Este trabalho foi apoiado por uma bolsa do Instituto de Medicina Engenharia de Sistemas (Imse) &amp; GIST-Caltech Fundo Collaborative (K04592) de GIST e pelo Programa de Pesquisa em Ciência Básica através da NRF da Coreia financiado pelo Ministério da Ciência, das TIC e do Ordenamento do futuro (NRF-2013R1A2A2A01067890).

Todos os procedimentos foram realizados de acordo com as diretrizes institucionais de Gwangju Instituto de Ciência e Tecnologia (GIST), e todos os procedimentos foram aprovados pelo Institutional Animal Care e do Comitê Use na GIST. 1. etapas de pré-lesão de <ol><li> Identificação da Área Membro Anterior na cápsula interna usando AAV-GFP <ol><li> Casa e lidar com ratos Sprague Dawley (~ 400 g, 11 - 13 semanas) em conformidade com as diretrizes institucionais e nacionais. </li><li> Esterilizar todos os instrumentos cirúrgicos e eletrodos usando um esterilizador apropriado (vapor ou esterilizador Plasma). Use esterilizador a vapor a 121 ° C como configuração de 30 min para a esterilização e 30 minutos para secar. </li><li> Anestesiar os animais com uma mistura de cloridrato de cetamina (100 mg / kg) e xilazina (7 mg / kg) através de uma injecção intramuscular. Verifique a profundidade da anestesia por beliscar pata. Manter a temperatura do corpo a 37,5 ± 0,5 ° C por meio de uma almofada de aquecimento sobo corpo do animal. </li><li> Colocar o animal em um quadro estereotáxico usando uma barra de ouvido e suporte de boca. </li><li> Limpar e desinfectar o local da cirurgia com álcool a 70% e solução de povidona iodo. Se infiltrar 2% de cloridrato de lidocaína sob o couro cabeludo na área do crânio incisão destina-se a reduzir a dor intra-operatório. </li><li> Aplicar veterinário pomada oftálmica para evitar a secagem dos olhos. Coloque uma cortina estéril sobre o animal aos locais operatórias. Manter todos os procedimentos em condições estéreis. </li><li> Realizar uma incisão na linha média do crânio de 2 cm utilizando um bisturi e retrair a pele bilateralmente com afastadores de arame. Seque o crânio com cotonetes e 30% de peróxido de hidrogênio. </li><li> Faça um furo usando uma broca parte da mão sobre a área do membro anterior do córtex motor (AP: 2,5 a partir de bregma, ML: ± 2.5 da linha média) e limpar o trato com micro-currette para o vírus de injecção. </li><li> Descongelar o AAV-GFP (2 x 10 12 moléculas de vírus / ml) em gelo e carga 1 ul davírus em uma seringa de 10 ul. Coloque a seringa no quadro estereotáxico. </li><li> Mover a agulha para o orifício pré-fabricados e baixar a agulha 1 mm de profundidade dentro da dura-máter. </li><li> Injectar o vírus lentamente (0,1 ul / min) usando uma microbomba alta precisão e deixar a agulha no lugar por um período adicional de 10 minutos para permitir que o vírus se difundem para fora. </li><li> Depois de limpar o local da cirurgia com irrigação salina, garantir o ferimento com sutura 3-0 nylon; libertar o rato a partir da moldura estereotáxica e transferi-lo para uma câmara de recuperação. Administrar cetoprofeno (2 mg / kg) através de uma injecção intramuscular para o controlo da dor pós-operatória. </li><li> Manter a temperatura do corpo (37 ° C) com a almofada de aquecimento e administrar antibióticos de segunda geração cefens-classe (0,1%, 1 ml) por meio de uma injecção intramuscular e 2% de cloridrato de lidocaína por meio de injecção subcutânea, conforme necessário. Não deixe um animal sem supervisão até que tenha recuperado a consciência suficiente para manterdecúbito esternal. Única casa o animal até a recuperação completa. </li><li> Após 2-3 semanas de recuperação, anestesiar profundamente o rato com uma overdose de cloridrato de cetamina (300 mg / kg) através de uma injecção intramuscular na capa. Confirmar a morte de animais por falta de toe beliscar resposta, pulso e respiração. Coloque o supino rato no capô. </li><li> Abrir a cavidade abdominal através de uma &#39;incisão em forma de Y&#39;para abrir a cavidade torácica. Prender firmemente a aorta descendente, com uma pinça hemostática e romper o átrio direito do coração de rato para a drenagem de sangue. Iniciar a perfusão para o ventrículo esquerdo do coração com frio de paraformaldeído a 1% durante 5 min (10 mL / min), seguido por paraformaldeído a 4% durante 30 min (10 mL / min). </li><li> Retire a cabeça de rato a partir da carcaça usando um par de tesouras. Faça uma incisão na linha média do pescoço até o nariz e remover os músculos do pescoço usando tesoura ou rongeur modo que o crânio é exposta. Gentilmente dissecar os ossos do crânio e duras para fora do cérebro. </li><li>Extrai-se a colocar o cérebro e cérebro de rato num tubo cónico de 50 ml cheio com paraformaldeído a 4% durante a noite. No dia seguinte, lava-se a cérebro com 1x PBS 3 vezes e coloca-se numa solução de sacarose a 30%. </li><li> Após o cérebro completamente afunda para o fundo da solução de sacarose a 30%, colocar o cérebro no cryomold com composto OCT, a -20 ° C em Criótomo. Corte o cérebro no plano coronal com uma espessura de 40 um e um intervalo de 200 | im. </li><li> Realizar a coloração imuno-histoquímica GFP utilizando o método slide 14. Aplicar o anticorpo primário (1: 200 de anti-Proteína Fluorescente Verde, fracção IgG de coelho) com fatias de cérebro durante a noite a 4 ° C. Em 2 ° dia, lava-se com 1% Solução Salina Tamponada com Fosfato (PBST) solução de Tween-20 e 3 vezes aplicar o anticorpo secundário (1: 500 de IgG de cabra anti-coelho (H + L)) durante 1 h. Lave o slide com 1% PBST 3 vezes. Coloque a tampa de vidro sobre a fatia do cérebro. </li><li> Usando um microscópio de fluorescência (comprimento de onda de excitação470 nm, comprimento de onda de emissão de 525 nm, Ampliação 5X), observar o AAV-GFP axónios transduzidas na cápsula interna. Comparar os locais de axónios transduzidas com o atlas de cérebro de rato 15 para determinar as coordenadas estereotáxicas dos axónios transduzidas </li></ol></li><li> Ajuste da intensidade de luz adequada para capsular infarto Modeling pré-lesão de <ol><li> Construção da Interface Neural Optical <ol><li> Corte um comprimento adequado (4 cm) de uma agulha espinhal calibre 27 com um estilete dentro de usar uma broca de corte. Nota: O corte pode comprimir e esmagar a ponta da agulha espinhal; remover o estilete e polir a ponta de agulha espinhal para remover a porção esmagado da agulha espinhal e manter o calibre interno da agulha espinhal. </li><li> Tira um comprimento apropriado (10 cm) do invólucro da fibra óptica (125 um com um núcleo de 62,5 mm) de cabo de remendo um lado. </li><li> Insira o fi óptica unjackedber para o tubo metálico (diâmetro externo: 3,8 milímetros, diâmetro interno: 3,3 milímetros e o comprimento: 17 mm), que é então apertado em torno da fibra. O tubo de metal é útil para preencher o espaço entre a fibra óptica e o cubo da agulha espinhal. Prender o inferior 02/01 do tubo de metal com uma prensa de duas vezes. </li><li> Aplicar o epóxi curáveis ​​por calor sobre a fibra óptica e inserir a fibra óptica para dentro da agulha espinhal. Aplicar um epóxi adicional para o espaço vazio no centro. Curar o epoxi durante 20 min a 100 ° C para a fixação estável. </li><li> Clivar a fibra óptica, que se projecta para fora da agulha espinhal e polir a fibra óptica na ponta da agulha espinhal usando polimento de diamante (polimento) folhas. </li><li> Ligue a parte do conector FC / PC do cabo de remendo para o acoplador do sistema de laser verde e medir a intensidade da luz da ponta da fibra óptica usando potência óptica digital e medidor de energia. </li></ol></li></ol></li></ol> 2. PhotothromBotic infarto a lesão na cápsula interna <ol><li> Esterilizar todos os instrumentos cirúrgicos e eletrodos usando um esterilizador apropriado (vapor ou esterilizador Plasma). Use esterilizador a vapor a 121 ° C como configuração de 30 min para a esterilização e 30 minutos para secar. </li><li> Anestesiar o animal (~ 400 g, 11 - 13 semanas) com uma mistura de cloridrato de cetamina (100 mg / kg) e xilazina (7 mg / kg) através de uma injecção intramuscular. Verifique a profundidade da anestesia por beliscar pata. Manter a temperatura do corpo a 37,5 ± 0,5 ° C por meio de uma almofada de aquecimento sob o corpo do animal. </li><li> Colocar o animal em um quadro estereotáxico usando uma barra de ouvido e suporte de boca. </li><li> Limpar e desinfectar o local da cirurgia com álcool a 70% e solução de povidona iodo. Se infiltrar 2% de cloridrato de lidocaína sob o couro cabeludo na área do crânio incisão destina-se a reduzir a dor intra-operatório. Aplicar veterinário pomada oftálmica para evitar a secagem dos olhos. </li><li> Aplique uma cortina estéril sobre a umaimal e expor os locais operatórias. Manter todos os procedimentos em condições estéreis. </li><li> Realizar uma incisão na linha média do crânio de 2 cm e retrair a pele bilateralmente com afastadores de arame. Seque o crânio com swaps de algodão e peróxido de hidrogênio. </li><li> Ajuste a altura do grampo do nariz até o bregma e lambda são alinhados no mesmo nível. Passo crítico: Este alinhamento é crítico para abordar correctamente uma estrutura mais profunda, tal como na realização de uma lesão do enfarte na cápsula interna na experiência principal. </li><li> Fazer um furo (diâmetro: 2 mm; AP: -2,04 partir bregma; ML: ± 3.0 a partir da linha média) usando uma broca para induzir fototrombose. </li><li> Polonês e limpar a ponta da fibra óptica da interface óptica. Fixar a ONI para o quadro estereotáxico sem dobrar. Verifique a ponta da ONI e eliminá-lo de forma clara, antes e após a inserção da interface óptica. </li><li> Medir a intensidade do laser a partir da ponta da fibra óptica antes da inserção do Optical interface para o local alvo do cérebro de rato. Ajustar a intensidade do laser de 3,5 mW, tal como foi confirmado por medidas de pré-cirurgia, na ponta da fibra óptica. </li><li> Inserir o ONI dentro da área alvo da cápsula interna (-7,8 mm confirmados a partir do passo de pré-cirurgia) através do orifício de broca. </li><li> Manter a temperatura do corpo a 37,5 ± 0,5 ° C durante fototrombose. A temperatura do corpo mais baixa pode não produzir o grau esperado de infarto. Injectar Rosa de Bengala (2 ml / kg) através da veia da cauda. </li><li> Ligue a 532 nm laser verde para 90 seg 1 min após a injeção Rose Bengal. Após a irradiação, remova cuidadosamente a ONI do cérebro. Depois de limpar o local da operação, garantir a ferida garantir a ferida com sutura 3-0 nylon; libertar o rato a partir da moldura estereotáxica e transferi-lo para uma câmara de recuperação. </li><li> Para o grupo de operação simulada (SOG), realizar um procedimento de tomada de lesão idênticos, exceto para a injeção de solução salina (0,2 ml / 100 g) em vez de Rose-Bengal. </li><li>Manter a temperatura do corpo (37 ° C) com a almofada de aquecimento após a cirurgia e administração de antibióticos de cefalosporina de segunda geração (, 0,1%, 1 ml) por meio de uma injecção intramuscular. Não deixe o animal sem supervisão até que tenha recuperado a consciência suficiente para manter decúbito esternal. Não devolva animais pós-cirúrgicos para a gaiola ocupados por outros animais até que esteja totalmente recuperado. NOTA: experiência preliminar foi realizada nos mesmos procedimentos para encontrar a intensidade de luz óptima de 1 mW a 5 mW e o procedimento pode ser exigido para adquirir o grau satisfatório de lesão em condições diferentes. </li></ol> 3. Avaliação da capsular infarto a lesão <ol><li> Testes comportamentais e Agrupamento animal <ol><li> Execute pellet única atingindo tarefas como descrito por Whishaw et al. 14 para avaliar o déficit motor do membro anterior a cada dia durante 1 semana após a modelagem acidente vascular cerebral. Realizar uma única tarefa pellet chegar(SPRT) em animais com restrição de alimentos (90% do controle de peso corporal) usando Plexiglas claras (30 x 15 x 35 cm de altura) com uma fenda de 1 cm de largura e uma prateleira de alimentos na frente do meio da parede anterior. </li><li> Colocar um pellet na prateleira de alimentos obliquamente contralateral ao membro anterior preferida. Administrar 20 pelotas por sessão durante 3 semanas. NOTA: Um número bem sucedida de SPRTs é definido como um alcance no qual o animal apreende uma pelota de alimentos e coloca-lo na boca, sem deixá-la cair. </li><li> Calcular a pontuação como uma percentagem de sucesso atinge, o qual é definido pela seguinte fórmula: <img alt="equação1" src="/files/ftp_upload/53281/53281equation1.jpg" /> NOTA: Nós dividir os animais em 3 grupos: o grupo de operação simulada (SOG), grupo de recuperação moderada (MRG), e um grupo de recuperação pobres (PRG). Se uma pontuação SPRT pós-AVC&gt; 50%, classificamos os ratos como a MRG, o que indica a presença de uma lesão substancial, mas a destruição não completa do target. Se a pontuação SPRT pós-AVC é &lt;50% em comparação com o resultado SPRT pré-acidente vascular cerebral, podemos classificar o grupo como PRG, o que indica a lesão completa no alvo. </li></ol></li><li> Confirmação neuro-histológicos de infarto a lesão <ol><li> Realização de perfusão cardíaca com paraformaldeído a 4%, como descrito anteriormente. Após o cérebro afunda completamente na solução de sacarose a 30%, realizar corte coronal com uma espessura de 10 um e um intervalo de 200 um utilizando um micrótomo ou Criótomo 4. </li><li> Mancha com H &amp; E, Nissl, Luxol fast blue-PAS, neurofilamento proteína-G ou coloração proteína ácida fibrilar glial e observar os achados histológicos para determinar a intensidade da luz ideal que pode cobrir toda a largura da cápsula interna na área alvo para observar coloração 4,17. </li><li> Utilizando o software ImageJ, medir o volume da área de enfarte photothrombotic da cápsula interna sobre as lâminas do cérebro.<ol><li> Para medir o volume da área de enfarte, inicie o software &quot;ImageJ&quot;. Para abrir os arquivos a serem empilhados, selecione &quot;Imagem para Stacks &#39;(&#39; Imagem &#39;→&#39; Stacks &#39;→&#39; Image to Stacks &#39;). Editar nome do arquivo e selecione &quot;Definir a escala&quot; ( &quot;Analisar&quot; → &quot;Definir a escala &#39;) para editar escala. </li><li> Em &#39;Plugins&#39;, selecione &quot;Meça Stacks &#39;para calcular o volume ou área de imagens. Insira o intervalo de distância de 2 imagens em &#39;Slice Espaçamento&#39;. Faça um desenho do ROI (Região de Interesse) de todas as imagens e clicar em &#39;Medida&#39;. NOTA: O software &quot;ImageJ&quot; calcula automaticamente a área eo volume de cada imagem e volume total deles. </li></ol></li></ol></li></ol>

<ol>
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The authors have nothing to disclose.

O modelo do infarto capsular aqui apresentado demonstra uma lesão-alvo com comprometimento motor acentuado e persistente na função de membro anterior. Modelos anteriores de AVC capsular subcortical demonstraram um grau insuficiente de comprometimento motor e uma 6,8,9 processo de recuperação rápida. Neste sentido, este modelo se assemelha os casos clínicos capsular de enfarte que exibem insuficiência funcional a longo prazo. Os passos mais críticos no desenvolvimento de u...

Até recentemente, a &quot;massa cinzenta acidente vascular cerebral (GMS) modelos&quot; têm sido utilizados exclusivamente para entender a fisiopatologia do derrame e para orientar o desenvolvimento de novos tratamentos. No entanto, tem havido um aumento da prevalência de acidente vascular cerebral que afeta a matéria branca subcortical em indivíduos idosos, o que constitui 15 - 25% de todos os acidentes vasculares cerebrais 1,2. Numerosos estudos têm sido realizados sobre acidente vascular cerebral utilizando modelos GMS, ao passo que há poucos estudos que usaram modelos (WMS) acidente vascular cerebral substância branca. A substância branca em roedores é substancialmente menor do que a substância branca em seres humanos ou primatas. Por conseguinte, é mais difícil de aceder selectivamente destruir e as regiões alvo na matéria branca 3. Além disso, não há ferramentas eficazes têm sido desenvolvidos até à data para destruir selectivamente a extensão prevista da matéria branca alvo. Por conseguinte, tem havido falta de modelos adequados para o estudo de acidentes vasculares cerebrais de substância branca. st animalmodelos Roke são muitas vezes utilizados para monitorar o progresso da recuperação motora para o desenvolvimento de novos reabilitação e métodos terapêuticos. É ideal para utilizar um modelo animal que apresenta um défice neurológico longo prazo concordantes com as alterações anatómicas demonstradas em acidente vascular cerebral humano 4,5. A este respeito, a rápida recuperação do déficit motor e amplo envolvimento do cérebro após a lesão do infarto pode não ser realista na busca de pesquisa acidente vascular cerebral. Anteriores modelos capsular de enfarte têm sido feitos pela oclusão da carótida interna ou artérias coroideias anterior e difusão de endotelina-1 (ET-1) no interior da cápsula interna 6-9. No entanto, exige a oclusão da artéria dissecção cuidadosa das artérias, mas produz uma vasta área de lesão do enfarte, incluindo a cápsula interna, sem déficits comportamentais persistentes. Além disso, a ET-1 não era difusa para destruir completamente a parte posterior da cápsula interna e, consequentemente, menos marcada ou persistir Behdéficit avioral. Um modelo de enfarte do photothrombotic tem sido amplamente utilizada para gerar vários tipos de lesões de enfarte do córtex e estruturas subcorticais 10. A técnica incluem a administração intravenosa, seguida de iluminação focal, o que leva a agregação de plaquetas nos vasos pequenos e geração de lesões enfarte 10. Técnica Photothrombotic tem sido amplamente utilizada para criar lesões GMS, enquanto que raramente tem sido utilizado para gerar lesões WMS 5,11. Para esta técnica, uma combinação de corante e luz de irradiação Rosa de Bengala foi demonstrado ser útil na destruição da estrutura de alvo, fazendo com que os défices funcionais correspondentes. O elemento-chave da técnica photothrombotic é irradiação de luz, uma vez que determina o tamanho das lesões de enfarte. resultados de irradiação de luz em diferentes efeitos sobre a matéria cinzenta e matéria branca, porque a dispersão da luz é mais do que 4 vezes maior em ma brancotter em comparação com a matéria cinzenta 12; Por conseguinte, se a intensidade de luz tem uma suficientemente baixa irradiação (&lt;1140 mW / mm 2), pode-se limitar a extensão para a qual lesão photothrombotic afectar a extensão para a substância branca (isto é., Cápsula interna). Por exemplo, a luz de energia mais elevada pode induzir enfartes, tanto na substância cinzenta e branca, mas a luz de energia mais baixo pode induzir fototrombose apenas na substância branca. Além disso, a penetração da energia luminosa foi muito limitada. Aproximadamente 99% da energia da luz foi perdido para além de 1 mm a partir da fonte de luz 13. Portanto, espera-se que o alvo com exactidão, a luz de menor energia induz fototrombose apenas na matéria branca, com uma interferência mínima da matéria cinzenta vizinha. Aqui, nós descrevemos um novo método para criar lesões na área de enfarte do membro anterior da cápsula interna em roedores. Nós descrevemos o método de identificação da área do membro anterior na ca internapsule, a tecnologia de irradiação de luz, incluindo o ajustamento e a entrega de luz, e a geração de uma lesão do enfarte. Descrevemos também testes comportamentais utilizados para avaliar a integridade da modelagem capsular.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="517">
	<tbody>
		<tr height="84">
			<td height="84" style="height:84px;width:157px;">DC Temperature controller</td>
			<td style="width:131px;">WORLD PRECISION INSTRUMENTS, INC.</td>
			<td style="width:88px;">ATC1000</td>
			<td style="width:143px;"></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:157px;">Digital Stereotaxic Instruments</td>
			<td style="width:131px;">STOELTING CO.</td>
			<td style="width:88px;">51900</td>
			<td style="width:143px;"></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:157px;">Electrical Stimulator</td>
			<td style="width:131px;">CyberMedic Corp.</td>
			<td style="width:88px;">EMGFES 2000</td>
			<td style="width:143px;"></td>
		</tr>
		<tr height="231">
			<td height="231" style="height:231px;width:157px;">Epoxy&#160;</td>
			<td style="width:131px;">Precision Fiber Products, INC.</td>
			<td style="width:88px;">PFP-353ND1</td>
			<td style="width:143px;">Mix Ratio: 
			10(A):1(B-hardener) by weight&#160; 
			Curing Schedule: 
			1 minute @150&#176;C 
			2~5 minutes @120&#176;C 
			5~10 minutes @100&#176;C 
			15~30 minutes @80&#176;C</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:157px;">Fiber Optic Scribe&#160;</td>
			<td style="width:131px;">THORLABS, INC</td>
			<td style="width:88px;">S90R</td>
			<td style="width:143px;"></td>
		</tr>
		<tr height="105">
			<td height="105" style="height:105px;width:157px;">Fiber patch cable</td>
			<td style="width:131px;">KOREA OPTRON Corp.</td>
			<td style="width:88px;"></td>
			<td style="width:143px;">Outer diameter: 3mm 
			&#216;200 &#181;m 
			0.39 NA 
			FC/PC-FC/PC 
			1 m</td>
		</tr>
		<tr height="126">
			<td height="126" style="height:126px;width:157px;">Laser Power Supply</td>
			<td style="width:131px;">CHANGCHUN NEW INDUSTRIES OPTOELECTRONICS TECH. CO., LTD.</td>
			<td style="width:88px;">MGL-FN-532nm-200mW-14010196</td>
			<td style="width:143px;"></td>
		</tr>
		<tr height="105">
			<td height="105" style="height:105px;width:157px;">Crimp ring&#160;</td>
			<td style="width:131px;">DAWOOTECH CO.,LTD.</td>
			<td style="width:88px;"></td>
			<td style="width:143px;">Length: 19mm 
			Inner diameter: 3mm 
			Outer diameter: 3.8mm 
			Material: SUS</td>
		</tr>
		<tr height="84">
			<td height="84" style="height:84px;width:157px;">Micro4-micro syringe pump controller</td>
			<td style="width:131px;">WORLD PRECISION INSTRUMENTS, INC</td>
			<td style="width:88px;">95100</td>
			<td style="width:143px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:157px;">Optical Power Meter</td>
			<td style="width:131px;">THOLABS, INC</td>
			<td style="width:88px;">PM100D</td>
			<td style="width:143px;"></td>
		</tr>
		<tr height="63">
			<td height="63" style="height:63px;width:157px;">Paraformaldehyde</td>
			<td style="width:131px;">SIGMA-ALDRICH CO. LLC.</td>
			<td style="width:88px;">P6148&#12288;</td>
			<td style="width:143px;"></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:157px;">Diamond lapping (polishing) sheet</td>
			<td style="width:131px;">THORLABS, INC</td>
			<td style="width:88px;">LF3D</td>
			<td style="width:143px;">Grit : 3 &#181;m</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:157px;">Diamond lapping (polishing) sheet</td>
			<td style="width:131px;">THORLABS, INC</td>
			<td style="width:88px;">LF6D</td>
			<td style="width:143px;">Grit : 6 &#181;m</td>
		</tr>
		<tr height="63">
			<td height="63" style="height:63px;width:157px;">Rose Bengal</td>
			<td style="width:131px;">SIGMA-ALDRICH CO. LLC.</td>
			<td style="width:88px;">330000</td>
			<td style="width:143px;"></td>
		</tr>
		<tr height="63">
			<td height="63" style="height:63px;width:157px;">Needle for spinal anesthesia with pencil point tip (Spinal needle)&#160;</td>
			<td style="width:131px;">B.BRAUN MELSUNGEN AG&#160;</td>
			<td style="width:88px;">4502027</td>
			<td style="width:143px;">Size: 27G 
			Length: 88mm 
			Needle: 0.40mm</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:157px;">Waterproof sandpaper&#160;</td>
			<td style="width:131px;">DEERFOS CO.,LTD</td>
			<td style="width:88px;">CC261</td>
			<td style="width:143px;">Grit : 1000 &#181;m</td>
		</tr>
		<tr height="84">
			<td height="84" style="height:84px;width:157px;">Nanofil 10uL syringe&#160;</td>
			<td style="width:131px;">WORLD PRECISION INSTRUMENTS, INC</td>
			<td style="width:88px;">NANOFIL</td>
			<td style="width:143px;"></td>
		</tr>
		<tr height="84">
			<td height="84" style="height:84px;width:157px;">Nanofil 33G BVLD needle</td>
			<td style="width:131px;">WORLD PRECISION INSTRUMENTS, INC</td>
			<td style="width:88px;">NF33BV-2</td>
			<td style="width:143px;"></td>
		</tr>
		<tr height="63">
			<td height="63" style="height:63px;width:157px;">AAV-GFP virus</td>
			<td style="width:131px;">UNC Vector Core</td>
			<td style="width:88px;">AAV2-CamKIIa-eYFP</td>
			<td style="width:143px;">2x10^12 virus molecules/ml</td>
		</tr>
		<tr height="63">
			<td height="63" style="height:63px;width:157px;">Anti-Green Fluorescent Protein, Rabbit IgG fraction</td>
			<td style="width:131px;">Life Technologies, INC</td>
			<td style="width:88px;">A11122</td>
			<td style="width:143px;">primary antibody (1:200)</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:157px;">Goat Anti-Rabbit IgG (H+L)</td>
			<td style="width:131px;">Life Technologies, INC</td>
			<td style="width:88px;">A11034</td>
			<td style="width:143px;">secondary antibody (1:500)</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:157px;">Ceftezole</td>
			<td style="width:131px;">GUJU Pharma CO.,LTD.</td>
			<td style="width:88px;">A27802741</td>
			<td style="width:143px;">0.1%, 1ml</td>
		</tr>
		<tr height="63">
			<td height="63" style="height:63px;width:157px;">Lidocain hydrochloride injection</td>
			<td style="width:131px;">JEIL PHARMACEUTICAL CO.,LTD.</td>
			<td style="width:88px;">A04900271</td>
			<td style="width:143px;">2%, 1ml</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:157px;">Hand Piece Drill</td>
			<td style="width:131px;">Seshin</td>
			<td style="width:88px;"></td>
			<td style="width:143px;"></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:157px;">Digital optical power and energy meter</td>
			<td style="width:131px;">THORLABS, INC</td>
			<td style="width:88px;">PM100D</td>
			<td style="width:143px;"></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:157px;">Ketopropen</td>
			<td style="width:131px;">UNIBIOTech</td>
			<td style="width:88px;"></td>
			<td style="width:143px;"></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

circumscribed capsular infarct modeling using a photothrombotic technique

Recent increase in the prevalence rate of white matter stroke demands specific research in the field. However, the lack of a pertinent animal model for white matter stroke has hampered research investigations. Here, we describe a novel method for creating a circumscribed capsular infarct that minimizes damage to neighboring gray matter structures. We used pre-surgery neural tracing with adeno-associated virus-green fluorescent protein (AAV-GFP) to identify somatotopic organization of the forelimb area within the internal capsule. The adjustment of light intensity based on different optical properties of gray and white matter contributes to selective destruction of white matter with relative preservation of gray matter. Accurate positioning of optical-neural interface enables destruction of entire forelimb area in the internal capsule, which leads to a marked and persistent motor deficit. Thus, this technique produces highly replicable capsular infarct lesions with a persistent motor deficit. The model will be helpful not only to study white matter stroke (WMS) at the behavioral, circuit, and cellular levels, but also to assess its usefulness for development of new therapeutic and rehabilitative interventions.

O método aqui apresentado destina-se a criar um enfarte capsular circunscrito com um déficit motor. Portanto, é crítico para determinar correctamente o alvo no interior da cápsula interna na etapa de pré-cirurgia. O mapeamento somatotopic de fibras piramidais na cápsula interna não foi resolvido até o momento. Para identificar corretamente o alvo dentro da cápsula interna, a área do membro anterior devem ser delimitadas. Uma injecção de AAV-GFP para a área do membro anterio...

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Circumscribed Capsular Infarct Modeling Using a Photothrombotic Technique

Este manuscrito descreve uma técnica de modelagem de infarto capsular. Aqui utilizamos uma técnica photothrombotic modificado com baixa intensidade de luz após o mapeamento de destino pré-cirurgia. Usando esta técnica, criamos um modelo de enfarte capsular circunscrito com comprometimento motor persistente.

Circunscrito capsular infarto Modelagem usando uma técnica Photothrombotic

Recent increase in the prevalence rate of white matter stroke demands specific research in the field. However, the lack of a pertinent animal model for ...

circumscribed-capsular-infarct-modeling-using-photothrombotic

Research

JoVE Journal

Medicine

7.8K visualizações.  Gwangju Institute of Science and Technology.  Este manuscrito descreve uma técnica de modelagem de infarto capsular. Aqui utilizamos uma técnica photothrombotic modificado com baixa intensidade de luz após o mapeamento de destino pré-cirurgia. Usando esta técnica, criamos um modelo de enfarte capsular circunscrito com comprometimento motor persistente. 

Vídeo: Circumscribed Capsular Infarct Modeling Using a Photothrombotic Technique

A Novel Capsulorhexis Technique Using Shearing Forces with Cystotome

Purpose:
To demonstrate a capsulorhexis technique using predominantly shearing forces with a cystotome on a virtual reality simulator and on a human eye.
Method:
Our technique involves creating the initial anterior capsular tear with a cystotome to raise a flap. The flap left unfolded on the lens surface. The cystotome tip is tilted horizontally and is engaged on the flap near the leading edge of the tear. The cystotome is moved in a circular fashion to direct the vector forces. The loose flap is constantly swept towards the centre so that it does not obscure the view on the tearing edge.
Results:
Our technique has the advantage of reducing corneal wound distortion and subsequent anterior chamber collapse. The capsulorhexis flap is moved away from the tear leading edge allowing better visualisation of the direction of tear. This technique offers superior control of the capsulorhexis by allowing the surgeon to change the direction of the tear to achieve the desired capsulorhexis size.
Conclusions:
The EYESI Surgical Simulator is a realistic training platform for surgeons to practice complex capsulorhexis techniques. The shearing forces technique is a suitable alternative and in some cases a far better technique in achieving the desired capsulorhexis.

This video demonstrates a novel capsulorhexis technique in modern cataract surgery. Capsulorhexis is the most difficult and important part of phacoemulsification surgery.

A Técnica Capsulorhexis Novel Usando as forças de cisalhamento com Cystotome

Purpose:
To demonstrate a capsulorhexis technique using predominantly shearing forces with a cystotome on a virtual reality simulator and on a human eye....

Medicina

A Novel Technique of Rescuing Capsulorhexis Radial Tear-out using a Cystotome

Part 1 : Purpose: To demonstrate a capsulorhexis radial tear out rescue technique using a cystotome on a virtual reality cataract surgery simulator and in a human eye. Part 2 : Method: Steps: When a capsulorhexis begins to veer radially towards the periphery beyond the pupillary margin the following steps should be applied without delay. 2.1) Stop further capsulorhexis manoeuvre and reassess the situation. 2.2) Fill the anterior chamber with ophthalmic viscosurgical device (OVD). We recommend mounting the cystotome to a syringe containing OVD so that the anterior chamber can be reinflated rapidly. 2.3) The capsulorhexis flap is then left unfolded on the lens surface. 2.4) The cystotome tip is tilted horizontally to avoid cutting or puncturing the flap and is engaged on the flap near the leading edge of the tear but not too close to the point of tear. 2.5) Gently push or pull the leading edge of tear opposite to the direction of tear. 2.6) The leading tearing edge will start to do a 'U-Turn'. Maintain the tension on the flap until the tearing edge returns to the desired trajectory. Part 3 : Results: Using our technique, a surgeon can respond instantly to radial tear out without having to change surgical instruments. Changing surgical instruments at this critical stage runs a risk of further radial tear due to sudden shallowing of anterior chamber as a result of forward pressure from the vitreous. Our technique also has the advantage of reducing corneal wound distortion and subsequent anterior chamber collapse. Part 4 : Discussion The EYESI Surgical Simulator is a realistic training platform for surgeons to practice complex capsulorhexis tear-out techniques. Capsulorhexis is the most important and complex part of phacoemulsification and endocapsular intraocular lens implantation procedure. A successful cataract surgery depends on achieving a good capsulorhexis. During capsulorhexis, surgeons may face a challenging situation like a capsulorhexis radial tear-out. A surgeon must learn to tackle the problem promptly without making the situation worse. Some other methods of rescuing the situation have been described using a capsulorhexis forceps. However, we believe our method is quicker, more effective and easier to manipulate as demonstrated on the EYESi surgical simulator and on a human eye. Acknowledgments: List acknowledgements and funding sources. We would like to thank Dr. Wael El Gendy, for video clip. Disclosures: describe potential conflicting interests or state We have nothing to disclose. References: 1. Brian C. Little, Jennifer H. Smith, Mark Packer. J Cataract Refract Surg 2006; 32:1420 1422, Issue-9. 2. Neuhann T. Theorie und Operationstechnik der Kapsulorhexis. Klin Monatsbl Augenheilkd. 1987; 1990: 542-545. 3. Gimbel HV, Neuhann T. Development, advantages and methods of the continuous circular capsulorhexis technique. J Cataract Refract Surg. 1990; 16: 31-37. 4. Gimbel HV, Neuhann T. Continuous curvilinear capsulorhexis. (letter) J Cataract Refract Sur. 1991; 17: 110-111.

Capsulorhexis is an important step in phacoemulsification surgery. A surgeon creates a continous curvilinear tear on the anterior lens capsule by controlling the tearing vector forces. A peripherally extended tear is a serious complication. This video demonstrates a novel technique of rescuing capsular radial tear out using a cystotome.

Uma nova técnica de Capsulorhexis Resgatando Radial Rasgue-out usando um Cystotome

Part 1 : Purpose:   To demonstrate a capsulorhexis radial tear out rescue technique using a cystotome on a virtual reality cataract surgery simulator and ...

Mouse Model of Intraluminal MCAO: Cerebral Infarct Evaluation by Cresyl Violet Staining

Stroke is the third cause of mortality and the leading cause of disability in the World. Ischemic stroke accounts for approximately 80% of all strokes. However, the thrombolytic tissue plasminogen activator (tPA) is the only treatment of acute ischemic stroke that exists. This led researchers to develop several ischemic stroke models in a variety of species. Two major types of rodent models have been developed: models of global cerebral ischemia or focal cerebral ischemia. To mimic ischemic stroke in patients, in whom approximately 80% thrombotic or embolic strokes occur in the territory of the middle cerebral artery (MCA), the intraluminal middle cerebral artery occlusion (MCAO) model is quite relevant for stroke studies. This model was first developed in rats by Koizumi et al. in 1986 1. Because of the ease of genetic manipulation in mice, these models have also been developed in this species 2-3.
	Herein, we present the transient MCA occlusion procedure in C57/Bl6 mice. Previous studies have reported that physical properties of the occluder such as tip diameter, length, shape, and flexibility are critical for the reproducibility of the infarct volume 4. Herein, a commercial silicon coated monofilaments (Doccol Corporation) have been used. Another great advantage is that this monofilament reduces the risk to induce subarachnoid hemorrhages. Using the Zeiss stereo-microscope Stemi 2000, the silicon coated monofilament was introduced into the internal carotid artery (ICA) via a cut in the external carotid artery (ECA) until the monofilament occludes the base of the MCA. Blood flow was restored 1 hour later by removal of the monofilament to mimic the restoration of blood flow after lysis of a thromboembolic clot in humans. The extent of cerebral infarct may be evaluated first by a neurologic score and by the measurement of the infarct volume. Ischemic mice were thus analyzed for their neurologic score at different post-reperfusion times. To evaluate the infarct volume, staining with 2,3,5-triphenyltetrazolium chloride (TTC) was usually performed. Herein, we used cresyl violet staining since it offers the opportunity to test many critical markers by immunohistochemistry. In this video, we report the MCAO procedure; neurological scores and the evaluation of the infarct volume by cresyl violet staining.

The intraluminal middle cerebral occlusion model in mice is herein presented. The extent of cerebral infarct is evaluated by a neurologic score and cresyl violet staining, an alternative staining to TTC, offering the great advantage to test in parallel many interest markers.

Modelo de Rato OACM Intraluminal: Avaliação infarto cerebral por coloração violeta Cresyl

Stroke is the third  cause of mortality and the leading cause of disability in the World. Ischemic  stroke accounts for approximately 80% of all strokes. ...

Modeling Colitis-Associated Cancer with Azoxymethane (AOM) and Dextran Sulfate Sodium (DSS)

Individuals with inflammatory bowel disease (IBD), such as Crohn's disease (CD) or ulcerative colitis (UC) are at increased risk of developing colorectal cancer (CRC) over healthy individuals. This risk is proportional to the duration and extent of disease, with a cumulative incidence as high as 30% in individuals with longstanding UC with widespread colonic involvement.1 Colonic dysplasia in IBD and colitis associated cancer (CAC) are believed to develop as a result of repeated cycles of epithelial cell injury and repair while these cells are bathed in a chronic inflammatory cytokine milieu.2 While spontaneous and colitis-associated cancers share the quality of being adenocarcinomas, the sequence of underlying molecular events is believed to be different.3 This distinction argues the need for specific animal models of CAC.
Several mouse models currently exist for the study of CAC. Dextran sulfate sodium (DSS), an agent with direct toxic effects on the colonic epithelium, can be administered in drinking water to mice in multiple cycles to create a chronic inflammatory state. With sufficient duration, some of these mice will develop tumors.4 Tumor development is hastened in this model if administered in a pro-carcinogenic setting. These include mice with genetic mutations in tumorigenesis pathways (APC, p53, Msh2), as well as mice pre-treated with genotoxic agents (azoxymethane [AOM], 1,2-dimethylhydrazine [DMH]).5 
The combination of DSS with AOM as a model for colitis associated cancer has gained popularity for its reproducibility, potency, low price, and ease of use. Though they have a shared mechanism, AOM has been found to be more potent and stable in solution than DMH. While tumor development in other models generally requires several months, mice injected with AOM and subsequently treated with DSS develop adequate tumors in as little as 7-10 weeks.6, 7 Finally, AOM and DSS can be administered to mice of any genetic background (knock out, transgenic, etc.) without cross-breeding to a specific tumorigenic strain. Here, we demonstrate a protocol for inflammation-driven colonic tumorigenesis in mice utilizing a single injection of AOM followed by three seven-day cycles of DSS over a 10 week period. This model induces tumors with histological and molecular changes closely resembling those occurring in human CAC and provides a highly valuable model for the study of oncogenesis and chemoprevention in this disease.8

Modeling Colitis-Associated Cancer with Azoxymethane AOM and Dextran Sulfate Sodium DSS

We demonstrate a protocol in which administration of the genotoxic agent azoxymethane (AOM) followed by three cycles of the pro-inflammatory agent dextran sulfate sodium (DSS) rapidly and consistently generates colon tumors in mice with morphologic and molecular similarities to those seen in human colitis-associated cancer.

Câncer de modelagem Colite Associada com Azoximetano (OMA) e sulfato de sódio Dextran (DSS)

Individuals with inflammatory bowel disease (IBD), such as Crohn's disease (CD) or ulcerative colitis (UC) are at increased risk of developing colorectal ...

Photothrombotic Ischemia: A Minimally Invasive and Reproducible Photochemical Cortical Lesion Model for Mouse Stroke Studies

The photothrombotic stroke model aims to induce an ischemic damage within a given cortical area by means of photo-activation of a previously injected light-sensitive dye. Following illumination, the dye is activated and produces singlet oxygen that damages components of endothelial cell membranes, with subsequent platelet aggregation and thrombi formation, which eventually determines the interruption of local blood flow. This approach, initially proposed by Rosenblum and El-Sabban in 1977, was later improved by Watson in 1985 in rat brain and set the basis of the current model. Also, the increased availability of transgenic mouse lines further contributed to raise the interest on the photothrombosis model. Briefly, a photosensitive dye (Rose Bengal) is injected intraperitoneally and enters the blood stream. When illuminated by a cold light source, the dye becomes activated and induces endothelial damage with platelet activation and thrombosis, resulting in local blood flow interruption. The light source can be applied on the intact skull with no need of craniotomy, which allows targeting of any cortical area of interest in a reproducible and non-invasive way. The mouse is then sutured and allowed to wake up. The evaluation of ischemic damage can be quickly accomplished by triphenyl-tetrazolium chloride or cresyl violet staining. This technique produces infarction of small size and well-delimited boundaries, which is highly advantageous for precise cell characterization or functional studies. Furthermore, it is particularly suitable for studying cellular and molecular responses underlying brain plasticity in transgenic mice.

Photothrombosis is a quick, minimally-invasive technique for inducing small and well-delimited infarction in areas of interest in highly reproducible manner. It is particularly suitable for studying cellular and molecular responses underlying brain plasticity in transgenic mice.

Isquemia Photothrombotic: Um Modelo de lesão cortical fotoquímica Minimamente Invasiva e reprodutível para mouse Estudos curso

The photothrombotic stroke model aims to induce an ischemic damage within a given cortical area by means of photo-activation of a previously injected ...

Murine Cervical Heart Transplantation Model Using a Modified Cuff Technique

Mouse models are of special interest in research since a wide variety of monoclonal antibodies and commercially defined inbred and knockout strains are available to perform mechanistic in vivo studies. While heart transplantation models using a suture technique were first successfully developed in rats, the translation into an equally widespread used murine equivalent was never achieved due the technical complexity of the microsurgical procedure. In contrast, non-suture cuff techniques, also developed initially in rats, were successfully adapted for use in mice1-3. This technique for revascularization involves two major steps I) everting the recipient vessel over a polyethylene cuff; II) pulling the donor vessel over the formerly everted recipient vessel and holding it in place with a circumferential tie. This ensures a continuity of the endothelial layer, short operating time and very high patency rates4.
Using this technique for vascular anastomosis we performed more than 1,000 cervical heart transplants with an overall success rate of 95%. For arterial inflow the common carotid artery and the proximal aortic arch were anastomosed resulting in a retrograde perfusion of the transplanted heart. For venous drainage the pulmonary artery of the graft was anastomosed with the external jugular vein of the recipient5.
Herein, we provide additional details of this technique to supplement the video.

The murine cervical heart transplantation model is well suited for immunological as well as ischemia reperfusion injury studies. We modified the procedure using a non-suture cuff technique and performed more than 1,000 successful transplants with this approach.
Herein, we provide additional details of this technique to supplement the video.

Murino Cervical Modelo de coração Transplante usando uma técnica Cuff Modificado

Mouse models are of special interest in research since a wide variety of monoclonal antibodies and commercially defined inbred and knockout strains are ...

Human Skeletal Muscle Biopsy Procedures Using the Modified Bergstr&#246;m Technique

The percutaneous biopsy technique enables researchers and clinicians to collect skeletal muscle tissue samples. The technique is safe and highly effective. This video describes the percutaneous biopsy technique using a modified Bergstr&#246;m needle to obtain skeletal muscle tissue samples from the vastus lateralis of human subjects. The Bergstr&#246;m needle consists of an outer cannula with a small opening (&#8216;window&#8217;) at the side of the tip and an inner trocar with a cutting blade at the distal end. Under local anesthesia and aseptic conditions, the needle is advanced into the skeletal muscle through an incision in the skin, subcutaneous tissue, and fascia. Next, suction is applied to the inner trocar, the outer trocar is pulled back, skeletal muscle tissue is drawn into the window of the outer cannula by the suction, and the inner trocar is rapidly closed, thus cutting or clipping the skeletal muscle tissue sample. The needle is rotated 90&#176;&#160;and another cut is made. This process may be repeated three more times. This multiple cutting technique typically produces a sample of 100-200 mg or more in healthy subjects and can be done immediately before, during, and after a bout of exercise or other intervention. Following post-biopsy dressing of the incision site, subjects typically resume their activities of daily living right away and can fully participate in vigorous physical activity within 48-72 hr. Subjects should avoid heavy resistance exercise for 48 hr to reduce the risk of herniation of the muscle through the incision in the fascia.

The purpose of this video is to present the modified Bergstr&#246;m skeletal muscle biopsy technique on human subjects.

Procedimentos de biópsia de músculo esquelético humano, utilizando a técnica Bergström Modificado

The percutaneous biopsy technique enables researchers and clinicians to collect skeletal muscle tissue samples. The technique is safe and highly ...

Using a Laminating Technique to Perform Confocal Microscopy of the Human Sclera

The sclera is a dense connective tissue that covers and protects the eye. It mainly consists of dense collagen bundles (types I, III, IV, V, VI, and VII). Due to its autofluorescence, opaqueness, and thickness, it has not been found suitable for confocal microscopy. An alternative approach to the one presented here, which uses formalin-fixed sclera embedded in paraffin for immunohistochemistry, has technical challenges, especially when preheating the tissue for antigen retrieval. Since the sclera is relatively poor in both cells and vessels, the use of larger tissue samples was explored to help prevent overlooking cells and to understand their localization in relation to vessels and other anatomical sites. To allow for the analysis of larger tissue samples under the confocal microscope, a laminating technique was performed to create thin layers from the sclera. Following the analysis of results of CD31 blood vessels and lymphatic vessel endothelial hyaluronan receptor 1 (LYVE1) positive cells, for which approval for scientific examination was obtained, the advantages and limitations of this method are discussed.

Human sclera tissue is mainly collagen; therefore, it is not easily usable for immunohistochemistry. To achieve the goal of performing immunohistochemistry for confocal microscopy of scleral tissue, a laminating technique was used.

Usando uma técnica de estratificação para executar microscopia confocal da esclera humana


The sclera is a dense connective tissue that covers and protects the eye. It mainly consists of dense collagen bundles (types I, III, IV, V, VI, and ...

Induction of Ischemic Stroke and Ischemia-reperfusion in Mice Using the Middle Artery Occlusion Technique and Visualization of Infarct Area

Cerebrovascular disease is highly prevalent in the global population and encompasses several types of conditions, including stroke. To study the impact of stroke on tissue injury and to evaluate the effectiveness of therapeutic interventions, several experimental models in a variety of species were developed. They include complete global cerebral ischemia, incomplete global ischemia, focal cerebral ischemia, and multifocal cerebral ischemia. The model described in this protocol is based on the middle cerebral artery occlusion (MCAO) and is related to the focal ischemia category. This technique produces consistent focal ischemia in a strictly defined region of the hemisphere and is less invasive than other methods. The procedure described is performed on mice, given the availability of several genetic variants and the high number of tests standardized for mice to aid in the behavioral and neurodeficit evaluation.

We describe a mouse model of stroke induced by the occlusion of the middle cerebral artery using a silicone coated suture. The protocol can be applied to induce permanent occlusion or a temporary ischemia, followed by reperfusion.

Indução de Acidente Vascular Cerebral Isquêmico e isquemia-reperfusão em ratos usando a técnica de oclusão da artéria Oriente e Visualização de infarto Área

Cerebrovascular disease is highly prevalent in the global population and encompasses several types of conditions, including stroke. To study the impact of ...

Histological Quantification of Chronic Myocardial Infarct in Rats

Myocardial infarction is defined as cardiomyocyte death due to prolonged ischemia; an inflammatory response and scar formation (fibrosis) follow the ischemic injury. Following the initial acute phase, chronic remodeling of the left ventricle (LV) modifies the structure and function of the heart. Permanent coronary ligation in small animals has been widely used as a reference model for a chronic model of MI. Thinning of the infarcted wall progressively develops to transmural fibrosis. Histological assessment of infarct size is commonly performed; nevertheless, a standardization of the methods for quantification is missing. Indeed, important methodological aspects, such as the number of sections analyzed and the sampling and quantification methods, are usually not described and therefore preclude comparison across investigations. Too often, quantification is performed on a single section obtained at the level of the papillary muscles. Because novel strategies aimed at reducing infarct expansion and remodeling are under investigation, there is an important need for the standardization of accurate heart sampling protocols. We describe an accurate method to quantify the infarct size using a systematic sampling of harvested rat heart and image analyses of trichromatic stained histological sections obtained from base to apex. We also provide evidence that calculating the expansion index (EI) allowed for infarct size assessment, taking into account changes of the left ventricle throughout the remodeling.

The post-mortem assessment of myocardial infarction (MI) in rodents is based on quantification of the infarct on stained heart sections. We describe an accurate method to quantify the infarct size using systematic sampling of harvested rat hearts from base to apex and image analyses of trichrome-stained histological sections.

Quantificação histológico de miocárdio crônico infarto em ratos

Myocardial infarction is defined as cardiomyocyte death due to prolonged ischemia; an inflammatory response and scar formation (fibrosis) follow the ...