Os autores gostariam de agradecer o apoio da Australian National Health and Medical Research Council e da Universidade de Deakin. O trabalho realizado no laboratório da Universidade de Deakin Sensorial foi apoiado pelo Health and Medical Research Council Grant Nacional (1043780) (RSJK) e Horticultura Australia Limited (BS12006) (RSJK).

As seguintes técnicas foram aprovados para uso pelo Comitê de Ética em Pesquisa em Humanos da Universidade Deakin. 1. Demografia e Antropometria <ol><li> Informações demográficas registro de participantes, incluindo a data de nascimento e sexo. </li><li> No início do estudo (e outro estudo aponta se desenho de estudo temporal) ter altura e medidas de peso. Certifique-se que os participantes tenham tirado sapatos, casacos pesados ​​ou outras peças de vestuário, e ter removido todos os itens pesados ​​de seus bolsos. <ol><li> Meça a altura do participante usando um estadiômetro. Medições de registro para o cm mais próximo. </li><li> Pesar os participantes por meio de escalas dedicados. Grave peso para o g mais próximo. </li><li> Calcular IMC usando a equação: peso (kg) / altura 2 (m 2). A partir daí, os participantes são classificados de acordo com os valores de IMC definição padrão; saudável 18,5-25 kg / m 2, excesso de peso 25-30 kg / m 2 ou obesidade &amp; #62; 30 kg / m 2 27. </li></ol></li></ol> As amostras 2. Produzindo para Oral Assessment Threshold Fatty Acid <ol><li> Use leite UHT desnatado como a base para a avaliação do limiar de sabor ácido graxo. O produto pode ser comprado e armazenado a granel, se necessário, e irá manter fechada por até 6 meses ou até que o produto chegou a seu termo. Prepare dois tipos de veículos: veículos com ácidos graxos adicionados e um veículo de controle. O volume das soluções preparadas para o teste dependerá número do participante. O protocolo a seguir fornece valores típicos de 2 participantes. </li><li> Prepare uma solução de leite de base para usar tanto para o controle e veículo de ácidos graxos, colocando 5% w: goma arábica de qualidade alimentar v (por exemplo, 100 g por 2 L de leite) em um copo de 3 L de vidro. Se necessário, a goma de hidrato antes da sua utilização (isto irá variar dependendo do fabricante de goma). </li><li> Adicionar 0,01% w: v EDTA até a goma para prevenir a oxidação (por exemplo, 200 mg por 2 L de leite). </li><li> Alocar aproximadamente 1 litro de leite desnatado por participante (por exemplo., Por 2 participantes, use 2 L de leite) e despeje em copo. </li><li> Usando um misturador de grau laboratorial com tela emulsor, homogeneizar a solução a 12.000 rpm durante 2 min. Definir solução para o lado. </li><li> Preparar as soluções de ácidos graxos utilizando C18 grau alimentício: 1. A oxidação pode ser avaliada por meio de cromatografia gasosa, se necessário. </li><li> Prepara-se uma série de 13 variantes do veículo ácido gordo (leite desnatado UHT) com concentrações crescentes de C18: 1 (0.02, 0.06, 1, 1.4, 2, 2.8, 3.8, 5, 6.4, 8, 9.8, 12, e 20 mM / L). Para fazer isso, rotular de 250 ml copos de vidro com cada concentração. </li><li> Adicionam-se 5% de parafina líquida a cada copo (por exemplo, 5 ml de parafina por 100 ml de solução de leite). </li><li> Baseado em C18: 1 concentração, adicionar a quantidade apropriada de C18: 1 para cada copo (ver Tabela 1). </li></ol><table border="1" cellpadding="0" cellspacing="0"&gt; <tbody><tr><td> C18: 1 concentração (mM) </td><td> ul / 100 ml </td></tr><tr><td> 0,02 </td><td> 0,56 </td></tr><tr><td> 0.06 </td><td> 1.9 </td></tr><tr><td> 1 </td><td> 31,5 </td></tr><tr><td> 1.4 </td><td> 44.1 </td></tr><tr><td> 2 </td><td> 63,1 </td></tr><tr><td> 2.8 </td><td> 88,4 </td></tr><tr><td> 3.8 </td><td> 119,9 </td></tr><tr><td> 5 </td><td> 157,8 </td></tr><tr><td> 6.4 </td><td> 202 </td></tr><tr><td> 8 </td><td> 250 </td></tr><tr><td> 9,8 </td><td> 309 </td></tr><tr><td> 12 </td><td> 380 </td></tr><tr><td> 20 </td><td> 631,2 </td></tr></tbody></table> . Tabela 1 Exemplo C18: 1 concentração por 100 ml de solução de concentrações crescentes (^ l / L) de C18: 1. São usadas para preparar a série de 13 emulsões para thr ácido gordo bucaleshold teste. <ol start="10"><li> Após a utilização, enche o C18: 1 recipiente com N2 para minimizar a oxidação e a seguir armazenar a 4 ° C. </li><li> Adicionar a solução de base de leite a cada copo de ácidos gordos até um volume total de 100 ml. Ponha de lado. </li><li> Utilizando a solução de base restante, prepare o veículo de controle. Num copo de vidro de 2 litros, adicionam-se 5% do volume remanescente em parafina líquida (por exemplo, 35 ml de parafina líquida, num volume final de 750 ml) em conjunto com a solução de base remanescente e homogeneizar durante 30 segundos por 100 ml de líquido. </li><li> Homogeneizar o veículo de controlo para 30 segundos por 100 ml. Este passo é realizado antes de as soluções de ácidos gordos para evitar a contaminação com C18: 1. </li><li> Homogeneizar cada veículo de ácidos gordos, começando com a concentração mais baixa para 30 segundos por 100 ml. </li><li> Higienizar o homogeneizador de antes e depois dos testes. </li><li> À medida que o processo de homogeneização pode elevar a temperatura da solutions, temperatura de verificação de controle e C18: 1 amostras com um termômetro. Servir todas as amostras à TA (20 ° C). </li><li> As amostras de leite devem ser preparadas no mesmo dia como o teste. Prove cada solução antes do teste para avaliar a frescura e adequação. Nota: Dependendo do volume necessário, preparação de solução terá um mínimo de 60 min. </li></ol> 3. Teste do limiar Fatty Acid Oral <ol><li> Certifique-se de que os participantes se abstiveram de comer ou beber (incluindo café, goma, bochechos, etc) durante pelo menos 1 hora antes do teste. </li><li> Minimizar sinais não-gosto através da realização de testes com iluminação vermelha com os participantes usando clipes de nariz. </li><li> Use o procedimento forçado triângulo ascendente escolha para determinar os limiares de ácidos graxos orais. Rotular 30 ml copos de plástico das porções com um número de identificação de três dígitos. Dê a cada participante com um conjunto de três soluções de 20 ml em ordem aleatória; dois veículos de controlo e um aci gordod veículo com a menor concentração de C18: 1 (0,02 mM). </li><li> Para determinar o limiar de ácidos graxos por via oral de um participante, instruir o participante para saborear cada solução da esquerda para a direita e expectorar em uma pia. Peça aos participantes para não engolir as amostras. </li><li> Peça ao participante para identificar qual das três amostras é &quot;estranho&quot; ou &quot;diferente&quot; e se não tiver certeza, eles devem adivinhar (escolha forçada). </li><li> Peça aos participantes que lavar a boca com água deionizada após cada conjunto de amostras. </li><li> Se identificou corretamente, fornecer ao participante um segundo conjunto de três soluções (2 controle e 1 solução ácido graxo em ordem aleatória) com a mesma concentração de ácidos graxos. Se identificado incorrectamente, fornecer o participante com um segundo conjunto de três soluções, mas com a próxima maior concentração de C18: 1 (0,06 mM). </li><li> Continue esse processo até que o participante é capaz de identificar corretamente os 3x amostra &quot;estranho&quot; emuma linha na mesma concentração. A concentração em que eles são capazes de identificar corretamente o sample &#39;estranho&#39; é registrado como os participantes C18: 1 limiar de detecção. Ver Figura 1 para uma representação gráfica deste processo. </li><li> Baseado no limiar de detecção, caracterizar os participantes como hipersensibilidade ou hiposensível de C18: 1. De acordo com a literatura anterior, indivíduos hipersensíveis podem detectar C18: 1 em concentrações &lt;3,8 mm, enquanto os indivíduos hiposensível requerem concentrações&gt; 3,8 mm. Nota: Dependendo do número de respostas incorretas, o procedimento de teste pode demorar entre 10-30 min para completar. </li></ol><img alt="Figura 1" fo:content-width="5in" fo:src="/files/ftp_upload/51236/51236fig1highres.jpg" src="/files/ftp_upload/51236/51236fig1.jpg" /> Figura 1. Crescente escolha forçada procedimento triângulo usado para determinar a detecção de ácido graxo t. hresholds participantes são fornecidos com três soluções (duas soluções de controle e um C18: 1 solução a uma dada concentração) e pediu para identificar o &#39;sample impar &quot;. Se estiver correta, os participantes recebem um segundo conjunto de amostras com a mesma C18: 1 concentração. Se estiver incorreto, o participante é fornecido com um outro conjunto de amostras com maior concentração de C18: 1. Este procedimento continua até três soluções &quot;estranho&quot; estão corretamente identificados em uma dada concentração. Este ponto é considerado &#39;ácido graxo limiar de detecção &quot;dos indivíduos. 4. Fat Classificação Task Esta tarefa envolve participantes de degustação de quatro amostras de creme instante, cada um com diferentes teores de gordura (0, 2, 6 e 10%) e classificando-as em ordem de concentração de gordura ascendente percebido. <ol><li> Prepare um lote de creme usando desnatado em pó instantâneo de baunilha creme de acordo com as instruções do pacote. Misture 2 colheres de sopa de creme powder, 1 colher de sopa de açúcar e 2 xícaras de leite desnatado em um microondas seguro tigela. Se o produto não estiver disponível sugere, este pode ser substituído com um produto instantâneo não gordo semelhante (por exemplo, cozinhar e servir de creme). </li><li> Usando alta potência, aquecer a mistura utilizando um forno de microondas de 1.400 W em intervalos de 30 seg para um total de cerca de 5 minutos, ou até ficar espesso. Isto pode variar dependendo do tipo de creme e a potência do microondas utilizado. Deixe o creme esfriar. </li><li> Rotular quatro tigelas de cozinha de 500 ml (ou similar), com porcentagem de gordura. </li><li> Divida o creme em 4 diferentes lotes de 100 g. </li><li> Adicionar 0, 2, 6, e 10% de óleo vegetal para cada bacia para conseguir o teor de gordura desejado (por exemplo, num lote de 100 g, adicionar 0 ml, 2 ml, 6 ml, e 10 ml de óleo vegetal para atingir percentagens relativas de gordura ) e combinar. Mexa cada amostra bem para garantir que todos os ingredientes são completamente amalgamados. </li><li> Rotular quatro de 30 ml copos de plástico com porções thre randomizadonúmeros e dígitos. Encha os copos porção com 20 g de cada creme (1 tipo de creme por xícara). </li><li> Refrigerar as amostras antes do teste e servir frio (4 ° C). </li><li> Realizar o teste sob luzes vermelhas para minimizar pistas visuais. </li><li> Já os participantes saborear, engolir e classificar os quatro cremes de percepção menor para o maior teor de gordura e receber uma pontuação de 5 dependendo de suas respostas. </li><li> A pontuação para essa tarefa é mostrada na Tabela 2. Nota: o tempo de preparação aproximado para as amostras de nata é de 30 min. A tarefa de classificação de gordura não superior a 10 min deve tomar para ser concluído. </li></ol><table align="left" border="1" cellpadding="0" cellspacing="0"><tbody><tr><td> Ordem de classificação </td><td> Contagem </td></tr><tr><td> 0, 2, 6, 10 </td><td> 5 </td></tr><tr><td> 2, 0, 6, 10 </td><td> 4 </td></tr><tr><td> 0, 2, 10, 6 </td><td> 3 </td></tr><tr><td> 0, 6, 2, 10 </td><td> 2 </td></tr><tr><td> 1, 6, 10, 2 </td><td> 1 </td></tr><tr><td> 6, 0, 2, 10 </td><td> 1 </td></tr><tr><td> 2, 10, 6, 0 </td><td> 1 </td></tr><tr><td> 2, 6, 0, 10 </td><td> 0 </td></tr><tr><td> 6, 2, 10, 0 </td><td> 0 </td></tr><tr><td> 0, 10, 2, 6 </td><td> 0 </td></tr></tbody></table> Tabela 2. Fat ranking de pontuação tarefa. Participantes recebem quatro amostras de creme com 0, 2, 6, ou 10% de gordura adicionada. Os participantes são convidados a classificar as amostras do menor para o maior teor de gordura e pontuação de 0 a 5 pontos (sendo 5 o máximo). 5. Fatty Food Gostar <ol><li> Prepare amostras pequenas (5-20 g) de ambas as opções regulares e baixo teor de gordura dos alimentos disponíveis no mercado. Os alimentos incluem versões regulares e baixo teor de gordura de: queijo creme (servido em um biscoito), mousse de chocolate, queijo, biscoitos secos, manteiga de amendoim mergulho servido em um pedaço de cenoura, maionese, salada dressing (servido em uma fatia de pepino), e iogurte. </li><li> Rotular cada amostra com um número de três dígitos aleatórios para identificação. </li><li> Amostras presentes em uma ordem aleatória para evitar efeitos de ordem. </li><li> Instrua os participantes a saborear cada amostra individualmente. Os alimentos são ingeridos, mas os participantes podem comer tanto ou tão pouco de cada amostra de como eles desejam. </li><li> Já os participantes avaliassem o quanto eles gostam ou não gostam de cada amostra. Meça gosto usando uma escala hedônica magnitude generalizada 100 mm (MLG; veja a Figura 2), variando de forte aversão ao imaginável mais forte que se possa imaginar como. Grave gostando, colocando uma linha vertical no ponto que representa os participantes gostam ou não gostam da comida. </li></ol><img alt="Figura 2" fo:content-width="5in" fo:src="/files/ftp_upload/51236/51236fig2highres.jpg" src="/files/ftp_upload/51236/51236fig2.jpg" /> Figura 2. MLG hedônicos.Os MLG hedônicos 30,31 utilizados para avaliar gosto de alimentos disponíveis comercialmente regulares e baixo teor de gordura. Participantes gosto e avalie cada amostra e colocar uma linha vertical no ponto que melhor representa o seu tipo, ou não gostam da amostra. <ol start="6"><li> Entradas não gosto não são minimizados para esta tarefa, então levar esta tarefa sob luz normal e não tem participantes usam clipes de nariz. </li></ol> 6. Fotografia Língua <ol><li> Configurar uma câmera e tripé para a fotografia. Iluminação interna regular é suficiente. </li><li> Defina a câmara para o modo macro (ou similar) para close-up fotografia. </li><li> Use um furador para criar um círculo de diâmetro de 6 mm em um 1,5 cm x 1,5 cm (ou similar) quadrado de papel de filtro. Rotular o papel com o número de identificação do participante. </li><li> Numa proveta de 50 ml, combinam corante azul com água desionizada a uma razão de 01:20. Uma pequena quantidade é necessária por participante. </li><li> Verter 30 ml food grau etanol em uma proveta de 50 ml para esterilização pinça. </li><li> Usando fita adesiva, marcar um rectângulo cm 20 cm x 30 sobre o lado da mesa de ensaio (isto deve ser a altura normal recepção), como mostrado na Figura 3a. </li></ol><img alt="Figura 3" fo:content-width="5in" fo:src="/files/ftp_upload/51236/51236fig3highres.jpg" src="/files/ftp_upload/51236/51236fig3.jpg" /> A) instalação Figura 3. Fotografia Tongue. Demonstração da configuração da tabela necessária antes da fotografia língua B) fotografia Tongue.. Demonstração do método de fotografia língua <ol start="7"><li> Já os participantes colocar os cotovelos sobre os cantos marcados do retângulo, descansar seu queixo em suas mãos e se projetar confortavelmente a sua língua, usando os lábios para firmar essa posição (Figura 3b). O participante deve permanecer nessa posição durante a duração da testing. </li><li> Utilizando uma forma rectangular (1.5 cm x 3 cm), uma tira de papel de filtro, seco brevemente a parte inferior da língua. </li><li> Mergulhe um cotonete na solução corante alimentar / água e transferir uma pequena quantidade de corante na superfície dorsal anterior da língua, imediatamente à direita do ponto de linha média e perto da ponta (ver Figura 4). Seca-se a lingueta por uma segunda vez com o papel de filtro. </li><li> Etanol seco pinças esterilizadas com uma toalha de papel e utilizar uma pinça, colocar a pré-rotulados papel de filtro de 1,5 cm 2 em língua do participante, com o orifício de 6 mm sobre o alimento corante azul (ver Figura 4). </li><li> Usando flash, tirar fotografias de três digitais de língua do participante. Para confidencialidade, assegurar só boca e língua do participante são visíveis. </li><li> Retire o papel-filtro 1,5 cm 2 de língua do participante com uma pinça que foram novamente esterilizados em etanol grau alimentício. Carregar fotografias de um software de edição de fotos e com a função de zoom, contar tudo papilas fungiformes visível. </li><li> Diferenciar papilas fungiformes de outros papilas como maior em forma de cogumelo, estruturas elevadas. Eles não assumem a solução corante tão fortemente, e como tal aparecem com cores muito pálidas. Nota: a fotografia Tongue não mais do que 10 min deve tomar para ser concluído. </li></ol><img alt="Figura 4" fo:content-width="5in" fo:src="/files/ftp_upload/51236/51236fig4highres.jpg" src="/files/ftp_upload/51236/51236fig4.jpg" /> Figura 4. Quantificar fungiform densidade papilas. Localização da área de 6 mm para avaliação papilas fungiformes. Usando o software de edição de fotografia, figuras numéricos indicam cada papila fungiforme.

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Os autores não têm nada a revelar.

As técnicas descritas para a determinação dos limiares por via oral de ácidos graxos, ácidos graxos gosto alimentar, e língua densidade papilas foram validados e utilizados em uma série de trabalhos publicados nos últimos anos e nós sugerimos graxos oral, avaliação de ponto inicial do ácido, a gordura classificação de tarefas e alimentos gordurosos gosto ser realizada em duplicata em cada momento relevante em um estudo. Tem havido alguma discussão sobre o melhor método para avaliar a detecção de limiares 32. Em particular, a composição das soluções utilizadas varia entre laboratórios, tal como a própria metodologia. Especificamente, o ácido gordo utilizado neste protocolo, C18: 1, acreditamos que é uma geralmente representativos e fácil de utilizar ácido gordo, ao contrário de outros ácidos gordos, incluindo o ácido linoleico (C18: 2) e ácido láurico (C12: 0) , que tenham sido previamente utilizados 9. C18: 1 é geralmente encontrado no fornecimento de alimentos e ao contrário de C12: 0 é líquido à temperatura ambiente, e é mais resistente à oxidação do que C18: 2 9.C18: 1 também foi mostrado para fornecer dados fiáveis ​​em várias sessões de teste, e é altamente correlacionada com C18: 2 e C12: 0 10. Além disso, a C18: 1 foi examinado extensivamente em toda a literatura relevante, e é, portanto, mais útil para comparações. Um grande ponto de diferença entre o protocolo descrito no presente trabalho e outros procedimentos utilizados em outros laboratórios são os veículos utilizados para apresentar estímulos ácidos graxos e da abordagem sistemática em que os limiares de detecção são determinados. Dois grandes veículos de ácidos graxos utilizados na literatura são o leite desnatado 10,17 e emulsões de água 6. Embora ambos têm demonstrado eficácia para determinação do limiar de ácido gordo, os participantes podem ter maior probabilidade de identificar o sabor de gordura dentro do leite, ou seja, não é comum à amostra de ácidos gordos em água, o que pode resultar em níveis inferiores de validade externa para os estudos que utilizam uma base de água. Leite sem gordurafornece um veículo para quimiorecepção ácido graxo, sem comprometer a validade. Embora estes dois métodos estão ainda a ser comparados directamente na literatura, sabe-se que os ácidos gordos são pouco solúveis em água 33. Como resultado da solubilidade do ácido gordo em soluções à base de leite, esta emulsão pode tanto ser mantidos mais tempo e ser mais homogéneas do que as soluções à base de água, embora isto ainda está a ser confirmado. Ao implementar esta metodologia, é importante observar os ácidos graxos livres pode ser naturalmente presente no leite 34 e, consequentemente, o produto deve ser usado bem dentro de sua expiração para evitar que o aumento dos ácidos graxos livres (que se desenvolvem com a idade) e possíveis interferências gosto desempenho limiar. Preparação de sucesso das soluções depende de inúmeros fatores. Em primeiro lugar, a ordem em que são adicionados os &quot;ingredientes&quot; é imperativo. Etapas de preparação de veículos devem seguir cuidadosamente as descritas anteriormente para assegurar a adequada composição veículo umnd uma emulsão estável. Em segundo lugar, a temperatura deve ser controlado. Cada amostra deve ser apresentado aos participantes da RT para garantir os participantes não detectar a &quot;amostra estranho&quot; devido a outros do que &quot;gosto&quot; fatores. Finalmente, todas as amostras devem ser correctamente homogeneizado durante o período de tempo sugeridos. Enquanto a emulsão de ácidos gordos e de leite sem gordura é mais eficaz do que se a água fosse para ser usado, há ainda a possibilidade de separação da emulsão dentro da amostra. O método de ensaio específico utilizado na determinação do limiar de ácido gordo oral também deve ser considerado. Dois métodos sensoriais com base em ter sido vulgarmente descritos na literatura; sendo um deles o procedimento forçado ascendente escolha triângulo eo alternativo, o método escada 35. A metodologia ascendente triângulo escolha forçada é um método estabelecido para a determinação do limiar gosto e pode ser considerado útil por várias razões, incluindo o fato de que, ao contrário do método de escada,o método ascendente começa com a menor concentração de C18: 1 (0,02 mM) e aumenta até que o participante seja capaz de detectar a presença de ácido gordo em solução 9. Por outro lado, o método envolve a escadaria aumentando ou diminuindo a concentração de ácidos gordos a partir de um ponto médio predeterminado 11. No entanto, a partir de uma determinação do limiar em um ponto acima do limite pode causar uma dessensibilização de resposta aqueles que prejudicam a capacidade de degustação. Além disso, o método ascendente tem uma menor probabilidade do acaso influenciar resultados (3,7%) em comparação com o método de escada (11,1%) 11. Como tal, sugerimos o método triângulo ascendente forçado escolha, combinado com leite sem gordura como um veículo para testar o gosto parece ser um meio eficaz de determinar com precisão os limiares orais. Aceitação alimentar ou gostar de teste é uma das avaliações mais diretas realizadas no âmbito da investigação sensorial e, como tal, há poucos problemas de tchapéu tendem a surgir. No entanto, o tipo de escala utilizada gosto é um foco importante. Neste caso, um MLG hedônica é o mais eficaz, já que tem bom poder discriminatório e é fácil para os participantes a usar 36. Os pontos finais dos MLG hedônicos são rotulados com os descritores &quot;mais forte antipatia imaginável &#39;e&#39; mais forte que se possa imaginar como&quot; e os participantes avaliam gostando contra todas as experiências hedônicos, não apenas alimentos 30,31. Este é eficaz no controle de efeitos de teto produzidos por escalas 9 pontos padrão, como todas as experiências são consideradas e comparadas. Além disso, os MLG hedônicos é mais capaz de demonstrar maior variação individual, como a escala é mais amplo 36. Alimentar-se o teste de aceitação pode ser limitada pelos alimentos apresentados, em que só apresentam duas opções por tipo de alimento. Mais pesquisas podem incluir várias outras marcas ou tipos de cada alimento, cada um com diferentes teores de gordura, ou talvez produtos feitos especificamente onde a gordurateor pode ser controlado e é a única variável. É importante notar que a interpretação de todos os dados deve ser feito com cuidado. Enquanto uma ligação potencial entre gosto, preferência e consumo é plausível e intrigante, os resultados são gerados dentro de um ambiente de laboratório e pode haver limites para a aplicação destes resultados a situações do mundo real. Avaliando densidade papilas através da fotografia língua é um processo mais difícil, com passos específicos que devem ser tomadas a fim de produzir resultados adequados e aplicáveis. Em particular, é importante identificar o tipo de papilas correcta. Três tipos de sabor papilas são visíveis na língua humana; fungiformes, folhadas e circumvallate 4. Papilas fungiformes pode, contudo, ser facilmente distinguidas como estruturas em forma de cogumelo 26, e são geralmente as papilas que são gravados durante as avaliações de sensibilidade. Papilas fungiformes tendem a variar em concentração de 5-60por área de 6 mm 37 (dependendo da sensibilidade), embora tenha havido estudos que indicam que alguns indivíduos podem ter mais de 230 papilas mesma área 21. O tipo de câmera utilizada é fundamental para a obtenção de resultados adequados e podem ser responsáveis ​​por essa variabilidade. Antes do uso da fotografia digital nesta área, videomicroscopia foi o padrão-ouro para a identificação e registro de densidade papilas. No entanto, determinou-se que o mesmo nível de identificação é possível utilizar uma câmara digital apropriado 26. Além disso, a fotografia digital leva apenas alguns minutos, onde videomicroscopia pode levar até uma hora 26. Não só isso, mas a fotografia digital tem o potencial de ser muito menos dispendioso e mais portátil, que pode ser útil para uso com vários grupos de participantes 26. Finalmente, embora o nosso objectivo é medir a densidade papilas fungiformes para associações com a detecção de ácido graxo oral, sugerimos também limiares gosto de tele cinco sabores protótipo também ser realizadas em paralelo. Dado ligação anterior com a densidade de papilas e função gosto, isso poderia servir como uma «medida verificando &#39;adicional que possa adicionar a integridade dos dados, especialmente tendo em conta esta é uma nova área de pesquisa. A área de pesquisa quimiorecepção oral, particularmente em relação ácidos graxos, é uma questão emergente, e, como tal, é importante que toda a pesquisa a ser realizada com um alto padrão, de preferência com o uso de protocolos consistentes para permitir comparações diretas.

O consumo excessivo de gordura na dieta é um fator potencial de ganho de peso 1-3 e obesidade se tornou uma epidemia global moderna. Pesquisas sugerem níveis mais altos de consumo de gordura, particularmente como parte de uma dieta ad libitum, podem estar associados com um IMC superior 2,3, no entanto, os fatores que influenciam o consumo de gordura na dieta e preferência está longe de ser clara. Procurando os mecanismos que estão na base do consumo de gordura é, portanto, um objetivo óbvio e de interesse particular é um mecanismo oral, responsável pela detecção de gordura, comumente chamado de &quot;sabor ácido graxo&quot; 2. De um ponto de vista evolutivo, o sistema de sabor presumivelmente serviu como um porteiro do sistema digestivo, orientando o consumo de energia e de nutrientes densos expulsão de compostos potencialmente tóxicos 4. O sentido do paladar é provocada por células receptoras gosto especializados que são distribuídos dentro de três tipos de línguapapilas; fungiformes, folhadas e papilas circumvallate, que cada um pode conter até várias centenas de paladar 5. Em adição aos cinco amplamente aceites gostos prototípicas (doce, salgado, azedo, amargo, e umami), não é inteiramente surpreendente que tenha havido sugestão de um mecanismo para a detecção de ácidos bucal seus produtos de degradação de gordura de gordura, ou mais provavelmente a 6. Pesquisa anterior mostrou consistentemente ácidos gordos pode ser detectado no interior da cavidade bucal durante um intervalo de concentrações de 7-11, apesar do facto de que não é um &quot;gosto&quot; no sentido tradicional do termo, como ele não tem só a qualidade perceptual discernível a ele associado (isto é. doce) 12. Trabalhe a partir de nosso laboratório destacou implicações funcionais da quimiorecepção ácidos graxos prejudicada, ou seja, sobre o peso corporal e consumo de gordura na dieta. Aqueles que são menos capazes de detectar ácidos graxos (hiposensível) parecem ter um índice de massa corporal mais elevado (BMI) e consomem mais energia 9, ao mesmo tempo, tem-se observado uma relação entre a sensibilidade de ácido gordo por via oral e o consumo de gordura na dieta; ou seja, de ácidos graxos indivíduos hiposensível foram mostrados a consumir mais gorduras animais, incluindo, carne, produtos lácteos de alta gordura, e gordo espalha todos que estão sendo apontados como contribuintes para o ganho de peso 13. Além disso, os indivíduos que são mais sensíveis aos ácidos graxos parecem estar mais bem equipados a diferenciação entre amostras com diferentes teores de gordura 9. Enquanto outros grupos de pesquisa não conseguiram encontrar associações similares 10,14,15, esta área de pesquisa crescente permanece intrigante. Estas diferenças individuais em quimiorecepção ácido gordo parecem ser um pouco modulado por factores ambientais, incluindo a dieta. Ingestão de gordura habitual tem sido associada com prejudicada quimiorecepção ácido gordo por via oral e, consequentemente, uma maior preferência para, e aumento do consumo degordura dietética 16. Além de adaptação do paladar, do trato gastrintestinal (GI) também parece sensível a tais alterações na ingestão de gordura 17 e sensibilidade ácido graxo GI prejudicada pode estar implicado na incapacidade de gerar saciedade adequada sinalização respostas que desencorajam o excesso de consumo de energia 18. Além dos fatores ambientais, quimiorecepção ácido graxo também pode ser ditada por diferenças genéticas e fisiológicas entre os indivíduos, incluindo a concentração de densidade papilas fungiformes (e presumivelmente receptores gustativos) na língua de um indivíduo 19. Maior densidade de fungiformes papilas da língua tem sido associada à maior sensibilidade oral para numerosos compostos oralmente detectados incluindo 6 - n-propiltiouracil (PROP) 20, 21 de açúcar, sal e 22, enquanto outros também observaram uma associação com a percepção cremoso 23. Supertasters PROP (que presumaBly ter um maior número de papilas fungiformes) são capazes de distinguir alto teor de gordura de baixas molhos para salada gordura 24 e são capazes de discriminar o teor de gordura e cremosidade de alimentos lácteos com mais precisão do que os não-provadores 23,25. Nesta fase, no entanto, a relação entre a densidade de papilas fungiformes e &quot;gosto&quot; de detecção de ácido graxo oral é desconhecida. Na base da investigação quimiorecepção ácido graxo oral humana é a aplicação de várias técnicas sensoriais. Identificando variabilidade individual na detecção de ácido gordo oral é um dos principais focos e depende em grande medida da determinação do limiar de detecção de ácidos gordos, isto é, o ponto mais baixo em que o ácido gordo é capaz de ser detectado na solução 9. Embora o método de teste e estímulo do veículo específico utilizado varia de acordo com a literatura e entre os grupos de pesquisa, o procedimento típico envolve a apresentação de um participante com um conjunto de ácidos gordos emulsionados e controlo (sem fácido atty) soluções e identificar qual é a amostra &quot;impar&quot;. Apresentamos aqui, um método confiável e reprodutível estabelecida para determinação do limiar de 10 usando soluções leite emulsionados e um procedimento forçado triângulo escolha crescente. A medida em que a sensibilidade de ácidos graxos por via oral influencia a dieta, ou seja, o consumo de alimentos gordurosos, ea capacidade de perceber a gordura nos alimentos também é de interesse e aqui também relatar duas técnicas estabelecidas adicionais para ampliar ainda mais a nossa compreensão da quimiorecepção ácido graxo. Fatty comida gosto pode ser identificado através de indivíduos com amostras de alimentos disponíveis no mercado, tanto com uma regular e uma opção de baixo teor de gordura, que são convidados a indicar gosto de cada 16. Em relação à percepção de gordura, uma tarefa de classificação de gordura tem sido desenvolvido pelo nosso laboratório, destinado a avaliar a capacidade do indivíduo para detectar gordura em creme, uma matriz de comida típica 16. Para avaliar geneticac ou diferenças fisiológicas entre os indivíduos, um método de fotografia língua comumente usado envolve a coloração, fotografando e quantificar papilas fungiformes 26. Enquanto estiver usando esta técnica em ácidos graxos pesquisa está em sua infância, aumentando a aplicação, especialmente em ambos magros e sobrepeso / obesidade grupos populacionais podem ajudar a identificar as causas inerentes do excesso de consumo de gordura.

<table><tbody><tr><td>Gum Arabic TIC Pretested PRE-HYDRATED FT Powder</td><td>Alchemy Agencies Ltd. NZ</td><td>CFR# 21 CFR 184.1330</td><td>Food grade agrigum</td></tr><tr><td>EDTA (Ethylenediaminetetraacetic acid)</td><td>Merck</td><td>1.08418 0250</td><td>Disodium salt dehydrate</td></tr><tr><td>L4RT Homogenizer</td><td>Silverson Longmedow, MA</td><td>L4RT</td><td></td></tr><tr><td>Liquid Paraffin</td><td>Fauldings</td><td></td><td>No catalog number as liquid paraffin is a regular consumable product</td></tr><tr><td>Nikon AF-S VR Micro Nikkor 105-mm f/2.8G IF-ED camera lens</td><td>Nikon</td><td>2160</td><td></td></tr><tr><td>SLIK Sprint Pro II tripod</td><td>Slik Corporation</td><td>611-849</td><td></td></tr><tr><td>Nikon D90 Digital Camera with LCD Protector</td><td>Nikon</td><td>BM-10</td><td></td></tr><tr><td>Nitrogen</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Tanita Body Scan Composition Monitor Scales</td><td>Tanita, Cloverdale, WA, Australia</td><td>BC-551</td><td></td></tr><tr><td>Seca Stadiometer</td><td>Medshop Australia, Fairfield, VIC, Australia</td><td>MED435</td><td></td></tr></tbody></table>

measuring oral fatty acid thresholds, fat perception, fatty food liking, and papillae density in humans

Evidência emergente de uma série de laboratórios indicam que os humanos têm a capacidade de identificar os ácidos gordos na cavidade oral, presumivelmente através de receptores de ácidos gordos alojados em células de sabor. Pesquisas anteriores mostraram que a sensibilidade oral, de um indivíduo de ácido graxo, ácido oleico especificamente (C18: 1) está associada com o índice de massa corporal (IMC), o consumo de gordura na dieta, e a capacidade de identificar a gordura nos alimentos. Desenvolvemos um método de confiança e reprodutível para avaliar quimiorecepção oral de ácidos gordos, usando uma leite e C18: 1 em emulsão, em conjunto com um procedimento forçado triângulo escolha ascendente. Em paralelo, uma matriz de comida foi desenvolvido para avaliar a capacidade de um indivíduo para perceber gordura, para além de um método simples para avaliar fatty gosto. Como uma fotografia adicionado língua medida é usada para avaliar a densidade papilas, com maior densidade sendo muitas vezes associada com o aumento da sensibilidade de sabor.

Os métodos descritos acima são importantes como alguma evidência emergente indicou que quimiorecepção ácido gordo prejudicada no tracto GI e cavidade oral pode estar associada com o aumento do IMC e o desenvolvimento de obesidade 17. Vários estudos têm utilizado os protocolos descritos para investigar a detecção por via oral de ácidos graxos e nossa publicação recente mostrou que o método é confiável e reprodutível 10. Estudos utilizando esta metodologia foram capazes de determinar com fiabilidade limiares de detecção orais de ácidos graxos do indivíduo, identificando o ponto em que os participantes são capazes de detectar uma diferença entre amostras de leite 9. . Depois de três sessões de testes utilizando este protocolo, Stewart et al 9 encontraram que o limiar de detecção média de C18: 1 foi de 2,2 ± 0,1, com limites de detecção variando 1-6,4 mm (ver Figura 5). Mais recentemente, temos estabelecido um C18: 1 faixa de limiar de detecção de 00,26-12 mM, (média: 2,64 ± 0,7 mm) 10. Estes resultados suportam a noção de que os ácidos gordos podem ser detectadas na cavidade oral, e que marcada diferenças individuais na sensibilidade a C18: 1 existe. Com base nesses resultados, podemos classificar os indivíduos como hipersensibilidade ou hiposensível de C18: 1. Indivíduos hipersensíveis são capazes de identificar corretamente C18: 1 &lt;3,8 mM, enquanto assuntos hiposensível requerem concentrações&gt; 3,8 mM. Investigação do nosso laboratório tem encontrado sensibilidade oral a C18: 1 está associado com o consumo da dieta de gordura e IMC (Figura 6), em que C18: 1 hiposensível indivíduos consomem mais gorduras saturadas e animais e têm um IMC superior 13. Curiosamente, em um estudo realizado por Stewart e Keast 16, verificou-se que o consumo de uma dieta de baixo teor de gordura resultou em aumento da sensibilidade ao C18: 1 para os participantes, tanto magras e com sobrepeso (Figura 7). No entanto, este estudo também descobriu que quando os participantes consu<html> med uma dieta rica em gordura, as pessoas magras tinham sensibilidade reduzida ao C18: 1, enquanto que os indivíduos com sobrepeso tiveram nenhuma mudança na sensibilidade gustativa (Figura 8). Isto sugere que habitualmente consomem uma dieta rica em gordura, o que é mais provável que os indivíduos com excesso de peso, pode resultar em atenuada quimiorecepção ácidos gordos 28. No entanto, como não houve diferenças na sensibilidade da linha de base entre os participantes magros e com excesso de peso, esses resultados podem indicar que indivíduos magros são simplesmente mais suscetíveis a mudanças na dieta sobre a ingestão de gordura. Isto também pode sugerir que foi a presença da intervenção específica (alta vs baixa gordura), que pode ter influenciado resultados, em vez de dietas habituais, os quais podem ou não podem ter sido diferente para a intervenção de dieta. Apesar disso, este estudo indica que existem algumas diferenças fundamentais entre indivíduos magros e com sobrepeso em relação a sensibilidade gustativa de ácidos graxos, o que requer uma investigação mais aprofundada. ONTEÚDO &quot;fo: manter-together.within-page =&quot; always &quot;&gt; <img alt="Figura 5" fo:content-width="5in" fo:src="/files/ftp_upload/51236/51236fig5highres.jpg" src="/files/ftp_upload/51236/51236fig5.jpg" /> Figura 5 C18:. Uma limiares de detecção de sabor variabilidade acentuada foi mostrado na sensibilidade a C18: 1 com os participantes. Capazes de detectar C18: 1 através de uma gama de concentrações (mM 1 mM-6.4). <img alt="Figura 6" fo:content-width="5in" fo:src="/files/ftp_upload/51236/51236fig6highres.jpg" src="/files/ftp_upload/51236/51236fig6.jpg" /> Figura 6 C18:. 1 limiares de detecção do gosto e associação com o IMC uma associação entre a capacidade de detectar C18:. 1 e na composição corporal tem sido demonstrado, por meio de que aqueles com limiares de detecção mais elevados (indivíduos hiposensível) têm valores significativamente mais elevados de IMC (P = 0,002 , r 2 = 0,467). <p class="jove_content" fo:keep-together.within-page = &quot;always&quot;&gt; <img alt="Figura 7" fo:content-width="5in" fo:src="/files/ftp_upload/51236/51236fig7highres.jpg" src="/files/ftp_upload/51236/51236fig7.jpg" /> Figura 7 C18:. 1 limiares de detecção de seguir uma dieta de baixa gordura Após 4 Consumo de semana de uma dieta de baixa gordura, C18: 1. Limiares de detecção de aumento para indivíduos ambos magros e obesos. <img alt="Figura 8" fo:content-width="5in" fo:src="/files/ftp_upload/51236/51236fig8highres.jpg" src="/files/ftp_upload/51236/51236fig8.jpg" /> Figura 8 C18:. 1 limiares de detecção de seguir uma dieta rica em gordura Após 4 Consumo de semana de uma dieta rica em gordura, indivíduos magros exibido sensibilidade reduzida ao C18:. 1 (P = 0,006), enquanto que os indivíduos com sobrepeso demonstraram nenhuma alteração (P = 0,609) . Da mesma forma que o impacto da dieta sobre os limiares de detecção de ácidos graxos, há pesquisas para suggeª que a comida gosto pode ser de plástico e alterado pela exposição. Por exemplo, verifica-se que uma dieta rica em gordura aumenta a preferência para um produto de maior teor em gordura, com a frente que ocorre após o consumo de uma dieta de baixo teor de gordura 16. No entanto, essas mudanças não foram consistentes na literatura. Afigura-se que as mudanças para as preferências são mediadas pelo período de tempo que o indivíduo tem vindo a aderir a uma dieta de alto ou de baixo teor de gordura. Especificamente, Mattes 29 encontraram alterações significativas nas preferências alimentares dos participantes após 12 semanas em uma dieta de baixo teor de gordura, enquanto Stewart e Keast 16 encontrou apenas alterações esporádicas e marginais após quatro semanas em uma dieta similar. Consumir um alto teor de gordura da dieta alterada preferências dos participantes para iogurte, com preferências por iogurte desnatado aumentando, inverso aos resultados esperados (linha de base (BL): 19,44 ± 5,73, Semana 4 (WK4): 21,94 ± 5,21, P = 0,046). Além disso, depois de quatro semanas de uma dieta com baixo teor de gordura, manteiga preferências para baixo teor de gordura aumentou em todos os participants (BL: 6,23 ± 4,26, WK4: 7,32 ± 3,04, P = 0,046). Preferências de iogurte desnatado aumentou para os participantes magros só (BL: 2,51 ± 3,26, WK4: 3,68 ± 4,94, P = 0,07), enquanto as preferências para mousse baixo teor de gordura diminuiu para todos os participantes (p = 0,01). A capacidade de detectar gordura nos alimentos é avaliado por pedindo aos participantes para degustar e classificar uma série de cremes com diferentes teores de gordura. Percepção de gordura é identificado com base em quão bem os participantes foram capazes de classificar as amostras. Percepção de gordura tem sido conhecida a mudar com a dieta, por exemplo, seguir uma dieta de baixa gordura resultou em melhorias para o desempenho do participante na correta identificação e classificação do grau de gordura em cada amostra de creme 11. Além disso, parece que há uma associação entre a sensibilidade de C18: 1 e identificação e classificação de conteúdo de gordura 4. De fato, os indivíduos que estavam hipersensíveis ao C18: 1 desempenho significativamente melhor on a tarefa de classificação de gordura (4,3 ± 0,6) em comparação com indivíduos hiposensível (2,3 ± 0,1, P = 0,02) (escores estão fora de um máximo de cinco) 9. Isso indica que as pessoas que são mais sensíveis aos ácidos graxos também foram melhores na diferenciação entre as quatro diferentes concentrações de gordura no creme. Embora tenha havido uma tendência para o desempenho melhorar depois de consumir a dieta de baixo teor de gordura, durante quatro semanas, esta não foi uma mudança significativa (BL: 1,3 ± 0,3, WK4: 2 ± 0,3, P = 0,077) 16. Densidade papilas ou seja, o número de papilas (e, portanto, as papilas gustativas) presentes na língua varia entre os indivíduos e é indicativo da função gosto. Quanto maior a densidade fungiformes papilas tem sido associada a sensibilidade aumentada sabor, para os compostos incluindo a sacarose e 21 a substância amarga PROP 20. Tongue densidade papilas, conforme determinado pela fotografia língua, varia consideravelmente entre os indivíduos. Por exemplo, Zhang &lt;em&gt; et al. 21 descobriu que havia diferenças individuais significativas entre os participantes, que vão desde uma concentração de 7,07 ± 0.35/cm 2-233,43 ± 0.00/cm 2 (dados foi para um único participante), enquanto que outros 26 encontraram uma média concentração papilas fungiformes ser 156,00 ± 5.86/cm 2. Além disso, foi constatado que as papilas podem aparecer significativamente diferente em estrutura entre os indivíduos, com a variação em altura, largura e formato, 21 embora evidência limitada sobre as possíveis implicações dessas diferenças. Dado descobertas anteriores que ligam número papilas com sensibilidade sabor, é plausível que uma relação semelhante também podem existir para a sensibilidade de ácido gordo por via oral, em que aqueles que estão mais oralmente sensível a ácidos gordos podem ter uma maior densidade de papilas sabor e, portanto, um maior número de receptores de ácidos gordos orais. Embora esta associação ainda está para ser estabelecida, presees um romance área de pesquisa pode ajudar a envolver os mecanismos subjacentes que orientam o consumo ao longo de gordura.

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Medindo limites de ácidos graxos orais, percepção de gordura, gosto por alimentos gordurosos e densidade de papilas em humanos | Neurociência | Vídeo

Measuring Oral Fatty Acid Thresholds, Fat Perception, Fatty Food Liking, and Papillae Density in Humans

Quimiorecepção oral de ácidos graxos ea associação com dieta e gordurosos preferências alimentares pode permitir a identificação de mecanismos envolvidos no desenvolvimento da obesidade e por mudanças na dieta pode ser difícil para muitas pessoas.

Medindo Oral Ácido Limites Fatty, Fat Percepção, gordos alimentares Gostar, e Papilas Densidade em seres humanos

Emerging evidence from a number of laboratories indicates that humans have the ability to identify fatty acids in the oral cavity, presumably via fatty ...

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20.2K visualizações.  Deakin University.  Quimiorecepção oral de ácidos graxos ea associação com dieta e gordurosos preferências alimentares pode permitir a identificação de mecanismos envolvidos no desenvolvimento da obesidade e por mudanças na dieta pode ser difícil para muitas pessoas. 

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Use of the Operant Orofacial Pain Assessment Device (OPAD) to Measure Changes in Nociceptive Behavior

We present an operant system for the detection of pain in awake, conscious rodents. The Orofacial Pain Assessment Device (OPAD) assesses pain behaviors in a more clinically relevant way by not relying on reflex-based measures of nociception. Food fasted, hairless (or shaved) rodents are placed into a Plexiglas chamber which has two Peltier-based thermodes that can be programmed to any temperature between 7 &deg;C and 60 &deg;C. The rodent is trained to make contact with these in order to access a reward bottle. During a session, a number of behavioral pain outcomes are automatically recorded and saved. These measures include the number of reward bottle activations (licks) and facial contact stimuli (face contacts), but custom measures like the lick/face ratio (total number of licks per session/total number of contacts) can also be created. The stimulus temperature can be set to a single temperature or multiple temperatures within a session. The OPAD is a high-throughput, easy to use operant assay which will lead to better translation of pain research in the future as it includes cortical input instead of relying on spinal reflex-based nociceptive assays.

Use of the Operant Orofacial Pain Assessment Device OPAD to Measure Changes in Nociceptive Behavior

We present a user-friendly, high-throughput operant system for the evaluation of pain behaviors in awake, conscious rodents. The Orofacial Pain Assessment Device (OPAD) can assess pain through a reward/conflict paradigm thus providing a more humane way of testing. This protocol will yield more clinically relevant and translational data from rodents.

O uso do dispositivo de Avaliação de Dor Orofacial operante (OPAD) para medir as mudanças no comportamento nociceptivo

We present an operant  system for the detection of pain in awake, conscious rodents. The Orofacial  Pain Assessment Device (OPAD) assesses pain behaviors ...

Comportamento

Technique to Collect Fungiform (Taste) Papillae from Human Tongue

The sense of taste is critical for human life. It informs the body about the quality of food that will be potentially ingested and stimulates metabolic processes that prepare the alimentary canal for digestion. Steady progress is being made towards understanding the early biochemical and molecular events underlying taste transduction (for a review, Breslin and Spector, 20081). However, progress to date has largely resulted from animal models. Yet, since marked differences in receptor specificity and receptor density vary among species, human taste transduction will only be understood by using human taste tissue. Here we describe a biopsy technique to collect human fungiform papillae, visible as rounded pink anterior structures, about 0.5 mm in diameter that contain taste buds. These biopsied papillae are used for several purposes including the isolation of viable taste bud cells, in situ hybridization, immunohistochemistry and, through techniques of molecular biology, the identification of taste-specific novel proteins.

Technique to Collect Fungiform Taste Papillae from Human Tongue

Knowledge of molecular mechanisms underlying gustatory transduction has recently enjoyed significant advances, largely due to using animal models. However, the wide diversity in taste sensitivity and specificity among mammals warrants studies in human tissue. We describe a biopsy technique to collect living taste cells from the papillae on human tongue.

Técnica para coletar fungiformes (Taste) papilas da língua humana

The sense of taste is critical for human life. It informs the body about the quality of food that will be potentially ingested and stimulates metabolic ...

Medicina

Studying Food Reward and Motivation in Humans

A key challenge in studying reward processing in humans is to go beyond subjective self-report measures and quantify different aspects of reward such as hedonics, motivation, and goal value in more objective ways. This is particularly relevant for the understanding of overeating and obesity as well as their potential treatments. In this paper are described a set of measures of food-related motivation using handgrip force as a motivational measure. These methods can be used to examine changes in food related motivation with metabolic (satiety) and pharmacological manipulations and can be used to evaluate interventions targeted at overeating and obesity. However to understand food-related decision making in the complex food environment it is essential to be able to ascertain the reward goal values that guide the decisions and behavioral choices that people make. These values are hidden but it is possible to ascertain them more objectively using metrics such as the willingness to pay and a method for this is described. Both these sets of methods provide quantitative measures of motivation and goal value that can be compared within and between individuals.

This article describes a set of methods for the measurement of food related motivation and food related goal values in humans.

Estudar recompensa alimentar e Motivação em seres humanos

A key challenge in studying reward processing in humans is to go beyond subjective self-report measures and quantify different aspects of reward such as ...

Fat Preference: A Novel Model of Eating Behavior in Rats

Obesity is a growing problem in the United States of America, with more than a third of the population classified as obese. One factor contributing to this multifactorial disorder is the consumption of a high fat diet, a behavior that has been shown to increase both caloric intake and body fat content. However, the elements regulating preference for high fat food over other foods remain understudied.
To overcome this deficit, a model to quickly and easily test changes in the preference for dietary fat was developed. The Fat Preference model presents rats with a series of choices between foods with differing fat content. Like humans, rats have a natural bias toward consuming high fat food, making the rat model ideal for translational studies. Changes in preference can be ascribed to the effect of either genetic differences or pharmacological interventions. This model allows for the exploration of determinates of fat preference and screening pharmacotherapeutic agents that influence acquisition of obesity.

Dietary fat content influences both energy intake and body fat composition in mammals. By examining rats&#8217; preference for high fat food in a series of choice experiments, it is possible to test genetic differences and pharmacological interventions on their preference for high fat food.

Preferência de Gordura: Um Modelo Novel de comportamento alimentar em ratos

Obesity is a growing problem in the United States of America, with more than a third of the population classified as obese. One factor contributing to ...

Psychophysical Tracking Method to Measure Taste Preferences in Children and Adults

The Monell two-series, forced-choice, paired-comparison tracking method provides a reliable measure of sweet taste preferences from childhood to adulthood. The method, which is identical for children, adolescents, and adults, is of short duration (&#60; 15 min), does not rely on sustained attention or place demands on memory (which would yield spurious age differences), and minimizes the impact of language development, making this method amenable to the cognitive limitations of pediatric populations. In this whole-mouth tasting method, subjects are asked to taste (without swallowing) pairs of solutions of different sucrose concentrations and to point to the solution they prefer. Each subsequent pair contains the participant&#39;s preceding preferred concentration and an adjacent stimulus concentration. The procedure continues until the subject chooses either a given concentration of sucrose when paired with both a higher and a lower concentration, or the highest or lowest concentration two consecutive times. Subjects are prevented from reaching response criteria on the basis of first or second position bias by the two-series design of the method, which counterbalances the order of solution presentation within each pair between the series (the weaker concentration is presented first in Series 1, second in Series 2). The geometric mean of the two sucrose concentrations chosen in Series 1 and 2 is an estimate of the participant&#39;s most preferred level of sucrose. Sucrose preference as determined with this laboratory-based measure has been shown to be associated with preference for sugars in foods and beverages and with taste receptor genotype, family history of alcoholism, and race/ethnicity, as well as depressive symptomatology among pediatric populations. The method has real-world relevance and has been applied to determine most preferred level of other tastes (e.g., salt), making it a valuable psychophysical tool.

Sweet taste has powerful hedonic appeal among people of all ages, particularly children. Described herein is a reliable and valid method that can be used to determine the level of sweetness most preferred, making it a valuable psychophysical tool for scientists.

Psicofísica Rastreamento método para medir preferências alimentares nas crianças e adultos

The Monell two-series, forced-choice, paired-comparison tracking method provides a reliable measure of sweet taste preferences from childhood to ...

Isolation and Culture of Human Fungiform Taste Papillae Cells

Taste cells are highly specialized, with unique histological, molecular and physiological characteristics that permit detection of a wide range of simple stimuli and complex chemical molecules contained in foods. In human, individual fungiform papillae contain from zero to as many as 20 taste buds. There is no established protocol for culturing human taste cells, although the ability to maintain taste papillae cells in culture for multiple cell cycles would be of considerable utility for characterizing the molecular, regenerative, and functional properties of these unique sensory cells. Earlier studies of taste cells have been done using freshly isolated cells in primary culture, explant cultures from rodents, or semi-intact taste buds in tissue slices1,2,3,4. Although each of these preparations has advantages, the development of long-term cultures would have provided significant benefits, particularly for studies of taste cell proliferation and differentiation. Several groups, including ours, have been interested in the development and establishment of taste cell culture models. Most attempts to culture taste cells have reported limited viability, with cells typically not lasting beyond 3-5 d5,6,7,8. We recently reported on a successful method for the extended culture of rodent taste cells9. We here report for the first time the establishment of an in vitro culture system for isolated human fungiform taste papillae cells. Cells from human fungiform papillae obtained by biopsy were successfully maintained in culture for more than eight passages (12 months) without loss of viability. Cells displayed many molecular and physiological features characteristic of mature taste cells. Gustducin and phospholipase C &beta;2, (PLC-&beta;2) mRNA were detected in many cells by reverse transcriptase-polymerase chain reaction and confirmed by sequencing. Immunocytochemistry analysis demonstrated the presence of gustducin and PLC-&beta;2 expression in cultured taste cells. Cultured human fungiform cells also exhibited increases in intracellular calcium in response to appropriate concentrations of several taste stimuli indicating that taste receptors and at least some of the signalling pathways were present. These results sufficient indicate that taste cells from adult humans can be generated and maintained for at least eight passages. Many of the cells retain physiological and biochemical characteristics of acutely isolated cells from the adult taste epithelium to support their use as a model taste system. This system will enable further studies of the processes involved in proliferation, differentiation and function of mammalian taste receptor cells in an in vitro preparation.
Human fungiform taste papillae used for establishing human fungiform cell culture were donated for research following proper informed consent under research protocols that were reviewed and approved by the IRB committee. The protocol (#0934) was approved by Schulman Associates Institutional Review Board Inc., Cincinnati, OH. Written protocol below is based on published parameters reported by Ozdener et al. 201110.

We aimed to develop a reproducible protocol for isolating and maintaining long-term cultures of human fungiform taste papillae cells. Cells from human fungiform papillae obtained by biopsy were successfully maintained in culture for more than eight passages (12 months) without loss of viability.

Isolamento e Cultura de Células Papila fungiforme Humanos Taste

Taste cells are highly specialized, with unique histological, molecular and physiological characteristics that permit detection of a wide range of simple ...

Neurociência

Assessment of Midline Lingual Point-Pressure Somatosensation Using Von Frey Hair Monofilaments

Detection and discrimination threshold estimates for oral point pressure are assessed using Von Frey Hair monofilaments. Consistent with previously published protocols, threshold estimates are determined using a two-interval forced choice (2-IFC) paradigm with a three down/one up approach. Detection threshold estimates determine the mean force in which a participant can identify the presence of pressure. During the detection threshold procedure, the participant is instructed to choose which of two sequentially presented observation intervals contained the tactile test stimulus. If the participant performs three correct detections in a row (i.e., 3 &#39;hits&#39;), the researcher decreases the stimulus to the next lower target force level. With one incorrect detection (a &#39;miss&#39;), the researcher increases the force delivered to the next higher level. This threshold estimation approach is known as a 3-down/1-up adaptive staircase. Reponses are recorded on a paper ballot, and a participant&#39;s estimated threshold is defined as the geometric mean of five reversals. During the discrimination threshold procedure, the participant is asked to make a choice between two serially presented stimuli as to which is the &#34;harder&#34; or &#34;stronger&#34; pressure. The same scoring of &#39;hits&#39;, &#39;misses&#39;, and stopping points are used. Detection and discrimination testing for oral point pressure at tongue midline takes approximately 20 min to complete. Using these commercially-available clinical tools, individual touch sensation profiles for the midline tongue can be achieved in a relatively time and cost effective means.

This work describes a standard method to assess tactile sensation at the midline of the tongue tip. Using Von Frey Hair (VFH) monofilaments, this protocol provides estimates of detection and discrimination threshold estimates for oral point pressure (OPP).

Avaliação da somatosensação de pressão de ponto lingual midline usando monofilamentos de cabelo von Frey

Detection and discrimination threshold estimates for oral point pressure are assessed using Von Frey Hair monofilaments. Consistent with previously ...

Assessment of Spatial Lingual Tactile Sensitivity using a Gratings Orientation Test

Individual thresholds by R-index estimates are calculated using a gratings orientation test (6 different tools of increasing grating size from 0.20-1.25 mm) to assess spatial lingual tactile sensitivity. During the experiment, the subjects are blindfolded and asked to specify the orientation of the grating (either horizontal or vertical) placed on the tongue. R-index is based on Signal Detection Theory (SDT), and it is an estimated probability of correctly identifying a target stimulus (the signal, e.g., the correct orientation) compared to an alternative stimulus (the noise, e.g., the incorrect orientation). Once the R-index values for each subject and each tool dimension are calculated, it is possible to derive the individual threshold by interpolating the two R-indices immediately below and above the established cut-off (typically 75%) based on one-sided R-index critical values. This procedure can be helpful in the medical field to study the association between oral tactile sensitivity, speech clarity, and swallowing disorders, as well as in sensory and consumer studies to explore individual variation in texture perception, food preferences, and eating behavior.

This work illustrates a standard procedure and threshold determination by the R-index to assess spatial lingual tactile sensitivity using a gratings orientation test.

Avaliação da Sensibilidade Tátil Lingual Espacial usando um Teste de Orientação de Grades

Individual thresholds by R-index estimates are calculated using a gratings orientation test (6 different tools of increasing grating size from 0.20-1.25 ...

Denver Papillae Protocol for Objective Analysis of Fungiform Papillae

The goal of the Denver Papillae Protocol is to use a dichotomous key to define and prioritize the characteristics of fungiform papillae (FP) to ensure consistent scoring between scorers. This protocol builds off of a need that has arisen from the last two decades of taste research using FP as a proxy for taste pore density. FP density has historically been analyzed using Miller &#38; Reedy&#8217;s 1990 characterizations of their morphology: round, stained lighter, large, and elevated. In this work, the authors forewarned that stricter definitions of FP morphology needed to be outlined. Despite this call to action, follow up literature has been scarce, with most studies continuing to cite Miller &#38; Reedy&#8217;s original work. Consequently, FP density reports have been highly variable and, combined with small sample sizes, may contribute to the discrepant conclusions on the role of FP in taste sensitivity. The Genetics of Taste Lab explored this apparent inconsistency in counting and found that scorers were individually prioritizing the importance of these characteristics differently and had no guidance for when a papilla had some, but not all, of the reported qualities of FP. The result of this subjectivity is highly variable FP counts of the same tongue image. The Denver Papillae Protocol has been developed to remedy this consequence through use of a dichotomous key that further defines and prioritizes the importance of the characteristics put forth by Miller &#38; Reedy. The proposed method could help create a standard way to quantify FP for researchers in the field of taste and nutritional studies.

Here we present a protocol to measure fungiform papilla density from digital photographs. This method builds prioritization and objective characteristic metrics into the original descriptive work on fungiform papillae by Miller &#38; Reedy (1990).

Denver Papilas Protocolo para Objective Analysis de papilas fungiformes

The goal of the Denver Papillae Protocol is to use a dichotomous key to define and prioritize the characteristics of fungiform papillae (FP) to ensure ...

Taste Exam: A Brief and Validated Test

The emerging importance of taste in medicine and biomedical research, and new knowledge about its genetic underpinnings, has motivated us to supplement classic taste-testing methods in two ways. First, we explain how to do a brief assessment of the mouth, including the tongue, to ensure that taste papillae are present and to note evidence of relevant disease. Second, we draw on genetics to validate taste test data by comparing reports of perceived bitterness intensity and inborn receptor genotypes. Discordance between objective measures of genotype and subjective reports of taste experience can identify data collection errors, distracted subjects or those who have not understood or followed instructions. Our expectation is that fast and valid taste tests may persuade researchers and clinicians to assess taste regularly, making taste testing as common as testing for hearing and vision. Finally, because many tissues of the body express taste receptors, taste responses may provide a proxy for tissue sensitivity elsewhere in the body and, thereby, serve as a rapid, point-of-care test to guide diagnosis and a research tool to evaluate taste receptor protein function.

This protocol measures human taste responses and includes a brief anatomical assessment, a short taste test, and a validation method using the subject&#39;s reported sensation and taste receptor genotype.

: Sabor um breve e validado teste exame

The emerging importance of taste in medicine and biomedical research, and new knowledge about its genetic underpinnings, has motivated us to supplement ...