Quantificação de modificações pós-traducionais globais de histona utilizando citometria de fluxo intranuclear em microglia cerebral isolada de camundongos

Nossa pesquisa visa entender os mecanismos regulatórios fundamentais que controlam a expressão gênica no cérebro, e estamos particularmente interessados em entender como a interrupção desses mecanismos contribui para condições neurodesenvolvimentais e neuropsiquiátricas. Nosso foco é entender como fatores de risco genéticos e ambientais se combinam para alterar a função celular e produzir prejuízos comportamentais. Este protocolo inclui métodos para triagem de alto rendimento de modificações de histonas em micróglias isoladas, permitindo-nos rastrear dezenas de diferentes modificações epigenéticas antes de nos comprometermos com o sequenciamento de alto rendimento e estudos de acompanhamento funcional.

Nosso protocolo fornece medidas de modificações histológicas globais semelhantes ao gráfico ocidental. No entanto, nossa técnica é mais rápida, requer menos células de entrada, é mais quantitativa e pode ser multiplexada.