± 32.5nm, 40.0...

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Quantitative SERS Detection of Uric Acid via Formation of Precise Plasmonic Nanojunctions within Aggregates of Gold Nanoparticles and Cucurbit[n]uril

큐커빗[7]우릴 및 요산의 호스트-게스트 복합체를 Au NP 용액에 소량 첨가하기 전에 수용액에서 형성하여 모듈형 분광계를 이용한 정량적 표면 강화 라만 분광법(SERS) 감지를 수행하였다.

금 나노 입자와 Cucurbit[n]uril의 응집체 내에서 정확한 플라즈몬 나노 접합의 형성을 통한 요산의 정량적 SERS 검출

This work describes a rapid and highly sensitive method for the quantitative detection of an important biomarker, uric acid (UA), via surface-enhanced ...

quantitative-sers-detection-uric-acid-via-formation-precise-plasmonic

Research

JoVE Journal

Chemistry

Quantitative SERS Detection of Uric Acid via Formation of Precise Plasmonic Nanojunctions within Aggregates of Gold Nanoparticles and Cucurbit[n]uril

3.8K 조회수.  University College London (UCL). 큐커빗[7]우릴 및 요산의 호스트-게스트 복합체를 Au NP 용액에 소량 첨가하기 전에 수용액에서 형성하여 모듈형 분광계를 이용한 정량적 표면 강화 라만 분광법(SERS) 감지를 수행하였다.

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Fabricating a UV-Vis and Raman Spectroscopy Immunoassay Platform

Immunoassays are used to detect proteins based on the presence of associated antibodies. Because of their extensive use in research and clinical settings, a large infrastructure of immunoassay instruments and materials can be found. For example, 96- and 384-well polystyrene plates are available commercially and have a standard design to accommodate ultraviolet-visible (UV-Vis) spectroscopy machines from various manufacturers. In addition, a wide variety of immunoglobulins, detection tags, and blocking agents for customized immunoassay designs such as enzyme-linked immunosorbent assays (ELISA) are available.
Despite the existing infrastructure, standard ELISA kits do not meet all research needs, requiring individualized immunoassay development, which can be expensive and time-consuming. For example, ELISA kits have low multiplexing (detection of more than one analyte at a time) capabilities as they usually depend on fluorescence or colorimetric methods for detection. Colorimetric and fluorescent-based analyses have limited multiplexing capabilities due to broad spectral peaks. In contrast, Raman spectroscopy-based methods have a much greater capability for multiplexing due to narrow emission peaks. Another advantage of Raman spectroscopy is that Raman reporters experience significantly less photobleaching than fluorescent tags1. Despite the advantages that Raman reporters have over fluorescent and colorimetric tags, protocols to fabricate Raman-based immunoassays are limited. The purpose of this paper is to provide a protocol to prepare functionalized probes to use in conjunction with polystyrene plates for direct detection of analytes by UV-Vis analysis and Raman spectroscopy. This protocol will allow researchers to take a do-it-yourself approach for future multi-analyte detection while capitalizing on pre-established infrastructure.

Nanoparticle-based optical probes have been designed as a vehicle for detecting antigens using Raman and UV-Vis spectroscopy. Here we describe a protocol for preparing such probes for a UV-Vis/Raman spectroscopy immunoassay in such a way to incorporate future multiplexing capabilities.

자외선 VI와 라만 분광학 면역 플랫폼 제조

Immunoassays are used to detect proteins based on the presence of associated antibodies. Because of their extensive use in research and clinical settings, ...

연구

생화학

Surface Enhanced Raman Spectroscopy Detection of Biomolecules Using EBL Fabricated Nanostructured Substrates

Fabrication and characterization of conjugate nano-biological systems interfacing metallic nanostructures on solid supports with immobilized biomolecules is reported. The entire sequence of relevant experimental steps is described, involving the fabrication of nanostructured substrates using electron beam lithography, immobilization of biomolecules on the substrates, and their characterization utilizing surface-enhanced Raman spectroscopy (SERS). Three different designs of nano-biological systems are employed, including protein A, glucose binding protein, and a dopamine binding DNA aptamer. In the latter two cases, the binding of respective ligands, D-glucose and dopamine, is also included. The three kinds of biomolecules are immobilized on nanostructured substrates by different methods, and the results of SERS imaging are reported. The capabilities of SERS to detect vibrational modes from surface-immobilized proteins, as well as to capture the protein-ligand and aptamer-ligand binding are demonstrated. The results also illustrate the influence of the surface nanostructure geometry, biomolecules immobilization strategy, Raman activity of the molecules and presence or absence of the ligand binding on the SERS spectra acquired.

We describe the fabrication and characterization of nano-biological systems interfacing nanostructured substrates with immobilized proteins and aptamers. The relevant experimental steps involving lithographic fabrication of nanostructured substrates, bio-functionalization, and surface-enhanced Raman spectroscopy (SERS) characterization, are reported. SERS detection of surface-immobilized proteins, and probing of protein-ligand and aptamer-ligand binding is demonstrated.

표면 EBL 날조 된 나노 구조 기판을 사용하여 생체 분자의 라만 분광학 감지 강화

Fabrication and characterization of conjugate nano-biological systems interfacing metallic nanostructures on solid supports with immobilized biomolecules ...

공학

Surface-enhanced Resonance Raman Scattering Nanoprobe Ratiometry for Detecting Microscopic Ovarian Cancer via Folate Receptor Targeting

Ovarian cancer represents the deadliest gynecologic malignancy. Most patients present at an advanced stage (FIGO stage III or IV), when local metastatic spread has already occurred. However, ovarian cancer has a unique pattern of metastatic spread, in that tumor implants are initially contained within the peritoneal cavity. This feature could enable, in principle, the complete resection of tumor implants with curative intent. Many of these metastatic lesions are microscopic, making them hard to identify and treat. Neutralizing such micrometastases is believed to be a major goal towards eliminating tumor recurrence and achieving long-term survival. Raman imaging with surface enhanced resonance Raman scattering nanoprobes can be used to delineate microscopic tumors with high sensitivity, due to their bright and bioorthogonal spectral signatures. Here, we describe the synthesis of two &#39;flavors&#39; of such nanoprobes: an antibody-functionalized one that targets the folate receptor &#8212; overexpressed in many ovarian cancers &#8212; and a non-targeted control nanoprobe, with&#160;distinct spectra. The nanoprobes are co-administered intraperitoneally to mouse models of metastatic human ovarian adenocarcinoma. All animal studies were approved by the Institutional Animal Care and Use Committee of Memorial Sloan Kettering Cancer Center. The peritoneal cavity of the animals is surgically exposed, washed, and scanned with a Raman microphotospectrometer. Subsequently, the Raman signatures of the two nanoprobes are decoupled using a Classical Least Squares fitting algorithm, and their respective scores divided to provide a ratiometric signal of folate-targeted over untargeted probes. In this way, microscopic metastases are visualized with high specificity. The main benefit of this approach is that the local application into the peritoneal cavity &#8212; which can be done conveniently during the surgical procedure &#8212; can tag tumors without subjecting the patient to systemic nanoparticle exposure. False positive signals stemming from non-specific binding of the nanoprobes onto visceral surfaces can be eliminated by following a ratiometric approach where targeted and non-targeted nanoprobes with distinct Raman signatures are applied as a mixture. The procedure is currently still limited by the lack of a commercial wide-field Raman imaging camera system, which once available will allow for the application of this technique in the operating theater.

Ovarian cancer forms metastases throughout the peritoneal cavity. Here, we present a protocol to make and use folate-receptor targeted surface-enhanced resonance Raman scattering nanoprobes that reveal these lesions with high specificity via ratiometric imaging. The nanoprobes are administered intraperitoneally to living mice, and the derived images correlate well with histology.

표면 강화 된 공명 라만 뿌리는 Folate 수용 체를 통해 미세한 난소 암 검출을 위한 Nanoprobe Ratiometry 대상

Ovarian cancer represents the deadliest gynecologic malignancy. Most patients present at an advanced stage (FIGO stage III or IV), when local metastatic ...

암 연구학

Rapid Nanoprobe Signal Enhancement by In Situ Gold Nanoparticle Synthesis

The use of nanoprobes such as gold, silver, silica or iron-oxide nanoparticles as detection reagents in bioanalytical assays can enable high sensitivity and convenient colorimetric readout. However, high densities of nanoparticles are typically needed for detection. The available synthesis-based enhancement protocols are either limited to gold and silver nanoparticles or rely on precise enzymatic control and optimization. Here, we present a protocol to enhance the colorimetric readout of gold, silver, silica, and iron oxide nanoprobes. It was observed that the colorimetric signal can be improved by up to a 10000-fold factor. The basis for such signal enhancement strategies is the chemical reduction of Au3+ to Au0. There are several chemical reactions that enable the reduction of Au3+ to Au0. In the protocol, Good&#39;s buffers and H2O2 are used and it is possible to favor the deposition of Au0 onto the surface of existing nanoprobes, in detriment of the formation of new gold nanoparticles. The protocol consists of the incubation of the microarray with a solution consisting of chloroauric acid and H2O2 in 2-(N-morpholino)ethanesulfonic acid pH 6 buffer following the nanoprobe-based detection assay. The enhancement solution can be applied to paper and glass-based sensors. Moreover, it can be used in commercially available immunoassays as demonstrated by the application of the method to a commercial allergen microarray. The signal development requires less than 5 min of incubation with the enhancement solution and the readout can be assessed by naked eye or low-end image acquisition devices such as a table-top scanner or a digital camera.

Rapid Nanoprobe Signal Enhancement by In Situ Gold Nanoparticle Synthesis

In this work, a protocol for signal enhancement of nanoprobe-based biosensing is presented. The protocol is based on the reduction of chloroauric acid onto the surface of existing nanoprobes that consist of gold, silver, silica or iron-oxide nanoparticles.

에 라 골드 나노 입자 합성에 의해 급속 한 Nanoprobe 신호 향상

The use of nanoprobes such as gold, silver, silica or iron-oxide nanoparticles as detection reagents in bioanalytical assays can enable high sensitivity ...

화학

Laser Ablation을 통한 나노입자와 나노구조체 합성

Ultrafast Laser-Ablated Nanoparticles and Nanostructures for Surface-Enhanced Raman Scattering-Based Sensing Applications

The technique of ultrafast laser ablation in liquids has evolved and matured over the past decade, with several impending applications in various fields such as sensing, catalysis, and medicine. The exceptional feature of this technique is the formation of nanoparticles (colloids) and nanostructures (solids) in a single experiment with ultrashort laser pulses. We have been working on this technique for the past few years, investigating its potential using the surface-enhanced Raman scattering (SERS) technique in hazardous materials sensing applications. Ultrafast laser-ablated substrates (solids and colloids) could detect several analyte molecules at the trace levels/mixture form, including dyes, explosives, pesticides, and biomolecules. Here, we present some of the results achieved using the targets of Ag, Au, Ag-Au, and Si. We have optimized the nanostructures (NSs) and nanoparticles (NPs) obtained (in liquids and air) using different pulse durations, wavelengths, energies, pulse shapes, and writing geometries. Thus, various NSs and NPs were tested for their efficiency in sensing numerous analyte molecules using a simple, portable Raman spectrometer. This methodology, once optimized, paves the way for on-field sensing applications. We discuss the protocols in (a) synthesizing the NPs/NSs via laser ablation, (b) characterization of NPs/NSs, and (c) their utilization in the SERS-based sensing studies.

저자 스포트라이트: Advancements and Applications in Nanoparticle Synthesis Through Laser Ablation in Liquids 

Ultrafast laser ablation in liquid is a precise and versatile technique for synthesizing nanomaterials (nanoparticles [NPs] and nanostructures [NSs]) in liquid/air environments. The laser-ablated nanomaterials can be functionalized with Raman-active molecules to enhance the Raman signal of analytes placed on or near the NSs/NPs.

표면 강화 라만 산란 기반 감지 응용 분야를 위한 초고속 레이저 절제 나노 입자 및 나노 구조

The technique of ultrafast laser ablation in liquids has evolved and matured over the past decade, with several impending applications in various fields ...

전기화학적 방법을 이용한 단일 나노입자의 이종 성능 분석

Tracking Electrochemistry on Single Nanoparticles with Surface-Enhanced Raman Scattering Spectroscopy and Microscopy

Studying electrochemical reactions on single nanoparticles is important to understand the heterogeneous performance of individual nanoparticles. This nanoscale heterogeneity remains hidden during the ensemble-averaged characterization of nanoparticles. Electrochemical techniques have been developed to measure currents from single nanoparticles but do not provide information about the structure and identity of the molecules that undergo reactions at the electrode surface. Optical techniques such as surface-enhanced Raman scattering (SERS) microscopy and spectroscopy can detect electrochemical events on individual nanoparticles while simultaneously providing information on the vibrational modes of electrode surface species. In this paper, a protocol to track the electrochemical oxidation-reduction of Nile Blue (NB) on single Ag nanoparticles using SERS microscopy and spectroscopy is demonstrated. First, a detailed protocol for fabricating Ag nanoparticles on a smooth and semi-transparent Ag film is described. A dipolar plasmon mode aligned along the optical axis is formed between a single Ag nanoparticle and Ag film. The SERS emission from NB fixed between the nanoparticle and the film is coupled into the plasmon mode, and the high-angle emission is collected by a microscope objective to form a donut-shaped emission pattern. These donut-shaped SERS emission patterns allow for the unambiguous identification of single nanoparticles on the substrate, from which the SERS spectra can be collected. In this work, a method for employing the SERS substrate as a working electrode in an electrochemical cell compatible with an inverted optical microscope is provided. Finally, tracking the electrochemical oxidation-reduction of NB molecules on an individual Ag nanoparticle is shown. The setup and the protocol described here can be modified to study various electrochemical reactions on individual nanoparticles.

저자 스포트라이트: Tracking Electrochemistry on Single Nanoparticles with Surface-Enhanced Raman Scattering Spectroscopy and Microscopy(표면 강화 라만 산란 분광법 및 현미경을 사용한 단일 나노입자에 대한 전기화학 추적)  

The protocol describes how to monitor electrochemical events on single nanoparticles using surface-enhanced Raman scattering spectroscopy and imaging.

Surface-Enhanced Raman Scattering Spectroscopy and Microscopy를 사용한 단일 나노입자의 전기화학 추적

Studying electrochemical reactions on single nanoparticles is important to understand the heterogeneous performance of individual nanoparticles. This ...

금 나노 입자와 Cucurbit[n]uril의 응집체 내에서 정확한 플라즈몬 나노 접합의 형성을 통한 요산의 정량적 SERS 검출

요약

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자외선 VI와 라만 분광학 면역 플랫폼 제조

표면 EBL 날조 된 나노 구조 기판을 사용하여 생체 분자의 라만 분광학 감지 강화

표면 강화 된 공명 라만 뿌리는 Folate 수용 체를 통해 미세한 난소 암 검출을 위한 Nanoprobe Ratiometry 대상

에 라 골드 나노 입자 합성에 의해 급속 한 Nanoprobe 신호 향상

표면 강화 라만 산란 기반 감지 응용 분야를 위한 초고속 레이저 절제 나노 입자 및 나노 구조

표면 강화 라만 산란 기반 감지 응용 분야를 위한 초고속 레이저 절제 나노 입자 및 나노 구조

표면 강화 라만 산란 기반 감지 응용 분야를 위한 초고속 레이저 절제 나노 입자 및 나노 구조

Surface-Enhanced Raman Scattering Spectroscopy and Microscopy를 사용한 단일 나노입자의 전기화학 추적

Surface-Enhanced Raman Scattering Spectroscopy and Microscopy를 사용한 단일 나노입자의 전기화학 추적

Surface-Enhanced Raman Scattering Spectroscopy and Microscopy를 사용한 단일 나노입자의 전기화학 추적