The authors have no acknowledgements.

Este estudo foi aprovado pelos conselhos de revisão institucional locais em todos os centros participantes. Todos os sujeitos do estudo multicêntrico desde seu consentimento informado para participar eTRIS em suas respectivas instituições. 1. Aquisição de Imagem <ol><li> Realize a ressonância magnética em um scanner de corpo inteiro T 1.5 T ou 3 usando bobinas-matriz faseada especializados para MRV como uma bobina vascular periférica, bobinas de matriz do corpo ou bobinas de run-off. Use estas bobinas em conjunto com outras bobinas de matriz corpo ou bobinas de coluna. Se não há bobinas especializados e adequados estão disponíveis, use a bobina de corpo em seu lugar. NOTA: Use scanners disponíveis no mercado, como a Siemens Symphony, Sonata, etc. <ol><li> Assunto tela, e questionário de segurança avaliação MRI antes de digitalizar. Já mudança de assunto em um vestido. </li></ol></li><li> Inserir uma linha intravenosa na veia antecubital de objecto para a injecção do agente de contraste. Siga proc segurança padrãoedures para injectar um agente de contraste à base de gadolínio. </li><li> Lugar sujeito em decúbito dorsal, pés primeira posição no aparelho de ressonância magnética e de posição bobinas apropriadas nas regiões a serem verificados. Bobinas seguras usando tiras de velcro conforme necessário. <ol><li> Pernas / pés do sujeito Fixe para evitar artefatos de movimento durante o exame de ressonância magnética. </li><li> Ligue o laser para centragem e mover a tabela até que as vigas de laser estão localizados logo abaixo dos joelhos do sujeito (patela). Aceite essa posição para o centro iso-o da digitalização e mover a tabela paciente para a posição central do furo scanner. </li></ol></li><li> Medir a depuração da creatinina (ClCr) e determinar a dose do agente de contraste a ser utilizado para o assunto com base no peso corporal. Se CrCL &lt;30 ml / min, assunto é excluído do estudo. Para indivíduos com ClCr&gt; 30 ml / min, mas menos do que 45 ml / min, a 0,01 mmol / kg de agente de contraste é usado. Para indivíduos com CrCL&gt; 45 ml / min mas &lt;60 mL / min, 0,02 mmol / kg de gadofosveset é injectado. Para os indivíduos com função renal normal (depuração da creatinina&gt; 60 ml / min), uma dose de 0,03 mmol / kg (0,12 mL / kg) gadofosveset trissódico é usado. Uma ressonância magnética de alimentação compatível injector é usada para injetar o agente de contraste. </li><li> Realizar imagem bilateral de ambas as pernas e pelve inferior em uma única sessão de exame com duração aproximadamente de 60 minutos, como mostrado na Tabela 1 e descrito na secção de protocolo de RM. NOTA: Anonymize os dados do paciente anteriores à transferência de imagens para um laboratório central para análise núcleo. </li></ol> 2. Protocolo de MRI <ol><li> Execute o protocolo de imagem a partir do console do scanner selecionando cada passo protocolo a partir da janela do protocolo e arrastando-o para a lista de execução. Depois de pronto, execute a sequência pressionando o botão equivalente Digitalização / Executar ou. </li><li> Adquirir gradiente eco 2D seqüências com base usando parâmetros de sequência na Tabela 1, nos três eixos ortogonais a imagem de meados de bezerro paraacima da crista ilíaca e uso como localizadores / batedores. </li><li> Executar tempo de varreduras de voo (TOF) angiografia em cada segmento, conforme especificado no Quadro 1 NOTA: Esses exames também são usados ​​como localizadores para ajudar a diferenciar artérias de veias como um agente de contraste de longa circulação é utilizado em estado estável neste protocolo. Este ponto de vista da árvore arterial é bastante limitado e só serve para ajudar o analista imagem diferenciar as artérias da vasculatura venosa e não servir como um angiograma de pleno direito. </li><li> Para evitar a aquisição de imagens de baixa qualidade na medida inferior e superior do volume de imagem, adquirir três coronais segmentos de 40 centímetros no pé a direcção da cabeça de sobreposição 10 cm durante os scans Gradiente eco T1 3D ponderadas. NOTA: Estes três segmentos abrangem: a) meados de bezerro para acima do joelho b) acima do joelho até a coxa / pelve mais baixa, e c) da coxa / abdômen pélvis para Figura 1 mostra imagens da amostra com os três locais de aquisição.ilustrado. </li><li> Para distinguir entre trombose venosa aguda e crônica, adquirir T1W de imagem direta do trombo (DTHI) e gradiente eco 3D (GRE) sequências utilizando parâmetros na Tabela 1. NOTA: Estes três scans também servir como o exame de pré-contraste para a aquisição MRV. A extensão da cobertura destas aquisições é o mesmo que os localizadores iniciais adquiridos nos três locais ilustrados na Figura 1. Sequência GRE também é facilmente implementável em várias plataformas de digitalização e entre as intensidades de campo de imagem. </li></ol><img alt="Figura 1" src="/files/ftp_upload/52761/52761fig1.jpg" /> Figura 1:. Exemplos de imagens que mostram os locais de aquisição para as três estações utilizadas para geração de imagens O campo de visão no sentido coronal e axial foi de 40 cm para cada posição de cama [aquisição: (meados de bezerro para acima do joelho), (acima de joelhos para coxa / pelve), (coxa / pelve<html> ao abdômen)] com 10 cm de sobreposição entre cada posição de cama. (A) imagem axial; (B) imagem sagital e (c) imagem coronal. A seta vermelha indica TVP. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/52761/52761fig1highres.jpg" target="_blank">Por favor clique aqui para ver uma versão maior desta figura.</a> <ol start="6"><li> Administrar o agente de contraste (gadofosveset trissódico) a uma dose de 0,03 mmol / kg (0,12 mL / kg) por via intravenosa no indivíduo a uma velocidade de 2 ml / s e nivelada com 20 ml de solução salina. Deixar o agente de contraste circular durante 5 minutos para assegurar um estado de equilíbrio numa acumulação de sangue. </li><li> Adquirir imagens de MRV; pós contraste gradiente 3D sequências de eco em 3 locais descritos anteriormente. Ver os parâmetros das sequências na Tabela 1 e Tabela 2. Use essas imagens para determinar a localização e tamanho dos trombos. </li></ol>files / ftp_upload / 52761 / 52761table1.jpg &quot;/&gt; Tabela 1: Lower protocolo venography extremidade MR com o agente de contraste, gadofosveset trissódico, incluindo imagens de trombos direto. <img alt="Tabela 2" src="/files/ftp_upload/52761/52761table2.jpg" /> Tabela 2: O parâmetro de imagem para cada sequência específica adquirida no protocolo. <ol start="8"><li> Após verificação for concluída, remova tema a partir do scanner de ressonância magnética e tirar a linha intravenosa. Peça ao sujeito para mudar de vestido e saia da instalação. </li></ol> Análise 3. Imagem <ol><li> Realizar análise de imagem em uma estação de trabalho de análise de imagem dedicada a executar o software de processamento de imagem open source aprovado pela FDA como OsiriX MD 20, por dois analistas de imagem treinados. Assegurar os analistas têm um mínimo de 3 anos de experiência cada um. </li><li> Temporariamente cego todas as imagens antes da transferência para a imagemworkstation analista para análise. </li><li> Certifique-se de que um radiologista avalia cada exame de ressonância magnética para detectar a presença e localização de trombos. Fornecer avaliação do radiologista para o analista imagem para ser utilizada como um guia ao longo da análise. </li><li> Carregar todas as imagens DICOM de ambas as visitas de ressonância magnética de um assunto para o software de processamento de imagem, selecionando &quot;importação&quot;, e comparar os dois pontos de tempo de imagem da série MRV para cada indivíduo para garantir a cobertura espacial adequada e registo entre pontos de tempo. <ol><li> Selecione a ferramenta &quot;MPR 3D&quot; no espectador a fornecer navegação simultânea de dados de imagem em 3 vistas ortogonais (axial, coronal e sagital). NOTA: O modo de MPR 3D do software de processamento de imagem permite a visualização dos vasos de interesse. </li></ol></li><li> Analisar os seguintes navios se TVP está presente: ilíaca externa, femoral comum, femoral superficial, femoral profunda, poplítea, tibial anterior, tibial posterior I &amp;II, gastrocnémio I e II, e peroneal I &amp; II veias. Toda a análise é restrita a regiões dos vasos que estão presentes em ambas as imagens de pontos de tempo. </li><li> Avaliar a qualidade da imagem para cada veia com TVP conhecido como indicado por avaliação do radiologista numa escala 0-5, com 0-2 e 3-5 sendo analisável ser analisável para ambas as sequências DTHI e MRV. Para a discriminação de sistema de pontuação veja a Figura 2. </li></ol><img alt="Figura 2" src="/files/ftp_upload/52761/52761fig2.jpg" /> Figura 2: O colapso do sistema de pontuação usado para avaliar a qualidade das imagens para cada veia de interesse com TVP conhecido. <ol start="7"><li> Para a análise MRV, analisar individualmente cada navio. Após 3D curvado reconstrução multiplanar, use contornos seguintes da linha central de cada veia, traçado pelo analista, para gerar trajetória curva para cada veia e salvar em arquivo. <ol><li> Estabelecer a posição do trombo no espaço tridimensional. A partir do plano curvo MPR, um caminho Bezier 3D será exibida. </li><li> Delinear a linha de centro da veia, seleccionando a função de &quot;contorno Path&quot; em &quot;Modo de criação&quot;. </li><li> Coloque pontos repetidamente sobre qualquer um dos vista ortogonal MPR para endireitar todo o vaso de interesse. </li><li> Fazer ajustes quando necessário para garantir que o navio está totalmente esticado no &quot;Modo de Edição&quot; </li><li> Quando o caminho de contorno é precisamente delineado em linha central do navio, salvar, selecionando o ícone &quot;caminho curvo&quot; para exportar o arquivo </li><li> Gerar um milímetro cortes axiais perpendicular à trajetória curva e salvar como arquivos DICOM (Figura 3). Observe o caminho curvo, navio se endireitou, e correspondentes imagens axiais para quantificar DVT a partir de imagens de MRV. NOTA: As imagens renderizadas no visualizador 3D Curved MPR deve então ser exportado in formato DICOM e adicionado à base de dados como uma nova série de imagens. </li></ol></li></ol><img alt="Figura 3" src="/files/ftp_upload/52761/52761fig3.jpg" /> Figura 3:. DVT amostra mostrada em seqüência MRV (i, painel esquerdo) Trajeto curvado (linha amarela) ilustra o contorno seguido pela veia que está sendo analisado. (Ii, painel do meio) navio endireitado ao longo central do navio que está sendo analisado (linha pontilhada vermelha) (iii, painel da direita) mostra cortes axiais perpendicular à veia que está sendo analisado em locais indicados por linhas amarelas (A, B, C) ​​em cortes longitudinais. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/52761/52761fig3highres.jpg" target="_blank">Por favor clique aqui para ver uma versão maior desta figura.</a> <ol start="7"><li><ol start="7"><li> Nessas imagens DICOM axiais, regiões segmento manualmente deinteresse abrangendo o trombo (ver Figura 4) usando o &quot;Polígono fechado Ferramenta ROI&quot;. Salve regiões de interesse para o arquivo selecionando a opção &quot;Salvar todos os ROIs deste Series&quot; localizado no &quot;ROI&quot; no menu suspenso e salvar as métricas de ROI, navegando até o menu &quot;Plugins&quot; e selecione &quot;Ferramentas de ROI&quot; seguido de &quot;ROI de exportação &quot;. Este deve ser guardado em um formato CSV. </li></ol></li></ol><img alt="Figura 4" src="/files/ftp_upload/52761/52761fig4.jpg" /> Figura 4:. Regiões segmentadas manualmente de interesse (verde) são mostrados englobando o trombo na axiais reformatado imagens DICOM <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/52761/52761fig4highres.jpg" target="_blank">Por favor clique aqui para ver uma versão maior desta figura.</a> <ol start="7"><li><ol start="8"><li> Calcular o volume de trombos através da multiplicação do AR<html> eA em cada fatia analisados ​​pela espessura de corte (1 mm), utilizando um roteiro personalizado construído Matlab. Calcular o volume total do trombo em cada disciplina, adicionando os volumes trombo em cada navio. </li></ol></li><li> Para a análise DTHI, identificar trombos frescos como regiões brilhantes em contraste pré-scans gradiente eco 3D T1W 13 no interior das regiões TVP segmentados pela MRV. <ol><li> Nas imagens de pré-contraste axiais, calcular o volume de trombo fresco por regiões de interesse (ROI) manualmente, como mostrado na Figura 5 desenho. Na Figura 6, imagens da amostra, indicando TVP medido por DTHI em conjunto com as imagens de MRV estão representados. </li><li> Abra as sequências pré-contraste e pós-contraste ao lado do outro. Selecione vista &quot;axial&quot; e delinear regiões brilhantes ao longo do vaso de interesse usando a &quot;Ferramenta ROI polígono fechado&quot;. </li></ol></li></ol>ES / ftp_upload / 52761 / 52761fig5.jpg &quot;/&gt; Figura 5: DVT amostra mostrada em seqüência de imagens DTHI (a) imagem coronal, (b) imagem axial, e (c) imagem axial que mostra a região de interesse (verde) traçou em torno de trombo fresco (setas azuis) em imagens pré-contraste.. As imagens são adquiridas DTHI antes da injecção do agente de contraste e confiar no teor de met-hemoglobina do trombo para produzir o sinal luminoso. <img alt="Figura 6" src="/files/ftp_upload/52761/52761fig6.jpg" /> Figura 6:. DVT amostra mostrada em seqüência DTHI imagem Os painéis da esquerda mostram imagens MRV com vazios sinal indicando TVP total (setas verdes). O show painel direito correspondente imagens DTHi com sinal luminoso, indicando presença de trombo fresco (setas azuis). <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/52761/52761fig6highres.jpg" target="_blank">Por favor clique aqui para ver uma</a>versão maior desta figura. 4. Avaliação da reprodutibilidade <ol><li> Avaliar um subconjunto de dez sujeitos para a reprodutibilidade da análise. </li><li> Realizar análise, como descrito acima, por dois analistas de imagem separados (primárias e secundárias) leitores para avaliar a variabilidade inter-observador </li><li> Certifique-se de que o leitor de primário realizam também uma segunda análise de imagem três meses após a primeira análise para avaliar a variabilidade intra-observador dos resultados. </li><li> Calcule coeficientes intra-classe de correlação (ICC) e realizar uma análise de Bland-Altman para avaliar a reprodutibilidade inter e intra-observador. Realizar um teste t de uma amostra de olhar de viés na análise de Bland-Altman. CCI&gt; 0,9 e nenhum viés na análise de Bland-Altman são considerados aceitáveis. </li></ol>

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Venkatesh Mani has received research grants from Novartis. Nadia Alie, Sarayu Ramachandran, Cecilia Besa, Philip Robson and Bachir Taouli have nothing to disclose. Michele Mercuri and Michael Grosso are employees of Daiichi Sankyo. Greg Piazza has received research grants from Daiichi Sankyo, BMS, EKOS, and the Thrombosis Research Institute. Samuel Goldhaber has received grants from BMS, Daiichi Sankyo, EKOS, NHLBI and the Thrombosis Research Institute. He is a consultant for Ariad, Bayer, Boehringer Ingelheim, Bristol Myers Squibb, Daiichi Sankyo, Genentech, Janssen, Merck, Pfizer and Portola. Zahi Fayad has received research grants from Daiichi Sankyo, Roche, GlaxoSmithKline, Merck, VBL Therapeutics, Novartis, Bristol-Myers Squibb, and Via Pharmaceuticals.

Este estudo demonstrou a viabilidade de quantificação de trombose venosa profunda no MR venography usando gadofosveset trissódico como um agente de contraste, com excelente reprodutibilidade de análise para quantificar o volume de trombo em um ambiente multicêntrico. Para calcular o volume total do trombo, o principal método utilizado no pós-contraste MRV varredura para medir o volume de trombos. O método utilizado foi o secundário abordagem directa imagiologia de trombos (DTHI), que utiliza a presença de meta...

O tromboembolismo venoso (TEV) afeta 300,000-600,000 pessoas nos Estados Unidos a cada ano 1. A trombose venosa profunda (TVP) é a apresentação mais comum de TEV, e mais comumente afeta a panturrilha, coxa ou veias pélvicas. O diagnóstico, gestão e acompanhamento dos pacientes com TVP não pode ser baseada exclusivamente em exames clínicos, uma vez que os sinais e sintomas desta doença são inespecíficos 2,3. Embora exames de sangue (como dímero-D) pode ajudar a excluir o diagnóstico de TVP, a imagem latente é necessário para estabelecer a presença de TVP 4. Ultra-som de compressão (USC) é actualmente o método de imagem mais utilizada no diagnóstico de suspeita de TVP aguda. CUS é barato e tem uma elevada sensibilidade e especificidade para detectar TVP aguda 5. No entanto, CUS não pode avaliar de forma confiável as veias profundas na pelve 6. Além disso, CUS não podemos quantificar directamente o volume de trombos e composição, que são importantes ao distinguir between TVP aguda (uma fonte potencial de embolia pulmonar (PE)) e TVP crônica (menos propensos a embolização) e para a avaliação da eficácia terapêutica 7. Ao contrário de tomografia computadorizada (TC), ressonância magnética (MRI) não entregar radiação ionizante, e por isso é apropriado para exames seriados para avaliar a evolução do trombo ou regressão. Comparado com CUS, ressonância magnética pode detectar TVP pélvica e pode definir mais precisamente proximal (veias poplítea e acima) e perna distal (abaixo veia poplítea) TVP 8, para melhor avaliar o risco de PE. A ressonância magnética pode caracterizar idade trombo e organização, e pode ajudar a diferenciar aguda de TVP crônica 9-11 (refs atualizado). A quantificação do volume de trombo, uma métrica importante para avaliar a evolução da doença e resposta ao tratamento, é viável com ressonância magnética. Os protocolos atuais venography ressonância magnética são realizados após a injeção de gadolínio (Gd) agentes de contraste à base 12. Estessão moléculas de baixo peso molecular que extravasam rapidamente após a injecção, e exigem tempo cuidado para capturar a fase de reforço venosa necessário para visualizar correctamente o trombo 13,14. Um estudo de prova de conceito, Redução de trombos edoxaban estudo de imagem (eTRIS), utilizando um projeto aberto, investigou a eficácia e segurança do edoxaban 90 mg uma vez por dia durante 10 dias, seguido de edoxaban 60 mg uma vez por dia no tratamento de aguda, TVP sintomática (ClinicalTrials.gov Identificador: NCT01662908). eTRIS aborda se edoxaban monoterapia, sem concomitante de heparina de baixo peso molecular (LMW heparina) no momento do início do tratamento, é mais eficaz do que o tratamento padrão com terapia de LMW heparina / varfarina em pacientes com trombose venosa profunda, tal como avaliado pela variação percentual (%) de linha de base no trombo volume / tamanho (medido por MRI) no dia 14-21. Outro objetivo do eTRIS foi desenvolver e validar um MR simplesvenography (MRV) de aquisição de imagem e protocolo de análise para a quantificação do volume de trombo em TVP. Para superar alguns dos desafios enfrentados pelos protocolos atuais MRV em configurações multicêntricos, utilizamos um recém-aprovado pela FDA, de longa circulação, associação de sangue agente de contraste à base de gadolínio (gadofosveset trissódico). Em comparação com a utilização de quelatos de base de Gd extracelulares (por exemplo, o Gd-DTPA) para MRV, gadofosveset tem um tempo de circulação significativamente mais longo, o que permite a utilização de um programa de aquisição de MR mais simples, sem qualquer tempo de aquisição. Gadofosveset trissódico é uma piscina de sangue agente de contraste de MRI que circula por 2-3 horas após a injecção intravenosa 15,16. O seu perfil de segurança é semelhante às dos agentes tradicionais extravasculares extracelulares contraste de MRI 17. Ele permite imagens em estado estacionário da vasculatura durante um período de 1 h. Portanto, nenhum operador de temporização dependente da aquisição de imagem é necessário após a injeção de contraste. A vantagem adicionalde utilizar este agente de contraste é que é uma molécula pequena (peso molecular de 857 Da) 18 e pode permear os lados de um trombo mesmo totalmente ocluso, proporcionando assim um contraste excelente do TVP a partir zonas circundantes sobre a MRV e permitindo o cálculo quantitativo da TVP volumes. Estudos anteriores estabeleceram a confiabilidade entre avaliadores de visualizar veias usando o venography Volume MR interpolada apneia Examination (VIBE) usando gadofosveset trissódico 19. Aqui, usamos uma abordagem semelhante em um ambiente de ensaio clínico multicêntrico para avaliar a trombose venosa profunda e usar o volume de TVP medido por MRI como um ponto final. eTRIS fornece uma plataforma ideal para avaliar a viabilidade e reprodutibilidade da análise da abordagem de imagem MRV aqui proposto, utilizando um agente de contraste de longa circulação com base em Gd poça de sangue para avaliar volumes de TVP. Também avaliamos o uso de uma abordagem de imagem direta do trombo (DTHI) para quantificar a extensão da TVP fresco antes dea injecção de agentes de contraste. Dois exames de MRI foram realizadas durante o curso do estudo: o primeiro, no prazo de 36 horas após a randomização para o grupo de monoterapia ou edoxaban heparina / grupo varfarina, e a segunda entre 14 a 21 dias após a randomização. As análises de todas as imagens foram realizados por um laboratório central do núcleo. Volume de trombo fresco é calculado a partir de um trombo Direct Imaging (DTHI) nas pernas e pélvis inferiores antes da injecção de qualquer agente de contraste. O volume total de trombo (novo e velho) é calculado a partir de um posto de contraste por ressonância magnética venography (MRV) imagens das veias nas pernas e pélvis mais baixos.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0">
	<tbody>
		<tr>
			<td>Ablavar (gadofosveset trisodium)</td>
			<td>Lantheus</td>
			<td></td>
			<td>Contrast Agent</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>1.5T or 3T Scanners</td>
			<td>GE, Siemens, or Phillips</td>
			<td></td>
			<td>GE(Horizon, Signa, Hdx, 750), Siemens (Symphony, Avanto, Sonata, Trio, Aera) or Philips (Intera, Achieva)</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

a multicenter mri protocol for the evaluation and quantification of deep vein thrombosis

Nós avaliamos uma venografia por ressonância magnética (MRV) abordagem com gadofosveset quantificar total de mudanças de volume trombo como o principal critério para a eficácia do tratamento em um estudo multicêntrico, randomizado, comparando monoterapia edoxaban com um regime de heparina / varfarina para agudas, sintomáticos extremidades inferiores trombose venosa profunda (TVP ) de tratamento. Nós também utilizada uma abordagem directa imagiologia de trombos (DTHI, sem o uso de um agente de contraste) para quantificar trombos frescos. Em seguida, procurou-se avaliar a reprodutibilidade da metodologia de análise e aplicabilidade do uso de 3D venography de ressonância magnética e de imagem trombo direto para a quantificação da TVP em um ambiente de estudo multicêntrico. A partir de 10 indivíduos selecionados aleatoriamente participantes do edoxaban Thrombus Redução estudo de imagem (eTRIS), o volume total de trombo em todo o sistema venoso profundo membros inferiores foi quantificada bilateralmente. Os indivíduos foram fotografada usando sequências de gradiente 3D-T1W eco antes (direta timagiologia hrombus, DTHI) e 5 minutos após a injecção de 0,03 mmol / kg de gadofosveset trissódico (venografia por ressonância magnética, a MRV). As margens da TVP em correspondentes, curvas multi-planares imagens reformatados axiais foram delineados manualmente por dois observadores para obter medições volumétricas de trombos venosos. MRV foi usada para calcular o volume total de TVP, enquanto DTHI foi usada para calcular o volume de trombos frescos. Correlação intra-classe (ICC) e análise de Bland Altman foram realizadas para comparar a variabilidade inter e intra-observador da análise. O ICC para a variabilidade inter e intra-observador foi excelente (0,99 e 0,98, p &lt;0,001, respectivamente) sem viés na análise de Bland-Altman para imagens MRV. Para imagens DTHi, os resultados foram ligeiramente inferior (ICC = 0,88 e 0,95, respectivamente, p &lt;0,001), com tendência para resultados entre observadores sobre os gráficos de Bland-Altman. Este estudo mostrou a viabilidade da estimativa de volume de trombo em TVP usando MRV com gadofosveset trissódico, com boa intra e noreprodutibilidade ter-observador em um ambiente multicêntrico.

Para efeitos de reprodutibilidade das avaliações, a linha de base e seguem-se as verificações foram reunidas e analisadas como processos distintos. Dos 10 indivíduos selecionados aleatoriamente (2 visitas cada), havia 59 navios com TVP identificados utilizando a abordagem MRV e 29 embarcações com trombo fresco identificado pelo DTHI. No subgrupo destes 10 indivíduos selecionados aleatoriamente analisadas para as métricas de reprodutibilidade, não há embarcações com TVP foram considerados de qualidade não-a...

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A Multicenter MRI Protocol for the Evaluation and Quantification of Deep Vein Thrombosis

The goal of this study is to use magnetic resonance venography with long-circulating gadolinium-based contrast agent and direct thrombus imaging for quantitative evaluation of DVT volume in a multicenter, clinical trial setting. Inter- and intra-observer variability assessments were conducted, and reproducibility of the protocol was determined.

A Multicenter MRI Protocolo para a Avaliação e Quantificação de Trombose Venosa Profunda

We evaluated a magnetic resonance venography (MRV) approach with gadofosveset to quantify total thrombus volume changes as the principal criterion for ...

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Research

JoVE Journal

Medicine

16.9K visualizações.  Icahn School of Medicine at Mount Sinai. The goal of this study is to use magnetic resonance venography with long-circulating gadolinium-based contrast agent and direct thrombus imaging for quantitative evaluation of DVT volume in a multicenter, clinical trial setting. Inter- and intra-observer variability assessments were conducted, and reproducibility of the protocol was determined.

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Quantification of the Immunosuppressant Tacrolimus on Dried Blood Spots Using LC-MS/MS

The calcineurin inhibitor tacrolimus is the cornerstone of most immunosuppressive treatment protocols after solid organ transplantation in the United States. Tacrolimus is a narrow therapeutic index drug and as such requires therapeutic drug monitoring and dose adjustment based on its whole blood trough concentrations. To facilitate home therapeutic drug and adherence monitoring, the collection of dried blood spots is an attractive concept. After a finger stick, the patient collects a blood drop on filter paper at home. After the blood is dried, it is mailed to the analytical laboratory where tacrolimus is quantified using high-performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry (HPLC-MS/MS) in combination with a simple manual protein precipitation step and online column extraction.
For tacrolimus analysis, a 6-mm disc is punched from the saturated center of the blood spot. The blood spot is homogenized using a bullet blender and then proteins are precipitated with methanol/0.2 M ZnSO4 containing the internal standard D2,13C-tacrolimus. After vortexing and centrifugation, 100 &#181;l of supernatant is injected into an online extraction column and washed with 5 ml/min of 0.1 formic acid/acetonitrile (7:3, v:v) for 1 min. Hereafter, the switching valve is activated and the analytes are back-flushed onto the analytical column (and separated using a 0.1% formic acid/acetonitrile gradient). Tacrolimus is quantified in the positive multi reaction mode (MRM) using a tandem mass spectrometer.
The assay is linear from 1 to 50 ng/ml. Inter-assay variability (3.6%-6.1%) and accuracy (91.7%-101.6%) as assessed over 20 days meet acceptance criteria. Average extraction recovery is 95.5%. There are no relevant carry-over, matrix interferences and matrix effects. Tacrolimus is stable in dried blood spots at RT and at +4 &#176;C for 1 week. Extracted samples in the autosampler are stable at +4 &#176;C for at least 72 hr.

Here we describe a high-performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry (HPLC-MS/MS) assay to quantify the immunosuppressant tacrolimus in dried blood spots using a simple manual protein precipitation step and online column extraction.

Quantificação do imunossupressor tacrolimus em manchas de sangue seco utilizando LC-MS / MS

The calcineurin inhibitor tacrolimus is the cornerstone of most immunosuppressive treatment protocols after solid organ transplantation in the United ...

Medicina

Using Saccadometry with Deep Brain Stimulation to Study Normal and Pathological Brain Function

The oculomotor system involves a large number of brain areas including parts of the basal ganglia, and various neurodegenerative diseases including Parkinson's and Huntington's can disrupt it. People with Parkinson's disease, for example, tend to have increased saccadic latencies. Consequently, the quantitative measurement of saccadic eye movements has received considerable attention as a potential biomarker for neurodegenerative conditions. A lot more can be learned about the brain in both health and disease by observing what happens to eye movements when the function of specific brain areas is perturbed. Deep brain stimulation is a surgical intervention used for the management of a range of neurological conditions including Parkinson's disease, in which stimulating electrodes are placed in specific brain areas including several sites in the basal ganglia. Eye movement measurements can then be made with the stimulator systems both off and on and the results compared. With suitable experimental design, this approach can be used to study the pathophysiology of the disease being treated, the mechanism by which DBS exerts it beneficial effects, and even aspects of normal neurophysiology.

This paper describes the use of quantitative measurement of eye movements in conjunction with stimulation of focal areas of the deep brain in order to study physiology, pathophysiology, and the mechanisms of deep brain stimulation.

Usando Saccadometry com Estimulação Cerebral Profunda para estudar normal e patológico função cerebral

The oculomotor system involves a large number of brain areas including parts of the basal ganglia, and various neurodegenerative diseases including ...

In Vivo Evaluation of Fracture Callus Development During Bone Healing in Mice Using an MRI-compatible Osteosynthesis Device for the Mouse Femur

Endochondral fracture healing is a complex process involving the development of fibrous, cartilaginous, and osseous tissue in the fracture callus. The amount of the different tissues in the callus provides important information on the fracture healing progress. Available in vivo techniques to longitudinally monitor the callus tissue development in preclinical fracture-healing studies using small animals include digital radiography and &#181;CT imaging. However, both techniques are only able to distinguish between mineralized and non-mineralized tissue. Consequently, it is impossible to discriminate cartilage from fibrous tissue. In contrast, magnetic resonance imaging (MRI) visualizes anatomical structures based on their water content and might therefore be able to noninvasively identify soft tissue and cartilage in the fracture callus. Here, we report the use of an MRI-compatible external fixator for the mouse femur to allow MRI scans during bone regeneration in mice. The experiments demonstrated that the fixator and a custom-made mounting device allow repetitive MRI scans, thus enabling longitudinal analysis of fracture-callus tissue development.

In Vivo Evaluation of Fracture Callus Development During Bone Healing in Mice Using an MRI-compatible Osteosynthesis Device for the Mouse Femur

The evaluation of tissue development in the fracture callus during endochondral bone healing is essential to monitor the healing process. Here, we report the use of a magnetic resonance imaging (MRI)-compatible external fixator for the mouse femur to allow MRI scans during bone regeneration in mice.

Na Vivo Avaliação do desenvolvimento de calo de fratura durante a consolidação óssea em ratos usando um dispositivo de osteossíntese compatível com MRI para o fêmur de Mouse

Endochondral fracture healing is a complex process involving the development of fibrous, cartilaginous, and osseous tissue in the fracture callus. The ...

Quantitative [18F]-Naf-PET-MRI Analysis for the Evaluation of Dynamic Bone Turnover in a Patient with Facetogenic Low Back Pain

Imaging techniques that reflect dynamic bone turnover may aid in characterizing a wide range of bone pathologies. Bone is a dynamic tissue undergoing continuous remodeling with the competing activity of osteoblasts, which produce the new bone matrix, and osteoclasts, whose function is to eliminate mineralized bone. [18F]-NaF is a positron emission tomography (PET) radiotracer that enables visualization of bone metabolism. [18F]-NaF is chemically absorbed into hydroxyapatite in the bone matrix by osteoblasts and can thus noninvasively detect osteoblastic activity, which is occult to conventional imaging techniques. Kinetic modeling of dynamic [18F]-NaF-PET data provides detailed quantitative measures of bone metabolism. Conventional semi-quantitative PET data, which utilizes standardized uptake values (SUVs) as a measure of radiotracer activity, is referred to as a static technique due to its snapshot of tracer uptake in time.&#160; Kinetic modeling, however, utilizes dynamic image data where tracer levels are continuously acquired providing tracer uptake temporal resolution. From the kinetic modeling of dynamic data, quantitative values like blood flow and metabolic rate (i.e., potentially informative metrics of tracer dynamics) can be extracted, all with respect to the measured activity in the image data. When combined with dual modality PET-MRI, region-specific kinetic data can be correlated with anatomically registered high-resolution structural and pathologic information afforded by MRI. The goal of this methodological manuscript is to outline detailed techniques for performing and analyzing dynamic [18F]-NaF-PET-MRI data. The lumbar facet joint is a common site of degenerative arthritis disease and a common cause for axial low back pain.&#160; Recent studies suggest [18F]-NaF-PET may serve as a useful biomarker of painful facetogenic disease.&#160; The human lumbar facet joint will, therefore, be used as a prototypical region of interest for dynamic [18F]-NaF-PET-MRI analysis in this manuscript.

Quantitative [18F]-Naf-PET-MRI Analysis for the Evaluation of Dynamic Bone Turnover in a Patient with Facetogenic Low Back Pain

Imaging techniques that reflect dynamic bone turnover may aid in characterizing a wide range of bone pathologies. We present detailed methodologies for performing and analyzing dynamic [18F]-NaF-PET-MRI data in a patient with facetogenic low back pain using the lumbar facet joints as a prototypical region of interest.

Análise quantitativa [18F]-NAF-PET-RM para avaliação da rotatividade óssea dinâmica em paciente com dor nas costas Facetogênica

Imaging techniques that reflect dynamic bone turnover may aid in characterizing a wide range of bone pathologies. Bone is a dynamic tissue undergoing ...

Quantification of Optic Nerve Cross Sectional Area on MRI: A Novel Protocol using Fiji Software

Optic nerve assessment is an important aspect of glaucoma diagnosis and follow-up. This project describes a protocol for a unified methodology of optic nerve cross-sectional assessment and quantification using 3 T MRI for image acquisition and ImageJ's Fiji software for image processing quantification. Image acquisition was performed using 3 T MRI, with proper instructions for the patient to ensure straight fixation during imaging. A T2-weighted fat suppressed sequence was used. A coronal cut taken 3 mm behind the globe and perpendicular to the optic nerve axis should be uploaded to the software. Using the threshold function, the white matter area of the optic nerve is selected and quantified, thus, eliminating inter-individual measurement bias. We also described the normal limits for the optic nerve cross-sectional area according to age, based on previously published literature. We used the described protocol to assess optic nerve of a suspected glaucoma patient. The optic nerve cross-sectional area was found to be within the normal limits, a finding further confirmed via optical coherence tomography of the optic nerve.

We provided a detailed protocol for a standardized method of optic nerve assessment and quantification using MRI, utilizing a widely available imaging sequence, and open access software for image analysis. Following this standardized protocol would provide meaningful data for comparison between different patients and different studies.

Quantificação da Área Transversal do Nervo Óptico na Ressonância Magnética: Um novo protocolo usando o software Fiji

Optic nerve assessment is an important aspect of glaucoma diagnosis and follow-up. This project describes a protocol for a unified methodology of optic ...

Repetitive Blood Sampling from the Subclavian Vein of Conscious Rat

Rats are widely used in pharmacokinetics (PK) and toxicokinetic (TK) studies that need to collect a certain amount of blood at specific time points to detect drug exposure. The rat blood sampling method determines the quality of the plasma and further affects the precision of the test results. The subclavian vein blood collection method described in this protocol collects blood samples repeatedly in the conscious state of animals to meet the needs of PK and TK tests. The skills of restraint handling and appropriate procedure of needle incision ensure the success rate of blood collection. It is easy to operate while ensuring the quality of plasma and at the same time catering to animal welfare. However, this method requires skilled operation, and an improper one may cause animal weakness, pain, lameness, and even mortality. The current method has been used in the testing facility for a 4-week oral toxicity study in Sprague Dawley (SD) rats with TK. The maximum amount of blood collected within 24 h did not exceed 20% of the animal's total blood. The animals' body weight was more than 200 g for males and females. The data showed that the animals' bodyweight increased steadily every week, and the clinical observation was normal after repetitive sample collection.

The present protocol describes a simple and efficient method for collecting blood from the subclavian vein in rats. It enables rapid, timely, and easily identifiable sampling without anesthesia and obtains high-quality blood through repetitive sample collection.

Amostragem Repetitiva de Sangue da Veia Subclávia de Rato Consciente

Rats are widely used in pharmacokinetics (PK) and toxicokinetic (TK) studies that need to collect a certain amount of blood at specific time points to ...

A Real-World High-Intensity Interval Training Protocol for Cardiorespiratory Fitness Improvement

High-Intensity Interval Training (HIIT) has emerged as an interesting time-efficient approach to increase exercise adherence and improve health. However, few studies have tested the efficiency of HIIT protocols in a &#34;real world&#34; setting, e.g., HIIT protocols designed for outdoor spaces without specialized equipment. This study presents a &#34;real world&#34; training protocol, named &#34;beep training&#34;, and compares the efficiency of a HIIT regiment versus a traditional long-duration Moderate-Intensity Continuous Training (MICT) regiment using this beep training protocol on VO2 max of overweight untrained men. Twenty-two subjects performed outdoor running with MICT (n = 11) or HIIT (n = 11). Cardiorespiratory fitness was assessed before and after training protocols using a metabolic analyzer. Both training protocols were performed 3 days a week for 8 weeks using the Beep Test results. The MICT group performed the exercise program at 60%-75% of the maximum speed of the 20 m shuttle test (Vmax) and with a progression of the distance of 3,500-5,000 m. The HIIT group performed the interval exercise with 7-10 bouts of 200 m at 85%-100% of the maximum speed of the 20 m shuttle test (Vmax), interspersed with 1 min of passive recovery. Although the HIIT group presented a significantly lower training volume than the MICT group (p &#60; 0.05) after 8 weeks of beep training, HIIT was superior to MICT in improving VO2 max (MICT: ~4.1%; HIIT: ~7.3%; p &#60; 0.05). The &#34;real world&#34; HIIT regiment based on beep training protocol is a time-efficient, low-cost, and easy-to-implement protocol for overweight untrained men.

This study presents a low-cost and easy-to-implement "real world" high-intensity interval training (HIIT) protocol for scientific research and discusses its efficiency for cardiorespiratory fitness.

Um protocolo de treinamento intervalado de alta intensidade do mundo real para melhoria do condicionamento cardiorrespiratório

High-Intensity Interval Training (HIIT) has emerged as an interesting time-efficient approach to increase exercise adherence and improve health. However, ...

Establishment and Evaluation of a Porcine Vein Graft Disease Model

Venous graft disease (VGD) is the leading cause of coronary artery bypass graft (CABG) failure. Large animal models of CABG-VGD are needed for the investigation of disease mechanisms and the development of therapeutic strategies. 
To perform the surgery, we enter the cardiac chamber through the third intercostal space and carefully dissect the internal mammary vein and immerse it in normal saline. The right main coronary artery is then treated for ischemia. The target vessel is incised, a shunt plug is placed, and the distal end of the graft vein is anastomosed. The ascending aorta is partially blocked, and the proximal end of the graft vein is anastomosed after perforation. The graft vein is checked for patency, and the proximal right coronary artery is ligated. 
CABG surgery is performed in minipigs to harvest the left internal mammary vein for its use as a vascular graft. Serum biochemical tests are used to evaluate the physiological status of the animals after surgery. Ultrasound examination shows that the proximal, middle, and distal end of the graft vessel are unobstructed. In the surgical model, turbulent blood flow in the graft is observed upon histological examination after the CABG surgery, and venous graft stenosis associated with intimal hyperplasia is observed in the graft. The study here provides detailed surgical procedures for the establishment of a repeatable CABG-induced VGD model.

In this protocol, novel pig vein bypass grafting was performed through a small incision in the left chest wall without cardiopulmonary bypass. A postoperative pathology study was done, which showed intimal thickening.

Estabelecimento e Avaliação de um Modelo de Enxerto de Veia Suína

Venous graft disease (VGD) is the leading cause of coronary artery bypass graft (CABG) failure. Large animal models of CABG-VGD are needed for the ...

Point-Of-Care Ultrasound Screening for Proximal Lower Extremity Deep Venous Thrombosis

Acute lower extremity deep venous thrombosis (DVT) is a serious vascular disorder that requires accurate and early diagnosis to prevent life-threatening sequelae. While whole leg compression ultrasound with color and spectral Doppler is commonly performed in radiology and vascular labs, point-of-care ultrasound (POCUS) is becoming more common in the acute care setting. Providers appropriately trained in focused POCUS can perform a rapid bedside examination with high sensitivity and specificity in critically ill patients. This paper describes a simplified yet validated approach to POCUS by describing a three-zone protocol for lower extremity DVT POCUS image acquisition. The protocol explains the steps in obtaining vascular images at six compression points in the lower extremity. Beginning at the level of the proximal thigh and moving distally to the popliteal space, the protocol guides the user through each of the compression points in a stepwise manner: from the common femoral vein to the femoral and deep femoral vein bifurcation, and, finally, to the popliteal vein. Further, a visual aid is provided that may assist providers during real-time image acquisition. The goal in presenting this protocol is to help make proximal lower extremity DVT exams more accessible and efficient for POCUS users at the patient&#39;s bedside.

Traditionally, lower extremity deep venous thrombosis (DVT) is diagnosed by radiology-performed venous duplex ultrasound. Providers appropriately trained in focused point-of-care ultrasound (POCUS) can perform a rapid bedside examination with high sensitivity and specificity in critically ill patients. We describe the scanning technique for focused POCUS DVT lower extremity examination.

Triagem ultrassonográfica no local de atendimento para trombose venosa profunda proximal dos membros inferiores

Acute lower extremity deep venous thrombosis (DVT) is a serious vascular disorder that requires accurate and early diagnosis to prevent life-threatening ...

Estudo Comparativo de Técnicas de Coleta de Sangue em Ratos

Modified Tail Vein and Penile Vein Puncture for Blood Sampling in the Rat Model

Blood samples are required in most experimental animal designs to assess various hematological parameters. This paper presents two procedures for blood collection in rats: the lateral tail vein puncture and the dorsal penile vein puncture, which offer significant advantages over other previously described techniques. This study shows that these two procedures allow for fast sampling (under 10 min) and yield sufficient blood volumes for most assays (202 &#956;L &#177; 67.7 &#956;L). The dorsal penile vein puncture must be done under anesthesia, whereas the lateral tail vein puncture can be done on a conscious, restrained animal.
Alternating these two techniques, therefore, enables blood draw in any situation. While it is always recommended for an operator to be assisted during a procedure to ensure animal welfare, these techniques require only a single operator, unlike most blood sampling methods that require two. Moreover, whereas these previously described methods (e.g., jugular stick, subclavian vein blood draw) require extensive prior training to avoid harm to or death of the animal, tail vein and dorsal penile vein puncture are rarely fatal. For all these reasons, and according to the context (e.g., for studies including male rats, during the perioperative or immediate postoperative period, for animals with thin tail veins), both techniques can be used alternately to enable repeated blood draws.

Autor em destaque: métodos de coleta de sangue dependentes do contexto em ratos 

Here, we present a protocol to offer rapid, easy, and reliable blood collection alternatives for the rat model. We describe three different blood sampling methods according to the context: tail vein puncture under anesthesia or on a conscious animal, and dorsal penile vein puncture under anesthesia.

Veia Caudal e Punção Peniana Modificadas para Coleta de Sangue no Modelo de Rato

Blood samples are required in most experimental animal designs to assess various hematological parameters. This paper presents two procedures for blood ...