Mouse Fluorescent Angiography 이미지에서 망막 혈관 직경 측정

이 프로토콜은 유전자 돌연변이 또는 망막 질환으로 인해 마취된 마우스에서 망막 혈관의 직경을 자동으로 측정하는 쉽고 신뢰할 수 있는 방법을 제공합니다. 이 기술의 가장 큰 장점은 여기에서 사용자 정의 작성된 MATLAB 프로그램이 실용적이고 사용하기 쉽고 편리하고 신뢰할 수 있다는 것입니다. 망막 혈관 직경 변화는 일반적으로 RP 및 기타 망막 혈관 질환과 같은 퇴행성 질환에서 발생합니다.

마우스 모델은 치료 효능과 망막 혈관에 미치는 영향에 대한 통찰력을 제공합니다. 이 방법은 눈의 혈관 질환 진행을 따른 정량화 가능한 임상 마커로 그리고 잠재적인 치료법을 모니터링하는 데 잠재적으로 유용할 수 있습니다. 먼저 플루오레세인 작동 용액이 든 주사기를 준비하여 마취된 동물에게 복강내 투여하고 각막 표면에 2% 메틸 셀룰로오스 겔 한 방울을 바릅니다.

그런 다음 동물을 이미징 시스템의 포지셔닝 단계에 놓습니다. 망막 영상 안저 카메라 렌즈를 배치하여 쥐의 각막에 직접 부드럽게 닿게 하고 정렬을 약간 조정하여 시신경 머리가 시야 중앙에 위치하도록 합니다. 그런 다음 안저 카메라의 녹색 형광 채널로 전환하고 망막 혈관에 초점을 맞춰 이미지를 촬영합니다.

플루오레세인 주입 후 원하는 시점에서 이미지를 캡처하여 이상적인 시점을 결정하고 플루오레세인 안저 이미지를 시각화합니다. 먼저 MATLAB 프로그램을 엽니다. 그런 다음 안저 직경을 다운로드하여 저장하십시오.

M 코드. 그런 다음 안저 이미지 분석 폴더를 열고 안저 직경을 끌어다 놓습니다. m 코드를 분석 폴더에 넣습니다.

FFA 이미지를 이미지 분석 폴더로 끌어다 놓습니다. MATLAB 프로그램에서 코드 파일을 두 번 클릭하여 활성화합니다. 실행 옵션을 선택합니다.

이미지를 선택할 수 있는 팝업 메뉴가 나타납니다. 이미지를 선택하면 분석 매개변수에 대한 팝업 메뉴가 화면에 나타납니다. 팝업 메뉴에서 분석 파라미터를 설정하고 OK를 누릅니다. 광학 디스크의 중심을 선택한 다음 광학 디스크의 가장자리를 선택합니다.

분석은 백그라운드에서 수행되고 분석 결과가 화면에 나타납니다. 테이블에는 각 용기에 대한 평균, 표준 편차 및 표준 오차 값이 포함되어 있습니다. 테이블을 저장합니다.

그런 다음 평균 두께 세트로 그림을 저장하십시오. 저장된 파일이 있는 해석 폴더를 연 다음 저장된 그림을 엽니다. 저장된 테이블을 열고 값을 복사한 다음 Excel 파일에 붙여넣습니다.

플루오레세인 주입 후, 대조군 마우스와 MITFMI-VGA9/돌연변이 마우스의 이미지를 획득했으며, 이를 위해 광학 디스크 중심에서 혈관의 종점까지 시계 방향으로 최단 거리를 측정했습니다. 평균 용기 직경은 야생형 및 돌연변이 마우스에 대한 용기 수의 함수로 구했습니다. 기억해야 할 가장 중요한 사항은 안저 카메라의 위치와 안저 이미지에서 광학 디스크의 중앙입니다.

이 기술 외에도 신약을 탐색하고, 눈의 다양한 혈관 상태를 진단하고, 망막 혈관의 기능을 더 잘 이해하기 위해 분자 기술을 수행할 수 있습니다.