O distúrbio articular e a DTM são um grupo de cerca de 30 doenças humanas que afetam os músculos articulares e a dor nos tecidos circundantes é a principal razão pela qual o paciente com DTM vai ao hospital até agora. Não há tratamento eficaz para a dor da DTM devido à má compreensão do mecanismo da dor. Para investigar o mecanismo da dor, desenvolvemos um modelo de camundongo de DTM dolorosa seguido pela análise do comportamento da dor.
A avaliação da dor na pesquisa da dor artificial é um grande desafio devido à variabilidade intrínseca da análise do comportamento. Além disso, o uso de laboratório diferente, o protocolo diferente para avaliar a dor, tornam difícil cruzar a referência entre diferentes estudos. Neste artigo do JOE, descrevemos uma versão visualizada de um ensaio de chama, filamento e força traseira para uma grande dor artificial.
Esses protocolos fornecem um método detalhado para implementação direta e combinados com abordagens para avaliar de forma abrangente a dor na ATM. Eles podem ser aplicados para avaliar o comportamento da dor em várias condições de dor oral, como dor autógena, caneta ATM, caneta muscular e caneta neuropata. Para começar posicione o camundongo anestesiado na plataforma cirúrgica, prepare uma seringa de insulina estéril ou uma agulha de calibre 31 para injetar CFA na articulação mandibular temporal.
Cubra a agulha com uma bainha feita de tubo de polietileno, deixando apenas dois milímetros da ponta da agulha salientes para evitar a inserção profunda. Em seguida, palpe o arco zigomático para localizar a articulação mandibular temporal ou o local da injeção da ATM. Em seguida, insira a agulha no local da injeção, que fica sob a extremidade posterior do arco zigomático.
Injete lentamente 10 microlitros de CFA na cápsula da ATM e aguarde pelo menos cinco segundos antes de retirar gradualmente a agulha. Para começar, estabeleça um modelo inflamatório de camundongo com dor na ATM por meio de injeção intra-articular de CFA. Depois que o mouse estiver totalmente recuperado, coloque o tubo de retenção na gaiola do mouse por pelo menos uma hora na sala comportamental antes de testar para aclimatar o mouse ao ambiente de teste.
Em seguida, ligue o software compatível para medir à força e abra o programa N-B-I-T-R-S-D-V 2.6 0.3. Agora selecione as opções de comunicação apropriadas. Escolha o UDP do modo assistido, selecione o IP local correto e pesquise o IP e a porta do dispositivo clicando em pesquisar.
Quando o IP de destino e a porta de destino forem exibidos, clique em abrir. Defina o eixo Y clicando em 10 no intervalo Y.Em seguida, clique em definir. Por fim, clique em aquisição.
Em seguida, selecione apenas o canal um para o gráfico azul e desative outros canais não conectados ao dispositivo. Clique em play para começar a registrar a força da mordida. Agora coloque o mouse em um tubo de plástico de 50 mililitros modificado para conter frouxamente o mouse e mova a placa de mordida em direção à boca do mouse.
Registre a mordida voluntária por dois minutos por sessão. Em seguida, clique em pausar para parar a gravação e clique em salvar. Agora classifique os dados na segunda coluna do arquivo Excel do máximo ao mínimo, selecione os cinco principais valores de amplitude da força de mordida para análise posterior.
Registre o valor do canal um do programa e subtraia ou adicione-o aos cinco principais valores da amplitude da força de mordida. Para obter os valores relativos da força de mordida deste ensaio, pegue a média desses cinco valores para determinar a força de mordida relativa média para um camundongo. Os camundongos tratados com CFA exibiram uma redução significativa na força de mordida relativa no primeiro dia após a injeção em comparação com o grupo PBS com recuperação gradual ao longo do tempo, a porcentagem de mudança da força de mordida diminuiu significativamente em camundongos tratados com CFA no primeiro dia com uma tendência de recuperação no dia 12.
Para começar, coloque uma gaiola de malha de arame na gaiola do rato e habitue os ratos na sala comportamental por pelo menos uma hora antes dos procedimentos de teste. Em seguida, ligue a máquina eletrônica de teste von Fray. Para medir o limite de retirada da cabeça, pressione máximo e ajuste a unidade para 500 gramas, que é uma unidade arbitrária definida pela máquina.
Defina o valor como zero para iniciar a gravação agora. Coloque os ratos na gaiola de malha de arame. Aplicar o filamento de von fray perpendicularmente à zona da articulação temporomandibular.
Registre o valor da força aplicada do filamento ou a intensidade do estímulo em gramas que desencadeia a reação como o primeiro teste. Em seguida, defina o valor da força na tela para zero e aguarde 10 segundos enquanto o mouse permanece dentro da gaiola. Comece a aplicar o filamento novamente e registre o valor do limite de retirada da cabeça foi significativamente menor em camundongos tratados com CFA no primeiro dia em comparação com a linha de base, seguida de recuperação parcial.
Com o tempo, a mudança percentual no limiar de retirada da cabeça diminuiu acentuadamente em camundongos tratados com CFA no primeiro dia, com melhora observada até o dia 12.
