Para começar, registre o peso de cada camundongo, posicione o camundongo eutanasiado em uma orientação supina e prenda seus membros com fita adesiva. Utilizar álcool isopropílico a 70% para esterilizar a área cirúrgica. Em seguida, crie uma incisão na linha média na pele começando do abdome médio até a região cervical anterior.
Para acessar a traqueia, retraia cuidadosamente as almofadas de gordura, mova lateralmente os músculos da alça e separe a traqueia do tecido conjuntivo circundante. Usando fórceps, crie um espaço entre a traqueia e o esôfago. Em seguida, levante o xifoide e corte o diafragma.
Insira um hemostático para elevar o esterno para um caminho desobstruído do esterno até a região do pescoço. Aperte a caixa torácica em ambos os lados e corte o esterno que se estende pelos músculos do pescoço. Agora remova o timo e qualquer gordura ou músculo que obstrua a traqueia para expor a bifurcação traqueal.
Corte os brônquios principais e separe cuidadosamente as vias aéreas do esôfago. Depois, corte a laringe e remova-a. Borrifar a traqueia dissecada com soro fisiológico estéril ou solução de preservação.
Use gaze estéril embebida em soro fisiológico estéril ou solução de preservação e coloque-a no gelo para manter a viabilidade. Depois de anestesiar levemente o camundongo e uma câmara de indução, injetar intraperitonealmente um coquetel composto por xilazina e cetamina. Retornar o mouse à câmara de indução com 2 a 3% de isoflurano mantido.
Em seguida, raspe o pelo no local da cirurgia. Confirmar a ausência de resposta reflexa a uma pinça do pododáctilo antes da intubação orotraqueal. Usando um cateter intravenoso de calibre 20, intubar o camundongo orotraquealmente e conectá-lo a um ventilador com oxigênio a 50% e isoflurano a 2%.
Agora, ative uma almofada de aquecimento e posicione o mouse em uma posição lateral direita sobre a almofada com a cabeça afastada do cirurgião e a cauda em direção ao cirurgião. Em seguida, prenda os membros com fita adesiva. Aplique pomada veterinária nos olhos para evitar o ressecamento durante a anestesia.
Esfregar a área cirúrgica primeiro com iodopovidona 7,5, depois álcool isopropílico a 70% e, finalmente, com iodopovidona a 10%. Durante esse tempo, carregar a traqueia do doador em um cateter intravenoso de calibre 16. Depois de fazer uma incisão na pele do receptor, cauterize o músculo e o tecido conjuntivo.
Com dois afastadores, abra o quinto ou sexto espaço intercostal e mantenha a caixa torácica aberta. Em seguida, use cotonetes e tesouras para dissecar o ligamento pulmonar inferior. Simular a criação do trajeto para a traqueia do doador.
Para fixar o tubo de saída do ventilador, oclua-o parcialmente com uma torneira de três vias para facilitar a insuflação do pulmão esquerdo. Puncione o pulmão esquerdo com uma agulha de calibre 20 para criar um caminho. Em seguida, insira o cateter intravenoso de calibre 16 no pulmão esquerdo e extruse a traqueia do doador nele.
Após a inserção do aloenxerto traqueal, solte a torneira de três vias para permitir o fluxo expiratório desobstruído através do tubo de saída. Para fechar o local da injeção pleural, posicione o clipe precisamente no local da punção com sua borda alinhada ao contorno da borda pulmonar. Em seguida, preencha a cavidade torácica com solução salina e absorva o soro fisiológico com gaze.
Reinsuflar o pulmão esquerdo e fechar as costelas usando uma sutura contínua. Fechar o músculo e a pele com suturas interrompidas. Agora, desligue o isoflurano e administre o analgésico meloxicam por via subcutânea ao final da cirurgia.
Observe o mouse receptor até que ele esteja acordado. Em seguida, remova o tubo traqueal e coloque o mouse receptor em uma gaiola. Um aloenxerto traqueal exibiu obstrução completa com tecido fibroblástico, e as células epiteliais foram visivelmente destruídas.
Por outro lado, um isoenxerto traqueal permaneceu patente, e as células epiteliais foram preservadas. Agregados linfoides foram observados no pulmão com o aloenxerto traqueal transplantado.
