Este protocolo único permite a avaliação da função cardiovascular do camundongo neonatal usando a tecnologia de eletrocardiografia imediatamente após o nascimento de forma não invasiva sem o uso de anestésicos. Avaliar a função cardiovascular de murina no início do pós-natal expandirá nossa compreensão do coração neonatal de forma que possa se correlacionar diretamente com os dados clínicos humanos. Para preparar o dispositivo de medição para a análise, conecte o dispositivo na porta USB de um computador.
O dispositivo de medição começará automaticamente a aquecer até 37 graus Celsius. Após cerca de 15 minutos, retire um filhote de rato de sua gaiola e limpe o tórax com 70% de etanol. Coloque o filhote na superfície aquecida do plástico e deixe que o animal se aclimata à superfície por aproximadamente dois a cinco minutos no escuro.
Enquanto o mouse está aclimatando, colete uma pequena gota de gel de condução elétrica adesivo e pressione suavemente a gota para baixo na parte superior de cada uma das quatro superfícies de eletrodos achatadas, puxando cuidadosamente o gel condutor para longe em um ângulo oblíquo do centro do eletrodo construído após contato. Quando cada eletrodo estiver completamente coberto com gel, coloque o filhote de rato neonatal na plataforma na posição propensa com a cabeça do filhote de frente para a borda USB da plataforma com cada eletrodo cobrindo uma porção do tórax superior do filhote. Contenha suavemente os antebraços enquanto aplica simultaneamente pressão suave aos eletrodos por aproximadamente um minuto.
Quando o gel condutor estiver pronto, fixe o filhote nos lados direito e esquerdo com para-choques de silicone de borracha. Monitore o mouse por um momento ajustando a colocação do para-choques conforme necessário. Quando o filhote estiver seguro, aplique qualquer gel condutor restante no eletrodo traseiro de aterramento e use pressão suave para colocar o eletrodo na garupa do filhote para permitir que o gel defina antes de soltar o filhote.
Coloque cuidadosamente o para-choque de silicone final em cima da garupa para segurar o eletrodo de aterramento no lugar e coloque suavemente toda a plataforma na gaiola de Faraday, em seguida, verifique se o filhote não está se movendo excessivamente e que o corpo e a cabeça do mouse parecem seguros. Um ECG ideal terá um sinal claro e proeminente que permite que todas as ondas sejam analisadas em vários prazos diferentes. Uma leitura de baixa qualidade não tem batidas perceptíveis, mostra clara interferência e exibe ondas ou inconsistências ao longo da leitura.
O programa fornece a análise dos principais aspectos da leitura do ECG, incluindo a frequência cardíaca, intervalos de RR, intervalo complexo QRS, intervalo QT e intervalo de RP. Utilizando esses dados para estabelecer um conjunto de valores normativos, nesta análise representativa, foi determinado que os filhotes analisados no primeiro dia pós-natal tinham uma média cardíaca de 357,2 batimentos por minuto. Para um filhote no primeiro dia pós-natal, os intervalos médios de RR, PR, QRS e QT foram de 169,1, 36,3, 16,9 e 45,4 milissegundos, respectivamente.
É importante ressaltar que a configuração pode ser usada para analisar padrões de ECG de camundongos neonatais que sofrem de defeitos cardíacos congênitos. O dispositivo é eficaz e confiável, mas também altamente sensível à interferência elétrica circundante. Certifique-se de remover sempre qualquer equipamento desnecessário, incluindo carregadores de laptop e dispositivos inteligentes antes da gravação.
Medidas adicionais possíveis incluem respiração e chumbo III, que é calculado a partir dos leads I até II.Variáveis adicionais podem permitir uma sobreposição adicional com outros sintomas fisiológicos e/ou arritmias cardíacas específicas.
