JoVE Logo

Войдите в систему

Для просмотра этого контента требуется подписка на Jove Войдите в систему или начните бесплатную пробную версию.

В этой статье

  • Резюме
  • Аннотация
  • протокол
  • Обсуждение
  • Благодарности
  • Материалы
  • Ссылки
  • Перепечатки и разрешения

Резюме

Роман микрожидкостных система была разработана с использованием явления пассивного накачки и пользователь управляемая система доставки жидкости. Это микрожидкостных система обладает потенциалом для использования в самых разнообразных биологических приложений с учетом его низкой стоимости, простоты использования, объемная точность, высокая скорость, повторяемость и автоматизации.

Аннотация

Роман микрожидкостных была разработана система, использующая явление пассивного насосных вместе с пользователем контролируемые капли система доставки жидкости. Пассивный накачка явление которого поверхностное натяжение индуцированные перепады давления привод движения жидкости в закрытых каналах. Автоматизированная система доставки жидкость состоит из набора управляемый напряжением клапаны с микро-сопла подключен к пластовой жидкости и систему управления. Эти управляемые напряжением клапаны предлагаем объемно точный способ доставки жидкости капель на входе микрожидкостных устройств в высоком образом частоты. На основании размеров продемонстрирована в текущем примере исследования, система способна течет 4 миллилитров в минуту (через 2,2 мм по 260um поперечного сечения канала). Исходя из этих же размеров канала, жидкость обмен точку внутри канала может быть достигнуто всего за восемь миллисекунд. Он отметил, что существует взаимосвязь между импульсом система (предоставленная сочетание капель созданные клапанов и скорости жидкости в канале), а поверхностное натяжение жидкости. Где импульс обеспечивает скорость до потока жидкости (или наоборот), выравнивание поверхностного натяжения на входе обеспечивает внезапная остановка любого потока. Эта внезапная остановка позволяет пользователю управлять потоком характеристики канала и открывает двери для различных биологических приложений, начиная где-то от реагента доставки наркотиков клетка исследований. Он также отметил, что, когда сопла направлены на входе на небольших углах, капли импульс может вызвать дополнительные интересные явления жидкости, такие как смешивание нескольких капель на входе.

протокол

В этом докладе мы демонстрируем жидкости способ доставки, что использует небольшие поверхностное натяжение капли для перекачки желаемого объема через микрожидкостных каналов для достижения числа различных явлений жидкости. Например, пользователь может пожелать одного потока жидкости настолько быстро, насколько это возможно, или передачу нескольких жидкостей в быстрой последовательности для создания конкретных жидкостных моделей. Для того, чтобы сделать это, пользователь должен сначала иметь приложение, построенное вокруг микрожидкостных устройств. Microflluidic устройства не должны быть связаны, но должна быть изготовлена ​​из гидрофильных материалов. Therfore, этот метод может быть использован практически с любым микрожидкостных устройств, с производительностью в значительной степени диктуется геометрических ограничений микрожидкостных каналов. Чтобы помочь ориентироваться в геометрических ограничений этого метода, введение в соответствующие численного анализа представлены в первую очередь.

  1. Аналитические методы: В соответствии с законом Лапласа и Закон Washburn [1], можно связать скорость потока в рамках микрожидкостных каналов по своим размерам и свойствам текущей жидкости, как показано в уравнении (1),
    figure-protocol-1287 (1)
    где Δ P является перепад давления между входом и выходом, γ является поверхностное натяжение жидкости, R является входом радиус капли, Q является скорость потока и К жидкостного сопротивления, как описывается уравнением (2),
    figure-protocol-1828 (2)
    где η является вязкость жидкости, L 0, длина канала, ч это канал, высота, ш ширина канала, λ = ш / в и д (λ) = 1,5, если λ> 4,45 или
    figure-protocol-2207
    если λ <4,45. Подставляя уравнение (2) в уравнение (1), всегда при условии, что ч <ш и решения для Q, то получим уравнение (3),
    (3) figure-protocol-2433
    Такой же анализ может быть сделано для скорости жидкости внутри канала, зная, что Q = ВА, где У жидкости средней скорости и является площадь поперечного сечения или ш. Подключение их в уравнение (3) вы столкнетесь с уравнением (4),
    (4) figure-protocol-2746
    Важную механическую концепцию, которая часто применяется в микрожидкостных биологии напряжение сдвига, которая относится к скорости потока и скорости уравнением (5),
    (5) figure-protocol-2993
    Зная связь между скоростью потока, скорости и их физические последствия в зависимости от канала размеры и свойства жидкости имеет решающее значение в дизайне микрожидкостных устройство для определенных целей. Как только устройство будет создан, пользователь должен калибровки жидкости системы доставки для достижения требуемых характеристик потока внутри устройства.
  2. Шаги в Настройка и калибровка Система доставки:
    1. Создать микрожидкостных устройство через мягкие литографии технологии с использованием полидиметилсилоксан (PDMS, Sylgard 184, Dow Corning) [2]. Есть ряд статей Юпитера, которые иллюстрируют способы получения PDMS микрожидкостных устройств [5]. Для демонстрации, мы выбрали простой прямой канал, с размерами следующим образом: 2,2 мм ширина, 10 мм длины и 260um высоту. Входного и выходного диаметра 1,8 мм и 5.1mm соответственно (рис. 1). Обратимо прикрепить устройство к PDMS стекло, нажав ее на стекло (или другой подходящий субстрат) и выдавливая пузырьки воздуха [5]. Обратимое присоединение позволяет устройству быть повторно использованы несколько раз. Метод может также использоваться с постоянно прикреплен устройств, но это не требуется.
    2. Заполните устройство с жидкостью. Гидрофобный характер PDMS и гидрофильности стекла способствовать продвижению каплей, которая находится на входе или выходе, в канал. Если капля жидкости не хочу вдаваться в канал сам по себе или, если пузыри двигаться в канале, пользователь может поместить каплю жидкости на входе или выходе, и использовать пипетку на противоположном конце, чтобы высосать жидкость через канал. Еще один способ помочь жидкость двигаться в канал, разделяя устройство PDMS из стекло и осторожно очистки устройства PDMS и стекло с этанолом. Это возвращается к PDMS и стекло их гидрофобные и гидрофильные натуры, соответственно, что, возможно, были ослаблены со временем и использовать.
    3. После заполнения устройства с жидким, место небольшое снижение на входе и BiggeГ падение на выходе. Убедитесь, что пассивное накачка происходит, наблюдая за небольшую каплю на входе коллапс и наблюдения потока жидкости к розетке. Опять же, убедитесь, что Есть нет пузырьков внутри канала.
    4. Используя [3] Компания Ли VHS микро отпуск начиная комплект, вместе взятые одного или нескольких клапанов (клапан установки на рисунке 2), состоящий из Ли VHS M / 2 24 Вольт Valve, 0,062 MINSTAC Сопла с отверстием размером 0,0100 ", Ли 0,062 Minstac на Мягкий адаптер Тюбе, Спайк Ли и удерживайте драйвера (для пользовательских элементов управления, не показано) и ведущий Ассамблея Wire (соединительный клапан Спайк и удерживайте драйверов, не показаны).
    5. Простой способ держать клапанов с помощью миниатюрных инструментов Bioscience держателей (рис. 2) [4]. Они обеспечивают способ точно целиться и удерживать клапан в определенном положении во время экспериментов склеиванием клапана к одному концу держателя и с помощью магнитного основания (не показаны), с другой стороны.
    6. Сделать водохранилищ для размещения нескольких футах над устройством PDMS микрожидкостных (в нашем случае мы использовали ¾ унции шприцы открытыми для окружающих, см. рисунок 2). Резервуар обеспечивает давление головой, чтобы сопла, с давлением пропорциональна высоте резервуара. Кроме сопла клапаны могут находиться под давлением на любое число различных средств (например, сжатый газ). Прикрепите шприц иглой шприца. Типичный иглу шприца будет легко крепятся на 1,14 мм внутренний диаметр трубы. 1,14 мм трубы будет легко крепятся на 1,58 мм (1 / 16 ") внутренняя трубка диаметром, потом сам подключается к" Soft адаптер трубы "из клапана. Для предотвращения утечки жидкости в 1,14 мм до 1,58 мм соединение трубки, можно использовать как PDMS герметиком. Теперь, когда есть линия между иглой шприца и клапан Ли Ко, заполнить шприц резервуары с жидкостью. Дополнительных шприц и клапан может использоваться, чтобы помочь в процессе чистки (показаны, но не отмеченного на рис 2). Место магнитом в сторону клапана, это, как эти клапаны очищаются (они, как правило, закрытые электромагнитные клапаны), и смотреть жидкости начнут поступать из резервуара через клапан и выход 0,0100''сопла.
    7. Калибровка системы, выбирая клапан открыт времени (открытое время это время, которое клапана позволяет жидкости проходить на основе каждого импульса) и частоты (количество импульсов в секунду). Активировать один клапан для выбранного периода (минуты или около того, просто помните, общее время работы). Взвесьте жидкость, которая была доставлена ​​из клапана. Зная общее время работы, частота и каждого импульса открытое время, рассчитывать граммов на миллисекунду выстрел из клапана. Это "грамм на миллисекунды" значения позволит вам выбрать открытое время и по любой желаемой громкости пользователь может захотеть избавиться от клапана.

Пример: Система активируется на минуту (60 секунд). Частота 15 Гц (15 импульсов в секунду). За импульс открытое время составляет 20 миллисекунд (мс).

(20 мс) (15 Гц) (60) = 18000ms.

Это означает, что из 60 000 мс в одну минуту, клапан был фактически открыт для 18000 мс.
Давайте предположим, что объем жидкости доставлен весом 5 граммов. Затем,

5 г / 18000 мс = 2.78e -4 г / мс.

В случае с водой, с его плотностью время одного грамма на миллилитр (мл),

2.78e -4 г / мс = 2.78e -4 мл / мс.

После калибровки, объем капли зависит от открытого времени. Например, с помощью открытого времени 20 мс, а все остальные параметры как и в предыдущем примере,

(2.78e -4 мл / мс) (20 мс) = 5.56e -3 мл = 5,56 мкл.

Чтобы найти открытое время у необходимо сделать капля х микролитр (мкл) объема,

(Х мкл) / [(2.78e -4 мл / мс) (1000 мкл / мл)] = у мс

8) Цель одним или несколькими соплами на вход устройства PDMS (рис. 3). Наличие калиброванного системы, рассчитать объем выходящих из каждого клапана, основанный на микрожидкостных размеры устройства. За высокую пассивную скорость накачки (для достижения максимальной скорости потока), рассчитать объем падения входе необходимо создать входе каплей, которая обладает 90 градусов угол контакта с входной поверхности [2]. Для создания пакета, рассчитать клапан частоты и открытым раз и клапан таймингов необходимо активировать двух клапанов в определенной последовательности. Как видно на рисунке 3, два сопла может быть направлен на входе. Это может распространяться на несколько насадок, все из которых направлены на входе в канал.

Представитель Результаты:

При правильной калибровке, при открытом клапане раз правильно рассчитаны и сопла правильно, направленных на входе, пользователь должен иметь возможность видеть поток пассивно накачкой (рис. 4). Взрыв жидкого шульд выходить из клапана и достижения на входе. Как жидкости достигает входе, есть мгновенный крах входе зайти в канал, к розетке. Жидкий в пределах канала перемещается только в период распада входе капли. Полное движение жидкости в канале останавливается в конце капли коллапс, предусматривающий мгновенную остановку жидкости и четко определены границы жидкостных (в случае, если пользователь течет нескольких жидкостей). Длительность падения распада зависит от радиуса входного порта и объема входе капли [1]. В нашей экспериментальной установки и проектирования, входного краху падение происходит в течение нескольких миллисекунд.

figure-protocol-10851
Рисунок 1. PDMS микрожидкостных устройство с одним входом, слева, и один выход, да. Пожалуйста, нажмите здесь , чтобы видеть большую версию рисунке 1.

figure-protocol-11201
Рисунок 2. Водохранилище системы и клапан установки. Пожалуйста, нажмите здесь , чтобы видеть большую версию рисунке 2.

figure-protocol-11520
Рисунок 3. Два клапана, и направленные на одном входе микрожидкостных устройств. Пожалуйста, нажмите здесь , чтобы видеть большую версию рисунке 3.

figure-protocol-11867
Рисунок 4. Времени последовательность шагов (33 миллисекунд) входного краху падение следующие жидкости выброса из клапана. Пожалуйста, нажмите здесь , чтобы видеть большую версию рисунке 4.

Обсуждение

  1. За высокую пассивную скорость накачки, если правильное сочетание частоты и импульсов на единицу объема (за счет правильной открытое время) выбран, пользователь должен видеть то, что кажется перепада статического или оболочки на входе и очень быстрая скорость потока внутри канала. Если происхо?...

Благодарности

Финансирование было предоставлено Висконсин институт Discovery.

Материалы

  1. http://www.theleeco.com .
  2. http://www.biosciencetools.com/Catalog/mHolders.htm .

Ссылки

  1. Berthier, E., Beebe, D. J. Flow rate analysis of a tension driven passive micropump. Lab Chip. 7, 1475-1478 (2007).
  2. Duffy, D. C., McDonald, J. C., Schueller, O. J. A., Whitesides, G. M. Rapid Prototyping of Microfluidic Systems in Poly(dimethylsiloxane). Anal. Chem. 70, 4974-4984 (1998).
  3. Harris, J., Lee, H., Vahidi, B., Tu, C., Cribbs, D., Cotman, C., NL, J. e. o. n. Non-plasma Bonding of PDMS for Inexpensive Fabrication of Microfluidic Devices. J Vis Exp. (9), (2007).
  4. Walker, G. M., Beebe, D. J. A passive pumping method for microfluidic devices. Lab Chip. 2 (3), 131-134 (2002).

Перепечатки и разрешения

Запросить разрешение на использование текста или рисунков этого JoVE статьи

Запросить разрешение

Смотреть дополнительные статьи

31

This article has been published

Video Coming Soon

JoVE Logo

Исследования

Образование

О JoVE

Авторские права © 2025 MyJoVE Corporation. Все права защищены