Detecção de Mitofagia em Caenorhabditis elegans e Células de Mamíferos Usando Corantes Organel-Específicos

A degradação das mitocôndrias danificadas pela mitofagia é essencial para o funcionamento da rede mitocondrial. Infelizmente, esse processo diminui com a idade. Desenvolvemos e utilizamos fármacos que ativam a mitofagia, promovendo assim o envelhecimento saudável para compreender a função da mitofagia no envelhecimento e em doenças relacionadas com a idade, incluindo a doença de Alzheimer.

Um dos maiores desafios é medir o processo mitofágico sem afetá-lo. Estudos recentes têm demonstrado que a expressão de GFP nas mitocôndrias das células musculares induz estresse, ou seja, MT UPR. Portanto, o uso de corantes em animais ou células não transgênicas é essencial e complementa as tecnologias genéticas.

Nosso protocolo tem três vantagens principais. Primeiro, não há necessidade de gerar animais transgênicos ou células que expressem biossensores de mitofagia. Em segundo lugar, não há necessidade de infraestrutura e experiência caras, como no caso da microscopia eletrônica.

E terceiro, o coquetel de corante organela está disponível comercialmente e o protocolo é simples e rápido. O novo composto ativador de mitofagia VL-850 induz mitofagia robusta e, desta forma, protege do estresse oxidativo e promove a vida útil. Agora, a grande questão é determinar o mecanismo de ação subjacente.

Exploramos o mecanismo em vários níveis, do celular ao organismo, usando C.elegans e células de mamíferos.