Declaração de Ética: Todos os experimentos foram aprovados pelo Comitê de Uso e Cuidado Animal Institucional. Cuidados com os animais foi de acordo com as diretrizes institucionais. Camundongos ICR feminino (7-8 semanas de idade; 25 - 30 g) foram alojados em ar condicionado, luz controlada biotério da Faculdade de Medicina Sackler na Universidade de Tel-Aviv. Pelo termo, os animais foram sacrificados com overdose de anestesia. 1. Fibred microscopia de fluorescência confocal (FCFM) Calibração <ol><li> Ligar o dispositivo. </li><li> Ligue a microssonda (mini0 / 30). </li><li> Calibrar o dispositivo de acordo com as instruções do fabricante. </li></ol> 2. Ratos Preparação for Imaging <ol><li> Anestesiar por uma injecção subcutânea de ambas Ketaset (100 mg / kg) e XYL-M2 (6 mg / kg). Confirme anesthetization adequada por falta de resposta aos toe-pinch. </li><li> Faça uma incisão na pele abaixo da virilha, a fim de<html> revelar os vasos arteriais femorais. Manter o local da incisão úmido com solução salina após a incisão. </li><li> Aqueça a cauda, ​​usando um saco (ou uma luva) cheia de água quente (não muito quente ao toque) durante aproximadamente 30 segundos. Prepara-se uma (IV) para a administração intravenosa de derivação de FITC dextrano (um agente de contraste) e de um ou outro agente quimioterapêutico ou de solução salina, por inserção de uma agulha (30 L, 1/2 polegada) na veia da cauda e ligando uma seringa de 1 ml a ele . Garantir a veia está aberto ao injetar soro fisiológico. NOTA: Uma administração IV de FITC dextrano (peso molecular elevado; 100 ul; 10 mg / ml; 2,000 kDa) facilita a visualização da microvasculatura femoral por FCFM. Doxorrubicina (100 ul; 8 mg / kg, adriamicina) ou solução salina também será mais tarde administrados IV na veia da cauda de pré-aquecida. </li><li> Posicione o mouse supinely em um palco de poliestireno. Prenda o mouse para a almofada e manter a posição usando fita adesiva cirúrgica. </li></ol>title &quot;&gt; 3. Imagens de fêmur vasos sanguíneos, FCFM Durante e após a administração de doxorrubicina ou Saline NOTA: O microscópio confocal desfibrado utilizado neste estudo é composto por duas unidades: (1) microssonda (mini0 / 30). (2) unidade de digitalização a laser (LSU-488; 488 nm de comprimento de onda). <ol><li> Executar todas as datas-voltas análises utilizando o laser de comprimento de onda nm LSU 488. NOTA: O principal detector unidade detecta o filtrado (500-650 nm) fluorescência emitida. As imagens obtidas são reconstruídos depois e exibido a uma taxa de 12 frames / seg. </li><li> Desligue cuidadosamente a seringa da agulha e anexar uma nova seringa contendo FITC dextrano. Administrar (IV) 100 uL de FITC dextrano. </li><li> Deslocar a microssonda (mini0 / 30) para um campo de vista apropriado e fixar-lo, após um ajuste para o eixo z, a fim de se obter a imagem correspondente. Aguarde até que o sinal inicial a desvanecer-se, até que um sinal claro e focado é visible. </li><li> Grave um fluxo de sangue linha de base para um curto período de estabilização (~ 30 segundos). Em seguida, conectar-se a agulha outra seringa, contendo doxorrubicina ou soro fisiológico. IV administrar doxorrubicina a 100 ul de solução salina ou. </li><li> Monitorar o fluxo de FITC-dextrano injectado continuamente durante 20 min. No software associado-FCFM, use o botão de diâmetro na régua superior, a fim de medir os vasos sanguíneos e categorizá-los como pequenos (&lt;15 mm) ou grande (&gt; 15 mm). </li><li> Eutanásia do animal com anestesia overdose. </li></ol>

<ol>
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Avaliar a toxicidade vascular induzida por quimioterapia é um desafio devido à dificuldade em visualizar a dinâmica da vasculatura em resposta a um estímulo em tempo real. Numerosos estudos clínicos têm implicado que várias quimioterapias causar lesão vascular direta, mas o mecanismo e as características desta toxicidade ainda não foi esclarecido. Nós estabelecemos um tempo real, in vivo plataforma de imagem molecular para avaliar a toxicidade vascular potencial de quimioterapia em ratos que compreen...

A evidência clínica indica que várias classes de quimioterapias provocar uma variedade de patologias vasculares manifestadas por fenômeno de Raynaud, hipertensão, infarto do miocárdio, ataque cerebrovascular, e veno-occlusivedisease hepática 1,2. &quot;As drogas anti-angiogênicos&quot; acidental &quot;&quot; é um termo relativamente novo, que descreve agentes quimioterápicos convencionais que atuam como inibidores da angiogénese possíveis, embora não originalmente desenvolvido para este fim de 3-5, mas projetado para eliminar as células tumorais através da imposição de tão pouco &quot;colateral danos &quot;para as células normais quanto possível 3. Vários quimioterapias têm sido implicados como vasculo-tóxicos como observado em estudos clínicos utilizando biomarcadores séricos. Entre estes estão os agentes (tais como ciclofosfamida), compostos de platina, tais como cisplatina () e antraciclinas 1,2,5-7 alquilação. Complicações cardiovasculares agudos podem ocorrer como result de toxicidade vascular induzida por quimioterapia. Eles podem evoluir para doenças crónicas como a aterosclerose e conta para o aumento do risco de morbidade vascular tarde. No entanto, apesar de montagem evidência clínica, há uma escassez de estudos designados enfatizando o mecanismo de toxicidade vascular e, portanto, maior elucidação da patogênese exata que infligem se justifica. Um grande desafio para revelar o mecanismo de toxicidade vascular induzida por quimioterapia resulta da complexidade de investigar a função vascular in vivo. Descrevemos aqui uma plataforma de alta resolução em imagem molecular in vivo em ratinhos que permite capturar características dos navios, o fluxo de sangue e. Esta plataforma facilita a detecção de efeitos directos vasculares induzidas pelo tratamento: em tempo real, bem como a segui-los durante um período de tempo dentro dos mesmos indivíduos.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="1395">
	<tbody>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:579px;">Name of Material/ Equipment</td>
			<td style="width:423px;">Company</td>
			<td style="width:213px;">Catalog Number</td>
			<td style="width:183px;">Comments/Description</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">general anesthesia (100mg/kg ketaset and 6mg/kg XYL-M2).&#160;</td>
			<td>Fort Dodge Animal Health, IA, USA and Biove Laboratories, France</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">a depilatory cream (Veet)</td>
			<td>&#160;ReckittBenckiser, Bristol, UK</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">A 30-gauge, 1/2-inch needle attached to 1 ml syringe&#160;</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">FITC dextran at a volume of 100 &#181;l (10 mg/ml; FD2000S, MW 2000000 Dalton)&#160;</td>
			<td>Sigma</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Doxorubicin (8 mg/kg, Adriamycin)</td>
			<td>Teva, Israel</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">paclitaxel (1.2 mg/kg, Medexel)&#160;</td>
			<td>Taro, Israel</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Saline</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

chemotherapy-induced vascular toxicity - real-time in vivo imaging of vessel impairment

Certas classes de quimioterapias podem exercer alterações vasculares agudas que podem evoluir em condições de longo prazo que podem predispor o paciente a um risco aumentado de morbidade vascular. No entanto, embora a evidência clínica de montagem, há uma escassez de estudos claros de toxicidade vascular e, portanto, a etiologia de um grupo heterogêneo de distúrbios cardiovasculares vasculares / continua a ser elucidado. Além disso, o mecanismo que pode ser a base toxicidade vascular pode completamente diferentes dos princípios da cardiotoxicidade induzida por quimioterapia, a qual está relacionada a lesão directa dos miócitos. Nós estabelecemos um tempo real, in vivo plataforma de imagem molecular para avaliar a toxicidade vascular aguda potencial de terapias anti-cancerígenas. Criámos uma plataforma de in vivo, imagiologia molecular de alta resolução em camundongos, adequado para a visualização de vasos dentro de órgãos confinados e blo de referênciavasos od dentro dos mesmos indivíduos, enquanto que cada indivíduo servir como seu próprio controle. Paredes dos vasos sanguíneos foram prejudicadas após a administração de doxorrubicina, o que representa um único mecanismo de toxicidade vascular que pode ser o evento no início de lesão de órgãos-alvo. Aqui, o método de microscopia de fluorescência (FCFM) imagiologia confocal baseado fibered é descrito, o qual fornece um modo inovador para compreender os fenómenos fisiológicos nos níveis celulares e subcelulares nos sujeitos animais.

Em imagiologia contínua in vivo em tempo real O aparelho de imagem usada aqui é uma alta definição, microscópio confocal fibered, equipado com uma sonda que permite a visualização da vascularização e a sua resposta a vários estímulos como a quimioterapia. Este método é minimamente invasivo, uma vez que, embora possa facilitar a imagiologia de vasos profundos ou órgão, que exige uma pequena incisão para a sonda. Os feixes de sonda consistem em dezenas de milhare...

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Chemotherapy-induced Vascular Toxicity - Real-time In vivo Imaging of Vessel Impairment

We herein describe the method of fibered confocal fluorescent microscopy (FCFM) based imaging, which provides an innovative mode to understand physiological phenomena at the cellular and sub-cellular levels in animal subjects.

Induzida pela quimioterapia Vascular Toxicidade - em tempo real<em&gt; In vivo</em&gt; Imagem de Impairment Vessel

Certain classes of chemotherapies may exert acute vascular changes that may progress into long-term conditions that may predispose the patient to an ...

chemotherapy-induced-vascular-toxicity-real-time-vivo-imaging-vessel

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Medicine

Chemotherapy-induced Vascular Toxicity - Real-time In vivo Imaging of Vessel Impairment

7.3K visualizações.  Tel Aviv University. We herein describe the method of fibered confocal fluorescent microscopy (FCFM) based imaging, which provides an innovative mode to understand physiological phenomena at the cellular and sub-cellular levels in animal subjects.