Questo protocollo unico consente la valutazione della funzione cardiovascolare del topo neonatale utilizzando la tecnologia elettrocardiografica immediatamente dopo la nascita in modo non invasivo senza l'uso di anestetici. La valutazione della funzione cardiovascolare murina nel primo periodo postnatale amplierà la nostra comprensione del cuore neonatale in un modo che potrebbe correlare direttamente con i dati clinici umani. Per preparare il dispositivo di misurazione per l'analisi, collegare il dispositivo alla porta USB di un computer.
Il dispositivo di misurazione inizierà automaticamente il riscaldamento fino a 37 gradi Celsius. Dopo circa 15 minuti, rimuovere un cucciolo di topo dalla gabbia di casa e pulire il torace con il 70% di etanolo. Posizionare il cucciolo sulla superficie riscaldata della plastica e consentire all'animale di acclimatarsi in superficie per circa due o cinque minuti al buio.
Mentre il mouse si acclimata, raccogliere una piccola goccia di gel conduttore elettrico adesivo e premere delicatamente la goccia verso il basso sulla parte superiore di ciascuna delle quattro superfici degli elettrodi appiattite, tirando accuratamente via il gel conduttore ad un angolo obliquo dal centro del costrutto dell'elettrodo dopo il contatto. Quando ogni elettrodo è completamente coperto di gel, posizionare il cucciolo di topo neonatale sulla piattaforma nella posizione prona con la testa del cucciolo rivolta verso il bordo USB in uscita della piattaforma con ogni elettrodo che copre una porzione del torace superiore del cucciolo. Trattenere delicatamente gli arami applicando contemporaneamente una leggera pressione agli elettrodi per circa un minuto.
Quando il gel conduttore è impostato, fissare il cucciolo sui lati destro e sinistro con paraurti in silicone di gomma. Monitorare il mouse per un momento regolando il posizionamento del paraurti in base alle esigenze. Quando il cucciolo è sicuro, applicare qualsiasi gel conduttore rimanente sull'elettrodo della coda di messa a terra e utilizzare una pressione delicata per posizionare l'elettrodo sulla groppa del cucciolo per consentire al gel di impostare prima di rilasciare il cucciolo.
Posizionare con cura il paraurti finale in silicone sopra la groppa per mantenere l'elettrodo di messa a terra in posizione e posizionare delicatamente l'intera piattaforma nella gabbia di Faraday, quindi verificare che il cucciolo non si muova eccessivamente e che il corpo e la testa del mouse appaiano sicuri. Un ECG ideale avrà un chiaro segnale prominente che consente di analizzare tutte le onde in diversi tempi. Una lettura di scarsa qualità non ha battiti distinguibili, mostra chiare interferenze e mostra onde o incongruenze durante la lettura.
Il programma fornisce analisi degli aspetti chiave della lettura ECG, tra cui la frequenza cardiaca, gli intervalli RR, l'intervallo complesso QRS, l'intervallo QT e l'intervallo PR. Utilizzando questi dati per stabilire una serie di valori normativi, in questa analisi rappresentativa, è stato determinato che i cuccioli analizzati nel primo giorno postnatale avevano una frequenza cardiaca media di 357,2 battiti al minuto. Per un cucciolo nel primo giorno postnatale, gli intervalli medi RR, PR, QRS e QT erano rispettivamente di 169,1, 36,3, 16,9 e 45,4 millisecondi.
È importante sottolineare che la configurazione può essere utilizzata per analizzare i modelli ECG di topi neonatale affetti da difetti cardiaci congeniti. Il dispositivo è efficace e affidabile, ma anche altamente sensibile alle interferenze elettriche circostanti. Assicurati di rimuovere sempre tutte le apparecchiature non necessarie, inclusi caricabatterie per laptop e dispositivi intelligenti prima della registrazione.
Ulteriori misurazioni possibili includono la respirazione e il piombo III, che viene calcolato dai cavi da I a II.Ulteriori variabili potrebbero consentire un'ulteriore sovrapposizione con altri sintomi fisiologici e/o aritmie cardiache specifiche.
