Aplicação de coloração de mitocôndrias vivas na classificação de células para purificar hepatócitos derivados de células-tronco pluripotentes induzidas por humanos

O escopo de nossa pesquisa é purificar hepatócitos derivados de células-tronco pluripotentes induzidas por humanos, usando sem modificação genética. Nosso objetivo é abordar a questão do risco tumorigênico associado às células indiferenciadas, entre aquelas diferenciadas das células iPS humanas. Um dos desafios experimentais atuais é a baixa pureza celular, devido ao armazenamento mecânico da triagem.

Estamos desenvolvendo um novo método de purificação, que utiliza as características exclusivas do metabolismo dos hepatócitos, para purificação em larga escala. Um método de classificação não celular para células progenitoras hepáticas não pode obter hepatócitos puros. Outro para hepatócitos maduros só pode tratar uma pequena fração de hepatócitos, devido à expressão limitada da proteína marcadora.

Em contraste, nossa abordagem pode obter hepatócitos em diferentes níveis de maturação com maior eva. Os hepatócitos derivados de células iPS humanas são extremamente imaturos e apresentam macroexpressão de hepatócitos mais reduzida após a purificação. Nosso objetivo futuro é melhorar a modulação de hepatócitos usando tecnologia organoidal e avanços diários para medicina regenerativa e descoberta de medicamentos.