이 연구는 산둥성 한의학 과학기술사업(2021Q080)과 치루 중의과대학 학술학교 계승사업[루웨이레터(2022) 93]의 지원을 받았다.

이 연구는 Shandong University of Traditional Chinese Medicine 부속병원 윤리위원회의 승인을 받았습니다(승인 번호: 2020-29).
1. 실험동물
<ol><li>18개월된 6개월 된 보통 등급의 수컷 뉴질랜드 토끼(2.75 ± 0.25kg)를 표준 단일 케이지(12시간 밝음/어두움 주기, 온도 20-24°C, 공기 습도 40%-60%)에서 키웁니다.</li>
</ol>2. 그룹화 방법
<ol><li>난수 방법을 사용하여 18마리의 뉴질랜드 토끼 중 6마리를 가짜 그룹으로 선택하고 나머지 12마리의 토끼를 모델링 그룹에 할당합니다.</li>
	<li>모델링에 성공한 후 모델링 그룹 토끼를 난수 방법에 따라 모델과 Tuina 그룹으로 나누고 각 그룹에 6마리의 토끼를 배치합니다.</li>
	<li>Tuina 그룹에서 Tuina 개입을 수행합니다. Tuina가 없는 가짜 및 모델 그룹에서 동일한 잡기 및 고정을 수행합니다. 4주 동안 격일로 작동합니다(그림 1).</li>
</ol>3. KOA 모델 구축
<ol><li>1주차에 표준 조건에서 토끼에게 적응 먹이를 수행합니다. 물과 음식에 대한 애드리비텀 접근. 토끼를 토끼 고정 상자에 오른쪽에 눕혀 하루 15분 동안 진정시킵니다. 머리 고정판에 머리를 고정하십시오. 토끼가 움직이지 않도록 고정 플레이트와 나사를 고정하십시오. 토끼를 잡고 고정할 때는 보호 장갑을 착용하십시오(그림 1).</li>
	<li>2주차의 1일, 4일, 7일차에 18마리의 토끼를 모두 토끼 고정 상자에 오른쪽에 놓습니다(그림 1). 아래에 언급된 작업을 수행합니다.</li>
	<li>3% 펜토바르비탈 나트륨(1ml/kg)을 토끼의 가장자리 귀 정맥에 주입합니다. 동물 면도기로 토끼의 왼쪽 무릎 관절을 면도하여 노출된 피부에 털이 생기지 않도록 합니다.</li>
	<li>토끼의 왼쪽 무릎 관절을 의료용 요오드와 75% 알코올을 사용하여 안쪽에서 바깥쪽으로 소독합니다(그림 2A).</li>
	<li>토끼의 왼쪽 무릎 관절을 60°로 구부립니다. Waixiyan의 바늘(22G, 0.7mm x 30mm)을 삽입합니다. 4% 파파인 용액(0.1mL/kg, 2.5kg 동물의 경우 평균 0.275mL)을 모델링 그룹의 무릎 관절강에 주입합니다. 동일한 양의 0.9% 염화나트륨 용액을 가짜 그룹에 주입합니다. 이 주사 용량은 통증이나 고통의 증거를 유발하지 않고 동물에 의해 잘 견뎌냅니다(그림 2B). 알림: Waixiyan(EX-LE5)은 슬개골 인대의 외측 오목부에 위치하고 Neixiyan(EX-LE4)은 슬개골인대 20,21,22의 내측 오목한 곳에 있습니다.</li>
	<li>용액이 쏟아지지 않도록 핀홀을 2분 동안 누릅니다.</li>
	<li>토끼의 왼쪽 무릎 관절 위와 아래에 손을 놓습니다. 토끼의 무릎 관절을 부드럽고 수동적으로 구부리고 생리적 운동 범위(ROM) 내에서 10회 확장하여 용액을 무릎 관절강에 고르게 침투시킵니다15. 모델링 기간 동안 8시간마다 토끼를 관찰하십시오. 토끼가 숨거나, 팔다리가 떨리거나, 얕고 빠른 호흡을 하거나, 심지어 물거나 긁는 징후를 보일 때 부프레노르핀 SR(0.18mg/kg)을 투여합니다.</li>
	<li>7주차에 토끼의 왼쪽 무릎이 부어오른 상태로 구부러진 상태에서 결절과 줄무늬가 있는 무릎 주위의 근육 긴장도가 증가하고, 국소 통증 자극 반응이 증가하고, 무릎 ROM이 감소하고, 절름발이 걸음걸이가 되고, 무게 중심이 건강한 쪽으로 이동하는 것을 관찰합니다. 이것은 KOA 모델의 성공을 결정합니다(그림 1, 그림 2C)23,24.</li>
</ol>4. 투이나 조작
<ol><li>Tuina 조작 전에 Tuina 기법 파라미터 결정 도구를 사용하여 훈련을 수행합니다. 같은 전문가가 1개월 동안 하루에 1시간씩 훈련합니다.<ol><li>Tuina 조작 시뮬레이션 플랫폼에서 엄지손가락으로 5N의 힘과 60회/분의 빈도로 회전 반죽 및 압착 방법을 수행합니다(그림 3A,C).</li>
		<li>Tuina 조작 파라미터 처리 소프트웨어로 X, Y, Z축의 세 방향에서 힘을 분석하고 화면에 표시된 힘의 크기, 빈도 및 작용 시간을 확인합니다(그림 3B, D).</li>
		<li>Tuina 조작의 기계적 매개변수를 평가하고 훈련 중에 소프트웨어를 사용하여 Tuina 조작을 표준화합니다. 엄지손가락으로 5N의 힘, 60회/분의 빈도, 10분의 연속 작동 시간으로 표준화된 회전 반죽 및 압착 방식을 유지합니다. 그림 3B,D 25,26,27에서 조작의 표준화된 정량적 파형을 참조하십시오.</li>
	</ol></li>
	<li>토끼 고정 상자에 토끼를 오른쪽으로 놓습니다. 토끼를 달래고 이완시키기 위해 10초 동안 토끼를 부드럽게 쓰다듬습니다21. 그런 다음 Tuina 개입을 수행합니다.</li>
	<li>토끼의 왼쪽 무릎 주위 근육 경직, 힘줄 매듭, 슬개골에 엄지손가락으로 회전 주무르기를 수행하며, 5N의 힘으로 5분 동안 분당 60회의 빈도로 상하 왕복 조작을 합니다.</li>
	<li>엄지 손가락을 사용하여 Yanglingquan(GB 34), Yinlingquan(SP 9), Waixiyan(EX-LE5), Neixiyan(EX-LE4), Heding(EX-LE2), Xuehai(SP 10), Liangqiu(ST 34) 및 Weizhong(BL 40)20,21,22를 5N의 힘과 60회/분의 주파수로 누르고 각 지점에서 30초 동안 작동합니다.</li>
	<li>토끼 무릎 관절에 회전 교정법을 수행하고 그룹의 각 동물에 대해 별도로 3회 수행합니다.<ol><li>한 손으로 대퇴골을 고정합니다. 다른 손을 먼저 무릎 관절 뒤에 놓고 엄지와 약지로 각각 외측 및 내측 경골 과두를 고정합니다. 검지와 중지로 오금 포사를 고정합니다. 견인력과 비틀림 힘을 가합니다.</li>
		<li>한 손으로 대퇴골을 고정합니다. 슬개골의 내측과 측면 가장자리를 다른 손의 엄지와 새끼손가락으로 고정합니다. 검지, 중지, 약지로 슬개골 기저부를 고정합니다. 비틀림 힘을 가합니다.</li>
		<li>견인력의 방향은 경골의 장축과 평행을 유지하고 비틀림력의 방향은 하부 Xiyan의 방향과 일치하도록 합니다. 피부와 손가락 사이의 마찰을 피하기 위해 손가락을 사용하여 피부를 제자리에 고정합니다.</li>
	</ol></li>
</ol>5. 무릎 관절 ROM 측정
알림: 측정하기 전에 토끼를 진정시키십시오. 측정 통계학자와 측정 시스템은 서로 다릅니다.
<ol><li>실험 시작과 주말에 각 그룹의 토끼의 왼쪽 무릎 관절의 가동성을 측정합니다.</li>
	<li>토끼 고정 상자에 토끼를 오른쪽으로 놓고 한 손으로 왼쪽 대퇴골을 고정합니다.</li>
	<li>의료용 관절경 원의 중심을 토끼의 왼쪽 무릎 관절의 측면 중심에 맞춥니다. 원의 중심을 더 큰 trochanter에 연결하는 선 확장과 평행이 되도록 고정 암을 확장합니다. 경골의 세로 축과 평행이 되도록 모바일 암을 확장합니다.</li>
	<li>다른 손은 무릎 관절에서 약 9cm 떨어진 경골의 세로 축에 놓습니다. 750°/s의 각속도 850°에서 약3-28g 토크를 수동으로 적용합니다.</li>
	<li>토끼의 무릎 관절이 더 이상 움직이지 않을 때까지 이 작업을 수행합니다. 관절이 움직임을 멈출 때 고니오미터가 표시하는 각도를 기록합니다. 이것은 무릎 관절 ROM입니다. 읽을 때 시선이 눈금자의 표면에 수직인지 확인하십시오.</li>
	<li>각 무릎에 대한 ROM을 3x 측정하고 평균값28을 취합니다.</li>
</ol>6. Hematoxylin-eosin (HE) 염색
<ol><li>시료 채취<ol><li>개입이 끝난 지 1주일(그림 1)에 토끼를 토끼 고정 상자에 오른쪽으로 눕힙니다(토끼는 오른쪽으로 누웠을 때 편안한 상태를 유지할 가능성이 더 큽니다). 펜토바르비톤(100mg/kg)을 토끼의 귀 가장자리 정맥에 주사하여 인도적 안락사29,30.</li>
		<li>메스, 가위, 지혈 겸자로 왼쪽 무릎강을 빠르게 열어 대퇴골 원위 연골 주위에 붙어 있는 연조직을 제거합니다.</li>
		<li>물고 있는 집게로 대퇴골 원위부의 약 1cm x 1cm 연골-뼈 표본을 채취하고 식염수에 넣어 세척합니다.</li>
	</ol></li>
	<li>고정 및 석회질 제거<ol><li>연골을 4% 파라포름알데히드 용액에 넣고 72시간 동안 고정합니다.</li>
		<li>흐르는 물에 12시간 동안 헹굽니다. 에틸렌디아민테트라아세트산(EDTA) 석회질 제거 용액에서 6주 동안 석회질을 제거합니다. EDTA 석회질 제거 용액은 3일마다 교체합니다. 뼈 조직이 부드럽고 유연해지고, 쉽게 구부러질 수 있고, 바늘로 매끄럽게 뚫을 때 석회질 제거의 종점을 결정한다31.</li>
	</ol></li>
	<li>포함된 섹션의 탈수<ol><li>탈수를 위해 검체를 자동 탈수기에 넣습니다.</li>
		<li>왁스를 바르고 손질한 조직을 파라핀 왁스를 녹인 정사각형 용기 바닥에 1시간 동안 놓습니다. 식고 단단한 블록으로 굳을 때까지 냉각 오븐에 넣으십시오. 슬라이서에서 파라핀이 박힌 조직 블록을 4μm 두께로 자릅니다.</li>
		<li>표백제 기계에서 섹션을 펼친 다음 접착 슬라이드에 놓고 번호를 매기고 슬라이스 베이킹 기계와 오븐으로 건조시킵니다.</li>
	</ol></li>
	<li>왁싱 제거 및 수분 공급<ol><li>섹션을 65°C에서 60분 동안 굽습니다.</li>
		<li>절편을 크실렌에 7분 동안 담근 다음 신선한 자일렌에 각각 2분 동안 7회 더 담그십시오.</li>
		<li>슬라이스를 무수 에탄올에 5분 동안 담근 다음 2% 에탄올, 95% 에탄올 및 85% 에탄올에 각각 75분 동안 담그십시오.</li>
		<li>증류수에 2분 동안 섹션을 담그십시오.</li>
	</ol></li>
	<li>헤마톡실린 염색: 20초 동안 헤마톡실린으로 절편을 염색합니다. 흐르는 물에 섹션을 헹굽니다. 염산 에탄올 분별에 섹션을 3초 동안 담그십시오. 수돗물로 5분 동안 섹션을 헹굽니다.</li>
	<li>Eosin 재염색: 30초 동안 에오신으로 섹션을 염색합니다. 수돗물로 섹션을 헹굽니다.</li>
	<li>시료의 투명성을 위한 탈수<ol><li>섹션을 95% 에탄올에 각각 3초 동안 두 번 넣은 다음 무수 에탄올에 3초 동안 넣습니다.</li>
		<li>다시 무수 에탄올에 슬라이스를 1분 동안 넣은 다음 각각 2분 동안 크실렌 세척을 1회 반복합니다.</li>
	</ol></li>
	<li>슬라이스 밀봉: 슬라이스를 꺼내고 중성 껌 실러를 떨어뜨리고 커버슬립으로 덮고 냄새가 나지 않을 때까지 흄 후드에서 슬라이스를 건조시킵니다.</li>
	<li>샘플 사진 촬영: 100x에서 광학 현미경의 시야 아래에서 관찰하고 사진을 찍습니다.</li>
	<li>평가: 각 그룹32에 대한 Mankin의 점수로 연골 조직을 평가합니다.</li>
</ol>7. 데이터 분석
<ol><li>분석 소프트웨어를 사용하여 실험 데이터를 통계적으로 분석합니다. 데이터에 정규 분포를 적용한 경우 t-검정을 기준으로 두 표본 그룹을 비교하고 일원 분산분석을 기준으로 여러 그룹을 비교합니다.</li>
	<li>결과를 평균 ± 표준 편차(SD)로 표현합니다. 상용 소프트웨어를 사용하여 결과를 통계 플롯으로 표현할 수 있습니다. 차이는 p < 0.05에서 통계적으로 유의했다.</li>
</ol>

토끼 모델에서 Tuina를 사용한 무릎 골관절염 치료

저자는 잠재적인 이해 상충이 없음을 선언합니다.

실험 프로토콜의 설계는 KOA 치료에서 Tuina의 메커니즘을 조사하는 데 특히 중요합니다. KOA 모델링은 Waixiyan에서 papain을 주입하여 토끼에 수행되었습니다. Waixiyan은 슬개골 인대의 외측 크립트에 위치하여 찾기 쉽고, 무릎 굴곡 시 대퇴골과 경골 사이의 관절 공간이 넓어 무릎 관절강에 주입하기 쉽고 주변 조직의 손상을 방지하기 때문에 KOA 모델34를 쉽게 설정할 수 있습니다. 투?...

무릎 골관절염(KOA)은 무릎 관절의 퇴행성 질환으로 주로 무릎 통증, 부종, 변형, 움직임 제한 등으로 나타나며, 장애율이 높고 여성의 유병률이 높아 2019년 전 세계 골관절염 환자는 5억 2,781만 명이며, 골관절염 유병률은 전 세계 골관절염 유병률의 60.6%를 차지합니다. 임상적으로 KOA의 치료는 일반적으로 비수술적 치료와 수술적 치료로 나뉩니다. 비수술적 치료에는 물리치료, 약물치료, 혈소판이 풍부한 혈장 주입 요법이 포함된다 2,3. 투이나는 한의학에서 일반적이고 안전하며 신뢰할 수 있고 효과적인 치료 방법입니다. 본 연구는 무릎관절 회전교정법과 투이나를 병용하여 KOA를 치료한다. 회전 반죽 및 압착법과 같은 Tuina 기술은 근육 조직의 균형을 맞추고, 통증을 줄이고, 염증 인자 수준을 조정하고, 조직 대사를 개선하고, 관절 연골 퇴행을 억제할 수 있습니다 4,5. 무릎 관절 회전 교정법은 하지 뼈와 관절의 정렬을 조정하고, 무릎 관절 간격을 개선하고, 수직력 라인을 복원하고, 하지 생체 역학 6,7,8,9의 균형을 맞출 수 있습니다. 저항 운동은 근육량과 근력을 향상시키고 연골 조직 재생을 촉진할 수 있습니다10,11. 예비 연구에 따르면 이 투이나 프로토콜은 KOA 치료에 경구용 글루코사민 설페이트 캡슐보다 훨씬 더 효과적이며, 작용이 더 빨리 시작되고 연골 세포 퇴화 및 손상된 연골 조직의 복구가 현저히 억제되는 것으로 나타났습니다12. KOA 치료에서 비스테로이드성 항염증제는 투이나 요법에 비해 부작용과 불만족스러운 장기 효능, 상대적으로 높은 수술 위험과 비용을 가지고 있으며, 수술 후 문제 및 보철 주위 합병증과 함께 수술 치료에 대한 특정 적응증이 필요하다13,14,15. 약물 요법 및 수술과 비교할 때 KOA에 대한 Tuina 치료는 부작용 감소, 위험 감소, 안전성 향상, 비용 효율성 및 오래 지속되는 효능 등 여러 가지 이점을 제공합니다. 또한 무릎 관절 통증, 부기, 터짐 및 제한된 움직임을 효과적으로 완화할 수 있습니다 6,13,16,17.
그러나 KOA 치료를 위한 Tuina의 메커니즘을 명확히 할 필요가 있으며, 이는 KOA 치료 프로토콜의 개선과 완성을 제한합니다. 따라서 동물실험을 통해 KOA에서 투이나의 개입 기전을 연구하는 것이 효과적인 방법이다. 토끼는 쥐에 비해 유순한 기질과 더 큰 무릎 관절을 가지고 있습니다. 해부학적 구조와 연골의 생화학적 지표는 인간과 유사하기 때문에 Tuina18의 무릎관절 질환의 기전을 연구하기에 적합한 과목이다. 토끼의 무릎 관절강에 파파인을 주입하여 확립된 KOA 모델은 모델링 시간이 짧고, 외상이 감소하며, 성공률이 높고, 생존율이 높으며, KOA19와 유사한 병리학적 기전을 가지고 있다는 장점이 있다. 본 연구는 과학적으로 실현 가능한 동물실험 프로토콜을 확립하여 투이나의 KOA 개입을 규명하고, 투이나의 기전을 규명하는 것을 목적으로 한다.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>0.9 % sodium chloride injection</td>
			<td>Sichuan Keren Pharmaceutical Co.</td>
			<td>Z22121903</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>-20&#176;C refrigerator</td>
			<td>Haier</td>
			<td>BD-328WL</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>4 % fixative solution</td>
			<td>Solarbio</td>
			<td>P1110</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>4&#176;C refrigerator</td>
			<td>Haier</td>
			<td>SC-315DS</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Anhydrous ethanol</td>
			<td>Sinopharm</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Automatic tissue dewatering machine</td>
			<td>Dakowei (Shenzhen) Medical Equipment Co.</td>
			<td>HP30</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Blast drying oven</td>
			<td>Shanghai Yiheng Scientific Instruments Co.</td>
			<td>DHG-9070A</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Coverslip</td>
			<td>Biyuntian</td>
			<td>FCGF50</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Electric thermostat water bath</td>
			<td>Shanghai Yiheng Scientific Instruments Co.</td>
			<td>HWS-26</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Embedding freezing table</td>
			<td>Changzhou Paishijie Medical Equipment Co.</td>
			<td>BM450</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Embedding machine</td>
			<td>Changzhou Paishijie Medical Equipment Co.</td>
			<td>BM450A</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ethylenediaminetetraacetic acid decalcification solution</td>
			<td>Servicebio</td>
			<td>G1105-500ML</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fluorescent inverted microscope</td>
			<td>Leica</td>
			<td>Leica DM IL LED</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hematoxylin-eosin staining kit</td>
			<td>Cisco Jet</td>
			<td>EE0012</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hydrochloric acid</td>
			<td>Laiyang Economic and Technological Development Zone Fine Chemical Plant</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Medical joint goniometer</td>
			<td>KOSLO</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Neutral gum</td>
			<td>Cisco Jet</td>
			<td>EE0013</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Normal-grade male New Zealand rabbit</td>
			<td>Jinan Xilingjiao Breeding and Breeding Center</td>
			<td>SCXK (Lu) 2020 0004</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Papain(3000 U/mg)</td>
			<td>Bioss</td>
			<td>D10366</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pathological tissue bleaching and drying instrument</td>
			<td>Changzhou Paishijie Medical Equipment Co.</td>
			<td>PH60</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pet electric clippers</td>
			<td>Codos</td>
			<td>CP-3180</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Rabbit fixing box</td>
			<td>any brand</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Rotating Slicer</td>
			<td>Leica</td>
			<td>531CM-Y43</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tuina technique parameter determination instrument</td>
			<td>Shanghai DuKang Instrument Equipment Co. Ltd.</td>
			<td>ZTC-<img alt="Equation 1" src="/files/ftp_upload/65763/65763eq01.jpg" style="margin: auto;" /></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ventilator</td>
			<td>TALY ELECTRIC</td>
			<td>C32</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Xylene</td>
			<td>Fuyu Reagent</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

tuina intervention in rabbit model of knee osteoarthritis

무릎 골관절염(KOA)은 주로 무릎 관절의 연골과 주변 연조직의 퇴행성 변화를 특징으로 합니다. KOA 치료에 대한 Tuina의 효능은 확인되었지만 근본적인 메커니즘에 대한 조사가 필요합니다. 본 연구는 투이나로 처리한 과학적으로 실현 가능한 KOA 토끼 모델을 확립하여 근본적인 기전을 밝히는 것을 목표로 한다. 이를 위해 생후 6개월 된 정상 등급의 수컷 뉴질랜드 수컷 토끼 18마리를 가짜, 모델, 투이나 그룹으로 무작위 나누고 각 그룹에 6마리의 토끼를 배치했습니다. KOA 모델은 무릎 관절강에 4% 파파인 용액을 주입하여 확립되었습니다. 투이나군은 투이나와 무릎관절 회전교정법을 병행하여 4주간 투여하였다. 표준 파지와 고정만이 가짜 및 모델 그룹에서 수행되었습니다. 1주간의 중재가 끝날 때 무릎 관절 운동 범위(ROM)를 관찰하고 연골 헤마톡실린-에오신(HE) 염색을 수행했습니다. 이 연구는 Tuina가 연골 세포 사멸을 억제하고 연골 조직을 복구하며 무릎 관절 ROM을 복원할 수 있음을 보여줍니다. 결론적으로, 이 연구는 KOA 모델 토끼에 대한 Tuina 치료의 과학적 타당성을 입증하고, KOA 및 유사한 무릎 관절 관련 질환 연구에 적용할 수 있는 가능성을 강조합니다.

무릎 움직임 제한과 연골 조직 손상의 정도는 KOA의 심각성을 반영합니다. 무릎 관절의 ROM은 무릎 관절 운동의 제한 정도를 반영합니다. 무릎 관절 ROM이 작을수록 무릎 관절 운동의 제한이 더 심각합니다. 반대로 무릎 관절 ROM이 클수록 무릎 움직임의 정도가 정상입니다. 연골 조직의 형태와 구조를 관찰하기 위한 HE 염색은 연골 조직 손상 정도를 반영합니다. 연골 조직의 표면이 불규칙할수록 균?...

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저자 스포트라이트: 토끼 모델을 사용하여 무릎 골관절염 치료에서 Tuina의 효능 탐구 

이 프로토콜은 무릎 골관절염의 토끼 모델에서 Tuina 중재 방법을 설명합니다.

무릎 골관절염의 토끼 모델에 대한 Tuina 개입

Knee osteoarthritis (KOA) is mainly characterized by degenerative changes in the knee joint's cartilage and surrounding soft tissues. The efficacy of ...

두 가지 유형의 치료법과 수술을 비교했을 때, 전체 무릎 골관절염의 tuina 치료는 부작용 감소, 위험 감소, 안전성 향상, 비용 효율성 및 더 오래 지속되는 효능 등 여러 가지 이점을 제공했습니다. 또한 무릎 관절 통증, 부기, 터짐 및 제한된 움직임을 효과적으로 제거할 수 있습니다. 이 연구는 과학적으로 타당하고 저렴한 연구를 제공하여 무릎 관절 질환 치료에서 tuina의 효과에 대한 기전을 탐구하는 데 도움이 될 것입니다.이 연구는 무릎 골관절염 모델 rabit에 대한 tuina 치료의 과학적 타당성을 입증하여 무릎 골관절염 및 유사한 무릎 관절 관련 질환 연구에 대한 잠재적 응용 가능성을 강조합니다.

tuina-intervention-in-rabbit-model-of-knee-osteoarthritis

Research

JoVE Journal

Medicine

Tuina Intervention in Rabbit Model of Knee Osteoarthritis

1.3K 조회수.  Shandong University of Traditional Chinese Medicine. 두 가지 유형의 치료법과 수술을 비교했을 때, 전체 무릎 골관절염의 tuina 치료는 부작용 감소, 위험 감소, 안전성 향상, 비용 효율성 및 더 오래 지속되는 효능 등 여러 가지 이점을 제공했습니다. 또한 무릎 관절 통증, 부기, 터짐 및 제한된 움직임을 효과적으로 제거할 수 있습니다. 이 연구는 과학적으로 타당하고 저렴한 연구를 제공하여 무릎 관절 질환 치료에서 tuina의 효?...

비디오: 저자 스포트라이트: 토끼 모델을 사용하여 무릎 골관절염 치료에서 Tuina의 효능 탐구 

The Monoiodoacetate Model of Osteoarthritis Pain in the Mouse

A major symptom of patients with osteoarthritis (OA) is pain that&#160;is triggered by peripheral as well as central changes within the pain pathways. The current treatments for OA pain such as NSAIDS or opiates are neither sufficiently effective nor devoid of detrimental side effects. Animal models of OA are being developed to improve our understanding of OA-related pain mechanisms and define novel pharmacological targets for therapy. Currently available models of OA in rodents include surgical and chemical interventions into one knee joint. The monoiodoacetate (MIA) model has become a standard for modelling joint disruption in OA in both rats and mice. The model, which is easier to perform in the rat, involves injection of MIA into a knee joint that induces rapid pain-like responses in the ipsilateral limb, the level of which can be controlled by injection of different doses. Intra-articular injection of MIA disrupts chondrocyte glycolysis by inhibiting glyceraldehyde-3-phosphatase dehydrogenase and results in chondrocyte death, neovascularization, subchondral bone necrosis and collapse, as well as inflammation. The morphological changes of the articular cartilage and bone disruption are reflective of some aspects of patient pathology. Along with joint damage, MIA injection induces referred mechanical sensitivity in the ipsilateral hind paw and weight bearing deficits that are measurable and quantifiable. These behavioral changes resemble some of the symptoms reported by the patient population, thereby validating the MIA injection in the knee as a useful and relevant pre-clinical model of OA pain.
The aim of this article is to describe the methodology of intra-articular injections of MIA and the behavioral recordings of the associated development of hypersensitivity with a mind to highlight the necessary steps to give consistent and reliable recordings.

Osteoarthritis (OA), or degenerative joint disease, is a debilitating condition associated with pain that remains only partially controlled by available analgesics. Animal models are being developed to improve our understanding of OA-related pain mechanisms. Here we describe the methodology for the monoiodoacetate model of OA pain in the mouse.

마우스에서 관절염 통증의 Monoiodoacetate 모델

A major symptom of patients with osteoarthritis (OA) is pain that&#160;is triggered by peripheral as well as central changes within the pain pathways. The ...

연구

의학

Preparation, Procedures and Evaluation of Platelet-Rich Plasma Injection in the Treatment of Knee Osteoarthritis

Knee osteoarthritis (KOA) is one of the most frequently encountered diseases in the orthopedic department. Existing non-surgical treatments have a limited effect on the repair of cartilage and on bone regeneration. Platelet-rich plasma (PRP) is an autologous bioactive substance that can repair cartilage injury and accelerate bone regeneration effectively. However, reporting of PRP preparation protocols in clinical studies is highly inconsistent, with the majority of studies providing insufficient information to allow the protocol to be reproduced. We describe a repeatable method of preparing PRP visually, the treatment of KOA using PRP intra-articular injection, and methods of evaluating the outcome. PRP was prepared using manual double centrifugation. The PRP layer was extracted from peripheral blood and used for knee joint cavity injection. Evaluations included assessments of blood platelet concentrations and clinical outcomes. Preparation of PRP by manual centrifugation requires less apparatus and is less costly than plasma filtration or centrifugation using equipment. The centrifugation time of our double centrifugation method was 6 and 5 minutes for the respective centrifugations at forces of 800 and 1400 x g, respectively, to allow for the consistent preparation of standardized PRP. However, a manual method is susceptible to operator error, and PRP batch preparation is not available. Intra-articular injection of PRP proved to be an effective treatment for knee osteoarthritis. The entire treatment procedure took less than 30 minutes, the blood platelet concentration of PRP could be standardized, and treatment was proven to be effective when evaluated by follow-up.

Knee osteoarthritis is frequently seen in the orthopedic department. We introduce in detail the entire knee osteoarthritis treatment process with platelet-rich plasma injection, including preparation, procedures, and evaluation.

준비, 절차 및 무릎 관절염의 치료에 혈소판이 풍부한 혈장 주입의 평가

Knee osteoarthritis (KOA) is one of the most frequently encountered diseases in the orthopedic department. Existing non-surgical treatments have a limited ...

Isometric Contractility Measurement of the Mouse Mesenteric Artery Using Wire Myography

The wire myograph technique is used to assess the contractility of vascular smooth muscles in response to depolarization, GPCR agonists/inhibitors and drugs. It is widely used in many studies on the physiological functions of vascular smooth muscle, the pathogenesis of vascular diseases such as hypertension, and the development of smooth muscle relaxant drugs. The mouse is a widely used model animal with a large pool of disease models and genetically modified strains. We introduced this method to measure the isometric contraction of mouse mesenteric artery in detail. A 1.4-mm segment of mouse mesenteric resistance artery was isolated and mounted on a myograph chamber by passing two steel wires through its lumen. After equilibration and normalization steps, the vessel segment was potentiated by a high-K+ solution twice prior to the contraction assay. As an example of the application of this method in drug development, we measured the relaxant effect of a novel natural substance, neoliensinine, isolated from a Chinese herb, embryos of the lotus seed (Nelumbo nucifera Gaertn.) on mouse mesenteric arteries. The vessel segments mounted on the myograph chamber were stimulated with a high-K+ solution. When the force tension reached a stable sustained phase, cumulative doses of neoliensinine were added to the chamber. We found that neoliensinine had a dose-dependent relaxant effect on smooth muscle contraction, thus suggesting that it bears potential activity against hypertension. In addition, as the vessel segment can survive at least 4 hours after mounting and maintain contractility induced by the high-K+ solution for many times, we suggest that the wire myograph system may be used for the time-consuming process of drug screening.

The wire myograph technique is used to investigate vascular smooth muscle functions and screen new drugs. We report a detailed protocol for measuring the isometric contractility of the mouse mesenteric artery and for screening new relaxants of vascular smooth muscle.

Myography 와이어를 사용 하 여 마우스 Mesenteric 동맥의 isometric 수축 측정

The wire myograph technique is used to assess the contractility of vascular smooth muscles in response to depolarization, GPCR agonists/inhibitors and ...

Transthoracic Echocardiographic Examination in the Rabbit Model

Large animal models such as the rabbit are valuable for translational preclinical research. Rabbits have a similar cardiac electrophysiology compared to that of humans and that of other large animal models such as dogs and pigs. However, the rabbit model has the additional advantage of lower maintenance costs compared to other large animal models. The longitudinal evaluation of cardiac function using echocardiography, when appropriately implemented, is a useful methodology for preclinical assessment of novel therapies for heart failure with reduced ejection fraction (e.g. cardiac regeneration). The correct use of this non-invasive tool requires the implementation of a standardized examination protocol following international guidelines. Here we describe, step by step, a detailed protocol supervised by veterinary cardiologists for performing echocardiography in the rabbit model, and demonstrate how to correctly obtain the different echocardiographic views and imaging planes, as well as the different imaging modes available in a clinical echocardiography system routinely used in human and veterinary patients.

Here we describe, step by step, a detailed protocol for performing echocardiography in the rabbit model. We show how to correctly obtain the different echocardiographic views and imaging planes, as well as the different imaging modes available in a clinical echocardiography system routinely used in human and veterinary patients.

토끼 모델의 흉부 심초음파 검사

Large animal models such as the rabbit are valuable for translational preclinical research. Rabbits have a similar cardiac electrophysiology compared to ...

The Lower Body Positive Pressure Treadmill for Knee Osteoarthritis Rehabilitation

Here, based on a clinician&rsquo;s point-of-view, we propose a two-model lower body positive pressure (LBPP) protocol (walking and squatting models) in addition to a clinical, functional assessment methodology, including details for further encouragement of the development of non-drug surgical intervention strategies in knee osteoarthritis patients. However, we only present the effect of LBPP training in improvement of pain and knee function in one patient through three-dimensional gait analysis. The exact, long-term effects of this approach should be explored in future studies.

Here, based on a clinician&#8217;s point-of-view, we propose a two-model lower body positive pressure (LBPP) protocol (walking and squatting models) in addition to a clinical, functional assessment methodology, including details for further encouragement of the development of non-drug surgical intervention strategies in knee osteoarthritis patients. However, we only present the effect of LBPP training in improvement of pain and knee function in one patient through three-dimensional gait analysis. The exact, long-term effects of this approach should be explored in future studies.

무릎 관절염 재활을위한 하체 양압 러닝 머신

Here, based on a clinician&rsquo;s point-of-view, we propose a two-model lower body positive pressure (LBPP) protocol (walking and squatting models) in ...

Osteoarthritis Pain Model Induced by Intra-Articular Injection of Mono-Iodoacetate in Rats

The current animal models of osteoarthritis (OA) can be divided into spontaneous models and induced models, both of which aim to simulate the pathophysiological changes of human OA. However, as the main symptom in the late stage of OA, pain affects the patients&#39; daily life, and there are not many available models. The mono-iodoacetate (MIA)-induced model is the most widely used OA pain model, mainly used in rodents. MIA is an inhibitor of glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase, which causes chondrocyte death, cartilage degeneration, osteophyte, and measurable changes in animal behavior. Besides, expression changes of matrix metalloproteinase (MMP) and pro-inflammatory cytokines (IL1 &#946; and TNF &#945;) can be detected in the MIA-induced model. Those changes are consistent with OA pathophysiological conditions in humans, indicating that MIA can induce a measurable and successful OA pain model. This study aims to describe the methodology of intra-articular injection of MIA in rats and discuss the resulting pain-related behaviors and histopathological changes.

This study describes the method of intra-articular injection of mono-iodoacetate in rats and discusses the resulting pain-related behaviors and histopathological changes, which provide references for future applications.

랫트에서 모노요오도아세테이트의 관절내 주사에 의해 유도된 골관절염 통증 모델

The current animal models of osteoarthritis (OA) can be divided into spontaneous models and induced models, both of which aim to simulate the ...

Standardized Histomorphometric Evaluation of Osteoarthritis in a Surgical Mouse Model

One of the most prevalent joint disorders in the United States, osteoarthritis (OA) is characterized by progressive degeneration of articular cartilage, primarily in the hip and knee joints, which results in significant impacts on patient mobility and quality of life. To date, there are no existing curative therapies for OA able to slow down or inhibit cartilage degeneration. Presently, there is an extensive body of ongoing research to understand OA pathology and discover novel therapeutic approaches or agents that can efficiently slow down, stop, or even reverse OA. Thus, it is crucial to have a quantitative and reproducible approach to accurately evaluate OA-associated pathological changes in the joint cartilage, synovium, and subchondral bone. Currently, OA severity and progression are primarily assessed using the Osteoarthritis Research Society International (OARSI) or Mankin scoring systems. In spite of the importance of these scoring systems, they are semiquantitative and can be influenced by user subjectivity. More importantly, they fail to accurately evaluate subtle, yet important, changes in the cartilage during the early disease states or early treatment phases. The protocol we describe here uses a computerized and semiautomated histomorphometric software system to establish a standardized, rigorous, and reproducible quantitative methodology for the evaluation of joint changes in OA. This protocol presents a powerful addition to the existing systems and allows for more efficient detection of pathological changes in the joint.

The current protocol establishes a rigorous and reproducible method for quantification of morphological joint changes that accompany osteoarthritis. Application of this protocol can be valuable in monitoring disease progression and evaluating therapeutic interventions in osteoarthritis.

외과 마우스 모형에 있는 골관절염의 표준화한 조직 형측정 평가

One of the most prevalent joint disorders in the United States, osteoarthritis (OA) is characterized by progressive degeneration of articular cartilage, ...

Isolated Lung Perfusion System in the Rabbit Model

The isolated lung perfusion system has been widely used in pulmonary research, contributing to elucidate the lungs&#39; inner workings, both micro and macroscopically. This technique is useful in the characterization of pulmonary physiology and pathology by measuring metabolic activities and respiratory functions, including interactions between circulatory substances and the effects of inhaled or perfused substances, as in drug testing. While in vitro methods involve the slicing and culturing of tissues, the isolated ex vivo lung perfusion system allows to work with a complete functional organ making possible the study of a continuous physiological function while recreating ventilation and perfusion. However, it should be noted that the effects of the absence of central innervation and lymphatic drainage still have to be fully assessed. This protocol aims to describe the assembly of the isolated lung apparatus, followed by the surgical extraction and cannulation of lungs and heart from experimental lab animals, as well as to display the perfusion technique and signal processing of data. The average viability of the isolated lung ranges between 5-8 h; during this period, the pulmonary capillary permeability increases, causing edema and lung injury. The functionality of preserved pulmonary tissue is measured by the capillary filtration coefficient (Kfc), used to determine the extent of pulmonary edema through time.

The isolated rabbit lung preparation is a gold standard tool in pulmonary research. This publication aims to describe the technique as developed for the study of physiological and pathological mechanisms involved in airway reactivity, lung preservation, and preclinical research in lung transplantation and pulmonary edema.

토끼 모델의 절연 폐 관류 시스템

The isolated lung perfusion system has been widely used in pulmonary research, contributing to elucidate the lungs&#39; inner workings, both micro and ...

무릎 골관절염 통증 관리를 위한 FSN 요법

Fu's Subcutaneous Needling for Knee Osteoarthritis Pain

Fu's subcutaneous needling (FSN) is a new acupuncture and dry needling technique based on traditional Chinese medicine. It rapidly produces long-lasting effects in soft tissue injuries, particularly in painful musculoskeletal conditions, by providing stimulation primarily in the subcutaneous area. Osteoarthritis (OA) is the most common joint disease in adults worldwide and is often accompanied by a painful syndrome of structural changes in the peripheral joints of the knee. However, the etiology of OA pain is not fully understood, though myofascial trigger points (MTrPs) are commonly found in the lower limb muscles (so-called "tightened muscles") of patients with knee OA. 
FSN has been used in many fields for the treatment of acute pain problems and can relieve muscle contraction from MTrPs, thereby improving the local circulation. This study recruited patients with pain from knee OA into an FSN group or a transcutaneous electrical nerve stimulation (TENS) group with three treatment sessions and a follow-up over the course of 2 weeks. The results showed that FSN was effective in treating soft tissue pain around the knee with OA. This study aimed to establish and visualize three key technical indicators during FSN therapy, including the FSN needle insertion point and layer; the frequency and duration of the swaying movement; and the manipulation of the reperfusion approach. These findings have great potential for future applications in myofascial pain treatment, especially for pain management. Following this protocol could enhance FSN skills.

저자 스포트라이트: 무릎 골관절염 통증에 대한 Fu의 피하 침  

We present a protocol for using Fu's subcutaneous needling for knee osteoarthritis pain, which combines swaying movement and reperfusion approach techniques. This protocol has great potential for future applications in myofascial pain treatment and could enhance Fu's subcutaneous needling (FSN) manipulation skills.

무릎 골관절염 통증에 대한 Fu의 피하 바늘

Fu's subcutaneous needling (FSN) is a new acupuncture and dry needling technique based on traditional Chinese medicine. It rapidly produces long-lasting ...

무릎 골관절염의 토끼 모델에 대한 Tuina 개입

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마우스에서 관절염 통증의 Monoiodoacetate 모델

준비, 절차 및 무릎 관절염의 치료에 혈소판이 풍부한 혈장 주입의 평가

Myography 와이어를 사용 하 여 마우스 Mesenteric 동맥의 isometric 수축 측정

토끼 모델의 흉부 심초음파 검사

무릎 관절염 재활을위한 하체 양압 러닝 머신

랫트에서 모노요오도아세테이트의 관절내 주사에 의해 유도된 골관절염 통증 모델

외과 마우스 모형에 있는 골관절염의 표준화한 조직 형측정 평가

토끼 모델의 절연 폐 관류 시스템

무릎 골관절염 통증에 대한 Fu의 피하 바늘

무릎 골관절염 통증에 대한 Fu의 피하 바늘