Agradecemos ao Harry Frank Guggenheim Foundation e da Ciência Natural e Pesquisa de Engenharia Council of Canada para subvenções a SMP que apoiaram a investigação que levou ao desenvolvimento desses métodos.

1. Equipamentos e quarto Configurar <ol><li> O aparelho de reprodução caixa é uma caixa, Plexiglas transparente medindo 50 cm x 50 cm x 50 cm, com 1-2 cm de cama corncob padrão. </li><li> Todos filmagem é conduzida no escuro através de uma câmara de vídeo portátil, na opção noite-shot. </li><li> A câmera de vídeo é colocada em um ângulo de 45 ° para baixo, de frente para a caixa jogo em um tripé. Todos os quatro cantos deve ser visível na foto para obter uma visão completa do aparelho. </li></ol> 2. Metodologia <ol><li> Os animais são desmamados entre 21-23 dias pós-natal. Dependendo do design experimental, os animais podem ser alojados em grupos de 2-4 nas combinações requeridos sexo masculino e feminino. </li><li> Testes de jogo ocorre durante o ciclo de luz de um animal, embora testes ocorre em um ambiente escuro. A sala de teste deve ser escuro, antes da entrada dos animais. </li><li> Grupos alojados juntos estão habituados, durante três consecutivos de 30 minutos, as sessões directamente antes de testaring seguindo a mesma sequência, como se está sendo testado (ver 2.5). </li><li> Após habituação, os pares são isolados individualmente 24 horas antes do teste, para maximizar as interações lúdicas (ver 2.5). </li><li> Os animais são transportados para uma sala escura e testes são depois colocados individualmente no aparelho de reprodução e testado como pares, durante 10 min. Temas são então removidos e colocados em conjunto na sua gaiola de origem. </li><li> Após cada sessão de jogo, de cama é descartado e o aparelho de reprodução é completamente limpas usando o anti-séptico Virkon (ou seu equivalente). Este é um agente superior para a limpeza dos odores de rato a partir do par anterior, uma vez que não deixe o cheiro forte e persistente de álcool ou sprays. Cobertura de pulverização pode também ser utilizado para mascarar quaisquer aromas desprendidos pelos sujeitos. Cama nova é então adicionado. </li><li> Repetir os passos (2,4-2,6) para ensaios adicionais. </li></ol> 3. Análise Comportamental: Avaliando o conteúdo do Jogo Em primeiro lugar, oalvos distintos disputavam por ratos em ambos combate sério e jogar lutando fazer esta espécie particularmente valioso como objeto de pesquisa para o estudo de jogo, como o escalonamento de brincalhão para combate sério pode ser inequivocamente detectado por uma mudança nas metas de corpo 35. Em segundo lugar, o número de ataques lançados contra a nuca do parceiro pode ser medido. Terceiro lugar, dado que a defesa é contingente no ataque, a defesa relativa do destinatário de ataques pode ser medido como a proporção de ataques defendidos. Quarto, quando a defesa contra um ataque nuca, o destinatário pode usar uma das várias táticas para proteger ou libertar sua nuca do focinho do seu parceiro 15, 25, 26. Essas táticas se dividem em duas categorias principais. <ol><li> Na evasão, o defensor pode caminhar, correr, saltar ou esquivar (Figura 2a), e, ao fazê-lo, não só se move de sua nuca longe de seu agressor, mas também acaba de costas para seu agressor (Vídeo de def evasiva<html> ense). </li><li> Na frente da defesa, o zagueiro se vira para o seu atacante, assim, não só a retirada de sua nuca distância, mas também justapondo seus dentes entre sua nuca e focinho do atacante. Voltado para a defesa cai em duas categorias principais: a rotação em torno do eixo longitudinal do corpo e de rotação, horizontalmente, em torno de um eixo vertical (normalmente entre a anca e do corpo médio, embora isso possa variar entre os 27 os sexos). Além disso, a rotação em torno do eixo longitudinal do corpo, pode tomar uma de duas formas. </li></ol><ol class="lalpha"><li> Rotação completa envolve o rato passar de uma posição em pé para totalmente supina (Figura 2B). Rotação parcial envolve o rato transformando seus quartos dianteiros, mas deixando uma ou ambas as patas traseiras em contacto com o solo (Figura 2C, vídeo para mostrar a diferença entre a rotação completa e rotação parcial). </li></ol>2 &quot;fo: conteúdo largura =&quot; 5in &quot;fo: src =&quot; / files/ftp_upload/4288/4288fig2highres.jpg &quot;src =&quot; files/ftp_upload/4288/4288fig2.jpg / &quot;/&gt; Figura 2. Três tipos de defesa em resposta a um ataque nuca lúdico são mostrados em 61 dias de idade os ratos machos (AC). A. Evasão. Após investida do atacante na nuca (a, b), o zagueiro desvia para longe do seu atacante (c). B. rotação completa. Um contato nuca por trás (a) leva o defensor para girar (b, c) até que seja deitado de costas e bloqueando o atacante com as patas estendidas (d). C. parcial rotação. Estocada de um atacante de nuca seu parceiro de lado (a, b) é seguido por uma rotação da cabeça, pescoço e ombros pelo defensor, então a retirada de sua nuca do focinho seu atacante, mantendo o apoio no chão com as patas traseiras (c). De Pellis et al 26;. Reimpresso com permissão de S. Karger AG, Basileia. <ol class="lalpha" start="2"><li> Rotação horizontal em torno do eixo vertical requires o defensor para mover seu traseiro fora de seu atacante enquanto se move a cabeça em direção ao seu parceiro (Figura 3, vídeo de rotação horizontal). </li><li> Na sequência da sua rotação em torno de imediato ou seu eixo vertical ou parcialmente em torno do seu eixo longitudinal, o defensor pode, então, traseira e empurrar contra seu parceiro, mostrando que o resultado, ao utilizar qualquer uma destas duas táticas, pode ser semelhante. Táticas de confusão com os resultados podem ser ainda mais impressionante quando se considera rotações completas e parciais. Quando um defensor executa uma rotação completa, o movimento é rápido e fluido - se em uma gravação em vídeo de 30 fps padrão, uma rotação para a plena supina leva 2-3 quadros e o movimento é contínuo (Vídeo). </li><li> A rotação parcial também pode acabar em uma posição totalmente deitada, mas isso normalmente envolve as acções concertadas do atacante. Neste caso, o defensor pode girar parcialmente seus quartos dianteiros e manter seu corpo horizontal ou até mesmo tocar ochão, mas o atacante pode pressionar seu peso corporal para o defensor. Com pressionando persistente e estendendo a mão para a nuca pelo atacante, o defensor gira mais e mais, até que esteja totalmente supina. Tal supina &quot;forçado&quot; ocorre de uma maneira staccato, com rotação incremental do corpo, e pode ter substancialmente mais do que três quadros de vídeo (Video mostrando uma rotação parcial que conduz à defesa adopção de uma posição supina). </li></ol> Tendo em conta que a maioria dos estudos está interessado nos efeitos de manipulações específicas sobre temas, o melhor é marcar a tática tentado pelo sujeito e não o resultado final, que pode ser forçado pelas ações de seu parceiro. Este julgamento pode ser feito através do exame dos movimentos da defesa dentro dos primeiros 2-3 frames de o início de uma acção de defesa (Video destacando os primeiros 2-3 quadros, quadro-a-frame). <ol start="3"><li> Ataques brincalhão pode ser medido quando o focinho de um rato ou contacts ou vem dentro de 1-2 cm de nuca seu parceiro (vídeo mostrando um ataque brincalhão comparação aos não-lúdicas movimentos próximos rato parceiro). </li></ol><ol class="lalpha"><li> Como observado acima, a tática defensiva do receptor podem ser categorizados nos primeiros quadros na sequência de um ataque. A nova seqüência começa com um novo ataque (vídeo mostrando longos sessões lúdicas comparação com ataques separados lúdicas). </li><li> Durante um brincalhão estendida lutar, tal como é mostrado na Figura 1, os ratos podem contra-atacar com sucesso, uma vez que se defendido, mas estes tipos de ataques são mais difíceis de pontuação, em particular no que diz respeito a uma reacção de defesa do parceiro. Porque contra-ataques são altamente correlacionadas com a freqüência de iniciar ataques 16, estas fases mais complexas de interações não precisam ser marcados a menos que haja uma boa razão para fazê-lo 23. A pontuação de ataques iniciando e as táticas empregared para se defender contra tais ataques são suficientes para captar as diferenças relativas nas brincadeiras e comportamento defensivo de ratos em diferentes condições experimentais 26, 29. </li></ol><img alt="Figura 3" fo:content-width="3.23in" fo:src="/files/ftp_upload/4288/4288fig3highres.jpg" src="/files/ftp_upload/4288/4288fig3.jpg" /> Figura 3. Diante defesa envolve um defesa virando-se para a sua articulação enquanto intruso sobre as patas traseiras em relação ao plano horizontal em torno de um eixo vertical (a, b). A partir desta posição, o defensor pode bloquear o acesso à sua nuca (c) e lançar um contra-ataque (d). De Pellis et al 25;. Adaptado e reproduzido com permissão da APA. Desde interações mais lúdicas começar com um ataque brincalhão, o número absoluto de tais ataques podem ser medidos no período de tempo de um teste experimental. O tamanho ideal do julgamento para os nossos estudos tem been 10 min após 24 horas de isolamento social 15, 16. Breves períodos de isolamento social aumenta a motivação para participar em jogos sociais enquanto não ter um efeito similar sobre o comportamento social, tais como investigação social 9. Apesar de qualquer quantidade de isolamento tem esse efeito, o impacto do isolamento na peça atinge uma assíntota de cerca de 24 h 27. Embora os ensaios de 5 min pode detectar tais isolamento induzidas-mudanças, eles são demasiado curtos para detectar diferenças subtis tais como aquelas entre os sexos, devido a um efeito de tecto - neste exemplo, a maior propensão para o sexo masculino para jogar principalmente emerge após os primeiros 5 min. Mesmo assim, por 15 minutos, os animais aparecem cansado pelo jogo vigoroso e, conseqüentemente, com duração de 10 min ensaios são um bom compromisso entre a economia do protocolo e da capacidade de detectar efeitos experimentais 15, 16, 27. Se testado na fase de claro ou escuro do ciclo dos ratos diariamente, a nossa experiência é que aumenta a quantidade de jogar se ªde e ratos são testados sob luz vermelha em vez de luz branca 15 e 16. Com o advento das câmaras de vídeo com capacidade de tiro noite, filmando no escuro é possível, e isso também aumenta a quantidade de jogos realizados em ensaios de teste 29. <ol start="4"><li> Dado que a defesa depende de uma ocorrência de ataque, defesa deve ser marcado como uma proporção de ataques que levam à defesa. Da mesma forma, dado que qualquer dado tipo de defesa depende de uma defesa ocorrendo, marcando tipos de defesa também deve ser em termos de proporções (por exemplo, das defesas que ocorreram, X% eram rotações completas). Pontuação de defesa como uma medida absoluta pode ser enganosa. Por exemplo, uma baixa freqüência de rotações completas podem surgir por causa de baixas taxas de ataque ou porque os assuntos em que determinada condição experimental utilizada a rotação completa raramente mesmo que tivessem sido atacados com a mesma freqüência que os animais na condição de controle. </li></ol><ol class = &quot;lalpha&quot;&gt; <li> Assim, quando marcou o jogo, há uma análise seqüencial: quantos ataques são lançados pelos sujeitos (número / unidade de tempo), quantos ataques são defendidos contra (ou seja, a probabilidade de defesa), e ao defender, o que é a probabilidade de utilizando as diferentes táticas de defesa (% táticas). </li></ol> 4. Análise Comportamental: Usando o Conteúdo do jogo para avaliar as relações parceiro desempenha Com o início da puberdade, há um declínio global no valor de combates jogo 8, 40. Isto é porque eles diminuem a frequência de seu lançamento de ataques nuca, mas manter a probabilidade, mesmo alto de defesa 17. Entre os ratos do sexo masculino, o padrão de jogo é modificada pelo desenvolvimento de relações de dominância que se aglutinam em torno da puberdade 37. Isso se reflete nos tipos de táticas defensivas utilizadas. <ol><li> No sexo masculino, com o início da puberdade, há uma diminuição relativa na sua utilizaçãoda tática rotação completa (vídeo diferente de rotação completa, como mostrado em partes acima) e um aumento no uso da tática rotação parcial (Vídeo diferentes de rotação parcial como show em peças acima), com os restantes a outras táticas sobre o mesmo freqüência em todas as idades 16. </li><li> No entanto, nos machos subordinados, ele é dependente de seu parceiro como a que essas táticas que usará. Ao jogar com outro macho subordinado ou uma mulher, um rato macho subordinado é mais provável usar a tática rotação parcial quando atacado, mas quando se joga com o macho dominante na colônia, é mais provável usar a tática rotação completa quando atacado 18 , 19, 24, 36. Assim, com o aparecimento de relações de dominância, a utilização relativa de táticas é um bom marcador para monitorar as mudanças nas relações sociais de um rato experimental subordinado 12. </li></ol>

<ol>
	<li>Aldis, O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Play Fighting. , (1975).</li><li>Blanchard, R. J., Blanchard, D. C., Takahashi, T., Kelley, M. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Attack+and+defensive+behaviour+in+the+albino+rat.">Attack and defensive behaviour in the albino rat.</a> Anim. Behav. 25, 622-634 (1977).</li><li>Fagen, R. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Animal Play Behavior. , (1981).</li><li>Field, E. F., Watson, N. V., Whishaw, I. Q., Pellis, S. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Play-fighting+in+androgen-insensitive+tfm+rats:+Evidence+that+androgen+receptors+are+critical+for+the+development+of+adult+playful+defense+but+not+playful+attack.">Play-fighting in androgen-insensitive tfm rats: Evidence that androgen receptors are critical for the development of adult playful defense but not playful attack.</a> Dev. Psychobiol. 48, 111-120 (2006).</li><li>Geist, V., Krames, L., Pliner, P., Alloway, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=On+weapons,+combat+and+ecology.">On weapons, combat and ecology.</a> Advances in the Study of Communication and Affect. 4, 1-30 (1978).</li><li>Kamitakahara, H., Monfils, M. -. H., Forgie, M. L., Kolb, B., Pellis, S. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+modulation+of+play+fighting+in+rats:+Role+of+the+motor+cortex.">The modulation of play fighting in rats: Role of the motor cortex.</a> Behav. Neurosci. 121, 164-176 (2007).</li><li>Kolb, B., Kolb, B., Tees, R. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Prefrontal+cortex.">Prefrontal cortex.</a> The Cerebral Cortex of the Rat. , 437-458 (1990).</li><li>Meaney, M. J., Stewart, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+descriptive+study+of+social+development+in+the+rat+(Rattus+norvegicus.">A descriptive study of social development in the rat (Rattus norvegicus.</a> Anim. Behav. 29, 34-45 (1981).</li><li>Panksepp, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+ontogeny+of+play+in+rats.">The ontogeny of play in rats.</a> Dev. Psychobiol. 14, 327-332 (1981).</li><li>Panksepp, J., Normansell, L., Cox, J. F., Siviy, S. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effects+of+neonatal+decortication+on+the+social+play+of+juvenile+rats.">Effects of neonatal decortication on the social play of juvenile rats.</a> Physiology and Behavior. 56, 429-443 (1994).</li><li>Pellis, S. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Agonistic+versus+amicable+targets+of+attack+and+defense:+Consequences+for+the+origin,+function+and+descriptive+classification+of+play-fighting.">Agonistic versus amicable targets of attack and defense: Consequences for the origin, function and descriptive classification of play-fighting.</a> Aggress. Behav. 14, 85-104 (1988).</li><li>Pellis, S. M., Bekoff, M., Allen, C., Burghardt, G. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Keeping+in+touch:+Play+fighting+and+social+knowledge.">Keeping in touch: Play fighting and social knowledge.</a> The Cognitive Animal: Empirical and Theoretical Perspectives on Animal Cognition. , 421-427 (2002).</li><li>Pellis, S. M., Bell, H. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Closing+the+circle+between+perceptions+and+behavior:+A+cybernetic+view+of+behavior+and+its+consequences+for+studying+motivation+and+development.">Closing the circle between perceptions and behavior: A cybernetic view of behavior and its consequences for studying motivation and development.</a> Dev. Cog. Neurosci. 1, 404-413 (2011).</li><li>Pellis, S. M., McKenna, M. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Intrinsic+and+extrinsic+influences+on+play+fighting+in+rats:+Effects+of+dominance,+partner's+playfulness,+temperament+and+neonatal+exposure+to+testosterone+propionate.">Intrinsic and extrinsic influences on play fighting in rats: Effects of dominance, partner's playfulness, temperament and neonatal exposure to testosterone propionate.</a> Behav. Brain Res. 50, 135-145 (1992).</li><li>Pellis, S. M., Pellis, V. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Play-fighting+differs+from+serious+fighting+in+both+target+of+attack+and+tactics+of+fighting+in+the+laboratory+rat+Rattus+norvegicus.">Play-fighting differs from serious fighting in both target of attack and tactics of fighting in the laboratory rat Rattus norvegicus.</a> Aggress. Behav. 13, 227-242 (1987).</li><li>Pellis, S. M., Pellis, V. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Differential+rates+of+attack,+defense+and+counterattack+during+the+developmental+decrease+in+play+fighting+by+male+and+female+rats.">Differential rates of attack, defense and counterattack during the developmental decrease in play fighting by male and female rats.</a> Dev. Psychobiol. 23, 215-231 (1990).</li><li>Pellis, S. M., Pellis, V. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Attack+and+defense+during+play+fighting+appear+to+be+motivationally+independent+behaviors+in+muroid+rodents.">Attack and defense during play fighting appear to be motivationally independent behaviors in muroid rodents.</a> Psych. Rec. 41, 175-184 (1991).</li><li>Pellis, S. M., Pellis, V. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Role+reversal+changes+during+the+ontogeny+of+play+fighting+in+male+rats:+Attack+versus+defense.">Role reversal changes during the ontogeny of play fighting in male rats: Attack versus defense.</a> Aggress. Behav. 17, 179-189 (1991).</li><li>Pellis, S. M., Pellis, V. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Juvenilized+play+fighting+in+subordinate+male+rats.">Juvenilized play fighting in subordinate male rats.</a> Aggress. Behav. 18, 449-457 (1992).</li><li>Pellis, S. M., Pellis, V. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+pre-juvenile+onset+of+play+fighting+in+rats+(Rattus+norvegicus.">The pre-juvenile onset of play fighting in rats (Rattus norvegicus.</a> Dev. Psychobiol. 31, 193-205 (1997).</li><li>Pellis, S. M., Pellis, V. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+play+fighting+of+rats+in+comparative+perspective:+A+schema+for+neurobehavioral+analyses.">The play fighting of rats in comparative perspective: A schema for neurobehavioral analyses.</a> Neurosci. Biobehav. Rev. 23, 87-101 (1998).</li><li>Pellis, S. M., Pellis, V. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+Playful+Brain.">The Playful Brain.</a> Venturing to the Limits of Neuroscience. , (2009).</li><li>Pellis, S. M., Pellis, V. C., Dewsbury, D. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Different+levels+of+complexity+in+the+playfighting+by+muroid+rodents+appear+to+result+from+different+levels+of+intensity+of+attack+and+defense.">Different levels of complexity in the playfighting by muroid rodents appear to result from different levels of intensity of attack and defense.</a> Aggress. Behav. 15, 297-310 (1989).</li><li>Pellis, S. M., Pellis, V. C., McKenna, M. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Some+subordinates+are+more+equal+than+others:+Play+fighting+amongst+adult+subordinate+male+rats.">Some subordinates are more equal than others: Play fighting amongst adult subordinate male rats.</a> Aggress. Behav. 19, 385-393 (1993).</li><li>Pellis, S. M., Pellis, V. C., McKenna, M. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+feminine+dimension+in+the+play+fighting+of+rats+(Rattus+norvegicus)+and+its+defeminization+neonatally+by+androgens.">A feminine dimension in the play fighting of rats (Rattus norvegicus) and its defeminization neonatally by androgens.</a> J. Comp. Psych. 108, 68-73 (1994).</li><li>Pellis, S. M., Pellis, V. C., Whishaw, I. Q. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+role+of+the+cortex+in+play+fighting+by+rats:+Developmental+and+evolutionary+implications.">The role of the cortex in play fighting by rats: Developmental and evolutionary implications.</a> Brain Behav. Evol. 39, 270-284 (1992).</li><li>Pellis, S. M., Field, E. F., Smith, L. K., Pellis, V. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Multiple+differences+in+the+play+fighting+of+male+and+female+rats.+Implications+for+the+causes+and+functions+of+play.">Multiple differences in the play fighting of male and female rats. Implications for the causes and functions of play.</a> Neurosci. Biobehav. Rev. 21, 105-120 (1997).</li><li>Pellis, S. M., Pellis, V. C., Pierce, J. D., Dewsbury, D. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Disentangling+the+contribution+of+the+attacker+from+that+of+the+defender+in+the+differences+in+the+intraspecific+fighting+of+two+species+of+voles.">Disentangling the contribution of the attacker from that of the defender in the differences in the intraspecific fighting of two species of voles.</a> Aggress. Behav. 18, 425-435 (1992).</li><li>Pellis, S. M., Hastings, E., Shimizu, T., Kamitakahara, H., Komorowska, J., Forgie, M. L., Kolb, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+effects+of+orbital+frontal+cortex+damage+on+the+modulation+of+defensive+responses+by+rats+in+playful+and+non-playful+social+contexts.">The effects of orbital frontal cortex damage on the modulation of defensive responses by rats in playful and non-playful social contexts.</a> Behav. Neurosci. 120, 72-84 (2006).</li><li>Reinhart, C. J., Pellis, S. M., McIntyre, D. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+development+of+play+fighting+in+kindling-prone+(FAST)+and+kindling-resistant+(SLOW)+rats:+How+does+the+retention+of+phenotypic+juvenility+affect+the+complexity+of+play.">The development of play fighting in kindling-prone (FAST) and kindling-resistant (SLOW) rats: How does the retention of phenotypic juvenility affect the complexity of play.</a> Dev. Psychobiol. 45, 83-92 (2004).</li><li>Reinhart, C. J., Metz, G., Pellis, S. M., McIntyre, D. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Play+fighting+between+kindling-prone+(FAST)+and+kindling-resistant+(SLOW)+rats.">Play fighting between kindling-prone (FAST) and kindling-resistant (SLOW) rats.</a> J. Comp. Psych. 120, 19-30 (2006).</li><li>Siviy, S. M., Panksepp, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Sensory+modulation+of+juvenile+play+in+rats.">Sensory modulation of juvenile play in rats.</a> Dev. Psychobiol. 20, 39-55 (1987).</li><li>Siviy, S. M., Baliko, C. N., Bowers, K. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Rough-and-tumble+play+behavior+in+Fischer-344+and+buffalo+rats:+Effects+of+social+isolation.">Rough-and-tumble play behavior in Fischer-344 and buffalo rats: Effects of social isolation.</a> Physiol. Behav. 61, 597-602 (1997).</li><li>Siviy, S. M., Love, N. J., DeCicco, B. M., Giordano, S. B., Seifert, T. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+relative+playfulness+of+juvenile+Lewis+and+Fischer-344+rats.">The relative playfulness of juvenile Lewis and Fischer-344 rats.</a> Physiol. Behav. 80, 385-394 (2003).</li><li>Smith, L. K., Fantella, S. -. L., Pellis, S. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Playful+defensive+responses+in+adult+male+rats+depend+upon+the+status+of+the+unfamiliar+opponent.">Playful defensive responses in adult male rats depend upon the status of the unfamiliar opponent.</a> Aggress. Behav. 25, 141-152 (1999).</li><li>Smith, L. K., Forgie, M. L., Pellis, S. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mechanisms+underlying+the+absence+of+the+pubertal+shift+in+the+playful+defense+of+female+rats.">Mechanisms underlying the absence of the pubertal shift in the playful defense of female rats.</a> Dev. Psychobiol. 33, 147-156 (1998).</li><li>Takahashi, L. K., Lore, R. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Play+fighting+and+the+development+of+agonistic+behavior+in+male+and+female+rats.">Play fighting and the development of agonistic behavior in male and female rats.</a> Aggress. Behav. 9, 217-227 (1983).</li><li>Taylor, G. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Fighting+in+juvenile+rats+and+the+ontogeny+of+agonistic+behavior.">Fighting in juvenile rats and the ontogeny of agonistic behavior.</a> J. Comp. Physiol. Psych. 94, 953-961 (1980).</li><li>Thor, D. H., Holloway, W. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Play+solicitation+behavior+in+juvenile+male+and+female+rats.">Play solicitation behavior in juvenile male and female rats.</a> Anim. Learn. Behav. 11, 173-178 (1983).</li><li>Thor, D. H., Holloway, W. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Developmental+analysis+of+social+play+behavior+in+juvenile+rats.">Developmental analysis of social play behavior in juvenile rats.</a> Bull. Psychon. Soc. 22, 587-590 (1984).</li><li>Vanderschuren, L. J. M. J., Niesink, R. J. M., van Ree, J. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+neurobiology+of+play+behavior+in+rats.">The neurobiology of play behavior in rats.</a> Neurosci. Biobehav. Rev. 21, 309-326 (1997).</li><li>Whishaw, I. Q., Kolb, B., Tees, R. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+decorticate+rat.">The decorticate rat.</a> Cerebral cortex of the rat. , 239-268 (1990).</li></ol>

Não há conflitos de interesse declarados.

Jogar luta é uma interação complexa, dinâmica em que os participantes continuamente influenciar cada comportamento do outro. Como conseqüência, um sistema de pontuação que é sensível a essa dinâmica ea natureza contingente das ações realizadas é necessário. O esquema descrito neste trabalho tem sido bem sucedida na comparação através sexos, diferenças individuais, através das diferenças de desenvolvimento, de deformação e para tratamentos experimentais 4, 14, 16, 20, 24, 29, 30, 31, 32, 32, 3...

O rato tem sido o animal mais intensivamente utilizados no laboratório com o qual a estudar o jogo 10, 21, 41, e várias tentativas têm sido feitas para desenvolver sistemas de pontuação para avaliar os efeitos dos tratamentos experimentais em jogo lutando 8, 9, 37, 38, 39. No entanto, embora estes sistemas têm tido algum sucesso no controlo da frequência de jogo, eles são menos adequados como formas de monitorar mudanças no conteúdo de jogo devido à sua falta de sensibilidade para a dinâmica da interação 13. O principal problema é que, durante a luta, o uso de táticas por um parceiro é muitas vezes dependente do desempenho de táticas específicas por outros 2 de 15. Desenvolvemos um sistema de pontuação que leva a dinâmica da interação em conta e assim é mais adequado para detectar e caracterizar as alterações subtis que ocorrem durante o jogo com manipulação experimental 16, 20, 26. Neste artigo, vamos nos concentrar naa medição das táticas defensivas realizadas pelo destinatário de um ataque brincalhão. Durante combate sério, os animais atacam e defendem metas específicas do corpo, utilizando sistemas de espécies típicas de armas 5. Em ratos, as armas primárias são os dentes, que são usados ​​para morder os flancos e dorso inferior 2. Luta grave tal é facilmente expostos num contexto residente intruso, em que um macho adulto desconhecido é introduzido na gaiola de um macho adulto residente 2, 15. Como em combate sério, em combates jogo, os animais também competem para ganhar alguma vantagem sobre um outro 1. Ratos, por exemplo, atacar e defender a nuca do pescoço 15, que se contactado é suavemente esfregou com o focinho 11, 32. Portanto, é possível discernir lúdicos ataques de ataques agressivos baseado não apenas na forma de interacções físicas (nuzzle vs morder), mas também sobre o corpo alvos atacados (nuca vsflancos e dorso inferior). Além disso, nuzzling brincalhão tal não deve ser confundido com a investigação social ou allogrooming. Investigação social envolve farejando o parceiro, mais freqüentemente na face e região anogenital. Porque estes comportamentos parecem coincidir com os comportamentos lúdicos, e, portanto, podem ser considerados os aspectos de interacções lúdicos, demonstrou-se que estas interacções sociais preceder brincadeira. Além disso, as mudanças na motivação para se envolver em investigação social são independentes das mudanças comparáveis ​​em jogo 9. Há várias características que distinguem allogrooming do jogo 20. Primeiro, allogrooming geralmente ocorre quando o amontoado ratos juntos após um período prolongado de jogar. Segundo, embora o ataque lúdico é centrada na nuca, allogrooming pode envolver o contacto com muitas partes do corpo do parceiro, embora, por vezes, é focada na nuca. Terceiro, esta preparação envolve suave mordiscando e puxando de tfur ele parceiro com os dentes. Em quarto lugar, ao contrário allogrooming, ataques mais lúdica para a nuca são defendidos pelo destinatário, o que leva a seqüências complexas de wrestling. O foco principal deste trabalho é mostrar o que pode ser proveitoso medida durante as seqüências complexas de jogo que podem incluir wrestling. Como mostrado abaixo, as várias táticas utilizadas pelo defensor para proteger sua liderança nuca a diferentes resultados possíveis. Estes resultados, como luta livre no chão, boxe ou perseguição, têm, em alguns estudos foram medidos como padrões de comportamento independentes, mas verificou-se que, na maioria dos casos, estes resultados dependem da tática defensiva adoptada pelo receptor de um nuca atacar 15. Por exemplo, táticas evasivas muitas vezes levar a persegue e rolar para as costas leva a luta. Assim, as medidas de resultado com base, como o boxe e wrestling, na verdade são compostos resultantes das acções de ambos os participantes. Usando umabordagem dinâmica, a estrutura proporciona um meio de marcar momentos na interacção quando as acções medidos são atribuíveis a apenas uma das 28 participantes, uma abordagem que serão mais evidentes ao leitor uma vez que os exemplos de como a estrutura de medição é utilizado são apresentados . Como mostrado na Figura 1, o rato à esquerda é visto outro aproximando da parte de trás (a), e em seguida atacando para a nuca do pescoço (b). No entanto, antes de o contacto é feito, o defesa gira em torno do eixo longitudinal do corpo (c), para enfrentar o seu atacante (d). Como o atacante se move para a frente, o defensor é empurrado para o lado (e), mas depois rola sobre suas costas como o atacante continua a chegar para a sua nuca (FH). A partir da posição supina, o defensor lança um ataque em direção a nuca seu parceiro (i), mas é bloqueado por pata traseira de seu parceiro (j, k). Seguindo uma outra tentativa de obter acesso a nuca do seu parceiro, o rato em top é empurrado para fora (l) por patas traseiras do animal de supino (m), o que permite, assim, o defensor original para recuperar o seu pé (n) e estocada para atacar nuca seu parceiro (o). <img src="/files/ftp_upload/4288/4288fig1.jpg" alt="Figura 1"/> Figura 1. Um par de jovens ratos machos é mostrado atacando e defendendo a nuca durante uma briga de jogo. De Pellis &amp; Pellis 15; reimpresso com permissão de John Wiley &amp; Sons.

<table border="1"><tbody><tr><td> Equipamento </td><td> Comentários (opcional) </td></tr><tr><td> Filmadora Sony DCR-DVD103 </td><td> Zoom óptico de 20x-, Noite tiro * Veja Abaixo </td></tr><tr><td> Jogar Aparelho </td><td> 50 X 50 X 50 centímetros Plexiglas </td></tr><tr><td></td><td> * Qualquer filmadora irá trabalhar para a gravação, apesar de um zoom óptico de 20x ou superior é desejado para zoom ideal. </td></tr></tbody></table>

peering into the dynamics of social interactions: measuring play fighting in rats

Jogar lutando no rato envolve ataque e defesa da nuca, que se contatado, é suavemente acariciou com o focinho. Porque os movimentos de um animal são contrariadas pelas ações de sua parceira, a luta é um jogo de interação, complexo e dinâmico. Esta complexidade dinâmica levanta problemas metodológicos sobre o que marcar para estudos experimentais. Nós apresentamos um esquema de pontuação que é sensível à natureza correlata das ações realizadas. A frequência de combate a peça pode ser medida por contagem do número de ataques de nuca lúdicas ocorrem por unidade de tempo. No entanto, a defesa brincalhão, como ele só pode ocorrer em resposta ao ataque, é necessariamente uma medida contingente que é melhor medida como uma porcentagem (# ataques defendeu / # total ataques X 100%). Como um ataque em particular é defendida contra pode envolver uma das várias táticas, e estes são contingentes na defesa tendo tido lugar e, conseqüentemente, o tipo de defesa também é melhor expressa como contingentementeuma percentagem. Duas experiências ilustram a forma como estas medidas podem ser usados ​​para detectar o efeito dos danos cerebrais em jogo luta, mesmo quando não há nenhum efeito sobre playfulness global. Isto é, o esquema aqui apresentado destina-se a detectar e avaliar mudanças no conteúdo de jogo após um tratamento experimental.

<html> Dois estudos ilustram a forma como o esquema de pontuação multi-facetado que desenvolvemos pode ser utilizado para diagnosticar os efeitos das manipulações experimentais no combate a reprodução de ratos. O primeiro mostra que o método pode ser usado para identificar o componente específico do jogo alterada por uma manipulação experimental e o segundo mostra como o método pode ser utilizado para medir alterações nas relações de sequência de uma manipulação experimental. (...

Watch this Scientific Journal Video about Peering into the Dynamics of Social Interactions: Measuring Play Fighting in Rats at JoVE.com

Peering into the Dynamics of Social Interactions: Measuring Play Fighting in Rats

Jogar lutando no rato envolve ataque e defesa da nuca, que se contatado, é suavemente acariciou com o focinho. Porque os movimentos de um animal são contrariadas pelas ações de sua parceira, a luta é um jogo de interação, complexo e dinâmico. Esta complexidade dinâmica levanta problemas metodológicos sobre o que marcar para estudos experimentais. Nós apresentamos um esquema de pontuação que é sensível à natureza correlata das ações realizadas. Duas experiências ilustram a forma como estas medidas podem ser usados ​​para detectar o efeito dos danos cerebrais em jogo luta, mesmo quando não há nenhum efeito sobre playfulness global. Isto é, o esquema aqui apresentado destina-se a detectar e avaliar mudanças na<emConteúdo&gt;</em&gt; De jogo após um tratamento experimental.

Perscrutando a dinâmica das interações sociais: Play medição Lutando em ratos

Play fighting in the rat involves attack and defense of the nape of the neck, which if contacted, is gently nuzzled with the snout. Because the movements ...

peering-into-dynamics-social-interactions-measuring-play-fighting

Research

JoVE Journal

Neuroscience

15.2K visualizações.  University of Lethbridge. Jogar lutando no rato envolve ataque e defesa da nuca, que se contatado, é suavemente acariciou com o focinho. Porque os movimentos de um animal são contrariadas pelas ações de sua parceira, a luta é um jogo de interação, complexo e dinâmico. Esta complexidade dinâmica levanta problemas metodológicos sobre o que marcar para estudos experimentais. Nós apresentamos um esquema de pontuação que é sensível à natureza correlata das ações realizadas. Duas exper...

Vídeo: Peering into the Dynamics of Social Interactions: Measuring Play Fighting in Rats

Combining Behavioral Endocrinology and Experimental Economics: Testosterone and Social Decision Making

Behavioral endocrinological research in humans as well as in animals suggests that testosterone plays a key role in social interactions. Studies in rodents have shown a direct link between testosterone and aggressive behavior1 and folk wisdom adapts these findings to humans, suggesting that testosterone induces antisocial, egoistic or even aggressive behavior2. However, many researchers doubt a direct testosterone-aggression link in humans, arguing instead that testosterone is primarily involved in status-related behavior3,4. As a high status can also be achieved by aggressive and antisocial means it can be difficult to distinguish between anti-social and status seeking behavior.
We therefore set up an experimental environment, in which status can only be achieved by prosocial means. In a double-blind and placebo-controlled experiment, we administered a single sublingual dose of 0.5 mg of testosterone (with a hydroxypropyl-&beta;-cyclodextrin carrier) to 121 women and investigated their social interaction behavior in an economic bargaining paradigm. Real monetary incentives are at stake in this paradigm; every player A receives a certain amount of money and has to make an offer to another player B on how to share the money. If B accepts, she gets what was offered and player A keeps the rest. If B refuses the offer, nobody gets anything. A status seeking player A is expected to avoid being rejected by behaving in a prosocial way, i.e. by making higher offers.
The results show that if expectations about the hormone are controlled for, testosterone administration leads to a significant increase in fair bargaining offers compared to placebo. The role of expectations is reflected in the fact that subjects who report that they believe to have received testosterone make lower offers than those who say they believe that they were treated with a placebo. These findings suggest that the experimental economics approach is sensitive for detecting neurobiological effects as subtle as those achieved by administration of hormones. Moreover, the findings point towards the importance of both psychosocial as well as neuroendocrine factors in determining the influence of testosterone on human social behavior.

The procedure described in this protocol shows that testosterone administration and folk beliefs about testosterone may be associated with directly opposed social behaviors.

Combinando Behavioral Endocrinologia e Economia Experimental: Decisão da testosterona e Social Fazendo

Behavioral endocrinological research in humans as well as in animals suggests that testosterone plays a key role in social interactions. Studies in ...

Neurociência

Brain Imaging Investigation of the Neural Correlates of Observing Virtual Social Interactions

The ability to gauge social interactions is crucial in the assessment of others&#x2019; intentions. Factors such as facial expressions and body language affect our decisions in personal and professional life alike 1. These "friend or foe" judgements are often based on first impressions, which in turn may affect our decisions to "approach or avoid". Previous studies investigating the neural correlates of social cognition tended to use static facial stimuli 2. Here, we illustrate an experimental design in which whole-body animated characters were used in conjunction with functional magnetic resonance imaging (fMRI) recordings. Fifteen participants were presented with short movie-clips of guest-host interactions in a business setting, while fMRI data were recorded; at the end of each movie, participants also provided ratings of the host behaviour. This design mimics more closely real-life situations, and hence may contribute to better understanding of the neural mechanisms of social interactions in healthy behaviour, and to gaining insight into possible causes of deficits in social behaviour in such clinical conditions as social anxiety and autism 3.

This article demonstrates an experimental design in which whole-body animated characters are used in conjunction with functional magnetic resonance imaging (fMRI) to investigate the neural correlates of observing virtual social interactions.

Investigação por imagem do cérebro os correlatos neurais da Observando Virtual Interações Sociais

The ability to gauge social interactions is crucial in the assessment of others&#x2019; intentions. Factors such as facial expressions and body language ...

Dual Electrophysiological Recordings of Synaptically-evoked Astroglial and Neuronal Responses in Acute Hippocampal Slices

Astrocytes form together with neurons tripartite synapses, where they integrate and modulate neuronal activity. Indeed, astrocytes sense neuronal inputs through activation of their ion channels and neurotransmitter receptors, and process information in part through activity-dependent release of gliotransmitters. Furthermore, astrocytes constitute the main uptake system for glutamate, contribute to potassium spatial buffering, as well as to GABA clearance. These cells therefore constantly monitor synaptic activity, and are thereby sensitive indicators for alterations in synaptically-released glutamate, GABA and extracellular potassium levels. Additionally, alterations in astroglial uptake activity or buffering capacity can have severe effects on neuronal functions, and might be overlooked when characterizing physiopathological situations or knockout mice. Dual recording of neuronal and astroglial activities is therefore an important method to study alterations in synaptic strength associated to concomitant changes in astroglial uptake and buffering capacities. Here we describe how to prepare hippocampal slices, how to identify stratum radiatum astrocytes, and how to record simultaneously neuronal and astroglial electrophysiological responses. Furthermore, we describe how to isolate pharmacologically the synaptically-evoked astroglial currents.

The preparation of acute brain slices from isolated hippocampi, as well as the simultaneous electrophysiological recordings of astrocytes and neurons in stratum radiatum during stimulation of schaffer collaterals is described. The pharmacological isolation of astroglial potassium and glutamate transporter currents is demonstrated.

Dois registros eletrofisiológicos de sinapticamente evocadas Respostas astroglial e neuronal em fatias hipocampais agudas

Astrocytes form together with neurons tripartite synapses, where they integrate and modulate neuronal activity. Indeed, astrocytes sense neuronal inputs ...

Inducing Plasticity of Astrocytic Receptors by Manipulation of Neuronal Firing Rates

Close to two decades of research has established that astrocytes in situ and in vivo express numerous G protein-coupled receptors (GPCRs) that can be stimulated by neuronally-released transmitter. However, the ability of astrocytic receptors to exhibit plasticity in response to changes in neuronal activity has received little attention. Here we describe a model system that can be used to globally scale up or down astrocytic group I metabotropic glutamate receptors (mGluRs) in acute brain slices. Included are methods on how to prepare parasagittal hippocampal slices, construct chambers suitable for long-term slice incubation, bidirectionally manipulate neuronal action potential frequency, load astrocytes and astrocyte processes with fluorescent Ca2+ indicator, and measure changes in astrocytic Gq GPCR activity by recording spontaneous and evoked astrocyte Ca2+ events using confocal microscopy. In essence, a &#8220;calcium roadmap&#8221; is provided for how to measure plasticity of astrocytic Gq GPCRs. Applications of the technique for study of astrocytes are discussed. Having an understanding of how astrocytic receptor signaling is affected by changes in neuronal activity has important implications for both normal synaptic function as well as processes underlying neurological disorders and neurodegenerative disease.

Here we describe an adaptation of protocols used to induce homeostatic plasticity in neurons for the study of plasticity of astrocytic G protein-coupled receptors. Recently used to examine changes in astrocytic group I mGluRs in juvenile mice, the method can be applied to measure scaling of various astrocytic GPCRs, in tissue from adult mice in situ and in vivo, and to gain a better appreciation of the sensitivity of astrocytic receptors to changes in neuronal activity.

Induzir Plasticidade de astrocítica Receptores de Manipulação de Neuronal queima de moeda

Close to two decades of research has established that astrocytes in situ and in vivo express numerous G protein-coupled receptors (GPCRs) that can be ...

Peering at Brain Polysomes with Atomic Force Microscopy

The translational machinery, i.e., the polysome or polyribosome, is one of the biggest and most complex cytoplasmic machineries in cells. Polysomes, formed by ribosomes, mRNAs, several proteins and non-coding RNAs, represent integrated platforms where translational controls take place. However, while the ribosome has been widely studied, the organization of polysomes is still lacking comprehensive understanding. Thus much effort is required in order to elucidate polysome organization and any novel mechanism of translational control that may be embedded. Atomic force microscopy (AFM) is a type of scanning probe microscopy that allows the acquisition of 3D images at nanoscale resolution. Compared to electron microscopy (EM) techniques, one of the main advantages of AFM is that it can acquire thousands of images both in air and in solution, enabling the sample to be maintained under near physiological conditions without any need for staining and fixing procedures. Here, a detailed protocol for the accurate purification of polysomes from mouse brain and their deposition on mica substrates is described. This protocol enables polysome imaging in air and liquid with AFM and their reconstruction as three-dimensional objects. Complementary to cryo-electron microscopy (cryo-EM), the proposed method can be conveniently used for systematically analyzing polysomes and studying their organization.

While ribosome structure has been extensively characterized, the organization of polysomes is still understudied. To overcome this lack of knowledge, we present here a detailed preparation protocol for accurate imaging of mammalian polysomes by atomic force microscopy (AFM) in air and liquid.

Olhando para Cérebro polissomos com Microscopia de Força Atômica

The translational machinery, i.e., the polysome or polyribosome, is one of the biggest and most complex cytoplasmic machineries in cells. Polysomes, ...

Autonomous and Rechargeable Microneurostimulator Endoscopically Implantable into the Submucosa

Gastric dysmotility can be a sign of common diseases such as longstanding diabetes mellitus. It is known that the application of high-frequency low-energetic stimulation can help to effectively moderate and alleviate the symptoms of gastric dysmotility. The goal of the research was the development of a miniature, endoscopically implantable device to a submucosal pocket. The implantable device is a fully customized electronic package which was specifically designed for the purpose of experiments in the submucosa. The device is equipped with a lithium-ion battery which can be recharged wirelessly by receiving an incident magnetic field from the charging/transmitting coil. The uplink communication is achieved in a MedRadio band at 432 MHz. The device was endoscopically inserted into the submucosal pocket of a live domestic pig used as an in vivo model, specifically in the stomach antrum. The experiment confirmed that the designed device can be implanted into the submucosa and is capable of bidirectional communication. The device can perform bipolar stimulation of muscle tissue.

The application of high-frequency low-energetic stimulation can alleviate the symptoms of gastric dysmotility. In this research, a miniature, endoscopically implantable and wirelessly rechargeable device which is implanted into a submucosal pocket is presented. Successful both-way communication and stimulation control were achieved during an experiment on live pig.

Autónoma e recarregável Microneurostimulator endoscopicamente implantável para a Submucosa

Gastric dysmotility can be a sign of common diseases such as longstanding diabetes mellitus. It is known that the application of high-frequency ...

Establishment of Acute Pontine Infarction in Rats by Electrical Stimulation

Pontine infarction is the most common stroke subtype in the posterior circulation, while there lacks a rodent model mimicking pontine infarction. Provided here is a protocol for successfully establishing a rat model of acute pontine infarction. Rats weighing about 250 g are used, and a probe with an insulated sheath is injected into the pons using a stereotaxic apparatus. A lesion is produced by the electrical stimulation with a single pulse. The Longa score, Berderson score, and beam balance test are used to assess neurological deficits. Additionally, the adhesive-removal somatosensory test is used to determine sensorimotor function, and the limb placement test is used to evaluate proprioception. MRI scans are then used to assess the infarction in vivo, and TTC staining is used to confirm the infarction in vitro. Here, a successful infarction is identified that is located in the anterolateral basis of the rostral pons. In conclusion, a new method is described to establish an acute pontine infarction rat model.

Presented here is a protocol for establishing acute pontine infarction in a rat model via electrical stimulation with a single pulse.

Estabelecimento de Infarto Agudo de Pontina em Ratos por Estimulação Elétrica

Pontine infarction is the most common stroke subtype in the posterior circulation, while there lacks a rodent model mimicking pontine infarction. Provided ...

Laser-Induced Brain Injury in the Motor Cortex of Rats

A common technique for inducing stroke in experimental rodent models involves the transient (often denoted as MCAO-t) or permanent (designated as MCAO-p) occlusion of the middle cerebral artery (MCA) using a catheter. This generally accepted technique, however, has some limitations, thereby limiting its extensive use. Stroke induction by this method is often characterized by high variability in the localization and size of the ischemic area, periodical occurrences of hemorrhage, and high death rates. Also, the successful completion of any of the transient or permanent procedures requires expertise and often lasts for about 30 minutes. In this protocol, a laser irradiation technique is presented that can serve as an alternative method for inducing and studying brain injury in rodent models.
When compared to rats in the control and MCAO groups, the brain injury by laser induction showed reduced variability in body temperature, infarct volume, brain edema, intracranial hemorrhage, and mortality. Furthermore, the use of a laser-induced injury caused damage to the brain tissues only in the motor cortex unlike in the MCAO experiments where destruction of both the motor cortex and striatal tissues is observed.
Findings from this investigation suggest that laser irradiation could serve as an alternative and effective technique for inducing brain injury in the motor cortex. The method also shortens the time for completing the procedure and does not require expert handlers.

The protocol presented here shows a technique to create a rodent model of brain injury. The method described here uses laser irradiation and targets motor cortex.

Lesão cerebral induzida por laser no córtex motor de ratos

A common technique for inducing stroke in experimental rodent models involves the transient (often denoted as MCAO-t) or permanent (designated as MCAO-p) ...

Measuring Transcellular Interactions through Protein Aggregation in a Heterologous Cell System

Protein interactions at cellular interfaces dictate a multitude of biological outcomes ranging from tissue development and cancer progression to synapse formation and maintenance. Many of these fundamental interactions occur in trans and are typically induced by heterophilic or homophilic interactions between cells expressing membrane anchored binding pairs. Elucidating how disease relevant mutations disrupt these fundamental protein interactions can provide insight into a myriad of cell biology fields. Many protein-protein interaction assays do not typically disambiguate between cis and trans interactions, which potentially leads to an overestimation of the extent of binding that is occurring in vivo and involve labor intensive purification of protein and/or specialized monitoring equipment. Here, we present an optimized simple protocol that allows for the observation and quantification of only trans interactions without the need for lengthy protein purifications or specialized equipment. The HEK cell aggregation assay involves the mixing of two independent populations of HEK cells, each expressing membrane-bound cognate ligands. After a short incubation period, samples are imaged and the resulting aggregates are quantified.

Here, we present an optimized protocol to rapidly and semiquantitatively measure ligand-receptor interactions in trans in a heterologous cell system using fluorescence microscopy.

Medindo interações transcelulares através da agregação de proteínas em um sistema celular heterologous

Protein interactions at cellular interfaces dictate a multitude of biological outcomes ranging from tissue development and cancer progression to synapse ...

The Joint Effect of Social Comparison and Social Distance on Evaluation of Intertemporal Choice Outcomes in Event-related Potential Studies

Intertemporal choice plays a crucial role in our daily lives, influencing decisions related to education, health, consumption, and investment. This research proposes an innovative experimental protocol that examines how social comparison and social distance jointly affect the neural processes involved in outcome assessment for intertemporal choices. The study is based on the theoretical framework of cognitive resource competition. This protocol enables researchers to dynamically establish an indifference point for each participant, effectively eliminating the influence of any biased indifference points on the assessment of intertemporal choices. Consequently, the study solely measures the combined impact of social comparison and social distance on how participants evaluate intertemporal choice outcomes. The findings reveal that individuals are more inclined to opt for immediate outcomes under negative unfair conditions. Moreover, compared to the fair and positive unfair conditions, people tend to undervalue delayed outcomes in the negative unfair condition. The strength of this approach lies in its dynamic indifference point setting, making it an effective method to investigate the influence of various external factors (such as social status and power level) on intertemporal decision-making. While the protocol is designed to measure electrophysiological events like event-related potentials, it can also be tailored for use with fMRI.

This protocol aims to investigate the neural activity related to social comparison and social distance during the processing of intertemporal decision outcomes. Indifference points will be measured using event-related potentials as part of the study.

O Efeito Conjunto da Comparação Social e da Distância Social na Avaliação de Resultados de Escolha Intertemporal em Estudos de Potencial Relacionado a Eventos

Intertemporal choice plays a crucial role in our daily lives, influencing decisions related to education, health, consumption, and investment. This ...