Lectin-based Isolation and Culture of Mouse Embryonic Motoneurons

Spinal motoneurons develop towards postmitotic stages through early embryonic nervous system development and subsequently grow out dendrites and axons. ...

Ruhr-University Bochum

Phosphacan &#x662F;&#x8868;&#x793A;&#x5206;&#x6CCC;&#x80DE;&#x5916;&#x90E8;&#x5206;&#x7684;&#x8DE8;&#x819C;&#x53D7;&#x4F53;&#x86CB;&#x767D;&#x916A;&#x6C28;&#x9178;&#x78F7;&#x9178;&#x9176; &#xFF08;RPTP beta&#xFF09; &#x786B;&#x9178;&#x8F6F;&#x9AA8;&#x7D20;&#x86CB;&#x767D;&#x591A;&#x7CD6;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x4E9A;&#x578B;&#x7EC6;&#x80DE;&#x57FA;&#x8D28;&#x4FE1;&#x53F7;&#x4E0E;&#x9AD3;&#x9798;&#x3001; &#x8F74;&#x7A81;&#x751F;&#x957F;&#x548C;&#x53D1;&#x5C55;&#x4E2D;&#x67A2;&#x795E;&#x7ECF;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x4E2D;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8FC1;&#x79FB;&#x5173;&#x8054;&#x7684;&#x4E8B;&#x4EF6;&#x6709;&#x7275;&#x8FDE;&#x548C;&#x8111;&#x75C5;&#x75C7;&#x7684;&#x4E0A;&#x4E0B;&#x6587;&#x4E2D;&#x53EF;&#x4EE5;&#x53D1;&#x6325;&#x5173;&#x952E;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;&#x6700;&#x8FD1;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x5DF2;&#x62A5;&#x9053; phosphacan&#x3001; phosphacan &#x77ED;&#x5F02;&#x6784;&#x4F53; &#xFF08;PSI&#xFF09;&#x3001; &#x5728;&#x4EA7;&#x540E;&#x7B2C;&#x4E8C;&#x5468;&#x7684;&#x54EA;&#x4E9B;&#x9AD8;&#x5CF0;&#x8868;&#x8FBE;&#x65B0;&#x9F3B;&#x606F;&#x8089;&#x7684;&#x9274;&#x5B9A;&#x3002;&#x9632;&#x6269;&#x6563;&#x5B89;&#x5168;&#x5021;&#x8BAE; L1 &#x548C; F3/contactin &#x7684;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x53D7;&#x4F53;&#x8FDB;&#x884C;&#x4EA4;&#x4E92;&#xFF0C;&#x5E76;&#x53EF;&#x4FC3;&#x8FDB;&#x8111;&#x76AE;&#x8D28;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x8F74;&#x7A81;&#x751F;&#x957F;&#x3002;&#x5728;&#x6B64;&#x7814;&#x7A76;&#x4E2D;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x5DF2;&#x8BC4;&#x5BA1;&#xFF0C;&#x901A;&#x8FC7;&#x539F;&#x4F4D;&#x6742;&#x4EA4;&#xFF0C;&#x9632;&#x6269;&#x6563;&#x5B89;&#x5168;&#x5021;&#x8BAE;&#x5728;&#x4EA7;&#x540E;&#x7B2C; 7 &#x5929;&#x7684;&#x5927;&#x9F20;&#x8111;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x4E2D;&#x7684;&#x8868;&#x8FBE;&#x8C31;&#x3002;&#x9632;&#x6269;&#x6563;&#x5B89;&#x5168;&#x5021;&#x8BAE;&#x5F88;&#x5927;&#x7A0B;&#x5EA6;&#x4E0A;&#x8868;&#x793A;&#x5728;&#x7070;&#x8D28;&#x7684;&#x53D1;&#x5C55;&#x4E2D;&#x56FD;&#x5BB6;&#x7684;&#x5927;&#x8111;&#x76AE;&#x8D28;&#xFF0C;&#x5B83;&#x4E0E; phosphacan&#xFF0C;colocalizes&#xFF0C;&#x800C; RPTPbeta &#x53D7;&#x4F53;&#x5F62;&#x5F0F;&#x7684;&#x8868;&#x8FBE;&#x4EC5;&#x9650;&#x4E8E;&#x5FC3;&#x5BA4;&#x9886;&#x57DF;&#x4E2D;&#xFF0C;&#x6CA1;&#x6709;&#x9075;&#x5B88;&#x9632;&#x6269;&#x6563;&#x5B89;&#x5168;&#x5021;&#x8BAE;&#x3002;&#x4ECE;&#x6240;&#x6709;&#x56FE;&#x5C42;&#x7684;&#x76AE;&#x5C42;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x8868;&#x8FBE;&#x9632;&#x6269;&#x6563;&#x5B89;&#x5168;&#x5021;&#x8BAE;&#x3002;&#x5728;&#x5C0F;&#x8111;&#xFF0C;&#x53E6;&#x4E00;&#x65B9;&#x9762;&#xFF0C;&#x6CA1;&#x6709;&#x8868;&#x8FBE;&#x7684;&#x9632;&#x6269;&#x6563;&#x5B89;&#x5168;&#x5021;&#x8BAE;&#x5DF2;&#x68C0;&#x6D4B;&#xFF0C;&#x867D;&#x7136;&#x5176;&#x4ED6; phosphacan/RPTP-&beta; &#x5F02;&#x6784;&#x4F53;&#x663E;&#x793A;&#x5F3A;&#x9632;&#x6269;&#x6563;&#x5B89;&#x5168;&#x5021;&#x8BAE;&#x7684;&#x8868;&#x8FBE;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#x3002;&#x603B;&#x4F53;&#x800C;&#x8A00;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x7684;&#x7814;&#x7A76;&#x8868;&#x660E; PSI &#x5206;&#x5316;&#x7684;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x5728;&#x5927;&#x8111;&#x76AE;&#x8D28;&#x7684;&#x4EA7;&#x540E;&#x671F;&#x95F4;&#x8868;&#x793A;&#xFF0C;&#x4F46;&#x4E0D;&#x4ECE;&#x7ED3;&#x6784;&#x4E2D;&#x51FA;&#x73B0;&#x6269;&#x6563;&#x548C;&#x8FC1;&#x79FB;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x610F;&#x89C1;&#x7684;&#x610F;&#x4E49;&#x662F;&#x4EE5;&#x524D;&#x7684; phosphacan/RPTP-&#x6D4B;&#x8BD5;&#x7248;&#x529F;&#x80FD;&#x578B;&#x53F7;&#x7684;&#x8303;&#x56F4;&#x5185;&#x8BA8;&#x8BBA;&#x3002;

&#x76AE;&#x5C42;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x8868;&#x8FBE;&#x9632;&#x6269;&#x6563;&#x5B89;&#x5168;&#x5021;&#x8BAE;&#xFF0C;phosphacan/RPTPbeta &#x65B0;&#x578B;&#x5F02;&#x6784;&#x4F53;&#x3002;

Phosphacan is a chondroitin sulfate proteoglycan representing the secreted extracellular part of a transmembrane receptor protein tyrosine phosphatase (RPTP-beta). These isoforms have been implicated in cell-extracellular matrix signaling events associated with myelination, axon growth, and cell migration in the developing central nervous system and may play critical roles in the context of brain pathologies. Recently, we have reported the identification of a new isoform of phosphacan, the phosphacan short isoform (PSI), the expression of which peaks in the second postnatal week. PSI interacts with the neuronal receptors L1 and F3/contactin and can promote neurite growth of cortical neurons. In this study, we have assessed, by in situ hybridization, the expression profile of PSI in the rat brain at postnatal day 7. PSI is largely expressed in the gray matter of the developing cerebral cortex in which it colocalizes with phosphacan, whereas the expression of RPTPbeta receptor forms is restricted to the ventricular area in which PSI has not been observed. Neurons from all layers of the cortex express PSI. In the cerebellum, on the other hand, no expression of PSI has been detected, although the other phosphacan/RPTP-beta isoforms show strong PSI expression here. Overall, our study suggests that PSI is expressed during the postnatal period in differentiated neurons of the cortex but is absent from structures in which proliferation and migration occur. The significance of these observations is discussed in the context of previous models of phosphacan/RPTP-beta functions.

Cortical neurons express PSI, a novel isoform of phosphacan/RPTPbeta.

Phosphacan est un prot&#xE9;oglycane chondro&#xEF;tine sulfate, repr&#xE9;sentant la partie extracellulaire s&#xE9;cr&#xE9;t&#xE9;e d&#x26;#39;une phosphatase transmembranaire du r&#xE9;cepteur prot&#xE9;ine tyrosine (RPTP-b&#xEA;ta). Ces isoformes ont &#xE9;t&#xE9; impliqu&#xE9;s dans les &#xE9;v&#xE9;nements cellule-matrice extracellulaire de signalisation associ&#xE9;es &#xE0; la my&#xE9;linisation, la croissance axonale et la migration cellulaire dans le d&#xE9;veloppement du syst&#xE8;me nerveux central et peut jouer un r&#xF4;le critique dans le contexte de pathologies c&#xE9;r&#xE9;brales. R&#xE9;cemment, nous avons signal&#xE9; l&#x26;#39;identification d&#x26;#39;une nouvelle isoforme phosphacan, l&#x26;#39;isoforme courte phosphacan (PSI), l&#x26;#39;expression de qui culmine dans la deuxi&#xE8;me semaine postnatale. PSI interagit avec le L1 neuronale r&#xE9;cepteurs et F3/contactin et peut favoriser la croissance des neurites des neurones corticaux. Dans cette &#xE9;tude, nous avons &#xE9;valu&#xE9;, par hybridation in situ, le profil d&#x26;#39;expression de l&#x26;#39;ISP dans le cerveau de rat au jour postnatal 7. PSI est largement exprim&#xE9; dans la mati&#xE8;re grise du cortex c&#xE9;r&#xE9;bral en d&#xE9;veloppement dans lequel il co-localise avec phosphacan, alors que l&#x26;#39;expression de formes de r&#xE9;cepteurs RPTPbeta est limit&#xE9; &#xE0; la zone ventriculaire dans lequel PSI n&#x26;#39;a pas &#xE9;t&#xE9; observ&#xE9;e. Les neurones de toutes les couches de la PSI cortex expresse. Dans le cervelet, d&#x26;#39;autre part, aucune expression de PSI a &#xE9;t&#xE9; d&#xE9;tect&#xE9;e, bien que l&#x26;#39;autre phosphacan / RPTP-b&#xEA;ta isoformes montrent une expression PSI fort ici. Dans l&#x26;#39;ensemble, notre &#xE9;tude sugg&#xE8;re que PSI est exprim&#xE9; au cours de la p&#xE9;riode postnatale dans les neurones diff&#xE9;renci&#xE9;s du cortex, mais est absent de structures dans lesquelles la prolif&#xE9;ration et la migration se produisent. La signification de ces observations est discut&#xE9;e dans le contexte des mod&#xE8;les pr&#xE9;c&#xE9;dents de phosphacan / RPTP-b&#xEA;ta fonctions.

Corticale neurones expriment PSI, une nouvelle isoforme de Phosphacan / RPTPbeta

Kortikalen Neuronen Express PSI, ein Roman Isoform Phosphacan / RPTPbeta.

Phosphacan &egrave; un proteoglicano Condroitin solfato che rappresenta la parte extracellulare secreta di una recettore transmembrana della proteina tirosina fosfatasi (RPTP-beta). Queste isoforme sono stati implicati nella cella extracellulare segnalazione eventi associati con mielinizzazione, axon crescita e migrazione delle cellule in via di sviluppo del sistema nervoso centrale e pu&ograve; giocare ruoli critici nel contesto delle patologie cerebrali. Recentemente, abbiamo segnalato l&#39;identificazione di una nuova isoforma di phosphacan, l&#39;isoforma corta phosphacan (PSI), l&#39;espressione di cui cime della settimana secondo postnatale. PSI interagisce con i recettori neuronali L1 e F3/anche e pu&ograve; promuovere la crescita dei neuriti dei neuroni corticali. In questo studio, noi abbiamo valutato, l&#39;ibridazione in situ, il profilo di espressione del PSI nel cervello del ratto a 7 giorno postnatale. PSI &egrave; espressa in gran parte nella sostanza grigia della corteccia cerebrale in via di sviluppo in cui colocalizza con phosphacan, considerando che l&#39;espressione di forme del recettore RPTPbeta &egrave; limitato alla zona ventricolare in cui non &egrave; stato osservato PSI. I neuroni da tutti gli strati della corteccia express PSI. Nel cervelletto, d&#39;altra parte, nessuna espressione del PSI &egrave; stata rilevata, anche se le altre phosphacan/RPTP-beta isoforme mostrano forte espressione PSI qui. Nel complesso, il nostro studio suggerisce che il PSI &egrave; espresso durante il periodo postnatale in differenziata dei neuroni della corteccia ma &egrave; assente dalle strutture in cui si verificano proliferazione e migrazione. Il significato di queste osservazioni &egrave; discusso nel contesto dei modelli precedenti delle funzioni phosphacan/RPTP-beta.

Neuroni corticali express PSI, un romanzo isoforma di phosphacan/RPTPbeta.

&#x30DB;&#x30B9;&#x30D5;&#x30A1;&#x30AB;&#x30F3;&#x306F;&#x819C;&#x8CAB;&#x901A;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x30C1;&#x30ED;&#x30B7;&#x30F3;&#x30DB;&#x30B9;&#x30D5;&#x30A1;&#x30BF;&#x30FC;&#x30BC;&#xFF08;RPTP-&#x3B2;&#xFF09;&#x306E;&#x5206;&#x6CCC;&#x7D30;&#x80DE;&#x5916;&#x90E8;&#x5206;&#x3092;&#x8868;&#x3059;&#x30B3;&#x30F3;&#x30C9;&#x30ED;&#x30A4;&#x30C1;&#x30F3;&#x786B;&#x9178;&#x30D7;&#x30ED;&#x30C6;&#x30AA;&#x30B0;&#x30EA;&#x30AB;&#x30F3;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x30A2;&#x30A4;&#x30BD;&#x30D5;&#x30A9;&#x30FC;&#x30E0;&#x306F;&#x3001;&#x9AC4;&#x9798;&#x3001;&#x8EF8;&#x7D22;&#x6210;&#x9577;&#x3001;&#x767A;&#x5C55;&#x9014;&#x4E0A;&#x306E;&#x4E2D;&#x67A2;&#x795E;&#x7D4C;&#x7CFB;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x7D30;&#x80DE;&#x79FB;&#x52D5;&#x306B;&#x95A2;&#x9023;&#x4ED8;&#x3051;&#x3089;&#x308C;&#x305F;&#x30A4;&#x30D9;&#x30F3;&#x30C8;&#x3092;&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EB;&#x4F1D;&#x9054;&#x7D30;&#x80DE; - &#x7D30;&#x80DE;&#x5916;&#x30DE;&#x30C8;&#x30EA;&#x30C3;&#x30AF;&#x30B9;&#x306B;&#x95A2;&#x4E0E;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3068;&#x8133;&#x306E;&#x75C5;&#x7406;&#x5B66;&#x306E;&#x6587;&#x8108;&#x3067;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x679C;&#x305F;&#x3059;&#x53EF;&#x80FD;&#x6027;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6700;&#x8FD1;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x30DB;&#x30B9;&#x30D5;&#x30A1;&#x30AB;&#x30F3;&#x3001;&#x30DB;&#x30B9;&#x30D5;&#x30A1;&#x30AB;&#x30F3;&#x77ED;&#x3044;&#x30A2;&#x30A4;&#x30BD;&#x30D5;&#x30A9;&#x30FC;&#x30E0;&#xFF08;PSI&#xFF09;&#x3001;&#x7B2C;&#x751F;&#x5F8C;&#x4E00;&#x9031;&#x9593;&#x306E;&#x30D4;&#x30FC;&#x30AF;&#x306E;&#x767A;&#x73FE;&#x306E;&#x65B0;&#x305F;&#x306A;&#x30A2;&#x30A4;&#x30BD;&#x30D5;&#x30A9;&#x30FC;&#x30E0;&#x306E;&#x540C;&#x5B9A;&#x304C;&#x5831;&#x544A;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002; PSI&#x306F;&#x3001;&#x795E;&#x7D4C;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;L1&#x3068;F3/contactin&#x3068;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x3057;&#x3001;&#x76AE;&#x8CEA;&#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30ED;&#x30F3;&#x306E;&#x795E;&#x7D4C;&#x7A81;&#x8D77;&#x306E;&#x6210;&#x9577;&#x3092;&#x4FC3;&#x9032;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x672C;&#x7814;&#x7A76;&#x3067;&#x306F;&#x3001;in situ&#x30CF;&#x30A4;&#x30D6;&#x30EA;&#x30C0;&#x30A4;&#x30BC;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x3001;&#x751F;&#x5F8C;7&#x65E5;&#x76EE;&#x306E;&#x30E9;&#x30C3;&#x30C8;&#x8133;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;PSI&#x306E;&#x767A;&#x73FE;&#x30D7;&#x30ED;&#x30D5;&#x30A1;&#x30A4;&#x30EB;&#x306E;&#x3053;&#x3068;&#x3067;&#x3001;&#x8A55;&#x4FA1;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002; RPTPbeta&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x306E;&#x5F62;&#x614B;&#x306E;&#x767A;&#x73FE;&#x304C;&#x89B3;&#x5BDF;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x306A;&#x3044;PSI&#x3067;&#x5FC3;&#x5BA4;&#x9818;&#x57DF;&#x306B;&#x5236;&#x9650;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x306E;&#x306B;&#x5BFE;&#x3057;&#x3001;PSI&#x306F;&#x3001;&#x4E3B;&#x306B;&#x3001;&#x305D;&#x308C;&#x304C;&#x30DB;&#x30B9;&#x30D5;&#x30A1;&#x30AB;&#x30F3;&#x3068;&#x5171;&#x5C40;&#x5728;&#x3057;&#x305F;&#x5927;&#x8133;&#x76AE;&#x8CEA;&#x306E;&#x7070;&#x767D;&#x8CEA;&#x3067;&#x8868;&#x73FE;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x76AE;&#x8CEA;&#x30A8;&#x30AF;&#x30B9;&#x30D7;&#x30EC;&#x30B9;PSI&#x306E;&#x3059;&#x3079;&#x3066;&#x306E;&#x5C64;&#x304B;&#x3089;&#x306E;&#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30ED;&#x30F3;&#x3002;&#x4ED6;&#x306E;&#x30DB;&#x30B9;&#x30D5;&#x30A1;&#x30AB;&#x30F3;/ RPTP-&#x3B2;&#x306E;&#x30A2;&#x30A4;&#x30BD;&#x30D5;&#x30A9;&#x30FC;&#x30E0;&#x304C;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x5F37;&#x529B;&#x306A;PSI&#x306E;&#x767A;&#x73FE;&#x3092;&#x793A;&#x3059;&#x304C;&#x3001;&#x5C0F;&#x8133;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x4E00;&#x65B9;&#x3067;&#x3001;PSI&#x306E;&#x306A;&#x3044;&#x8868;&#x73FE;&#x306F;&#x3001;&#x691C;&#x51FA;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x3002;&#x5168;&#x4F53;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306E;&#x7814;&#x7A76;&#x3067;&#x306F;&#x3001;PSI&#x306F;&#x3001;&#x5927;&#x8133;&#x76AE;&#x8CEA;&#x306E;&#x5206;&#x5316;&#x795E;&#x7D4C;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x751F;&#x5F8C;&#x671F;&#x9593;&#x4E2D;&#x306B;&#x767A;&#x73FE;&#x3059;&#x308B;&#x304C;&#x3001;&#x5897;&#x6B96;&#x3068;&#x79FB;&#x52D5;&#x304C;&#x767A;&#x751F;&#x3059;&#x308B;&#x69CB;&#x9020;&#x304B;&#x3089;&#x4E0D;&#x5728;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x5506;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x89B3;&#x200B;&#x200B;&#x6E2C;&#x306E;&#x91CD;&#x8981;&#x6027;&#x306F;&#x30DB;&#x30B9;&#x30D5;&#x30A1;&#x30AB;&#x30F3;/ RPTP-&#x3B2;&#x306E;&#x95A2;&#x6570;&#x306E;&#x4EE5;&#x524D;&#x306E;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x306E;&#x6587;&#x8108;&#x3067;&#x8AAC;&#x660E;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x76AE;&#x8CEA;&#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30ED;&#x30F3;&#x30A8;&#x30AF;&#x30B9;&#x30D7;&#x30EC;&#x30B9;PSI&#x3001;&#x30DB;&#x30B9;&#x30D5;&#x30A1;&#x30AB;&#x30F3;/ RPTPbeta&#x306E;&#x65B0;&#x898F;&#x30A2;&#x30A4;&#x30BD;&#x30D5;&#x30A9;&#x30FC;&#x30E0;

Phosphacan &#xCF58; proteoglycan &#xC778;&#xC0B0; &#xAC00;&#xC218;&#xBD84;&#xD574;&#xB294; &#xB9C9; &#xD6A1;&#xB2E8; &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xD2F0;&#xB85C;&#xC2E0; &#xD6A8;&#xC18C; (RPTP beta)&#xC758; &#xBE44; &#xC138;&#xD3EC; &#xC678; &#xBD80;&#xBD84;&#xC744; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0B4;&#xB294;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; isoforms myelination, &#xCD95; &#xC0C9; &#xC131;&#xC7A5; &#xBC0F; &#xC140; &#xB9C8;&#xC774;&#xADF8;&#xB808;&#xC774;&#xC158; &#xAC1C;&#xBC1C; &#xC911;&#xC559; &#xC2E0;&#xACBD; &#xC2DC;&#xC2A4;&#xD15C;&#xC5D0; &#xAD00;&#xB828; &#xB41C; &#xC774;&#xBCA4;&#xD2B8; &#xC2E0;&#xD638; &#xC140; &#xC138;&#xD3EC; &#xC678; &#xB9E4;&#xD2B8;&#xB9AD;&#xC2A4;&#xC5D0; &#xC5F0;&#xB8E8; &#xB418;&#xC5B4; &#xACE0; &#xB1CC; &#xBCD1; &#xB9AC;&#xC758; &#xB9E5;&#xB77D;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xC7AC;&#xC0DD;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xCD5C;&#xADFC;&#xC5D0;, &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; phosphacan, phosphacan &#xC9E7;&#xC740; isoform (PSI), &#xC0B0; &#xD6C4; &#xB458;&#xC9F8; &#xC8FC;&#xC5D0;&#xB294; &#xBD09;&#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xC2DD;&#xC758; &#xC0C8;&#xB85C;&#xC6B4; isoform &#xC2DD;&#xBCC4; &#xBCF4;&#xACE0;. PSI l 1&#xC640; f 3/contactin &#xC2E0;&#xACBD; &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4;&#xC640; &#xC791;&#xC6A9; &#xD558; &#xACE0; &#xB300;&#xB1CC; &#xD53C; &#xC9C8;&#xC758; &#xC2E0;&#xACBD; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; neurite &#xC131;&#xC7A5;&#xC744; &#xCD09;&#xC9C4; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xD3C9;&#xAC00;, &#xC81C;&#xC790;&#xB9AC; &#xAD50; &#xC7A1;, &#xCD9C;&#xC0DD; &#xD6C4; &#xC81C; 7 &#xC77C;&#xC5D0; &#xC950; &#xB1CC;&#xC5D0;&#xC11C; PSI&#xC758; &#xC2DD; &#xD504;&#xB85C; &#xD30C;&#xC77C;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574;. RPTPbeta &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4; &#xD615;&#xD0DC;&#xC758; &#xC2DD;&#xC740; PSI &#xAD00;&#xCC30; &#xD558;&#xC9C0;&#xB294; &#xC2EC; &#xC2E4; &#xC601;&#xC5ED;&#xC5D0; &#xC81C;&#xD55C; &#xBC18;&#xBA74; PSI &#xAC1C;&#xBC1C; &#xB300;&#xB1CC; &#xD53C; &#xC9C8;&#xC744; &#xAC00;&#xC9C4; phosphacan, colocalizes&#xC758; &#xD68C;&#xC0C9; &#xBB38;&#xC81C;&#xC5D0; &#xD06C;&#xAC8C; &#xD45C;&#xC2DC; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC2E0;&#xACBD; &#xD53C; &#xC9C8;&#xC758; &#xBAA8;&#xB4E0; &#xCE35;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC775;&#xC2A4;&#xD504;&#xB808;&#xC2A4; PSI. &#xC18C; &#xB1CC;&#xC5D0; &#xB2E4;&#xB978; &#xD55C;&#xD3B8;&#xC73C;&#xB85C;, PSI&#xC758; &#xC2DD;&#xC774; &#xC5C6;&#xB294; &#xAC10;&#xC9C0; &#xB418;&#xC5C8;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;, &#xBE44;&#xB85D; &#xB2E4;&#xB978; phosphacan/RPTP-&#xBCA0;&#xD0C0; isoforms &#xBCF4;&#xC5EC; &#xAC15;&#xD55C; PSI &#xC2DD; &#xC5EC;&#xAE30;. &#xC804;&#xBC18;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C;, &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xC5F0;&#xAD6C; &#xC81C;&#xC548; PSI &#xD53C; &#xC9C8; &#xCC28;&#xBCC4;&#xD654; &#xB41C; &#xB274;&#xB7F0; &#xC0B0; &#xD6C4; &#xAE30;&#xAC04; &#xD45C;&#xD604; &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xACB0; &#xC11D; &#xAD6C;&#xC870; &#xD655;&#xC0B0; &#xBC0F; &#xB9C8;&#xC774;&#xADF8;&#xB808;&#xC774;&#xC158; &#xBC1C;&#xC0DD; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xAD00;&#xCC30;&#xC758; &#xC911;&#xC694;&#xC131;&#xC5D0; &#xB300;&#xD574;&#xC11C;&#xB294; phosphacan/RPTP-&#xBCA0;&#xD0C0; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC758; &#xC774;&#xC804; &#xBAA8;&#xB378;&#xC758; &#xB9E5;&#xB77D;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC124;&#xBA85;.

&#xB300;&#xB1CC; &#xD53C; &#xC9C8;&#xC758; &#xB274;&#xB7F0; PSI, phosphacan/Rptpbeta&#xC758; &#xC18C;&#xC124; isoform &#xC775;&#xC2A4;&#xD504;&#xB808;&#xC2A4;.

Phosphacan es un proteoglicano de sulfato de condroitina que representa la parte extracelular secretada de un receptor transmembrana tirosina fosfatasa de prote&#xED;nas (RPTP-beta). Estas isoformas han sido implicados en los eventos de c&#xE9;lula-matriz extracelular de se&#xF1;alizaci&#xF3;n asociados con la mielinizaci&#xF3;n, el crecimiento axonal, y la migraci&#xF3;n celular en el desarrollo del sistema nervioso central y puede desempe&#xF1;ar un papel fundamental en el contexto de las patolog&#xED;as cerebrales. Recientemente hemos informado de la identificaci&#xF3;n de una nueva isoforma de phosphacan, la isoforma corta phosphacan (PSI), la expresi&#xF3;n de que los picos en la segunda semana de vida. PSI interact&#xFA;a con la L1 receptores neuronales y F3/contactin y puede promover el crecimiento de las neuritas de las neuronas corticales. En este estudio, hemos evaluado, mediante hibridaci&#xF3;n in situ, el perfil de expresi&#xF3;n de la ISP en el cerebro de la rata en el d&#xED;a postnatal 7. PSI est&#xE1; en gran medida se expresa en la materia gris de la corteza cerebral en desarrollo en el que colocalizes con phosphacan, mientras que la expresi&#xF3;n de las formas de los receptores RPTPbeta se limita a la zona ventricular en que PSI no ha sido observado. Las neuronas de todas las capas de la corteza PSI expresa. En el cerebelo, por el contrario, ninguna expresi&#xF3;n de PSI ha sido detectado, aunque el otro phosphacan / isoformas RPTP-beta muestran expresi&#xF3;n PSI fuerte aqu&#xED;. En general, nuestro estudio sugiere que el PSI se expresa durante el per&#xED;odo postnatal en neuronas diferenciadas de la corteza, pero est&#xE1; ausente de estructuras en las que se producen la proliferaci&#xF3;n y migraci&#xF3;n. El significado de estas observaciones se discuten en el contexto de los modelos anteriores de phosphacan / funciones RPTP-beta.

Cortical neuronas expresan PSI, una nueva isoforma de Phosphacan / RPTPbeta

The chondroitin sulfate proteoglycan DSD-1-PG/phosphacan represents one of four splice variants of receptor-protein-tyrosine-phosphatase-beta/zeta (RPTPbeta/zeta). This receptor is expressed by glial cells and occurs in two isoforms, RPTPbeta(long) and RPTPbeta(short). The secreted forms phosphacan and phosphacan short isoform (PSI) bind to extracellular matrix and adhesion molecules and might mediate astroglial effects on neuronal differentiation. Phosphacan and RPTPbeta(long) both carry the DSD-1 epitope, a glycosaminoglycan modification that is involved in stimulating neurite outgrowth of embryonic rat mesencephalic and hippocampal neurons in a polycationic environment. Additionally, phosphacan inhibits neurite outgrowth of embryonic DRG neurons in the presence of laminin. In the light of these functional properties we examined the expression patterns of the DSD-1 epitope and phosphacan isoforms in the developing mouse visual system. During retinal development the DSD-1 epitope appears around embryonic day (E)13, peaks around postnatal day (P)6, and is downregulated from P9 to adolescence. By comparison, the phosphacan core protein is first detectable at E12, reaches maximal levels around P14, and persists, although at lower levels, to adulthood. The DSD-1 epitope is restricted to the nerve fiber and the inner plexiform layers. In contrast, the phosphacan core protein immunoreactivity extends from the nerve fiber layer to the outer plexiform layer. The level of expression of the phosphacan/RPTPbeta gene was investigated by reverse-transcriptase polymerase chain reaction. These experiments suggest that there is a shift in the expression patterns of the different phosphacan/RPTPbeta isoforms during late embryonic and postnatal development. In situ hybridization experiments support the conclusion that at least one of the phosphacan/RPTPbeta isoforms in the retina is expressed by neurons.

Differential expression of phosphacan/RPTPbeta isoforms in the developing mouse visual system.

&#x6E20;&#x52A1;&#x7F72;-1-PG/phosphacan &#x786B;&#x9178;&#x8F6F;&#x9AA8;&#x7D20;&#x86CB;&#x767D;&#x805A;&#x7CD6;&#x8868;&#x793A;&#x53D7;&#x4F53;&#x7684;&#x86CB;&#x767D;-&#x916A;&#x6C28;&#x9178;-&#x78F7;&#x9178;&#x9176;-beta/zeta &#xFF08;RPTPbeta/zeta) &#x7684;&#x56DB;&#x4E2A;&#x63A5;&#x5934;&#x53D8;&#x79CD;&#x4E4B;&#x4E00;&#x3002;&#x8FD9;&#x79CD;&#x53D7;&#x4F53;&#x8868;&#x793A;&#xFF0C;&#x795E;&#x7ECF;&#x80F6;&#x8D28;&#x7EC6;&#x80DE;&#xFF0C;&#x53D1;&#x751F;&#x5728;&#x4E24;&#x4E2A;&#x4E9A;&#x578B;&#xFF0C;RPTPbeta(long) &#x548C; RPTPbeta(short)&#x3002;&#x5206;&#x6CCC;&#x7684;&#x5F62;&#x5F0F; phosphacan &#x548C; phosphacan &#x77ED;&#x5F02;&#x6784;&#x4F53; &#xFF08;PSI&#xFF09; &#x7ED1;&#x5B9A;&#x5230;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5916;&#x57FA;&#x8D28;&#x548C;&#x7C98;&#x9644;&#x5206;&#x5B50;&#x548C;&#x53EF;&#x80FD;&#x8C03;&#x89E3;&#x661F;&#x5F62;&#x80F6;&#x8D28;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5BF9;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x5206;&#x5316;&#x7684;&#x5F71;&#x54CD;&#x3002;Phosphacan &#x548C; RPTPbeta(long) &#x8FDB;&#x884C;&#x6E20;&#x52A1;&#x7F72; 1 &#x6297;&#x539F;&#x8868;&#x4F4D;&#xFF0C;&#x53C2;&#x4E0E;&#x523A;&#x6FC0;&#x9633;&#x79BB;&#x5B50;&#x73AF;&#x5883;&#x4E2D;&#x5927;&#x9F20;&#x80DA;&#x80CE;&#x4E2D;&#x8111;&#x795E;&#x7ECF;&#x548C;&#x6D77;&#x9A6C;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x7A81;&#x8D77;&#x7684;&#x7CD6;&#x80FA;&#x805A;&#x7CD6;&#x6539;&#x6027;&#x3002;&#x6B64;&#x5916;&#xFF0C;phosphacan &#x6291;&#x5236;&#x5C42;&#x7C98;&#x8FDE;&#x86CB;&#x767D;&#x5B58;&#x5728;&#x7684;&#x80DA;&#x80CE;&#x80CC;&#x6839;&#x8282;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x7684;&#x7A81;&#x8D77;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x6839;&#x636E;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x529F;&#x80FD;&#x7279;&#x6027;&#x5BA1;&#x67E5;&#x53D1;&#x5C55;&#x4E2D;&#x56FD;&#x5BB6;&#x7684;&#x9F20;&#x6807;&#x89C6;&#x89C9;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x6E20;&#x52A1;&#x7F72; 1 &#x6297;&#x539F;&#x8868;&#x4F4D;&#x548C; phosphacan &#x4E9A;&#x578B;&#x7684;&#x8868;&#x8FBE;&#x6A21;&#x5F0F;&#x3002;&#x89C6;&#x7F51;&#x819C;&#x53D1;&#x80B2;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x6E20;&#x52A1;&#x7F72; 1 &#x6297;&#x539F;&#x8868;&#x4F4D;&#x80DA;&#x80CE;&#x5929; (E) 13&#x3001; &#x4EA7;&#x540E;&#x5929; (P) 6&#xFF0C;&#x5468;&#x56F4;&#x7684;&#x5C71;&#x5CF0;&#x5468;&#x56F4;&#x4F1A;&#x51FA;&#x73B0;&#xFF0C;&#x5230;&#x9752;&#x6625;&#x671F;&#x4ECE; P9 &#x7F16;&#x7801;&#x3002;&#x76F8;&#x6BD4;&#x4E4B;&#x4E0B;&#xFF0C;phosphacan &#x6838;&#x5FC3;&#x86CB;&#x767D;&#x662F;&#x9996;&#x6B21;&#x63A2;&#x6D4B;&#x5728; E12&#x3001; &#x8FBE;&#x5230; P14&#xFF0C;&#x5468;&#x56F4;&#x7684;&#x6700;&#x5927;&#x7EA7;&#x522B;&#x548C;&#x4ECD;&#x7136;&#x5B58;&#x5728;&#xFF0C;&#x867D;&#x7136;&#x5728;&#x8F83;&#x4F4E;&#x7EA7;&#x522B;&#xFF0C;&#x5230;&#x6210;&#x5E74;&#x3002;&#x6E20;&#x52A1;&#x7F72; 1 &#x6297;&#x539F;&#x8868;&#x4F4D;&#x4EC5;&#x9650;&#x4E8E;&#x795E;&#x7ECF;&#x7EA4;&#x7EF4;&#x548C;&#x8513;&#x72B6;&#x5185;&#x5C42;&#x3002;&#x76F8;&#x6BD4;&#x4E4B;&#x4E0B;&#xFF0C;phosphacan &#x6838;&#x5FC3;&#x86CB;&#x767D;&#x514D;&#x75AB;&#x53CD;&#x5E94;&#x6027;&#x795E;&#x7ECF;&#x7EA4;&#x7EF4;&#x5C42;&#x4ECE;&#x5EF6;&#x4F38;&#x5230;&#x5916;&#x5C42;&#x3002;Phosphacan/RPTPbeta &#x57FA;&#x56E0;&#x8868;&#x8FBE;&#x6C34;&#x5E73;&#x7684;&#x9006;&#x8F6C;&#x5F55;-&#x805A;&#x5408;&#x9176;&#x94FE;&#x53CD;&#x5E94;&#x8FDB;&#x884C;&#x4E86;&#x8C03;&#x67E5;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x5B9E;&#x9A8C;&#x8868;&#x660E;&#x8F6C;&#x53D8;&#x4E2D;&#x6709;&#x4E0D;&#x540C;&#x7684; phosphacan/RPTPbeta &#x4E9A;&#x578B;&#x7684;&#x8868;&#x8FBE;&#x6A21;&#x5F0F;&#x5728;&#x540E;&#x671F;&#x80DA;&#x80CE;&#x548C;&#x4EA7;&#x540E;&#x53D1;&#x80B2;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x3002;&#x539F;&#x4F4D;&#x6742;&#x4EA4;&#x5B9E;&#x9A8C;&#x652F;&#x6301;&#x8868;&#x793A;&#x81F3;&#x5C11;&#x4E00;&#x4E2A;&#x5728;&#x89C6;&#x7F51;&#x819C;&#x4E2D;&#x7684; phosphacan/RPTPbeta &#x5F02;&#x6784;&#x4F53;&#x662F;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x7684;&#x7ED3;&#x8BBA;&#x3002;

Phosphacan/RPTPbeta &#x4E9A;&#x578B;&#x5728;&#x53D1;&#x5C55;&#x4E2D;&#x56FD;&#x5BB6;&#x7684;&#x9F20;&#x6807;&#x89C6;&#x89C9;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x7684;&#x5DEE;&#x5F02;&#x8868;&#x8FBE;&#x3002;

Le sulfate de chondro&#xEF;tine prot&#xE9;oglycane DSD-1-PG/phosphacan repr&#xE9;sente l&#x26;#39;un des quatre variants d&#x26;#39;&#xE9;pissage de receptor-protein-tyrosine-phosphatase-beta/zeta (RPTPbeta / zeta). Ce r&#xE9;cepteur est exprim&#xE9; par les cellules gliales et se d&#xE9;roule en deux isoformes, RPTPbeta (long) et RPTPbeta (courte). Le s&#xE9;cr&#xE9;t&#xE9;e formes phosphacan et phosphacan court isoforme (PSI) se lient &#xE0; la matrice extracellulaire et des mol&#xE9;cules d&#x26;#39;adh&#xE9;sion et pourrait m&#xE9;dier les effets astrogliales sur la diff&#xE9;renciation neuronale. Phosphacan et RPTPbeta (long) &#xE0; la fois porter le DSD-1 &#xE9;pitope, une modification glycosaminoglycane qui est impliqu&#xE9; dans la stimulation de la croissance des neurites de neurones embryonnaires de rat m&#xE9;senc&#xE9;phaliques et de l&#x26;#39;hippocampe dans un environnement polycationique. En outre, la croissance des neurites phosphacan inhibe les neurones DRG embryonnaires en pr&#xE9;sence de la laminine. &#xC0; la lumi&#xE8;re de ces propri&#xE9;t&#xE9;s fonctionnelles, nous avons examin&#xE9; les profils d&#x26;#39;expression de la DSD-1 &#xE9;pitope et isoformes phosphacan dans le syst&#xE8;me de souris en d&#xE9;veloppement visuel. Au cours de d&#xE9;veloppement de la r&#xE9;tine, le DSD-1 &#xE9;pitope appara&#xEE;t autour de jour embryonnaire (E) 13, des pics autour de jour postnatal (P) 6, et est r&#xE9;gul&#xE9;e &#xE0; la baisse de P9 &#xE0; l&#x26;#39;adolescence. Par comparaison, la prot&#xE9;ine de capside phosphacan est d&#x26;#39;abord d&#xE9;tectable &#xE0; E12, atteint des niveaux maximaux autour P14, et persiste, m&#xEA;me si &#xE0; des niveaux inf&#xE9;rieurs, &#xE0; l&#x26;#39;&#xE2;ge adulte. Le DSD-1 &#xE9;pitope est limit&#xE9;e &#xE0; la fibre nerveuse et les couches plexiformes internes. En revanche, l&#x26;#39;immunor&#xE9;activit&#xE9; phosphacan prot&#xE9;ine de capside s&#x26;#39;&#xE9;tend de la couche de fibres nerveuses de la couche plexiforme externe. Le niveau d&#x26;#39;expression du g&#xE8;ne phosphacan / RPTPbeta a &#xE9;t&#xE9; &#xE9;tudi&#xE9;e par la transcriptase inverse r&#xE9;action en cha&#xEE;ne par polym&#xE9;rase. Ces exp&#xE9;riences sugg&#xE8;rent qu&#x26;#39;il ya un changement dans les profils d&#x26;#39;expression des diff&#xE9;rents phosphacan / isoformes RPTPbeta au cours du d&#xE9;veloppement embryonnaire et postnatal fin. L&#x26;#39;hybridation in situ des exp&#xE9;riences appuient la conclusion qu&#x26;#39;au moins une des isoformes phosphacan / RPTPbeta de la r&#xE9;tine est exprim&#xE9; par les neurones.

Expression diff&#xE9;rentielle des Phosphacan / RPTPbeta isoformes dans le syst&#xE8;me visuel de souris en d&#xE9;veloppement

Das Chondroitinsulfat Proteoglycans DSD-1-PG/Phosphacan stellt eine der vier Splice-Varianten der Rezeptor-Protein-Tyrosin-Phosphatase-Beta/Zeta (RPTPbeta/Zeta). Dieser Rezeptor wird durch Gliazellen ausgedr&uuml;ckt und tritt in zwei Isoformen, RPTPbeta(long) und RPTPbeta(short). Die sezernierte Formen Phosphacan und Phosphacan kurze Isoform (PSI) an der extrazellul&auml;ren Matrix und Adh&auml;sion Molek&uuml;le binden und Astroglial Effekte auf neuronale Differenzierung vermitteln k&ouml;nnte. Phosphacan und RPTPbeta(long) beide tragen die DSD-1-Epitop, eine Glykosaminoglykane-Modifikation, die in anregenden Neurit Auswuchs der embryonalen Ratte Aquaeductus und hippocampal Neuronen in einer Polycationic Umgebung beteiligt ist. Dar&uuml;ber hinaus hemmt Phosphacan Neurit Auswuchs der embryonalen DRG-Neuronen in Anwesenheit von Laminin. Im Lichte dieser funktionalen Eigenschaften haben wir die Muster von der DSD-1-Epitop und Phosphacan-Isoformen in Entwicklungsl&auml;ndern Maus visual System gepr&uuml;ft. W&auml;hrend der retinalen Entwicklung der DSD-1-Epitop erscheint um embryonale Tag (E) 13, Gipfel rund um postnatale Tag (P) 6, und Downregulated von P9 zu Adoleszenz. Im Vergleich dazu das Phosphacan Kern-Protein ist die erste nachweisbare bei E12 erreicht maximale Ebenen um P14 und fortbesteht, obwohl auf den unteren Ebenen, bis ins Erwachsenenalter. Die DSD-1-Epitop beschr&auml;nkt sich auf die Nerven-Faser und die inneren plexiforme Schichten. Im Gegensatz dazu erstreckt sich die Phosphacan Kern-Protein-Immunoreactivity aus der Nerven-Faser-Schicht auf die &auml;u&szlig;ere plexiforme Schicht. Die H&ouml;he der Expression des Gens Phosphacan/RPTPbeta wurde durch Reverse-Transkriptase-Polymerase-Kettenreaktion untersucht. Diese Experimente deuten darauf hin, dass es eine Verschiebung im Ausdrucksmuster der verschiedenen Phosphacan/RPTPbeta-Isoformen w&auml;hrend der sp&auml;ten embryonalen und postnatale Entwicklung gibt. In situ Hybridisierung Experimente unterst&uuml;tzen die Schlussfolgerung, dass mindestens eines der Phosphacan/RPTPbeta-Isoformen in der Netzhaut durch Neuronen ausgedr&uuml;ckt wird.

Differentielle Ausdruck Phosphacan/RPTPbeta Isoformen in Entwicklungsl&auml;ndern Maus visual System.

Il proteoglicano Condroitin solfato DSD-1-PG/phosphacan rappresenta una delle quattro varianti di splicing del recettore-proteina-tirosin-fosfatasi-beta/zeta (RPTPbeta/zeta). Questo recettore &egrave; espresso dalle cellule gliali e si verifica in due isoforme, RPTPbeta(long) e RPTPbeta(short). Le forme secrete phosphacan phosphacan breve isoform (PSI) legano alle molecole di adesione e matrice extracellulare e potrebbe mediare astroglial effetti sulla differenziazione neuronale. Phosphacan e RPTPbeta(long) entrambi portano l&#39;epitopo DSD-1, una modifica di glicosaminoglicano che &egrave; coinvolta nella stimolante escrescenza dei neuriti dei neuroni mesencefaliche e dell&#39;ippocampo di ratto embrionale in un ambiente polycationic. Inoltre, phosphacan inibisce escrescenza dei neuriti dei neuroni DRG embrionali in presenza di laminina. Alla luce di queste propriet&agrave; funzionali abbiamo esaminato il pattern di espressione delle isoforme di epitopo e phosphacan DSD-1 di sviluppo del sistema visivo del mouse. Durante lo sviluppo della retina l&#39;epitopo DSD-1 appare intorno giorno embrionale (E) 13, vette intorno giorno postnatale (P) 6 ed &egrave; downregolata da P9 all&#39;adolescenza. In confronto, la proteina core phosphacan prima &egrave; rilevabile a E12, raggiunge livelli massimali intorno P14 e persiste, anche se a livelli inferiori, fino all&#39;et&agrave; adulta. L&#39;epitopo DSD-1 &egrave; limitata per la fibra del nervo e gli strati interni plessiforme. Al contrario, l&#39;immunoreattivit&agrave; phosphacan core proteico si estende dallo strato della fibra del nervo lo strato plessiforme esterno. Il livello di espressione del gene della phosphacan/RPTPbeta &egrave; stato studiato da reazione a catena della polimerasi trascrittasi inversa. Questi esperimenti suggeriscono che c&#39;&egrave; un cambiamento nei modelli di espressione delle diverse isoforme di phosphacan/RPTPbeta durante lo sviluppo embrionale e postnatale tardo. Esperimenti di ibridazione in situ supportano la conclusione che almeno una delle isoforme di phosphacan/RPTPbeta nella retina &egrave; espresso dai neuroni.

Espressione differenziale delle isoforme di phosphacan/RPTPbeta in sviluppo del sistema visivo del mouse.

&#x30B3;&#x30F3;&#x30C9;&#x30ED;&#x30A4;&#x30C1;&#x30F3;&#x786B;&#x9178;&#x30D7;&#x30ED;&#x30C6;&#x30AA;&#x30B0;&#x30EA;&#x30AB;&#x30F3;DSD-1-PG/phosphacan&#x306F;receptor-protein-tyrosine-phosphatase-beta/zeta&#xFF08;RPTPbeta /&#x30BC;&#x30FC;&#x30BF;&#xFF09;&#x306E;4&#x3064;&#x306E;&#x30B9;&#x30D7;&#x30E9;&#x30A4;&#x30B9;&#x30D0;&#x30EA;&#x30A2;&#x30F3;&#x30C8;&#x306E;&#x3044;&#x305A;&#x308C;&#x304B;&#x3092;&#x8868;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x304C;&#x30B0;&#x30EA;&#x30A2;&#x7D30;&#x80DE;&#x3067;&#x767A;&#x73FE;&#x3055;&#x305B;&#x3001;&#x4E8C;&#x3064;&#x306E;&#x30A2;&#x30A4;&#x30BD;&#x30D5;&#x30A9;&#x30FC;&#x30E0;&#x3001;RPTPbeta&#xFF08;lon&#x200B;&#x200B;g&#xFF09;&#x3068;RPTPbeta&#xFF08;&#x30B7;&#x30E7;&#x30FC;&#x30C8;&#xFF09;&#x304C;&#x767A;&#x751F;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x5206;&#x6CCC;&#x578B;&#x30DB;&#x30B9;&#x30D5;&#x30A1;&#x30AB;&#x30F3;&#x3068;&#x7D30;&#x80DE;&#x5916;&#x30DE;&#x30C8;&#x30EA;&#x30C3;&#x30AF;&#x30B9;&#x3068;&#x63A5;&#x7740;&#x5206;&#x5B50;&#x306B;&#x30DB;&#x30B9;&#x30D5;&#x30A1;&#x30AB;&#x30F3;&#x77ED;&#x3044;&#x30A2;&#x30A4;&#x30BD;&#x30D5;&#x30A9;&#x30FC;&#x30E0;&#xFF08;PSI&#xFF09;&#x306B;&#x30D0;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C9;&#x3057;&#x3001;&#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30ED;&#x30F3;&#x306E;&#x5206;&#x5316;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x30A2;&#x30B9;&#x30C8;&#x30ED;&#x30B0;&#x30EA;&#x30A2;&#x306E;&#x52B9;&#x679C;&#x3092;&#x4EF2;&#x4ECB;&#x3059;&#x308B;&#x304B;&#x3082;&#x3057;&#x308C;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x3002;&#x30DB;&#x30B9;&#x30D5;&#x30A1;&#x30AB;&#x30F3;&#x3068;RPTPbeta&#xFF08;lon&#x200B;&#x200B;g&#xFF09;&#x306F;DSD-1&#x30A8;&#x30D4;&#x30C8;&#x30FC;&#x30D7;&#x3001;&#x30DD;&#x30EA;&#x30AB;&#x30C1;&#x30AA;&#x30F3;&#x6027;&#x74B0;&#x5883;&#x3067;&#x306E;&#x30E9;&#x30C3;&#x30C8;&#x80CE;&#x5150;&#x8133;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x6D77;&#x99AC;&#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30ED;&#x30F3;&#x306E;&#x795E;&#x7D4C;&#x7A81;&#x8D77;&#x4F38;&#x9577;&#x3092;&#x4FC3;&#x9032;&#x306B;&#x95A2;&#x4E0E;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x30B0;&#x30EA;&#x30B3;&#x30B5;&#x30DF;&#x30CE;&#x30B0;&#x30EA;&#x30AB;&#x30F3;&#x306E;&#x5909;&#x66F4;&#x3092;&#x904B;&#x3076;&#x306E;&#x4E21;&#x65B9;&#x3002;&#x3055;&#x3089;&#x306B;&#x3001;&#x30DB;&#x30B9;&#x30D5;&#x30A1;&#x30AB;&#x30F3;&#x306F;&#x3001;&#x30E9;&#x30DF;&#x30CB;&#x30F3;&#x306E;&#x5B58;&#x5728;&#x4E0B;&#x3067;&#x80DA;&#x6027;DRG&#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30ED;&#x30F3;&#x306E;&#x795E;&#x7D4C;&#x7A81;&#x8D77;&#x4F38;&#x9577;&#x3092;&#x963B;&#x5BB3;&#x3059;&#x308B;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x6A5F;&#x80FD;&#x7279;&#x6027;&#x306E;&#x5149;&#x306E;&#x4E2D;&#x3067;&#x6211;&#x3005;&#x304C;&#x958B;&#x767A;&#x3001;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x306E;&#x8996;&#x899A;&#x30B7;&#x30B9;&#x30C6;&#x30E0;&#x306E;DSD-1&#x30A8;&#x30D4;&#x30C8;&#x30FC;&#x30D7;&#x3068;&#x30DB;&#x30B9;&#x30D5;&#x30A1;&#x30AB;&#x30F3;&#x30A2;&#x30A4;&#x30BD;&#x30D5;&#x30A9;&#x30FC;&#x30E0;&#x306E;&#x767A;&#x73FE;&#x30D1;&#x30BF;&#x30FC;&#x30F3;&#x3092;&#x8ABF;&#x3079;&#x305F;&#x3002;&#x7DB2;&#x819C;&#x306E;&#x958B;&#x767A;&#x6642;&#x306B;DSD-1&#x30A8;&#x30D4;&#x30C8;&#x30FC;&#x30D7;&#x306F;&#x3001;&#x80DA;&#x65E5;&#xFF08;E&#xFF09;13&#x3001;&#x751F;&#x5F8C;&#x65E5;&#x524D;&#x5F8C;&#x306E;&#x30D4;&#x30FC;&#x30AF;&#xFF08;P&#xFF09;6&#x306E;&#x5468;&#x56F2;&#x306B;&#x8868;&#x793A;&#x3055;&#x308C;&#x3001;P9&#x304B;&#x3089;&#x601D;&#x6625;&#x671F;&#x306B;&#x30C0;&#x30A6;&#x30F3;&#x30EC;&#x30AE;&#x30E5;&#x30EC;&#x30FC;&#x30C8;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6BD4;&#x8F03;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x3088;&#x308A;&#x3001;&#x30DB;&#x30B9;&#x30D5;&#x30A1;&#x30AB;&#x30F3;&#x306E;&#x30B3;&#x30A2;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x306F;E12&#x3067;&#x6700;&#x521D;&#x306B;&#x691C;&#x51FA;&#x53EF;&#x80FD;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3001;&#x6210;&#x4EBA;&#x306B;&#x3001;&#x4E0B;&#x4F4D;&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x304C;&#x3001;P14&#x306E;&#x5468;&#x56F2;&#x306B;&#x6700;&#x5927;&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x306B;&#x5230;&#x9054;&#x3057;&#x3001;&#x6301;&#x7D9A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002; DSD-1&#x30A8;&#x30D4;&#x30C8;&#x30FC;&#x30D7;&#x306F;&#x3001;&#x795E;&#x7D4C;&#x7DDA;&#x7DAD;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x5185;&#x7DB2;&#x72B6;&#x5C64;&#x306B;&#x9650;&#x5B9A;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x5BFE;&#x7167;&#x7684;&#x306B;&#x3001;&#x30DB;&#x30B9;&#x30D5;&#x30A1;&#x30AB;&#x30F3;&#x306E;&#x30B3;&#x30A2;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x306E;&#x514D;&#x75AB;&#x53CD;&#x5FDC;&#x6027;&#x306F;&#x3001;&#x795E;&#x7D4C;&#x7DDA;&#x7DAD;&#x5C64;&#x304B;&#x3089;&#x5916;&#x7DB2;&#x72B6;&#x5C64;&#x306B;&#x3082;&#x53CA;&#x3076;&#x3002;&#x30DB;&#x30B9;&#x30D5;&#x30A1;&#x30AB;&#x30F3;/ RPTPbeta&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x767A;&#x73FE;&#x306E;&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x306F;&#x3001;&#x9006;&#x8EE2;&#x5199;&#x9175;&#x7D20;&#x30DD;&#x30EA;&#x30E1;&#x30E9;&#x30FC;&#x30BC;&#x9023;&#x9396;&#x53CD;&#x5FDC;&#x306B;&#x3088;&#x308A;&#x691C;&#x8A0E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x5B9F;&#x9A13;&#x306F;&#x3001;&#x80DA;&#x306E;&#x5F8C;&#x671F;&#x3068;&#x7523;&#x5F8C;&#x306E;&#x958B;&#x767A;&#x6642;&#x306B;&#x7570;&#x306A;&#x308B;&#x30DB;&#x30B9;&#x30D5;&#x30A1;&#x30AB;&#x30F3;/ RPTPbeta&#x30A2;&#x30A4;&#x30BD;&#x30D5;&#x30A9;&#x30FC;&#x30E0;&#x306E;&#x767A;&#x73FE;&#x30D1;&#x30BF;&#x30FC;&#x30F3;&#x306E;&#x5909;&#x5316;&#x304C;&#x3042;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x5506;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002; in situ&#x30CF;&#x30A4;&#x30D6;&#x30EA;&#x30C0;&#x30A4;&#x30BC;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x5B9F;&#x9A13;&#x3067;&#x7DB2;&#x819C;&#x306E;&#x30DB;&#x30B9;&#x30D5;&#x30A1;&#x30AB;&#x30F3;/ RPTPbeta&#x30A2;&#x30A4;&#x30BD;&#x30D5;&#x30A9;&#x30FC;&#x30E0;&#x306E;&#x5C11;&#x306A;&#x304F;&#x3068;&#x3082;&#x4E00;&#x3064;&#x306F;&#x795E;&#x7D4C;&#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x767A;&#x73FE;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x7D50;&#x8AD6;&#x3092;&#x30B5;&#x30DD;&#x30FC;&#x30C8;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x958B;&#x767A;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x8996;&#x899A;&#x30B7;&#x30B9;&#x30C6;&#x30E0;&#x306E;&#x30DB;&#x30B9;&#x30D5;&#x30A1;&#x30AB;&#x30F3;/ RPTPbeta&#x30A2;&#x30A4;&#x30BD;&#x30D5;&#x30A9;&#x30FC;&#x30E0;&#x306E;&#x5DEE;&#x6B21;&#x7684;&#x767A;&#x73FE;

&#xCF58; proteoglycan DSD-1-PG/phosphacan &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4;-&#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;-&#xD2F0;&#xB85C;&#xC2E0;-&#xC778;&#xC0B0; &#xAC00;&#xC218;&#xBD84;&#xD574; &#xD6A8;&#xC18C;-&#xBCA0;&#xD0C0;/&#xC81C;&#xD0C0; (RPTPbeta/&#xC81C;&#xD0C0;)&#xC758; 4 &#xAC1C; &#xBD99;&#xC5EC; &#xC11C; &#xBCC0;&#xC885; &#xC911; &#xD558;&#xB098;&#xB97C; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0C5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774; &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4; glial &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xD45C;&#xD604; &#xB418; &#xACE0; &#xB450; isoforms&#xB97C; RPTPbeta(long) &#xBC0F; Rptpbeta(short)&#xC5D0;&#xC11C; &#xBC1C;&#xC0DD; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xBE44; &#xC591;&#xC2DD; phosphacan &#xBC0F; phosphacan &#xC9E7;&#xC740; isoform (PSI) &#xC138;&#xD3EC; &#xC678; &#xB9E4;&#xD2B8;&#xB9AD;&#xC2A4;&#xC640; &#xC811;&#xCC29; &#xBD84;&#xC790;&#xC5D0; &#xBC14;&#xC778;&#xB529;&#xD558;&#xACE0; &#xC2E0;&#xACBD; &#xBD84;&#xD654;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; astroglial &#xD6A8;&#xACFC; &#xC911;&#xC7AC;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. Phosphacan &#xBC0F; RPTPbeta(long) polycationic &#xD658;&#xACBD;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBC30;&#xC544; &#xC950; mesencephalic &#xADF8;&#xB9AC;&#xACE0; hippocampal &#xB274;&#xB7F0;&#xC758; &#xC790;&#xADF9; neurite &#xD30C;&#xC0DD;&#xBB3C;&#xC5D0; &#xD3EC;&#xD568; &#xB418;&#xB294; glycosaminoglycan &#xC218;&#xC815; DSD 1 epitope&#xB97C; &#xC218;&#xD589; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB610;&#xD55C;, phosphacan laminin &#xC874;&#xC7AC; &#xBC30;&#xC544; DRG &#xB274;&#xB7F0;&#xC758; neurite &#xD30C;&#xC0DD;&#xBB3C;&#xC744; &#xC5B5;&#xC81C; &#xD55C;&#xB2E4;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC801; &#xC18D;&#xC131;&#xC5D0; &#xBE44;&#xCD94;&#xC5B4; &#xC6B0;&#xB9AC; &#xAC1C;&#xBC1C; &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4; &#xBE44;&#xC8FC;&#xC5BC; &#xC2DC;&#xC2A4;&#xD15C;&#xC5D0; DSD 1 epitope &#xBC0F; phosphacan isoforms &#xC2DD; &#xD328;&#xD134;&#xC744; &#xAC80;&#xC0AC;&#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB9DD;&#xB9C9; &#xAC1C;&#xBC1C; &#xD558;&#xB294; &#xB3D9;&#xC548; DSD 1 epitope &#xBC30;&#xC544; &#xD558;&#xB8E8; (E) 13, &#xCD9C;&#xC0DD; &#xD6C4; &#xD558;&#xB8E8; (P) 6, &#xBD09;&#xC6B0;&#xB9AC; &#xD45C;&#xC2DC; &#xB418;&#xBA70; p 9&#xC5D0;&#xC11C; &#xCCAD;&#xC18C;&#xB144; &#xAE30;&#xC5D0; downregulated. &#xBE44;&#xAD50; &#xD568;&#xC73C;&#xB85C;&#xC368;, phosphacan &#xCF54;&#xC5B4; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xBA3C;&#xC800; e12&#xC5D0;&#xC11C; &#xAC10;&#xC9C0; P14, &#xC8FC;&#xC704; &#xCD5C;&#xB300; &#xC218;&#xC900;&#xC5D0; &#xB3C4;&#xB2EC; &#xC774;&#xBA70;, &#xC131;&#xC778; &#xAE30;&#xC758; &#xB0AE;&#xC740; &#xC218;&#xC900;&#xC5D0; &#xC788;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xACC4;&#xC18D; &#xB418;. DSD 1 epitope &#xC2E0;&#xACBD; &#xC12C;&#xC720; &#xBC0F; &#xB0B4;&#xBD80; plexiform &#xACC4;&#xCE35;&#xC73C;&#xB85C; &#xC81C;&#xD55C; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB300;&#xC870;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C;, phosphacan &#xD575;&#xC2EC; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; immunoreactivity &#xC2E0;&#xACBD; &#xC12C;&#xC720; &#xCE35;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC678;&#xBD80; plexiform &#xB808;&#xC774;&#xC5B4;&#xB97C; &#xD655;&#xC7A5;&#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. Phosphacan/RPTPbeta &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xBC1C;&#xD604;&#xC758; &#xC218;&#xC900;-&#xC5ED;&#xC804;&#xC0AC; &#xC911; &#xD569; &#xD6A8;&#xC18C; &#xC5F0;&#xC1C4; &#xBC18;&#xC751;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC870;&#xC0AC; &#xB418;&#xC5C8;&#xB2E4;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xC2E4;&#xD5D8; &#xC81C;&#xC548;&#xB294; &#xBCC0;&#xD654;&#xAC00; &#xB2E4;&#xB978; phosphacan/RPTPbeta isoforms &#xC2DD; &#xD328;&#xD134;&#xC5D0; &#xB2A6;&#xC740; &#xBC30;&#xC544; &#xBC0F; &#xC0B0; &#xD6C4; &#xAC1C;&#xBC1C; &#xD558;&#xB294; &#xB3D9;&#xC548;. &#xC81C;&#xC790;&#xB9AC; &#xAD50; &#xC7A1; &#xC2E4;&#xD5D8; &#xC9C0;&#xC6D0; &#xACB0;&#xB860; &#xC801;&#xC5B4;&#xB3C4; &#xD558;&#xB098;&#xB294; &#xB9DD;&#xB9C9;&#xC5D0;&#xC11C; phosphacan/RPTPbeta isoforms &#xB274;&#xB7F0;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xD45C;&#xD604; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Phosphacan/RPTPbeta isoforms &#xAC1C;&#xBC1C; &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4; &#xBE44;&#xC8FC;&#xC5BC; &#xC2DC;&#xC2A4;&#xD15C;&#xC5D0;&#xC11C;&#xC758; &#xCC28;&#xB3D9; &#xC2DD;.

El sulfato de condroitina proteoglicanos DSD-1-PG/phosphacan representa una de las cuatro variantes de empalme de receptor-protein-tyrosine-phosphatase-beta/zeta (RPTPbeta / zeta). Este receptor se expresa en las c&#xE9;lulas gliales y se presenta en dos isoformas, RPTPbeta (largo) y RPTPbeta (corto). El secretada formas phosphacan y phosphacan isoforma corta (PSI) se unen a la matriz extracelular y mol&#xE9;culas de adhesi&#xF3;n y podr&#xED;a mediar los efectos astroglial en la diferenciaci&#xF3;n neuronal. Phosphacan y RPTPbeta (largo), tanto llevar el DSD-1 ep&#xED;topo, una modificaci&#xF3;n de glicosaminoglicanos que est&#xE1; implicado en la estimulaci&#xF3;n de crecimiento de las neuritas de las neuronas de ratas embrionarias mesencef&#xE1;licas y del hipocampo en un ambiente policati&#xF3;nico. Adem&#xE1;s, phosphacan inhibe el crecimiento neur&#xED;tico de las neuronas DRG embrionarias en la presencia de laminina. A la luz de estas propiedades funcionales se examinaron los patrones de expresi&#xF3;n de la DSD-1 ep&#xED;topo y isoformas phosphacan en el sistema de rat&#xF3;n en desarrollo visual. Durante el desarrollo de la retina del DDS-1 ep&#xED;topo aparece alrededor del d&#xED;a embrionario (E) 13, los picos de los alrededores el d&#xED;a postnatal (P) 6, y es downregulated de P9 a la adolescencia. En comparaci&#xF3;n, la prote&#xED;na del n&#xFA;cleo phosphacan es detectable a primera E12, alcanza niveles m&#xE1;ximos alrededor de P14, y persiste, aunque en menor grado, a la edad adulta. El DDS-1 ep&#xED;topo est&#xE1; restringido a la fibra nerviosa y las capas plexiforme interna. En contraste, el n&#xFA;cleo phosphacan inmunoreactividad prote&#xED;na se extiende desde la capa de fibra nerviosa a la capa plexiforme exterior. El nivel de expresi&#xF3;n del gen phosphacan / RPTPbeta fue investigado por la transcriptasa inversa-reacci&#xF3;n en cadena de la polimerasa. Estos experimentos sugieren que hay un cambio en los patrones de expresi&#xF3;n de los diferentes phosphacan / isoformas RPTPbeta durante el desarrollo embrionario y postnatal tard&#xED;a. La hibridaci&#xF3;n in situ experimentos apoyan la conclusi&#xF3;n de que al menos uno de los phosphacan / RPTPbeta isoformas en la retina se expresa por las neuronas.

Expresi&#xF3;n diferencial de Phosphacan / RPTPbeta isoformas del rat&#xF3;n en desarrollo del sistema visual

Colte motoneuroni spinali sono uno strumento prezioso per studiare i meccanismi fondamentali della crescita assone e dendrite e anche per l&#39;analisi dei Pathomechanismen sottostanti malattie come la sclerosi laterale amiotrofica (SLA) e atrofia muscolare spinale (SMA). Come i motoneuroni del midollo spinale in via di sviluppo di topi costituiscono solo una minore popolazione di neuroni, queste cellule devono essere arricchito per studiarle in assenza di contaminazione delle cellule neuronali e non neuronali. Qui, descriviamo un protocollo per l&#39;isolamento e la coltura in vitro di motoneuroni primari embrionali da embrioni del mouse singoli. Dissezione dei tessuti, isolamento delle cellule e un p75 (NTR) - Anticorpo - base tecnica panning, che arricchisce altamente motoneuroni all&#39;interno &lt; 8 h sono descritti. Questo protocollo ha lo scopo di fornire un&#39;alternativa ai protocolli basati su FACS stabiliti descrivendo p75 (NTR)-basato su arricchimenti dei neuroni. Questo protocollo contribuir&agrave; a facilitare la ricerca sui meccanismi molecolari sottostanti meccanismi di sviluppo, la sopravvivenza e la malattia del motoneurone.

Isolamento e l&#39;arricchimento dei motoneuroni embrionali del mouse dal midollo spinale lombare degli embrioni del mouse singoli.

Kultivierten spinal Motoneurons sind ein wertvolles Instrument f&uuml;r die Untersuchung der grundlegenden Mechanismen der Axon und Dendrit Wachstum sowie f&uuml;r Analysen der Pathomechanismen zugrunde liegenden Erkrankungen wie Amyotrophe Lateralsklerose (ALS) und Spinale Muskelatrophie (SMA). Motoneurons in Entwicklungsl&auml;ndern R&uuml;ckenmark von M&auml;usen nur eine geringf&uuml;gige Bev&ouml;lkerung der Neuronen bilden, m&uuml;ssen diese Zellen angereichert werden, um sie in Ermangelung kontaminierender neuronale und nicht-neuronale Zellen zu studieren. Hier beschreiben wir, ein Protokoll f&uuml;r die Isolation und in-vitro Kultivierung von embryonalen prim&auml;re Motoneurons aus einzelnen Maus-Embryos. Gewebe-Dissektion, Zellenlokalisierung und ein p75 (NTR) - Antik&ouml;rper - basierte Schwenk-Technik, die Sie Motoneurons innerhalb Reichert &lt; 8H werden beschrieben. Dieses Protokoll zielt darauf ab, eine Alternative zu den etablierten FACS-basierte Protokolle beschreiben p75 (NTR)-basierte Bereicherungen der Neuronen. Dieses Protokoll wird dazu beitragen, die Forschung &uuml;ber die molekularen Mechanismen Motoneuron-Entwicklung, &Uuml;berleben und Krankheit-Mechanismen zu erleichtern.

Isolierung und Bereicherung der embryonalen Maus Motoneurons von lumbales R&uuml;ckenmark einzelnen Maus-Embryos.

&#x4F53;&#x5916;&#x57F9;&#x517B;&#x7684;&#x810A;&#x9AD3;&#x8FD0;&#x52A8;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x90FD;&#x662F;&#x751F;&#x957F;&#x7684;&#x4E00;&#x4E2A;&#x5B9D;&#x8D35;&#x7684;&#x5DE5;&#x5177;&#xFF0C;&#x5B66;&#x4E60;&#x57FA;&#x672C;&#x7684;&#x8F74;&#x7A81;&#x548C;&#x6811;&#x7A81;&#x673A;&#x5236;&#xFF0C;&#x8FD8;&#x8D1F;&#x8D23;&#x5206;&#x6790; pathomechanisms &#x57FA;&#x7840;&#x75BE;&#x75C5;&#x5982;&#x808C;&#x840E;&#x7F29;&#x4FA7;&#x7D22;&#x786C;&#x5316; (ALS) &#x548C;&#x810A;&#x9AD3;&#x6027;&#x808C;&#x840E;&#x7F29;&#x75C7; (SMA)&#x3002;&#x5728;&#x53D1;&#x5C55;&#x4E2D;&#x56FD;&#x5BB6;&#x7684;&#x5C0F;&#x9F20;&#x810A;&#x9AD3;&#x4E2D;&#x7684;&#x8FD0;&#x52A8;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x6784;&#x6210;&#x7684;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x4EBA;&#x53E3;&#x53EA;&#x6709;&#x8F7B;&#x5FAE;&#xFF0C;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x9700;&#x8981;&#x5145;&#x5B9E;&#xFF0C;&#x7814;&#x7A76;&#x4ED6;&#x4EEC;&#x5728;&#x6CA1;&#x6709;&#x6C61;&#x67D3;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x4E0E;&#x975E;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x7EC6;&#x80DE;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x5C06;&#x4ECB;&#x7ECD;&#x4E00;&#x79CD;&#x534F;&#x8BAE;&#x7684;&#x5206;&#x79BB;&#x548C;&#x4F53;&#x5916;&#x57F9;&#x517B;&#x7684;&#x80DA;&#x80CE;&#x4E3B;&#x8FD0;&#x52A8;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x4ECE;&#x4E2A;&#x522B;&#x5C0F;&#x9F20;&#x80DA;&#x80CE;&#x3002;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x6E05;&#x626B;&#x3001; &#x7EC6;&#x80DE;&#x5206;&#x79BB;&#x548C; p75 &#xFF08;&#x4F17;&#x8BAE;&#x9662;&#xFF09;-&#x6297;&#x4F53;-&#x57FA;&#x4E8E;&#x5E73;&#x79FB;&#x6280;&#x672F;&#xFF0C;&#x9AD8;&#x5EA6;&#x4E30;&#x5BCC;&#x4E86;&#x8FD0;&#x52A8;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x5185;&#x7684; &lt; &#x63CF;&#x8FF0; 8 h&#x3002;&#x672C;&#x8BAE;&#x5B9A;&#x4E66;&#x7684;&#x76EE;&#x7684;&#x662F;&#x63D0;&#x4F9B;&#x5BF9;&#x65E2;&#x5B9A;&#x7684;&#x57FA;&#x4E8E;&#x6D41;&#x5F0F;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4EEA;&#x7684;&#x534F;&#x8BAE;&#x63CF;&#x8FF0; p75 &#x66FF;&#x4EE3;&#x65B9;&#x6CD5; (&#x6B63;&#x5E38;)-&#x57FA;&#x4E8E;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x7684;&#x6D53;&#x7F29;&#x3002;&#x6B64;&#x534F;&#x8BAE;&#x5C06;&#x6709;&#x52A9;&#x4E8E;&#x4FC3;&#x8FDB;&#x57FA;&#x7840;&#x8FD0;&#x52A8;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x75C5;&#x60A3;&#x8005;&#x751F;&#x5B58;&#x53CA;&#x53D1;&#x5C55;&#x673A;&#x5236;&#x7684;&#x5206;&#x5B50;&#x673A;&#x5236;&#x7684;&#x7814;&#x7A76;&#x3002;

&#x5206;&#x79BB;&#x4E0E;&#x6D53;&#x7F29;&#x7684;&#x8170;&#x810A;&#x9AD3;&#x7684;&#x4E2A;&#x522B;&#x5C0F;&#x9F20;&#x80DA;&#x80CE;&#x4ECE;&#x5C0F;&#x9F20;&#x80DA;&#x80CE;&#x8FD0;&#x52A8;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x3002;

Cultured spinal motoneurons are a valuable tool for studying the basic mechanisms of axon and dendrite growth and also for analyses of pathomechanisms underlying diseases like amyotrophic lateral sclerosis (ALS) and spinal muscular atrophy (SMA). As motoneurons in the developing spinal cord of mice constitute only a minor population of neurons, these cells need to be enriched in order to study them in the absence of contaminating neuronal and non-neuronal cells. Here, we describe a protocol for the isolation and in vitro cultivation of embryonic primary motoneurons from individual mouse embryos. Tissue dissection, cell isolation and a p75(NTR)-antibody-based panning technique, which highly enriches motoneurons within <8 h are described. This protocol is aimed to provide an alternative to the established FACS-based protocols describing p75(NTR)-based enrichments of neurons. This protocol will help in facilitating the research on molecular mechanisms underlying motoneuron development, survival and disease mechanisms.

Isolation and enrichment of embryonic mouse motoneurons from the lumbar spinal cord of individual mouse embryos.

De culture motoneurones spinaux sont un outil pr&#xE9;cieux pour &#xE9;tudier les m&#xE9;canismes de base de l&#x26;#39;axone et la croissance des dendrites et aussi pour les analyses de sous-jacents des maladies comme le pathom&#xE9;canismes la scl&#xE9;rose lat&#xE9;rale amyotrophique (SLA) et l&#x26;#39;atrophie musculaire spinale (SMA). Comme motoneurones de la moelle &#xE9;pini&#xE8;re de souris en d&#xE9;veloppement ne constituent qu&#x26;#39;une population minoritaire de neurones, ces cellules ont besoin d&#x26;#39;&#xEA;tre enrichi afin de les &#xE9;tudier en l&#x26;#39;absence de contamination des cellules neuronales et non neuronales. Ici, nous d&#xE9;crivons un protocole pour l&#x26;#39;isolement et la culture in vitro des embryons motoneurones primaires &#xE0; partir d&#x26;#39;embryons de souris individuelles. La dissection des tissus, l&#x26;#39;isolement cellulaire et une p75 (NTR)-bas&#xE9;e sur les anticorps technique du panoramique, qui enrichit fortement les motoneurones dans &#x26;lt;8 h sont d&#xE9;crits. Ce protocole vise &#xE0; fournir une alternative aux &#xE9;tablis FACS protocoles bas&#xE9;s d&#xE9;crivant p75 (NTR) &#xE0; base d&#x26;#39;enrichissement de neurones. Ce protocole aidera &#xE0; faciliter la recherche sur les m&#xE9;canismes mol&#xE9;culaires sous-jacents des motoneurones m&#xE9;canismes de d&#xE9;veloppement, de survie et de la maladie.

Isolement et l&#x26;#39;enrichissement des motoneurones embryonnaires de souris &#xE0; partir de la moelle &#xE9;pini&#xE8;re lombaire d&#x26;#39;embryons de souris individuels

&#x57F9;&#x990A;&#x810A;&#x9AC4;&#x904B;&#x52D5;&#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30ED;&#x30F3;&#x306F;&#x8EF8;&#x7D22;&#x3068;&#x6A39;&#x72B6;&#x7A81;&#x8D77;&#x306E;&#x6210;&#x9577;&#x306E;&#x57FA;&#x672C;&#x7684;&#x306A;&#x30E1;&#x30AB;&#x30CB;&#x30BA;&#x30E0;&#x3092;&#x7814;&#x7A76;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x3001;&#x307E;&#x305F;&#x3001;&#x7B4B;&#x840E;&#x7E2E;&#x6027;&#x5074;&#x7D22;&#x786C;&#x5316;&#x75C7;&#xFF08;ALS&#xFF09;&#x3068;&#x810A;&#x9AC4;&#x6027;&#x7B4B;&#x840E;&#x7E2E;&#x75C7;&#xFF08;SMA&#xFF09;&#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306A;&#x75C5;&#x6C17;&#x306E;&#x6839;&#x5E95;&#x306B;&#x3042;&#x308B;pathomechanisms&#x306E;&#x5206;&#x6790;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x8CB4;&#x91CD;&#x306A;&#x30C4;&#x30FC;&#x30EB;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x306E;&#x958B;&#x767A;&#x810A;&#x9AC4;&#x306E;&#x904B;&#x52D5;&#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30ED;&#x30F3;&#x306F;&#x3001;&#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30ED;&#x30F3;&#x306E;&#x308F;&#x305A;&#x304B;&#x306A;&#x4EBA;&#x53E3;&#x3092;&#x69CB;&#x6210;&#x3059;&#x308B;&#x3088;&#x3046;&#x306B;&#x3001;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x306F;&#x795E;&#x7D4C;&#x7D30;&#x80DE;&#x3068;&#x975E;&#x795E;&#x7D4C;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x6DF7;&#x5165;&#x306E;&#x306A;&#x3044;&#x72B6;&#x614B;&#x3067;&#x305D;&#x308C;&#x3089;&#x3092;&#x52C9;&#x5F37;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x6FC3;&#x7E2E;&#x3059;&#x308B;&#x5FC5;&#x8981;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x5206;&#x96E2;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x3001;&#x500B;&#x3005;&#x306E;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x306E;&#x80DA;&#x304B;&#x3089;&#x80DA;&#x306E;&#x4E3B;&#x8981;&#x306A;&#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30ED;&#x30F3;&#x306E;in vitro&#x57F9;&#x990A;&#x30D7;&#x30ED;&#x30C8;&#x30B3;&#x30EB;&#x3092;&#x8A18;&#x8FF0;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x7D44;&#x7E54;&#x306E;&#x89E3;&#x5256;&#x3001;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x5358;&#x96E2;&#x3068;&#x9AD8;&#x5EA6;&#x306B;&#x26;lt;8&#x6642;&#x9593;&#x4EE5;&#x5185;&#x306B;&#x904B;&#x52D5;&#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30ED;&#x30F3;&#x3092;&#x8C4A;&#x304B;&#x306B;P75&#xFF08;NTR&#xFF09;&#x6297;&#x4F53;&#x30D9;&#x30FC;&#x30B9;&#x306E;&#x30D1;&#x30F3;&#x6280;&#x8853;&#x306F;&#x3001;&#x8A18;&#x8F09;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x30D7;&#x30ED;&#x30C8;&#x30B3;&#x30EB;&#x306F;&#x3001;&#x795E;&#x7D4C;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;p75&#x306E;&#xFF08;NTR&#xFF09;&#x30D9;&#x30FC;&#x30B9;&#x306E;&#x6FC3;&#x7E2E;&#x3092;&#x8A18;&#x8FF0;&#x3059;&#x308B;&#x78BA;&#x7ACB;FACS&#x30D9;&#x30FC;&#x30B9;&#x306E;&#x30D7;&#x30ED;&#x30C8;&#x30B3;&#x30EB;&#x3078;&#x306E;&#x4EE3;&#x66FF;&#x3092;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x76EE;&#x7684;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x30D7;&#x30ED;&#x30C8;&#x30B3;&#x30EB;&#x306F;&#x3001;&#x904B;&#x52D5;&#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30ED;&#x30F3;&#x306E;&#x958B;&#x767A;&#x3001;&#x751F;&#x5B58;&#x7387;&#x3068;&#x75BE;&#x60A3;&#x306E;&#x30E1;&#x30AB;&#x30CB;&#x30BA;&#x30E0;&#x306E;&#x6839;&#x5E95;&#x306B;&#x3042;&#x308B;&#x5206;&#x5B50;&#x30E1;&#x30AB;&#x30CB;&#x30BA;&#x30E0;&#x306B;&#x95A2;&#x3059;&#x308B;&#x7814;&#x7A76;&#x3092;&#x4FC3;&#x9032;&#x3059;&#x308B;&#x306E;&#x306B;&#x5F79;&#x7ACB;&#x3064;&#x3060;&#x308D;&#x3046;&#x3002;

&#x500B;&#x3005;&#x306E;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x80DA;&#x306E;&#x8170;&#x9AC4;&#x304B;&#x3089;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x80CE;&#x5150;&#x904B;&#x52D5;&#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30ED;&#x30F3;&#x306E;&#x5206;&#x96E2;&#x3068;&#x6FC3;&#x7E2E;

&#xAD50;&#xC591;&#xB41C; &#xCC99;&#xCD94; motoneurons &#xCD95; &#xC0AD;&#xACFC; dendrite &#xC131;&#xC7A5;&#xC758; &#xAE30;&#xBCF8; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998;&#xC744; &#xACF5;&#xBD80; &#xD558; &#xACE0; &#xB610;&#xD55C; &#xB8E8; &#xAC8C; &#xB9AD; &#xBCD1; &#xCE21;&#xBA74; &#xACBD;&#xD654; &#xC99D; (ALS), &#xCC99;&#xC218; &#xADFC;&#xC721; &#xC704;&#xCD95; &#xC99D; (SMA) &#xAC19;&#xC740; pathomechanisms &#xAE30;&#xBCF8; &#xC9C8;&#xBCD1;&#xC758; &#xBD84;&#xC11D;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xADC0;&#xC911; &#xD55C; &#xB3C4;&#xAD6C;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;. Motoneurons &#xC0DD;&#xC950;&#xC758; &#xAC1C;&#xBC1C; &#xCC99;&#xC218;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC2E0;&#xACBD; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xC791;&#xC740; &#xC778;&#xAD6C; &#xAD6C;&#xC131;, &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xC138;&#xD3EC; &#xC2E0;&#xACBD; &#xBC0F; &#xBE44; &#xC2E0;&#xACBD; &#xC138;&#xD3EC;&#xB97C; &#xC624;&#xC5FC; &#xC5C6;&#xC774; &#xACF5;&#xBD80; &#xD558;&#xAE30; &#xC704;&#xD574; &#xB18D;&#xCD95; &#xD574;&#xC57C; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC5EC;&#xAE30;, &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xBD84;&#xB9AC;&#xC640; &#xAC1C;&#xBCC4; &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4; &#xBC30;&#xC544;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBC30;&#xC544; &#xAE30;&#xBCF8; motoneurons&#xC758; &#xCCB4; &#xC678; &#xBC30;&#xC591;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xD504;&#xB85C;&#xD1A0;&#xCF5C; &#xC124;&#xBA85;. &#xC870;&#xC9C1; &#xC808; &#xAC1C;, &#xC140; &#xACE0;&#xB9BD;&#xACFC; p75 (NTR)-&#xD56D; &#xCCB4;-&#xAE30;&#xBC18;&#xC73C;&#xB85C; &#xB9E4;&#xC6B0; &#xD48D;&#xC694;&#xB86D;&#xAC8C; &#xD558;&#xB294; &#xB0B4; motoneurons &#xD328;&#xB2DD; &#xAE30;&#xBC95; &lt; 8h &#xC124;&#xBA85; &#xB418;&#xC5B4; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774; &#xD504;&#xB85C;&#xD1A0;&#xCF5C;&#xC740; &#xC124;&#xB9BD; FACS &#xAE30;&#xBC18; &#xD504;&#xB85C;&#xD1A0;&#xCF5C; p75 &#xC124;&#xBA85; &#xD558;&#xB294; &#xB300;&#xC548;&#xC744; &#xC81C;&#xACF5;&#xC744; &#xBAA9;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; (NTR)-&#xC2E0;&#xACBD; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; enrichments&#xC744; &#xAE30;&#xBC18;&#xC73C;&#xB85C; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774; &#xD504;&#xB85C;&#xD1A0;&#xCF5C;&#xC740; &#xAE30;&#xBCF8; motoneuron &#xAC1C;&#xBC1C;, &#xC0DD;&#xC874; &#xBC0F; &#xC9C8;&#xBCD1; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998; &#xBD84;&#xC790; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xB97C; &#xCD09;&#xC9C4;&#xC5D0; &#xB3C4;&#xC6C0;&#xC774; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xACA9;&#xB9AC; &#xD558; &#xACE0; &#xAC1C;&#xBCC4; &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4; &#xBC30;&#xC544;&#xC758; &#xC694; &#xCD94; &#xCC99;&#xC218;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBC30;&#xC544; &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4; motoneurons&#xC758; &#xB18D;&#xCD95;.

Cultivadas de motoneuronas espinales son una herramienta valiosa para el estudio de los mecanismos b&#xE1;sicos del crecimiento de la dendrita y ax&#xF3;n y tambi&#xE9;n para el an&#xE1;lisis de los mecanismos patog&#xE9;nicos que subyacen a enfermedades como la esclerosis lateral amiotr&#xF3;fica (ELA) y la atrofia muscular espinal (SMA). Como motoneuronas en la m&#xE9;dula espinal en desarrollo de ratones constituyen s&#xF3;lo una poblaci&#xF3;n menor de neuronas, estas c&#xE9;lulas deben ser enriquecida con el fin de estudiar en la ausencia de contaminaci&#xF3;n de las c&#xE9;lulas neuronales y no neuronales. A continuaci&#xF3;n, describimos un protocolo para el aislamiento y cultivo in vitro de embriones primarios de neuronas motoras individuales embriones de rat&#xF3;n. La disecci&#xF3;n de tejidos, el aislamiento celular y una p75 (NTR)-anticuerpo-basado en la t&#xE9;cnica panor&#xE1;mica, que es altamente enriquece motoneuronas dentro de &#x26;lt;8 h se describen. Este protocolo est&#xE1; destinado a proporcionar una alternativa a los establecidos FACS protocolos basados &#x200B;&#x200B;describen p75 (NTR)-basados &#x200B;&#x200B;enriquecimientos de neuronas. Este protocolo ayudar&#xE1; a facilitar la investigaci&#xF3;n sobre los mecanismos moleculares que subyacen a los mecanismos de motoneuronas desarrollo, supervivencia y enfermedad.

Aislamiento y enriquecimiento de las motoneuronas de embriones de rat&#xF3;n de la m&#xE9;dula espinal lumbar de embriones de rat&#xF3;n individuales

&#x63A7;&#x5236;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x5B58;&#x6D3B;&#x548C;&#x518D;&#x751F;&#x7684;&#x673A;&#x5236;&#x53D1;&#x5C55;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x4E2D;&#xFF0C;&#x51FA;&#x751F;&#x540E;, &#x548C;&#x75C5;&#x53D8;&#x7684;&#x6761;&#x4EF6;&#x4E0B;&#x53D1;&#x6325;&#x4E86;&#x91CD;&#x8981;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;&#x80DA;&#x80CE;&#x5C0F;&#x9F20;&#x79BB;&#x4F53;&#x8FD0;&#x52A8;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x5DF2;&#x7ECF;&#x7814;&#x7A76;&#x8FD9;&#x79CD;&#x57FA;&#x672C;&#x673A;&#x5236;&#x7684;&#x6709;&#x7528;&#x5DE5;&#x5177;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x8FD0;&#x52A8;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x53D6;&#x51B3;&#x4E8E;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5916;&#x57FA;&#x8D28; (ECM) &#x7684;&#x5206;&#x5B50;&#xFF0C;&#x662F;&#x70C8;&#x6027;&#x8C03;&#x89E3;&#x8005;&#x7684;&#x5B58;&#x6D3B;&#x548C;&#x8F74;&#x7A81;&#x751F;&#x957F;&#x548C;&#x6307;&#x5BFC;&#x5728;&#x4E2D;&#x67A2;&#x795E;&#x7ECF;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x4E2D;&#xFF0C;&#x5E76;&#x5728;&#x4F53;&#x5916;&#xFF0C;&#x5C55;&#x793A;&#x65E2;&#x6709;&#x5438;&#x5F15;&#x529B;&#x6216;&#x62D2;&#x6307;&#x5BFC;&#x63D0;&#x793A;&#x3002;&#x6B64;&#x5916;&#xFF0C;ECM &#x86CB;&#x767D;&#x591A;&#x7CD6;&#x548C;&#x7CD6;&#x86CB;&#x767D;&#x662F;&#x4F5C;&#x4E3A;&#x518D;&#x751F;&#x8F74;&#x7A81;&#x751F;&#x957F;&#x969C;&#x788D;&#x7684;&#x80F6;&#x8D28;&#x7622;&#x75D5;&#x7684;&#x7EC4;&#x4EF6;&#x3002;CNS &#x8F74;&#x7A81;&#x4EA7;&#x7269;&#x4E0E;&#x76F8;&#x6BD4;&#xFF0C;&#x5C11;&#x662F;&#x77E5;&#x7684;&#x6307;&#x5BFC;&#x5BF9;&#x5176;&#x5468;&#x8FB9;&#x7684;&#x76EE;&#x6807;&#x8FD0;&#x52A8;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x7684;&#x7EBF;&#x7D22;&#x3002;&#x56E0;&#x4E3A;&#x6211;&#x4EEC;&#x611F;&#x5174;&#x8DA3;&#x7684;&#x80F6;&#x8D28;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6E90;&#x6027;&#x786B;&#x9178;&#x8F6F;&#x9AA8;&#x7D20;&#x86CB;&#x767D;&#x591A;&#x7CD6; (CSPGs) &#x7684;&#x5F71;&#x54CD;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x5DF2;&#x5236;&#x8BA2;&#x4E86;&#x8C03;&#x67E5;&#x5BF9;&#x8FD0;&#x52A8;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x4EA7;&#x7269;&#x548C;&#x751F;&#x5B58;&#x7684;&#x80F6;&#x8D28;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6E90;&#x6027;&#x57FA;&#x8D28;&#x5206;&#x5B50;&#x5F71;&#x54CD;&#x7684;&#x6A21;&#x578B;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x7528;&#x4F53;&#x5916;&#x57F9;&#x517B;&#x7684;&#x80DA;&#x80CE;&#x5C0F;&#x9F20;&#x8FD0;&#x52A8;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x6765;&#x8C03;&#x67E5;&#x4F5C;&#x4E3A;&#x5347;&#x964D;&#x6C38;&#x751F;&#x5316;&#x7684;&#x96EA;&#x65FA;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7CFB; IMS32 &#x7684;&#x80F6;&#x8D28;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6E90;&#x6027;&#x7684;&#x5355;&#x5143;&#x683C; A7&#x3001; Neu7&#xFF0C;&#x4EE5;&#x53CA;&#x516C;&#x5F00;&#x8FDB;&#x4FEE;&#x5B66;&#x9662;&#x65B0;&#x751F;&#x884C;&#x4E3B;&#x661F;&#x5F62;&#x80F6;&#x8D28;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4EA7;&#x751F;&#x7684;&#x77E9;&#x9635;&#x5206;&#x5B50;&#x8F74;&#x7A81;&#x751F;&#x957F;&#x6548;&#x5E94;&#x3002;&#x7ED3;&#x679C;&#x8868;&#x660E;&#x5206;&#x5B50;&#x7684; ECM&#xFF0C;&#x7279;&#x522B;&#x662F;&#x786B;&#x9178;&#x8F6F;&#x9AA8;&#x7D20;&#x786B;&#x9178;&#x76D0;&#xFF0C;&#x53D1;&#x6325;&#x91CD;&#x8981;&#x4F5C;&#x7528;&#x4F5C;&#x4E3A;&#x8F74;&#x7A81;&#x751F;&#x957F;&#x4FC3;&#x8FDB;&#x63D0;&#x793A;&#x4FE1;&#x606F;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x53EF;&#x4EE5;&#x8BC1;&#x660E;&#x5BF9;&#x8FD0;&#x52A8;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x5B58;&#x6D3B;&#x53CA; caspase3 &#x8BF1;&#x5BFC;&#x7EC6;&#x80DE;&#x51CB;&#x4EA1;&#x7684;&#x77E9;&#x9635;&#x7EC4;&#x4EF6;&#x4FEE;&#x6539;&#x6548;&#x679C;&#x3002;&copy; 2010&#x5E74;&#x5A01;&#x5229;&#x65AF;&#x516C;&#x53F8;&#x3002;

&#x8F74;&#x7A81;&#x751F;&#x957F;&#x548C;&#x5B58;&#x6D3B;&#x7684;&#x4F53;&#x5916;&#x57F9;&#x517B;&#x7684;&#x5C0F;&#x9F20;&#x80DA;&#x80CE;&#x8FD0;&#x52A8;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x5BF9;&#x80F6;&#x8D28;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6E90;&#x6027;&#x57FA;&#x8D28;&#x5206;&#x5B50;&#xFF0C;&#x7279;&#x522B;&#x662F;&#x786B;&#x9178;&#x8F6F;&#x9AA8;&#x7D20;&#x786B;&#x9178;&#x76D0;&#x7684;&#x5F71;&#x54CD;&#x3002;

Mechanisms controlling neuronal survival and regeneration play an important role during development, after birth, and under lesion conditions. Isolated embryonic mouse motoneurons have been a useful tool for studying such basic mechanisms. These cultured motoneurons depend on extracellular matrix (ECM) molecules, which are potent mediators of survival and axonal growth and guidance in the CNS and in vitro, exhibiting either attractive or repellent guidance cues. Additionally, ECM proteoglycans and glycoproteins are components of the glial scar acting as a growth barrier for regenerating axons. Compared with CNS axon outgrowth, less is known about the cues that guide motoneurons toward their peripheral targets. Because we are interested in the effects of glial-derived chondroitin sulfate proteoglycans (CSPGs), we have worked out a model system for investigating the influences of glial-derived matrix molecules on motoneuron outgrowth and survival. We used cultured embryonic mouse motoneurons to investigate axon growth effects of matrix molecules produced by the glial-derived cell lines A7, Neu7, and Oli-neu primary astrocytes as wellas the immortalized Schwann cell line IMS32. The results indicate that molecules of the ECM, especially chondroitin sulfates, play an important role as axon growth-promoting cues. We could demonstrate a modifying effect of the matrix components on motoneuron survival and caspase3-induced apoptosis. Â© 2010 Wiley-Liss, Inc.

Influence of glial-derived matrix molecules, especially chondroitin sulfates, on neurite growth and survival of cultured mouse embryonic motoneurons.

M&#xE9;canismes de contr&#xF4;le la survie neuronale et la r&#xE9;g&#xE9;n&#xE9;ration jouer un r&#xF4;le important au cours du d&#xE9;veloppement, apr&#xE8;s la naissance, et dans des conditions de l&#xE9;sions. Isol&#xE9;s motoneurones embryonnaires de souris ont &#xE9;t&#xE9; un outil utile pour &#xE9;tudier ces m&#xE9;canismes de base. Ces motoneurones cultiv&#xE9;s d&#xE9;pendent de la matrice extracellulaire (ECM) de mol&#xE9;cules, qui sont de puissants m&#xE9;diateurs de la croissance axonale et la survie et d&#x26;#39;orientation dans le SNC et in vitro, pr&#xE9;sentant soit des signaux de guidage attractives ou r&#xE9;pulsives. En outre, les prot&#xE9;oglycanes et les glycoprot&#xE9;ines d&#x26;#39;ECM sont des composantes de la cicatrice gliale agissant comme une barri&#xE8;re de croissance pour les axones. En comparaison avec l&#x26;#39;axone du SNC excroissance, on en sait moins sur les indices qui motoneurones de guidage vers leurs cibles p&#xE9;riph&#xE9;riques. Parce que nous sommes int&#xE9;ress&#xE9;s aux effets de d&#xE9;riv&#xE9;s des cellules gliales prot&#xE9;oglycanes chondro&#xEF;tine sulfate (CSPG), nous avons travaill&#xE9; sur un syst&#xE8;me mod&#xE8;le pour &#xE9;tudier les influences de mol&#xE9;cules de la matrice d&#xE9;riv&#xE9;s des cellules gliales sur l&#x26;#39;excroissance des motoneurones et la survie. Nous avons utilis&#xE9; de culture motoneurones embryonnaires de souris pour &#xE9;tudier les effets de la croissance axonale mol&#xE9;cules de la matrice produites par des lign&#xE9;es de cellules gliales d&#xE9;riv&#xE9; A7, Neu7, et Oli-neu astrocytes primaires que wellas la ligne de Schwann immortalis&#xE9; cellule IMS32. Les r&#xE9;sultats indiquent que les mol&#xE9;cules de la MEC, en particulier de chondro&#xEF;tine sulfates, jouent un r&#xF4;le important en tant axone favorisant la croissance des indices. Nous avons pu d&#xE9;montrer un effet de modifier des composants de la matrice sur la survie des neurones moteurs et caspase3 l&#x26;#39;apoptose induite par. &#xA9; 2010 Wiley-Liss,

Influence de mol&#xE9;cules de la matrice d&#xE9;riv&#xE9;s des cellules gliales, en particulier des sulfates de chondro&#xEF;tine, sur la croissance des neurites et la survie des motoneurones de souris en culture embryonnaires

Mechanismen, die Steuerung der neuronalen &uuml;berleben und Regeneration Rolle eine wichtige w&auml;hrend der Entwicklung nach der Geburt und unter Bedingungen der L&auml;sion. Isolierte embryonale Maus Motoneurons wurden ein n&uuml;tzliches Werkzeug f&uuml;r solche grundlegenden Mechanismen zu studieren. Diese kultivierten Motoneurons h&auml;ngen von der extrazellul&auml;ren Matrix (ECM) Molek&uuml;le, die potente Mediatoren des &Uuml;berlebens und Axonales Wachstum und Anleitungen im ZNS und in Vitro, ausstellen entweder attraktiv oder abweisend-Anleitung-Hinweise sind. Dar&uuml;ber hinaus sind die ECM-Proteoglykane und Glykoproteine Komponenten der Gliazellen Narbe als eine Wachstums-Barriere f&uuml;r regenerierende Axone. Verglichen mit CNS Axon Auswuchs, ist weniger &uuml;ber die Cues bekannt, die Motoneurons in Richtung ihrer peripheren Ziele f&uuml;hren. Da wir die Wirkung von Chondroitinsulfat Gliazellen abgeleitete Proteoglykane (CSPGs) interessiert sind, haben wir ein Modellsystem zur Untersuchung der Einfl&uuml;sse von Gliazellen abgeleitete Matrix Molek&uuml;len auf Motoneuron Auswuchs und &Uuml;berleben ausgearbeitet. Wir verwendeten kultivierten embryonalen Maus Motoneurons Axon Wachstumseffekte Matrix Molek&uuml;le produziert durch die Gliazellen abgeleitete Zelle A7, Neu7 und Oli-Neu Zeilen prim&auml;re Astrozyten als parodontalen verewigt Schwann-Zelllinie IMS32 zu untersuchen. Die Ergebnisse zeigen, dass die Molek&uuml;le des ECM, insbesondere Chondroitin Sulfate, als Axon wachstumsf&ouml;rdernde Signale eine wichtige Rolle spielen. Wir k&ouml;nnten eine &Auml;nderung Wirkung der Matrix-Komponenten auf Motoneuron &uuml;berleben und caspase3-induzierten Apoptose demonstrieren. &copy; 2010 Wiley-Liss, Inc.

Einfluss der Matrix Gliazellen abgeleitete Molek&uuml;le, vor allem Chondroitin Sulfate, Neurit Wachstum und &Uuml;berleben der kultivierten Maus embryonalen Motoneurons.

Meccanismi di controllo della rigenerazione e la sopravvivenza neuronale svolgono un ruolo importante durante lo sviluppo, dopo la nascita e in condizioni di lesione. Motoneuroni isolato embrionali del mouse sono stati uno strumento utile per lo studio di tali meccanismi di base. Questi motoneuroni colti dipendono da molecole della matrice extracellulare (ECM), che sono potenti mediatori di sopravvivenza e di crescita assonale e di orientamento nel SNC e in vitro, esibendo sia spunti di orientamento attraente o repellenti. Inoltre, glicoproteine e proteoglicani ECM sono componenti della cicatrice glia che agisce come una barriera di crescita per la rigenerazione di assoni. Confrontato con escrescenza assone CNS, meno &egrave; conosciuto circa gli spunti che guidano i motoneuroni verso i loro bersagli periferici. Perch&eacute; ci interessa gli effetti dei proteoglicani gliali derivato Condroitin solfato (CSPG), abbiamo lavorato fuori un sistema modello per studiare le influenze delle molecole di matrice gliali derivato sul motoneurone escrescenza e sopravvivenza. Abbiamo usato motoneuroni colta embrionali del mouse per studiare gli effetti di crescita axon di molecole di matrice prodotti dal astrociti cellule gliali derivato linee A7, Neu7 e Oli-neu primario come wellas la cellula di Schwann immortalata linea IMS32. I risultati indicano che molecole di ECM, soprattutto condroitina solfati, svolgono un ruolo importante come spunti growth-promoting assone. Noi potremmo dimostrare un effetto modificando dei componenti matrix sulla sopravvivenza del motoneurone e apoptosi indotta da caspase3. &copy; 2010 Wiley-Liss, Inc.

Influenza delle molecole di matrice gliali derivato, soprattutto condroitina solfati, sulla crescita dei neuriti e sopravvivenza dei motoneuroni embrionali del mouse colta.

&#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30ED;&#x30F3;&#x306E;&#x751F;&#x5B58;&#x3068;&#x518D;&#x751F;&#x3092;&#x5236;&#x5FA1;&#x3059;&#x308B;&#x30E1;&#x30AB;&#x30CB;&#x30BA;&#x30E0;&#x306F;&#x3001;&#x51FA;&#x751F;&#x5F8C;&#x3001;&#x75C5;&#x5909;&#x306E;&#x6761;&#x4EF6;&#x4E0B;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x958B;&#x767A;&#x6642;&#x306B;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x679C;&#x305F;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x5358;&#x96E2;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x80DA;&#x306E;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x904B;&#x52D5;&#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30ED;&#x30F3;&#x306F;&#x3001;&#x3053;&#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306A;&#x57FA;&#x672C;&#x7684;&#x306A;&#x30E1;&#x30AB;&#x30CB;&#x30BA;&#x30E0;&#x3092;&#x7814;&#x7A76;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x6709;&#x7528;&#x306A;&#x30C4;&#x30FC;&#x30EB;&#x3068;&#x306A;&#x3063;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x57F9;&#x990A;&#x904B;&#x52D5;&#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30ED;&#x30F3;&#x306F;&#x3001;&#x9B45;&#x529B;&#x7684;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x64A5;&#x6307;&#x5C0E;&#x306E;&#x624B;&#x304C;&#x304B;&#x308A;&#x306E;&#x3069;&#x3061;&#x3089;&#x304B;&#x3092;&#x793A;&#x3059;&#x4E2D;&#x67A2;&#x795E;&#x7D4C;&#x7CFB;&#x304A;&#x3088;&#x3073;in vitro&#x3067;&#x306E;&#x751F;&#x5B58;&#x3068;&#x8EF8;&#x7D22;&#x6210;&#x9577;&#x3068;&#x30AC;&#x30A4;&#x30C0;&#x30F3;&#x30B9;&#x306E;&#x5F37;&#x529B;&#x306A;&#x30E1;&#x30C7;&#x30A3;&#x30A8;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;&#x3067;&#x3042;&#x308A;&#x3001;&#x7D30;&#x80DE;&#x5916;&#x30DE;&#x30C8;&#x30EA;&#x30C3;&#x30AF;&#x30B9;&#xFF08;ECM&#xFF09;&#x5206;&#x5B50;&#x306B;&#x4F9D;&#x5B58;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3055;&#x3089;&#x306B;&#x3001;ECM&#x30D7;&#x30ED;&#x30C6;&#x30AA;&#x30B0;&#x30EA;&#x30AB;&#x30F3;&#x3068;&#x7CD6;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306F;&#x3001;&#x518D;&#x751F;&#x8EF8;&#x7D22;&#x306E;&#x6210;&#x9577;&#x306E;&#x969C;&#x58C1;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x4F5C;&#x7528;&#x3059;&#x308B;&#x30B0;&#x30EA;&#x30A2;&#x7622;&#x75D5;&#x306E;&#x30B3;&#x30F3;&#x30DD;&#x30FC;&#x30CD;&#x30F3;&#x30C8;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x4E2D;&#x67A2;&#x795E;&#x7D4C;&#x7CFB;&#x306E;&#x8EF8;&#x7D22;&#x4F38;&#x9577;&#x3068;&#x6BD4;&#x8F03;&#x3057;&#x3066;&#x3001;&#x4EE5;&#x4E0B;&#x305D;&#x306E;&#x5468;&#x8FBA;&#x306E;&#x76EE;&#x6A19;&#x306B;&#x5411;&#x304B;&#x3063;&#x3066;&#x30AC;&#x30A4;&#x30C9;&#x904B;&#x52D5;&#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30ED;&#x30F3;&#x305D;&#x306E;&#x624B;&#x304C;&#x304B;&#x308A;&#x306B;&#x3064;&#x3044;&#x3066;&#x77E5;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x30B0;&#x30EA;&#x30A2;&#x7D30;&#x80DE;&#x7531;&#x6765;&#x306E;&#x30B3;&#x30F3;&#x30C9;&#x30ED;&#x30A4;&#x30C1;&#x30F3;&#x786B;&#x9178;&#x30D7;&#x30ED;&#x30C6;&#x30AA;&#x30B0;&#x30EA;&#x30AB;&#x30F3;&#xFF08;&#x67D4;&#x6BDB;&#xFF09;&#x306E;&#x52B9;&#x679C;&#x306B;&#x8208;&#x5473;&#x3092;&#x6301;&#x3063;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x306E;&#x3067;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x904B;&#x52D5;&#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30ED;&#x30F3;&#x306E;&#x7A81;&#x8D77;&#x4F38;&#x9577;&#x3068;&#x751F;&#x5B58;&#x306B;&#x30B0;&#x30EA;&#x30A2;&#x7D30;&#x80DE;&#x7531;&#x6765;&#x30DE;&#x30C8;&#x30EA;&#x30C3;&#x30AF;&#x30B9;&#x5206;&#x5B50;&#x306E;&#x5F71;&#x97FF;&#x3092;&#x8ABF;&#x67FB;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x30B7;&#x30B9;&#x30C6;&#x30E0;&#x3092;&#x3057;&#x3066;&#x304D;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;&#x30B0;&#x30EA;&#x30A2;&#x7531;&#x6765;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x682A;A7&#x3001;Neu7&#x3001;&#x3068;wellas&#x4E0D;&#x6B7B;&#x5316;&#x30B7;&#x30E5;&#x30EF;&#x30F3;&#x7D30;&#x80DE;&#x682A;IMS32&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x30AA;&#x30EA; - &#x795E;&#x7D4C;&#x306E;&#x4E3B;&#x661F;&#x72B6;&#x81A0;&#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x751F;&#x6210;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x30DE;&#x30C8;&#x30EA;&#x30C3;&#x30AF;&#x30B9;&#x5206;&#x5B50;&#x306E;&#x8EF8;&#x7D22;&#x6210;&#x9577;&#x306E;&#x5F71;&#x97FF;&#x3092;&#x8ABF;&#x3079;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x57F9;&#x990A;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x80CE;&#x5150;&#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30ED;&#x30F3;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x7D50;&#x679C;&#x306F;&#x3001;&#x7279;&#x306B;ECM&#x306E;&#x5206;&#x5B50;&#x3001;&#x30B3;&#x30F3;&#x30C9;&#x30ED;&#x30A4;&#x30C1;&#x30F3;&#x786B;&#x9178;&#x306F;&#x3001;&#x8EF8;&#x7D22;&#x6210;&#x9577;&#x4FC3;&#x9032;&#x624B;&#x304C;&#x304B;&#x308A;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x679C;&#x305F;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x904B;&#x52D5;&#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30ED;&#x30F3;&#x306E;&#x751F;&#x5B58;&#x3068;&#x30AB;&#x30B9;&#x30D1;&#x30FC;&#x30BC;&#x8A98;&#x5C0E;&#x30A2;&#x30DD;&#x30C8;&#x30FC;&#x30B7;&#x30B9;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x30DE;&#x30C8;&#x30EA;&#x30C3;&#x30AF;&#x30B9;&#x6210;&#x5206;&#x306E;&#x4FEE;&#x98FE;&#x52B9;&#x679C;&#x3092;&#x5B9F;&#x8A3C;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x3002; &#xA9;2010&#x30EF;&#x30A4;&#x30EA;&#x30FC;&#x30EA;&#x30B9;&#x682A;&#x5F0F;&#x4F1A;&#x793E;

&#x57F9;&#x990A;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x80DA;&#x6027;&#x904B;&#x52D5;&#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30ED;&#x30F3;&#x306E;&#x795E;&#x7D4C;&#x7A81;&#x8D77;&#x6210;&#x9577;&#x3068;&#x751F;&#x5B58;&#x306B;&#x53CA;&#x307C;&#x3059;&#x30B0;&#x30EA;&#x30A2;&#x7531;&#x6765;&#x306E;&#x30DE;&#x30C8;&#x30EA;&#x30C3;&#x30AF;&#x30B9;&#x5206;&#x5B50;&#x306E;&#x5F71;&#x97FF;&#x3001;&#x7279;&#x306B;&#x30B3;&#x30F3;&#x30C9;&#x30ED;&#x30A4;&#x30C1;&#x30F3;&#x786B;&#x9178;&#x3001;

&#xC2E0;&#xACBD; &#xC0DD;&#xC874; &#xBC0F; &#xC7AC;&#xC0DD; &#xC81C;&#xC5B4; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998; &#xCD9C;&#xC0DD; &#xD6C4;, &#xACE0; &#xBCD1; &#xBCC0; &#xC870;&#xAC74; &#xD558;&#xC5D0;&#xC11C; &#xAC1C;&#xBC1C; &#xD558;&#xB294; &#xB3D9;&#xC548; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xD55C;&#xB2E4;. &#xACA9;&#xB9AC; &#xB41C; &#xBC30;&#xC544; &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4; motoneurons &#xAC19;&#xC740; &#xAE30;&#xBCF8; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998;&#xC744; &#xACF5;&#xBD80; &#xD558;&#xB294; &#xB370; &#xC720;&#xC6A9;&#xD55C; &#xB3C4;&#xAD6C;&#xAC00; &#xB418;&#xC5C8;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xAD50;&#xC591;&#xB41C; motoneurons &#xB9E4;&#xB825;&#xC801;&#xC778; &#xB610;&#xB294; &#xAD6C; &#xCDA9; &#xC81C; &#xC9C0;&#xCE68; &#xB2E8;&#xC11C; &#xC911; &#xC804;&#xC2DC; &#xC0DD;&#xC874; &#xBC0F; axonal &#xC131;&#xC7A5;&#xACFC; CNS&#xC640; &#xC2DC;&#xD5D8;&#xAD00;, &#xC9C0;&#xCE68;&#xC758; &#xAC15;&#xB825;&#xD55C; &#xC911;&#xC7AC;&#xC790;&#xB294; &#xC138;&#xD3EC; &#xC678; &#xAE30;&#xC9C8; (ECM) &#xBD84;&#xC790;&#xC5D0; &#xB530;&#xB77C; &#xB2EC;&#xB77C; &#xC9D1;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB610;&#xD55C;, ECM proteoglycans &#xBC0F; glycoproteins&#xB294; &#xCD95; &#xC0AD; &#xC7AC;&#xC0DD;&#xC744; &#xC704;&#xD55C; &#xC131;&#xC7A5; &#xC7A5;&#xBCBD; &#xC5ED;&#xD560; &#xAD50; &#xD749;&#xD130;&#xC758; &#xAD6C;&#xC131; &#xC694;&#xC18C;. CNS axon &#xD30C;&#xC0DD;&#xBB3C;&#xC5D0; &#xBE44;&#xD574; &#xB35C; motoneurons &#xC8FC;&#xBCC0; &#xBAA9;&#xD45C; &#xCABD;&#xC73C;&#xB85C; &#xC548;&#xB0B4; &#xD558;&#xB294; &#xC2E0;&#xD638;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC54C;&#xB824;&#xC838; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC; &#xAD50; &#xD30C;&#xC0DD; chondroitin &#xD669;&#xC0B0; proteoglycans (CSPGs)&#xC758; &#xD6A8;&#xACFC;&#xC5D0; &#xAD00;&#xC2EC;&#xC774; &#xC788;&#xAE30; &#xB54C;&#xBB38;&#xC5D0;, &#xC6B0;&#xB9AC; motoneuron &#xD30C;&#xC0DD;&#xBB3C; &#xBC0F; &#xC0DD;&#xC874;&#xC5D0; &#xD30C;&#xC0DD; &#xB41C; &#xAD50; &#xB9E4;&#xD2B8;&#xB9AD;&#xC2A4; &#xBD84;&#xC790;&#xC758; &#xC601;&#xD5A5;&#xC744; &#xC870;&#xC0AC; &#xD558;&#xAE30; &#xC704;&#xD55C; &#xBAA8;&#xB378; &#xC2DC;&#xC2A4;&#xD15C; &#xBC16;&#xC73C;&#xB85C; &#xC77C; &#xD588;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xAD50;&#xC591;&#xB41C; &#xBC30;&#xC544; &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4; motoneurons wellas IMS32 &#xBD88;&#xBA78; &#xD558; &#xAC8C; Schwann &#xC138;&#xD3EC; &#xB77C;&#xC778;&#xC73C;&#xB85C; &#xD30C;&#xC0DD; &#xB41C; glial &#xC138;&#xD3EC; &#xB77C;&#xC778; a 7, Neu7, &#xADF8;&#xB9AC;&#xACE0; Oli neu &#xAE30;&#xBCF8; &#xC774;&#xB2E4; &#xC81C;&#xC791;&#xD55C; &#xB9E4;&#xD2B8;&#xB9AD;&#xC2A4; &#xBD84;&#xC790;&#xC758; &#xCD95; &#xC0AD; &#xC131;&#xC7A5; &#xD6A8;&#xACFC; &#xC870;&#xC0AC; &#xD558;&#xAE30; &#xC704;&#xD574; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD588;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xACB0;&#xACFC; ECM, &#xD2B9;&#xD788; chondroitin &#xD669;&#xC0B0; &#xBD84;&#xC790; &#xCD95; &#xC0C9; &#xC131;&#xC7A5; &#xCD94;&#xC9C4; &#xD45C;&#xD604;&#xC73C;&#xB85C; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0C5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC; motoneuron &#xC0DD;&#xC874;&#xACFC; caspase3 &#xC720;&#xB3C4; apoptosis&#xC5D0; &#xB9E4;&#xD2B8;&#xB9AD;&#xC2A4; &#xAD6C;&#xC131;&#xC758; &#xC218;&#xC815; &#xD6A8;&#xACFC; &#xC124;&#xBA85;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &copy; 2010&#xC640; &#xC77C;&#xB9AC; Liss, inc.

&#xAD50;&#xC591;&#xB41C; &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4; &#xBC30;&#xC544; motoneurons&#xC758; neurite &#xC131;&#xC7A5; &#xADF8;&#xB9AC;&#xACE0; &#xC0DD;&#xC874;&#xC5D0; &#xD30C;&#xC0DD; &#xB41C; &#xAD50; &#xB9E4;&#xD2B8;&#xB9AD;&#xC2A4; &#xBD84;&#xC790;, &#xD2B9;&#xD788; chondroitin &#xD669;&#xC0B0;&#xC758; &#xC601;&#xD5A5;.

Mecanismos de control de la supervivencia neuronal y la regeneraci&#xF3;n de desempe&#xF1;ar un papel importante durante el desarrollo, despu&#xE9;s del nacimiento, y en condiciones de lesi&#xF3;n. Motoneuronas aislados de embriones de rat&#xF3;n han sido una herramienta &#xFA;til para el estudio de estos mecanismos b&#xE1;sicos. Estas neuronas motoras cultivadas dependen de la matriz extracelular (ECM) mol&#xE9;culas, que son potentes mediadores de la supervivencia, crecimiento y axonal y orientaci&#xF3;n en el sistema nervioso central e in vitro, que muestran tanto las se&#xF1;ales de orientaci&#xF3;n atractivas o repelentes. Adem&#xE1;s, proteoglicanos y glicoprote&#xED;nas ECM son componentes de la cicatriz glial que act&#xFA;a como una barrera para el crecimiento regeneraci&#xF3;n de los axones. En comparaci&#xF3;n con el ax&#xF3;n nervioso central, se sabe menos sobre las se&#xF1;ales que las neuronas motoras de gu&#xED;a hacia sus objetivos perif&#xE9;ricos. Debido a que estamos interesados &#x200B;&#x200B;en los efectos de la gliales derivadas de los proteoglicanos sulfato de condroitina (CSPGs), hemos desarrollado un sistema modelo para investigar la influencia de mol&#xE9;culas de la matriz gliales derivadas en consecuencia las motoneuronas y la supervivencia. Se utiliz&#xF3; cultivos de motoneuronas embrionarias de rat&#xF3;n para investigar los efectos del crecimiento de axones de las mol&#xE9;culas de la matriz producida por el glial-derivado l&#xED;neas de c&#xE9;lulas A7, Neu7, y Oli-neu astrocitos primarios as&#xED;como la l&#xED;nea de la c&#xE9;lula de Schwann inmortalizado IMS32. Los resultados indican que las mol&#xE9;culas de la ECM, especialmente sulfatos de condroitina, juegan un papel importante como promotora del crecimiento axonal se&#xF1;ales. Se pudo demostrar un efecto modificador de los componentes de la matriz sobre la supervivencia de las motoneuronas y la apoptosis inducida por caspase3. &#xA9; 2010 Wiley-Liss, Inc.

Influencia de las mol&#xE9;culas de la matriz gliales derivadas, especialmente sulfatos de condroitina, el crecimiento de las neuritas y la supervivencia de las motoneuronas embrionarias de rat&#xF3;n cultivadas

&#x63A7;&#x5236;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x5B58;&#x6D3B;&#x548C;&#x518D;&#x751F;&#x7684;&#x673A;&#x5236;&#x53D1;&#x5C55;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x4E2D;&#xFF0C;&#x51FA;&#x751F;&#x540E;, &#x548C;&#x75C5;&#x53D8;&#x7684;&#x6761;&#x4EF6;&#x4E0B;&#x53D1;&#x6325;&#x4E86;&#x91CD;&#x8981;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;&#x80DA;&#x80CE;&#x5C0F;&#x9F20;&#x79BB;&#x4F53;&#x8FD0;&#x52A8;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x5DF2;&#x7ECF;&#x7814;&#x7A76;&#x8FD9;&#x79CD;&#x57FA;&#x672C;&#x673A;&#x5236;&#x7684;&#x6709;&#x7528;&#x5DE5;&#x5177;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x8FD0;&#x52A8;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x53D6;&#x51B3;&#x4E8E;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5916;&#x57FA;&#x8D28; (ECM) &#x7684;&#x5206;&#x5B50;&#xFF0C;&#x662F;&#x70C8;&#x6027;&#x8C03;&#x89E3;&#x8005;&#x7684;&#x5B58;&#x6D3B;&#x548C;&#x8F74;&#x7A81;&#x751F;&#x957F;&#x548C;&#x6307;&#x5BFC;&#x5728;&#x4E2D;&#x67A2;&#x795E;&#x7ECF;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x4E2D;&#xFF0C;&#x5E76;&#x5728;&#x4F53;&#x5916;&#xFF0C;&#x5C55;&#x793A;&#x65E2;&#x6709;&#x5438;&#x5F15;&#x529B;&#x6216;&#x62D2;&#x6307;&#x5BFC;&#x63D0;&#x793A;&#x3002;&#x6B64;&#x5916;&#xFF0C;ECM &#x86CB;&#x767D;&#x591A;&#x7CD6;&#x548C;&#x7CD6;&#x86CB;&#x767D;&#x662F;&#x4F5C;&#x4E3A;&#x518D;&#x751F;&#x8F74;&#x7A81;&#x751F;&#x957F;&#x969C;&#x788D;&#x7684;&#x80F6;&#x8D28;&#x7622;&#x75D5;&#x7684;&#x7EC4;&#x4EF6;&#x3002;CNS &#x8F74;&#x7A81;&#x4EA7;&#x7269;&#x4E0E;&#x76F8;&#x6BD4;&#xFF0C;&#x5C11;&#x662F;&#x77E5;&#x7684;&#x6307;&#x5BFC;&#x5BF9;&#x5176;&#x5468;&#x8FB9;&#x7684;&#x76EE;&#x6807;&#x8FD0;&#x52A8;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x7684;&#x7EBF;&#x7D22;&#x3002;&#x56E0;&#x4E3A;&#x6211;&#x4EEC;&#x611F;&#x5174;&#x8DA3;&#x7684;&#x80F6;&#x8D28;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6E90;&#x6027;&#x786B;&#x9178;&#x8F6F;&#x9AA8;&#x7D20;&#x86CB;&#x767D;&#x591A;&#x7CD6; (CSPGs) &#x7684;&#x5F71;&#x54CD;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x5DF2;&#x5236;&#x8BA2;&#x4E86;&#x8C03;&#x67E5;&#x5BF9;&#x8FD0;&#x52A8;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x4EA7;&#x7269;&#x548C;&#x751F;&#x5B58;&#x7684;&#x80F6;&#x8D28;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6E90;&#x6027;&#x57FA;&#x8D28;&#x5206;&#x5B50;&#x5F71;&#x54CD;&#x7684;&#x6A21;&#x578B;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x7528;&#x4E8E;&#x4F53;&#x5916;&#x57F9;&#x517B;&#x7684;&#x5C0F;&#x9F20;&#x80DA;&#x80CE;&#x8FD0;&#x52A8;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x8F74;&#x7A81;&#x751F;&#x957F;&#x6548;&#x5E94;&#x4EA7;&#x751F;&#x7684;&#x80F6;&#x8D28;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6E90;&#x6027;&#x7684;&#x5355;&#x5143;&#x683C; A7&#x3001; Neu7&#xFF0C;&#x4EE5;&#x53CA;&#x516C;&#x5F00;&#x8FDB;&#x4FEE;&#x5B66;&#x9662;&#x65B0;&#x751F;&#x884C;&#x4E3B;&#x661F;&#x5F62;&#x80F6;&#x8D28;&#x7EC6;&#x80DE;&#xFF0C;&#x4EE5;&#x53CA;&#x6C38;&#x751F;&#x5316;&#x7684;&#x96EA;&#x65FA;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7CFB; IMS32 &#x7684;&#x77E9;&#x9635;&#x5206;&#x5B50;&#x7684;&#x8C03;&#x67E5;&#x3002;&#x7ED3;&#x679C;&#x8868;&#x660E;&#x5206;&#x5B50;&#x7684; ECM&#xFF0C;&#x7279;&#x522B;&#x662F;&#x786B;&#x9178;&#x8F6F;&#x9AA8;&#x7D20;&#x786B;&#x9178;&#x76D0;&#xFF0C;&#x53D1;&#x6325;&#x91CD;&#x8981;&#x4F5C;&#x7528;&#x4F5C;&#x4E3A;&#x8F74;&#x7A81;&#x751F;&#x957F;&#x4FC3;&#x8FDB;&#x63D0;&#x793A;&#x4FE1;&#x606F;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x53EF;&#x4EE5;&#x8BC1;&#x660E;&#x5BF9;&#x8FD0;&#x52A8;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x5B58;&#x6D3B;&#x53CA; caspase3 &#x8BF1;&#x5BFC;&#x7EC6;&#x80DE;&#x51CB;&#x4EA1;&#x7684;&#x77E9;&#x9635;&#x7EC4;&#x4EF6;&#x4FEE;&#x6539;&#x6548;&#x679C;&#x3002;

Mechanisms controlling neuronal survival and regeneration play an important role during development, after birth, and under lesion conditions. Isolated embryonic mouse motoneurons have been a useful tool for studying such basic mechanisms. These cultured motoneurons depend on extracellular matrix (ECM) molecules, which are potent mediators of survival and axonal growth and guidance in the CNS and in vitro, exhibiting either attractive or repellent guidance cues. Additionally, ECM proteoglycans and glycoproteins are components of the glial scar acting as a growth barrier for regenerating axons. Compared with CNS axon outgrowth, less is known about the cues that guide motoneurons toward their peripheral targets. Because we are interested in the effects of glial-derived chondroitin sulfate proteoglycans (CSPGs), we have worked out a model system for investigating the influences of glial-derived matrix molecules on motoneuron outgrowth and survival. We used cultured embryonic mouse motoneurons to investigate axon growth effects of matrix molecules produced by the glial-derived cell lines A7, Neu7, and Oli-neu primary astrocytes as well as the immortalized Schwann cell line IMS32. The results indicate that molecules of the ECM, especially chondroitin sulfates, play an important role as axon growth-promoting cues. We could demonstrate a modifying effect of the matrix components on motoneuron survival and caspase3-induced apoptosis.

M&#xE9;canismes de contr&#xF4;le la survie neuronale et la r&#xE9;g&#xE9;n&#xE9;ration jouer un r&#xF4;le important au cours du d&#xE9;veloppement, apr&#xE8;s la naissance, et dans des conditions de l&#xE9;sions. Isol&#xE9;s motoneurones embryonnaires de souris ont &#xE9;t&#xE9; un outil utile pour &#xE9;tudier ces m&#xE9;canismes de base. Ces motoneurones cultiv&#xE9;s d&#xE9;pendent de la matrice extracellulaire (ECM) de mol&#xE9;cules, qui sont de puissants m&#xE9;diateurs de la croissance axonale et la survie et d&#x26;#39;orientation dans le SNC et in vitro, pr&#xE9;sentant soit des signaux de guidage attractives ou r&#xE9;pulsives. En outre, les prot&#xE9;oglycanes et les glycoprot&#xE9;ines d&#x26;#39;ECM sont des composantes de la cicatrice gliale agissant comme une barri&#xE8;re de croissance pour les axones. En comparaison avec l&#x26;#39;axone du SNC excroissance, on en sait moins sur les indices qui motoneurones de guidage vers leurs cibles p&#xE9;riph&#xE9;riques. Parce que nous sommes int&#xE9;ress&#xE9;s aux effets de d&#xE9;riv&#xE9;s des cellules gliales prot&#xE9;oglycanes chondro&#xEF;tine sulfate (CSPG), nous avons travaill&#xE9; sur un syst&#xE8;me mod&#xE8;le pour &#xE9;tudier les influences de mol&#xE9;cules de la matrice d&#xE9;riv&#xE9;s des cellules gliales sur l&#x26;#39;excroissance des motoneurones et la survie. Nous avons utilis&#xE9; de culture motoneurones embryonnaires de souris pour &#xE9;tudier les effets de la croissance axonale mol&#xE9;cules de la matrice produites par des lign&#xE9;es de cellules gliales d&#xE9;riv&#xE9; A7, Neu7, et Oli-neu astrocytes primaires ainsi que la ligne de Schwann immortalis&#xE9; cellule IMS32. Les r&#xE9;sultats indiquent que les mol&#xE9;cules de la MEC, en particulier de chondro&#xEF;tine sulfates, jouent un r&#xF4;le important en tant axone favorisant la croissance des indices. Nous avons pu d&#xE9;montrer un effet de modifier des composants de la matrice sur la survie des neurones moteurs et caspase3 l&#x26;#39;apoptose induite par.

Mechanismen, die Steuerung der neuronalen &uuml;berleben und Regeneration Rolle eine wichtige w&auml;hrend der Entwicklung nach der Geburt und unter Bedingungen der L&auml;sion. Isolierte embryonale Maus Motoneurons wurden ein n&uuml;tzliches Werkzeug f&uuml;r solche grundlegenden Mechanismen zu studieren. Diese kultivierten Motoneurons h&auml;ngen von der extrazellul&auml;ren Matrix (ECM) Molek&uuml;le, die potente Mediatoren des &Uuml;berlebens und Axonales Wachstum und Anleitungen im ZNS und in Vitro, ausstellen entweder attraktiv oder abweisend-Anleitung-Hinweise sind. Dar&uuml;ber hinaus sind die ECM-Proteoglykane und Glykoproteine Komponenten der Gliazellen Narbe als eine Wachstums-Barriere f&uuml;r regenerierende Axone. Verglichen mit CNS Axon Auswuchs, ist weniger &uuml;ber die Cues bekannt, die Motoneurons in Richtung ihrer peripheren Ziele f&uuml;hren. Da wir die Wirkung von Chondroitinsulfat Gliazellen abgeleitete Proteoglykane (CSPGs) interessiert sind, haben wir ein Modellsystem zur Untersuchung der Einfl&uuml;sse von Gliazellen abgeleitete Matrix Molek&uuml;len auf Motoneuron Auswuchs und &Uuml;berleben ausgearbeitet. Wir verwendeten kultivierten embryonalen Maus Motoneurons Axon Wachstumseffekte Matrix Molek&uuml;le produziert durch die Gliazellen abgeleitete Zelle A7, Neu7 und Oli-Neu Zeilen prim&auml;re Astrozyten sowie der aufgrund fortgesetzter Schwann-Zelle IMS32 zu untersuchen. Die Ergebnisse zeigen, dass die Molek&uuml;le des ECM, insbesondere Chondroitin Sulfate, als Axon wachstumsf&ouml;rdernde Signale eine wichtige Rolle spielen. Wir k&ouml;nnten eine &Auml;nderung Wirkung der Matrix-Komponenten auf Motoneuron &uuml;berleben und caspase3-induzierten Apoptose demonstrieren.

Meccanismi di controllo della rigenerazione e la sopravvivenza neuronale svolgono un ruolo importante durante lo sviluppo, dopo la nascita e in condizioni di lesione. Motoneuroni isolato embrionali del mouse sono stati uno strumento utile per lo studio di tali meccanismi di base. Questi motoneuroni colti dipendono da molecole della matrice extracellulare (ECM), che sono potenti mediatori di sopravvivenza e di crescita assonale e di orientamento nel SNC e in vitro, esibendo sia spunti di orientamento attraente o repellenti. Inoltre, glicoproteine e proteoglicani ECM sono componenti della cicatrice glia che agisce come una barriera di crescita per la rigenerazione di assoni. Confrontato con escrescenza assone CNS, meno &egrave; conosciuto circa gli spunti che guidano i motoneuroni verso i loro bersagli periferici. Perch&eacute; ci interessa gli effetti dei proteoglicani gliali derivato Condroitin solfato (CSPG), abbiamo lavorato fuori un sistema modello per studiare le influenze delle molecole di matrice gliali derivato sul motoneurone escrescenza e sopravvivenza. Abbiamo usato motoneuroni colta embrionali del mouse per studiare gli effetti di crescita axon di molecole di matrice prodotti dal astrociti cellule gliali derivato linee A7, Neu7 e Oli-neu primaria cos&igrave; come la cellula di Schwann immortalata linea IMS32. I risultati indicano che molecole di ECM, soprattutto condroitina solfati, svolgono un ruolo importante come spunti growth-promoting assone. Noi potremmo dimostrare un effetto modificando dei componenti matrix sulla sopravvivenza del motoneurone e apoptosi indotta da caspase3.

&#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30ED;&#x30F3;&#x306E;&#x751F;&#x5B58;&#x3068;&#x518D;&#x751F;&#x3092;&#x5236;&#x5FA1;&#x3059;&#x308B;&#x30E1;&#x30AB;&#x30CB;&#x30BA;&#x30E0;&#x306F;&#x3001;&#x51FA;&#x751F;&#x5F8C;&#x3001;&#x75C5;&#x5909;&#x306E;&#x6761;&#x4EF6;&#x4E0B;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x958B;&#x767A;&#x6642;&#x306B;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x679C;&#x305F;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x5358;&#x96E2;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x80DA;&#x306E;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x904B;&#x52D5;&#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30ED;&#x30F3;&#x306F;&#x3001;&#x3053;&#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306A;&#x57FA;&#x672C;&#x7684;&#x306A;&#x30E1;&#x30AB;&#x30CB;&#x30BA;&#x30E0;&#x3092;&#x7814;&#x7A76;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x6709;&#x7528;&#x306A;&#x30C4;&#x30FC;&#x30EB;&#x3068;&#x306A;&#x3063;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x57F9;&#x990A;&#x904B;&#x52D5;&#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30ED;&#x30F3;&#x306F;&#x3001;&#x9B45;&#x529B;&#x7684;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x64A5;&#x6307;&#x5C0E;&#x306E;&#x624B;&#x304C;&#x304B;&#x308A;&#x306E;&#x3069;&#x3061;&#x3089;&#x304B;&#x3092;&#x793A;&#x3059;&#x4E2D;&#x67A2;&#x795E;&#x7D4C;&#x7CFB;&#x304A;&#x3088;&#x3073;in vitro&#x3067;&#x306E;&#x751F;&#x5B58;&#x3068;&#x8EF8;&#x7D22;&#x6210;&#x9577;&#x3068;&#x30AC;&#x30A4;&#x30C0;&#x30F3;&#x30B9;&#x306E;&#x5F37;&#x529B;&#x306A;&#x30E1;&#x30C7;&#x30A3;&#x30A8;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;&#x3067;&#x3042;&#x308A;&#x3001;&#x7D30;&#x80DE;&#x5916;&#x30DE;&#x30C8;&#x30EA;&#x30C3;&#x30AF;&#x30B9;&#xFF08;ECM&#xFF09;&#x5206;&#x5B50;&#x306B;&#x4F9D;&#x5B58;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3055;&#x3089;&#x306B;&#x3001;ECM&#x30D7;&#x30ED;&#x30C6;&#x30AA;&#x30B0;&#x30EA;&#x30AB;&#x30F3;&#x3068;&#x7CD6;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306F;&#x3001;&#x518D;&#x751F;&#x8EF8;&#x7D22;&#x306E;&#x6210;&#x9577;&#x306E;&#x969C;&#x58C1;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x4F5C;&#x7528;&#x3059;&#x308B;&#x30B0;&#x30EA;&#x30A2;&#x7622;&#x75D5;&#x306E;&#x30B3;&#x30F3;&#x30DD;&#x30FC;&#x30CD;&#x30F3;&#x30C8;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x4E2D;&#x67A2;&#x795E;&#x7D4C;&#x7CFB;&#x306E;&#x8EF8;&#x7D22;&#x4F38;&#x9577;&#x3068;&#x6BD4;&#x8F03;&#x3057;&#x3066;&#x3001;&#x4EE5;&#x4E0B;&#x305D;&#x306E;&#x5468;&#x8FBA;&#x306E;&#x76EE;&#x6A19;&#x306B;&#x5411;&#x304B;&#x3063;&#x3066;&#x30AC;&#x30A4;&#x30C9;&#x904B;&#x52D5;&#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30ED;&#x30F3;&#x305D;&#x306E;&#x624B;&#x304C;&#x304B;&#x308A;&#x306B;&#x3064;&#x3044;&#x3066;&#x77E5;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x30B0;&#x30EA;&#x30A2;&#x7D30;&#x80DE;&#x7531;&#x6765;&#x306E;&#x30B3;&#x30F3;&#x30C9;&#x30ED;&#x30A4;&#x30C1;&#x30F3;&#x786B;&#x9178;&#x30D7;&#x30ED;&#x30C6;&#x30AA;&#x30B0;&#x30EA;&#x30AB;&#x30F3;&#xFF08;&#x67D4;&#x6BDB;&#xFF09;&#x306E;&#x52B9;&#x679C;&#x306B;&#x8208;&#x5473;&#x3092;&#x6301;&#x3063;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x306E;&#x3067;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x904B;&#x52D5;&#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30ED;&#x30F3;&#x306E;&#x7A81;&#x8D77;&#x4F38;&#x9577;&#x3068;&#x751F;&#x5B58;&#x306B;&#x30B0;&#x30EA;&#x30A2;&#x7D30;&#x80DE;&#x7531;&#x6765;&#x30DE;&#x30C8;&#x30EA;&#x30C3;&#x30AF;&#x30B9;&#x5206;&#x5B50;&#x306E;&#x5F71;&#x97FF;&#x3092;&#x8ABF;&#x67FB;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x30B7;&#x30B9;&#x30C6;&#x30E0;&#x3092;&#x3057;&#x3066;&#x304D;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;&#x30B0;&#x30EA;&#x30A2;&#x7531;&#x6765;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x682A;A7&#x3001;Neu7&#x3001;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x30AA;&#x30EA;&#xB7;&#x795E;&#x7D4C;&#x306E;&#x4E3B;&#x661F;&#x72B6;&#x81A0;&#x7D30;&#x80DE;&#x306A;&#x3069;&#x306E;&#x4E0D;&#x6B7B;&#x5316;&#x30B7;&#x30E5;&#x30EF;&#x30F3;&#x7D30;&#x80DE;&#x682A;IMS32&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x751F;&#x6210;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x30DE;&#x30C8;&#x30EA;&#x30C3;&#x30AF;&#x30B9;&#x5206;&#x5B50;&#x306E;&#x8EF8;&#x7D22;&#x6210;&#x9577;&#x306E;&#x5F71;&#x97FF;&#x3092;&#x8ABF;&#x3079;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x57F9;&#x990A;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x80CE;&#x5150;&#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30ED;&#x30F3;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x7D50;&#x679C;&#x306F;&#x3001;&#x7279;&#x306B;ECM&#x306E;&#x5206;&#x5B50;&#x3001;&#x30B3;&#x30F3;&#x30C9;&#x30ED;&#x30A4;&#x30C1;&#x30F3;&#x786B;&#x9178;&#x306F;&#x3001;&#x8EF8;&#x7D22;&#x6210;&#x9577;&#x4FC3;&#x9032;&#x624B;&#x304C;&#x304B;&#x308A;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x679C;&#x305F;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x904B;&#x52D5;&#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30ED;&#x30F3;&#x306E;&#x751F;&#x5B58;&#x3068;&#x30AB;&#x30B9;&#x30D1;&#x30FC;&#x30BC;&#x8A98;&#x5C0E;&#x30A2;&#x30DD;&#x30C8;&#x30FC;&#x30B7;&#x30B9;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x30DE;&#x30C8;&#x30EA;&#x30C3;&#x30AF;&#x30B9;&#x6210;&#x5206;&#x306E;&#x4FEE;&#x98FE;&#x52B9;&#x679C;&#x3092;&#x5B9F;&#x8A3C;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#xC2E0;&#xACBD; &#xC0DD;&#xC874; &#xBC0F; &#xC7AC;&#xC0DD; &#xC81C;&#xC5B4; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998; &#xCD9C;&#xC0DD; &#xD6C4;, &#xACE0; &#xBCD1; &#xBCC0; &#xC870;&#xAC74; &#xD558;&#xC5D0;&#xC11C; &#xAC1C;&#xBC1C; &#xD558;&#xB294; &#xB3D9;&#xC548; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xD55C;&#xB2E4;. &#xACA9;&#xB9AC; &#xB41C; &#xBC30;&#xC544; &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4; motoneurons &#xAC19;&#xC740; &#xAE30;&#xBCF8; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998;&#xC744; &#xACF5;&#xBD80; &#xD558;&#xB294; &#xB370; &#xC720;&#xC6A9;&#xD55C; &#xB3C4;&#xAD6C;&#xAC00; &#xB418;&#xC5C8;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xAD50;&#xC591;&#xB41C; motoneurons &#xB9E4;&#xB825;&#xC801;&#xC778; &#xB610;&#xB294; &#xAD6C; &#xCDA9; &#xC81C; &#xC9C0;&#xCE68; &#xB2E8;&#xC11C; &#xC911; &#xC804;&#xC2DC; &#xC0DD;&#xC874; &#xBC0F; axonal &#xC131;&#xC7A5;&#xACFC; CNS&#xC640; &#xC2DC;&#xD5D8;&#xAD00;, &#xC9C0;&#xCE68;&#xC758; &#xAC15;&#xB825;&#xD55C; &#xC911;&#xC7AC;&#xC790;&#xB294; &#xC138;&#xD3EC; &#xC678; &#xAE30;&#xC9C8; (ECM) &#xBD84;&#xC790;&#xC5D0; &#xB530;&#xB77C; &#xB2EC;&#xB77C; &#xC9D1;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB610;&#xD55C;, ECM proteoglycans &#xBC0F; glycoproteins&#xB294; &#xCD95; &#xC0AD; &#xC7AC;&#xC0DD;&#xC744; &#xC704;&#xD55C; &#xC131;&#xC7A5; &#xC7A5;&#xBCBD; &#xC5ED;&#xD560; &#xAD50; &#xD749;&#xD130;&#xC758; &#xAD6C;&#xC131; &#xC694;&#xC18C;. CNS axon &#xD30C;&#xC0DD;&#xBB3C;&#xC5D0; &#xBE44;&#xD574; &#xB35C; motoneurons &#xC8FC;&#xBCC0; &#xBAA9;&#xD45C; &#xCABD;&#xC73C;&#xB85C; &#xC548;&#xB0B4; &#xD558;&#xB294; &#xC2E0;&#xD638;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC54C;&#xB824;&#xC838; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC; &#xAD50; &#xD30C;&#xC0DD; chondroitin &#xD669;&#xC0B0; proteoglycans (CSPGs)&#xC758; &#xD6A8;&#xACFC;&#xC5D0; &#xAD00;&#xC2EC;&#xC774; &#xC788;&#xAE30; &#xB54C;&#xBB38;&#xC5D0;, &#xC6B0;&#xB9AC; motoneuron &#xD30C;&#xC0DD;&#xBB3C; &#xBC0F; &#xC0DD;&#xC874;&#xC5D0; &#xD30C;&#xC0DD; &#xB41C; &#xAD50; &#xB9E4;&#xD2B8;&#xB9AD;&#xC2A4; &#xBD84;&#xC790;&#xC758; &#xC601;&#xD5A5;&#xC744; &#xC870;&#xC0AC; &#xD558;&#xAE30; &#xC704;&#xD55C; &#xBAA8;&#xB378; &#xC2DC;&#xC2A4;&#xD15C; &#xBC16;&#xC73C;&#xB85C; &#xC77C; &#xD588;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xD30C;&#xC0DD; &#xB41C; glial &#xC138;&#xD3EC; &#xB77C;&#xC778; a 7, Neu7, &#xADF8;&#xB9AC;&#xACE0; Oli neu &#xAE30;&#xBCF8; &#xC774;&#xB2E4; &#xBD88;&#xBA78; &#xD558; &#xAC8C; Schwann &#xC138;&#xD3EC; &#xB77C;&#xC778; ims32&#xC5D0;&#xC11C; &#xC0DD;&#xC0B0; &#xB418;&#xB294; &#xB9E4;&#xD2B8;&#xB9AD;&#xC2A4; &#xBD84;&#xC790;&#xC758; &#xCD95; &#xC0AD; &#xC131;&#xC7A5; &#xD6A8;&#xACFC; &#xC870;&#xC0AC; &#xD558;&#xAE30; &#xC704;&#xD574; &#xAD50;&#xC591;&#xB41C; &#xBC30;&#xC544; &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4; motoneurons&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD588;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xACB0;&#xACFC; ECM, &#xD2B9;&#xD788; chondroitin &#xD669;&#xC0B0; &#xBD84;&#xC790; &#xCD95; &#xC0C9; &#xC131;&#xC7A5; &#xCD94;&#xC9C4; &#xD45C;&#xD604;&#xC73C;&#xB85C; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0C5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC; motoneuron &#xC0DD;&#xC874;&#xACFC; caspase3 &#xC720;&#xB3C4; apoptosis&#xC5D0; &#xB9E4;&#xD2B8;&#xB9AD;&#xC2A4; &#xAD6C;&#xC131;&#xC758; &#xC218;&#xC815; &#xD6A8;&#xACFC; &#xC124;&#xBA85;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Mecanismos de control de la supervivencia neuronal y la regeneraci&#xF3;n de desempe&#xF1;ar un papel importante durante el desarrollo, despu&#xE9;s del nacimiento, y en condiciones de lesi&#xF3;n. Motoneuronas aislados de embriones de rat&#xF3;n han sido una herramienta &#xFA;til para el estudio de estos mecanismos b&#xE1;sicos. Estas neuronas motoras cultivadas dependen de la matriz extracelular (ECM) mol&#xE9;culas, que son potentes mediadores de la supervivencia, crecimiento y axonal y orientaci&#xF3;n en el sistema nervioso central e in vitro, que muestran tanto las se&#xF1;ales de orientaci&#xF3;n atractivas o repelentes. Adem&#xE1;s, proteoglicanos y glicoprote&#xED;nas ECM son componentes de la cicatriz glial que act&#xFA;a como una barrera para el crecimiento regeneraci&#xF3;n de los axones. En comparaci&#xF3;n con el ax&#xF3;n nervioso central, se sabe menos sobre las se&#xF1;ales que las neuronas motoras de gu&#xED;a hacia sus objetivos perif&#xE9;ricos. Debido a que estamos interesados &#x200B;&#x200B;en los efectos de la gliales derivadas de los proteoglicanos sulfato de condroitina (CSPGs), hemos desarrollado un sistema modelo para investigar la influencia de mol&#xE9;culas de la matriz gliales derivadas en consecuencia las motoneuronas y la supervivencia. Se utiliz&#xF3; cultivos de motoneuronas embrionarias de rat&#xF3;n para investigar los efectos del crecimiento de axones de las mol&#xE9;culas de la matriz producida por el glial-derivado l&#xED;neas de c&#xE9;lulas A7, Neu7, y Oli-neu astrocitos primarios, as&#xED; como la l&#xED;nea de la c&#xE9;lula de Schwann inmortalizado IMS32. Los resultados indican que las mol&#xE9;culas de la ECM, especialmente sulfatos de condroitina, juegan un papel importante como promotora del crecimiento axonal se&#xF1;ales. Se pudo demostrar un efecto modificador de los componentes de la matriz sobre la supervivencia de las motoneuronas y la apoptosis inducida por caspase3.

Alice Klausmeyer

Institute for Cellmorphology and molecular Neurobiology,
Group for Cellbiology,
Institute for Cellmorphology and molecular Neurobiology, Group for Cellbiology

Ruhr-University Bochum

Lectin-based Isolation and Culture of Mouse Embryonic Motoneurons

Alice Klausmeyer

.css-o250i3{font-size:18px;font-family:Open Sans,sans-serif;line-height:21.6px;}Institute for Cellmorphology and molecular Neurobiology,Group for Cellbiology,Institute for Cellmorphology and molecular Neurobiology, Group for Cellbiology

Ruhr-University Bochum

Lectin-based Isolation and Culture of Mouse Embryonic Motoneurons

Institute for Cellmorphology and molecular Neurobiology,
Group for Cellbiology,
Institute for Cellmorphology and molecular Neurobiology, Group for Cellbiology