Для просмотра этого контента требуется подписка на Jove Войдите в систему или начните бесплатную пробную версию.
Диссоциирующего клетки определенных типов ткани требует специфических параметров для агитации ткани для получения большого количества жизнеспособных, culturable клеток. Miltenyi gentleMACS диссоциатор оптимизирует эту задачу с простым, практичным протокола. В этой публикации использование этого аппарата на легочной ткани объясняется.
Подготовка одноклеточных суспензий из тканей является важной предпосылкой для многих экспериментов в сотовых исследований. Процесс диссоциации целые органы требует специфических параметров, чтобы получить большое количество жизнеспособных клеток в воспроизводимым образом. GentleMACS диссоциатор оптимизирует эту задачу с простым, практичным протокола. Инструмент содержит предварительно запрограммированными настройками, которые оптимизированы для эффективной, но нежный диссоциации различных типов тканей, в том числе мыши легких. В этой публикации использование диссоциатор gentleMACS на легочную ткань производным от мышей показано.
Для работы в стерильных условиях, то рекомендуется выполнять все шаги в ламинарном боксе.
1. Материалы
2. Диссоциирующего легочной ткани
3. Фильтрация
Часть 4: Представитель Результаты:
Рисунок 1. Легкого диссоциации с gentleMACS ™ диссоциатор привело к 92% жизнеспособных клеток. Мертвые клетки флуоресцентно окрашенных пропидий йодида (PI) (право сюжет точку; левый участок точка: нет окрашивания PI).
Рисунок 2. Диссоциация мыши легочной ткани с использованием результатов gentleMACS диссоциатор в высокий процент жизнеспособных лейкоцитов и эндотелиальных клеток. Производных одноклеточных суспензий окрашивали CD45-PE и CD146-FITC или CD31-FITC и анализировали с помощью проточной цитометрии.
Рисунок 3. Single-клеточной суспензии производным от мыши легочной ткани окрашивали CD11c-FITC и Анти-mPDCA-1-APC для обнаружения мыши CD11c низкий м-PDCA-1 + plasmacytoid контроллеров домена, а также высокой CD11c клеток.
Рисунок 4. Обогащение дендритных клеток с использованием CD11c микрошарики, сепаратор MiniMACS и два MS Столбцы.
В этом видео, мы вводим новый метод диссоциации легочной ткани мыши. Мы показали, что сочетание механических и ферментативных лечения легочной ткани дали высокий процент жизнеспособных лейкоцитов и эндотелиальных клеток. В частности, механические распада тканей было достигнуто за сч?...
The authors are employees of Miltenyi Biotec GmbH who make the instrument used in this article.
Авторы являются сотрудниками Miltenyi Biotec GmbH, Германия.
Запросить разрешение на использование текста или рисунков этого JoVE статьи
Запросить разрешениеСмотреть дополнительные статьи
This article has been published
Video Coming Soon
Авторские права © 2025 MyJoVE Corporation. Все права защищены