Nosso objetivo era desenvolver um protocolo voluntário de corrida de roda eficaz e acessível que pudesse medir os parâmetros de corrida individuais em camundongos, minimizando os efeitos do isolamento social. A lacuna nos protocolos atuais de VWR é a incapacidade de medir com precisão as métricas de corrida individuais em camundongos sem evitar o estresse induzido pelo isolamento ou confiar em dados gerais de desempenho da gaiola. A vantagem do nosso protocolo é apresentar um modelo de reexecução voluntária eficiente adequado para vários contextos de pesquisa que evita o isolamento enquanto rastreia com precisão as métricas de execução individuais em camundongos.
Este protocolo pode permitir que os paradigmas de estresse explorem o impacto do exercício no comportamento em camundongos alojados em grupo, enquanto medem com precisão as métricas individuais sem introduzir o estresse associado ao alojamento de isolamento. Para começar, aplique cola na circunferência média externa de cada roda e fixe um ímã. Este ímã será detectado pelo sensor do velocímetro para monitorar o funcionamento voluntário da roda.
No lado oposto da roda, cole um objeto de peso semelhante, como uma moeda, para contrabalançar e evitar a rotação indesejada devido ao peso do ímã. Corte um pedaço de uma placa de espuma branca em uma forma complementar à base da roda. Prenda-o com papel adesivo à prova d'água para servir de palco para o velocímetro e a roda.
Insira um novo conjunto de baterias no velocímetro. Em seguida, defina o tamanho da roda durante a programação inicial, medindo a circunferência externa da roda. Cole o sensor do velocímetro na plataforma.
Certifique-se de que o sensor esteja colocado paralelo ao ímã da roda para permitir o registro adequado do movimento. Enrole o sensor e o fio com fita adesiva para evitar que o fio seja mastigado por ratos. Configure um aparato comportamental com uma caixa para testar camundongos simultaneamente.
Em seguida, corte a espuma branca em dois pedaços de tábua com 30 centímetros de comprimento e 40 centímetros de largura. Faça um corte de 20 centímetros no meio da largura da placa para permitir a interseção das duas placas de espuma. Em seguida, cubra a placa de espuma com papel adesivo à prova d'água para facilitar a limpeza entre os grupos.
Use as duas placas de espuma que se cruzam para dividir a caixa do aparelho em quatro quadrantes. Agora coloque uma roda preparada no canto de cada quadrante. Prenda os fios na parede com fita adesiva e prenda os velocímetros na lateral do aparelho Perspex transparente.
Para mouses sem controle de exercícios, trave as rodas usando cola quente para imobilizar o centro de rotação da roda e desative a rotação. Para corrida voluntária com rodas, coloque os mouses na sala de corrida voluntária para se habituar por 30 a 60 minutos e, em seguida, reinicie todos os velocímetros antes de iniciar a sessão. Coloque cada mouse no canto de seu quadrante designado, onde ele possa correr livremente.
Após duas horas, retorne os ratos à gaiola e registre os dados do velocímetro. Limpe as arenas e rodas com 70% de etanol entre os grupos para evitar a contaminação do cheiro. Os ratos demonstraram a maior atividade voluntária de corrida durante a segunda semana, gastando uma média de 2.135,87 segundos na roda, viajando 1,16 quilômetros e correndo a uma velocidade de 2,25 quilômetros por hora.
A menor atividade voluntária de corrida com rodas foi registrada na sexta semana, com os ratos gastando uma média de 1.136,48 segundos na roda, viajando 0,56 quilômetros e mantendo uma velocidade de 2,21 quilômetros por hora. Após cinco semanas de corrida voluntária da roda, os camundongos exibiram um aumento de 26,87% no tempo de investigação durante o teste de reconhecimento de objetos espaciais, indicando melhora na função do hipocampo.
