Modelo cirúrgico para tubos uroteliais de engenharia de tecido de estágio único em minipigs

Para começar, jejue um mini porco de Göttingen adulto 12 horas antes da cirurgia. Depois de realizar uma laparotomia padrão da linha média inferior em um porco anestesiado, puxe a bexiga urinária interperitoneal para a ferida. Agora, faça hemostasia profilática na parede anterior da bexiga e incise o músculo detrusor com diatermia.

Em seguida, corte a camada mucosa interna com uma tesoura para extirpar um segmento de bexiga de parede completa. Feche a parede da bexiga com uma sutura contínua trançada reabsorvível rápida, deixando uma abertura proximal de um centímetro quadrado. Disseque cuidadosamente a camada mucosa da amostra ressecada em condições estéreis e pique a amostra mucosa em microenxertos de um milímetro quadrado para incorporação de andaimes.

Usando uma pinça, coloque as partículas mucosas em uma malha biodegradável ajustada com uma taxa de expansão de um a seis. Coloque a tela com os microenxertos voltados para cima dentro de um molde retangular de aço preenchido com solução de colágeno. Após a solidificação, deslize o hidrogel sobre uma malha de náilon apoiada em uma placa de aço perfurada e remova suavemente o molde.

Expulse a água do hidrogel colocando uma malha de náilon e, em seguida, uma placa de aço em cima do gel e, em seguida, comprima passivamente com um peso de 120 gramas colocado em cima da placa de aço por cinco minutos. Após a compressão, remova suavemente o peso e a malha de náilon. Agora, o enxerto está pronto para o manuseio cirúrgico.

Enrole o andaime achatado em torno de um stent biodegradável com os microenxertos voltados para o stent e suture o andaime no lugar longitudinalmente com uma sutura lenta de monofilamento reabsorvível. Fixe uma rolha de enema colônico anterógrado dentro do lúmen do stent suturando o stent à tampa com duas ou três suturas não reabsorvíveis interrompidas. Depois de completar o andaime, anastomose a construção tubular à abertura restante na parede anterior da bexiga com uma sutura contínua de monofilamento reabsorvível lenta.

Aperte a anastomose com uma sutura de cordão em bolsa e ligue a extremidade distal do conduto. Colha um retalho peritoneal do ligamento pubovesical e remende o andaime tubular longitudinalmente com uma sutura de monofilamento reabsorvível lenta e contínua. Injete solução salina através do cateter uretral para confirmar a patência da anastomose.

Dissecar sem rodeios um canal transfascial lateralmente à linha média ao lado da glândula mamária caudal no lado direito. Coloque o conduíte em uma bolsa subcutânea e marque o conduíte com suturas não reabsorvíveis no nível da pele. Após fechar a fáscia muscular anterior do músculo abdominal, feche a pele com uma sutura contínua de monofilamento não reabsorvível.

Ao final de seis semanas de observação, inspecione o lúmen do conduto por endoscopia quanto à continuidade e revestimento epitelial. Realize tomografia computadorizada com contraste aprimorado para garantir a permeabilidade do conduto. Após seis semanas de observação, a avaliação do tecido do andaime microscópico não revelou sinais de rejeição ou infecção do hospedeiro, e o andaime tubular permaneceu pérvio e desobstruído.

As avaliações histológicas mostraram um epitélio luminal estratificado de origem urotelial cobrindo todo o andaime com remanescentes dos biomateriais de reforço ainda visíveis após seis semanas.