O presente protocolo pode ser usado com sucesso em ratos com corações saudáveis ou remodelados na presença de uma grande variedade de fatores de risco para estudos de acompanhamento agudos ou de longo prazo. Este protocolo permite estudar fibrilação atrial em diferentes condições fisiopatológicas para avaliar novas estratégias profiláticas e terapêuticas. Depois de anestesiar um rato wistar adulto, coloque o rato em uma posição supina em uma almofada de aquecimento para manter sua temperatura corporal a 37 graus Celsius.
Em seguida, conecte três eletrodos de ECG de superfície aos membros do rato em uma configuração de chumbo II, colocando o eletrodo negativo no membro dianteiro direito, o eletrodo positivo na barra traseira esquerda e o eletrodo de aterramento no membro dianteiro esquerdo. Fixar os eletrodos na posição usando acordes finos de corda elástica. Em seguida, ligue a gravação de ECG superficial e realize a gravação contínua de ECG durante todo o procedimento usando um programa comercial ou de aquisição desenvolvido localmente.
Para estimulação elétrica, use um cateter quadripolar francês de cinco ou seis franceses conectado a um marca-passo cardíaco à base de microcontrolador. Uma vez que a rota esteja totalmente anestesiada, insira o cateter através da cavidade oral no esôfago. Para confirmar a posição correta do cateter de estimulação ao nível da atria, aplique estimulação elétrica em uma frequência de 400 estímulos por minuto.
Em seguida, verifique se o rastreamento do ECG mostra captura constante do atria. Com base nisso, determine o limiar diastólico definido como a menor tensão necessária para obter captura atrial. Para ratos do grupo de estimulação, uma vez determinada a posição correta do cateter, ajuste o estimulador para uma frequência de 4.000 estímulos por minuto a uma tensão de três volts acima do limiar diastólico.
Em seguida, para cada rato, aplique 15 ciclos sucessivos de estimulação, 20 segundos cada, com um intervalo livre de cinco minutos entre os ciclos. Em seguida, verifique a eficácia da estimulação identificando o tempo de recuperação do nódulo sinusal, que aparece no final do ritmo rápido como um intervalo de tempo maior do que o comprimento do ciclo registrado durante o ritmo sinusal e representa o intervalo de tempo necessário para a retomada do ritmo sinusal após o término da supressão do overdrive. Em seguida, identifique a ocorrência do episódio de fibrilação atrial definida como a presença de três ou mais batidas supraventriculares consecutivas, irregulares e supraventriculares com ondas P ausentes ou substituídas por pequenas e distorcidas ondas F.
Para ratos do grupo sham, após inserir o cateter através da cavidade oral, mantenha o cateter em posição por 18 minutos sem aplicar qualquer estimulação elétrica, enquanto registra continuamente o ECG superficial. No primeiro dia de estimulação, 80% dos ratos que receberam estimulação elétrica apresentaram episódios de fibrilação atrial Dos 164 ciclos de estimulação aplicados, 42 foram seguidos por episódios de fibrilação atrial. Durante os 10 dias de estimulação, em média, 15,6 episódios de fibrilação atrial foram eficientemente induzidos em todos os animais.
Do total de ciclos de estimulação aplicados, 20% foram seguidos por fibrilação atrial e 41 episódios duraram mais de 600 segundos. Para episódios que duram menos de 600 segundos, a duração média foi de 40,12 segundos. A técnica atual é relativamente fácil de reproduzir e nenhum treinamento especial é necessário para funcionários de laboratório que trabalham regularmente com modelos animais.
Após este procedimento, a gravação contínua de ECG usando um dispositivo de telemetria pode ser realizada para avaliar episódios de fibrilação atrial espontânea e variabilidade da frequência cardíaca.
