우심실 구조 및 기능에 대한 심층 심초음파 평가는 폐고혈압 동물 모델에서 새로운 치료 표적의 효과를 스크리닝하는 데 유용한 도구입니다. 이 프로토콜의 주요 장점은 우심방 및 우심실 형태를 평가하고 우심실 수축기 및 이완기 기능을 특성화하는 데 필요한 모든 심초음파 보기 및 측정에 대한 자세한 설명을 제공한다는 것입니다. 이 기술은 Monocrotaline에 의해 유도 된 폐 고혈압의 쥐 모델의 심 초음파 특성을 설명합니다.
심초음파기사가 좌심실에 대한 이전 경험이 있더라도 우심실 영상을 연습하고 능숙해지는 데 충분한 시간을 할애하는 것이 중요합니다. 쥐가 의식을 잃은 후 유도실에서 쥐를 제거하고 등쪽 욕창 위치에 있는 이미징 스테이션 동물 플랫폼으로 옮기는 것으로 시작합니다. 기화기에 연결된 노즈 콘을 사용하여 이소플루란을 투여합니다.
각 발에 전극 젤을 바르고 동물 플랫폼의 심전도 리드 플레이트에 발을 고정합니다. 가슴을 면도하고 제모제를 사용하여 모피를 제거하십시오. 직장 온도 프로브를 제자리에 고정합니다.
동물의 오른쪽과 왼쪽에 면봉을 놓고 플랫폼이 기울어 졌을 때 위치를 유지하기 위해 테이프로 고정하십시오. 이미지를 획득하려면 플랫폼을 오른쪽으로 10-15도 기울이고 꼬리 방향으로 약 5도 아래로 내립니다. 변환기를 쥐의 오른쪽 흉골주위 라인을 가리키도록 이동하고 변환기를 내립니다.
변환기를 시계 반대 방향으로 돌려 대동맥과 승모판막이 보이도록 합니다. 우심실이 가장 넓은 영역에 M 모드 샘플 볼륨 라인을 배치하고 우심실과 좌심실을 포함하도록 게이트를 조정합니다. 변환기를 들어 올리고 쥐의 오른쪽 흉골 주위 선을 향해 약간 기울어 지도록 재배치합니다.
플랫폼을 오른쪽으로 약간 기울어진 위치로 이동합니다. 젤과 접촉할 때까지 변환기를 내립니다. 우심실 유출 트랙이 보이고 폐동맥 판막에 초점이 맞춰지고 명확하게 보일 때까지 플랫폼을 꼬리 모양으로 오른쪽 또는 왼쪽으로 이동합니다.
그런 다음 Sign Store를 눌러 폐동맥 판막의 B-모드 이미지를 기록합니다. 동일한 B-모드 이미지 위치를 유지하면서 Color를 눌러 폐동맥 판막을 통한 흐름을 식별하는 데 도움을 줍니다. 가장 높은 속도 지점이 보이도록 속도를 조정합니다.
PW 또는 Pulsed Wave를 눌러 혈류 스펙트럼을 정량화합니다. PW 각도를 폐 밸브를 통과하는 흐름 방향과 평행하게 정렬합니다. 업데이트를 눌러 view 폐 속도.
플랫폼을 왼쪽 모서리로 기울이고 가능한 한 두개골 아래로 기울입니다. 변환기를 시계 반대 방향으로 30도에서 45도 회전하고 변환기를 동물의 오른쪽 어깨나 귀를 가리키도록 움직입니다. 젤과 접촉할 때까지 변환기를 내립니다.
좌심실과 좌심방이 보이지만 흉골 그림자가 우심실 자유 벽 위에 있는 전형적인 4개의 챔버 보기를 보장합니다. 적용 가능한 4개의 챔버를 조정하기 위해 변환기를 이동하십시오. view 초점을 획득 view 우심실의. 최대 평면을 얻을 때까지 필요한 경우 플랫폼을 꼬리 방향으로 약간 이동합니다.
우심실이 단축되지 않고 좌심실 유출로가 열리지 않았는지 확인하십시오. 우심실 자유 벽의 삼첨판 고리를 통해 M 모드 커서를 놓아 TAPTE를 시각화하고 업데이트 및 서명 저장을 눌러 TAPSE 데이터를 기록합니다. B 모드를 누른 다음 색상을 눌러 TV를 통한 흐름을 식별하는 데 도움을 줍니다. PW를 눌러 혈류 스펙트럼을 정량화합니다.
B 모드로 돌아가서 조직을 누르고 조직 도플러를 배치합니다.ampRV 자유 벽의 삼첨판 고리에 볼륨 게이트를 놓습니다. 업데이트를 눌러 조직 도플러 이미지를 봅니다. PLAX 보기를 사용하여 심장 위치 및 좌심실 형태에 대한 초기 평가를 수행했습니다.
변형된 PLAX 보기를 사용한 우심실 평가는 단크로탈린 또는 MCT 처리된 쥐가 대조군 쥐에 비해 우심실이 확대되고 좌심실이 변위된 것으로 나타났습니다. MCT 처리된 래트에서 RVIDd, RVIDs 및 RVFWT의 현저한 증가가 관찰되었으며, 이는 우심실의 확장 및 우심실 자유벽의 비후를 나타냅니다. 수정된 PLAX 보기는 폐동맥을 시각화하고 폐동맥 판막 직경을 측정하는 데에도 사용되었습니다.
도플러 이미징을 사용하여 폐동맥 유속을 측정한 결과, 대조군 쥐에서 폐 흐름은 중간 수축기에서 최대 속도와 함께 대칭적인 V자 모양을 나타냈습니다. 반면, MCT를 투여받은 쥐는 최고 속도가 더 느리고 수축기 초기에 발생했으며 후기 수축기에서 노치를 나타냈다. 우심실 중심의 정점 4개의 챔버 보기를 사용하여 우심실 및 수축기 영역과 우심방 영역을 측정했습니다.
MCT를 투여받은 쥐는 폐동맥압 증가로 인해 우심방 확장을 나타냈다. 또한, 우심실 압력이 증가하여 대조군에 비해 좌심실의 정상 곡률이 손실되었습니다. 뇌실내 중격도 평평 해 보였다.
밝은 심실에 초점을 맞춘 정점 4개의 챔버 보기는 삼첨판 고리의 M 모드 심문에서 TAPPE를 측정하는 데에도 사용되었습니다. TOPSE는 MCT 처리된 쥐에서 유의하게 감소하여 기능이 손상되었음을 시사합니다. 이 프로토콜에서 가장 어려운 부분은 최적의 우심실 초점을 맞춘 정점 4개의 챔버 보기를 얻는 것입니다.
심초음파는 수축기와 이완기 동안 전체 우심실이 시야에 있는지 확인하는 것이 좋습니다. 우심실에 초점을 맞춘 정점 4개의 챔버 뷰로 얻은 이미지는 나중에 변형률 분석에 사용될 수 있으며, 초기 단계에서 우심실 수축기 기능 장애를 평가하는 데 사용할 수 있는 강력한 도구입니다.
