JoVE Logo
АВТОРЫ
СВЯЖИТЕСЬ С НАМИ

Войдите в систему

Для просмотра этого контента требуется подписка на Jove Войдите в систему или начните бесплатную пробную версию.

В этой статье

  • Резюме
  • Аннотация
  • Введение
  • протокол
  • Результаты
  • Обсуждение
  • Раскрытие информации
  • Благодарности
  • Материалы
  • Ссылки
  • Перепечатки и разрешения

Резюме

Подробный экспериментальный протокол представлен в этой работе для оценки нейроповеденческой токсичности загрязнителей окружающей среды с использованием модели личинок зебры, включая процесс воздействия и тесты на нейроповеденческие показатели.

Аннотация

В последние годы все больше и больше загрязнителей окружающей среды оказались нейротоксическими, особенно на ранних стадиях развития организмов. Личинки зебрафиш являются выдающейся моделью для нейроповеденческого исследования загрязнителей окружающей среды. Здесь предусмотрен подробный экспериментальный протокол для оценки нейротоксичности загрязняющих веществ окружающей среды с использованием личинок зебры, включая сбор эмбрионов, процесс воздействия, нейроповеденческие показатели, процесс испытаний и анализа данных. Кроме того, для обеспечения успеха ассссы обсуждаются культурная среда, процесс экспозиции и экспериментальные условия. Протокол был использован в разработке психопатических препаратов, исследования экологических нейротоксических загрязнителей, и может быть оптимизирован, чтобы сделать соответствующие исследования или быть полезным для механистических исследований. Протокол демонстрирует четкий процесс работы для изучения нейроповеденческого воздействия на личинки зебры и может выявить эффекты различных нейротоксических веществ или загрязняющих веществ.

Введение

В последние годы все больше и больше загрязнителей окружающей среды были доказаны нейротоксические1,2,3,4. Однако оценка нейротоксичности in vivo после воздействия загрязнителей окружающей среды не так проста, как оценка эндокринных нарушений или токсичности развития. Кроме того, раннее воздействие загрязняющих веществ, особенно в экологически значимых дозах, привлекает все большее внимание в исследованиях токсичности5,6,7,8.

Зебрафиш в настоящее время устанавливается в качестве модели животных, пригодных для нейротоксичности исследований во время раннего развития после воздействия экологических загрязнителей. Зебрафиши являются позвоночными, которые развиваются быстрее, чем другие виды после оплодотворения. Личинки не нужно кормить, потому что питательные вещества в хорионе достаточно для поддержания их в течение 7 дней послеоплодизации (dpf)9. Larvae выйти из хора на 2 dpf и развивать поведение, такие как плавание иповорот,который можно наблюдать, отслеживается, количественно, и анализируются автоматически с помощью инструментов поведения10,11,12,13, начиная с 3-4 dpf14,15,16,17,18. Кроме того, высокопроизводительные тесты также могут быть реализованы с помощью поведенческих инструментов. Таким образом, личинки зебры являются выдающейся моделью для нейроповеденческого исследования загрязнителей окружающей среды19. Здесь протокол предлагается с использованием высокой пропускной способностью мониторинга для изучения нейроповеденческой токсичности загрязнителей окружающей среды на личинках зебры под легкими стимулами.

Наша лаборатория изучила нейроповеденческую токсичность 2,2',4,4'-тетрабромодифенил эфир (BDE-47)20,21, 6'-Гидрокси / Метокси-2,2',4,4'-tetra Bromodiiphenyl ether (6-OH/MeO-BDE-47)22, дека-броминированный дифениловый эфир (БДЭ-209), свинец и коммерческие хлорированные парафины23 с использованием представленного протокола. Многие лаборатории также используют протокол для изучения нейроповеденческих эффектов других загрязнителей на личинок или взрослых рыб24,25,26,27. Этот нейроповеденческий протокол был использован, чтобы помочь обеспечить механистической поддержки, показывающие, что низкие дозы воздействия бисфенола А и замены бисфенола S индуцированных преждевременного гипоталамического нейрогенеза в эмбриональных зебрафиш27. Кроме того, некоторые исследователи оптимизировали протокол для проведения соответствующих исследований. Недавнее исследование исключило токсичность бета-амилоида (АЗ) в простой модели зебры с высокой пропускной способностью с использованием наночастиц золота с покрытием казеина (Cas AuNPs). Он показал, что «Cas AuNPs в системном циркуляции трансумтризировался через гематоэнцефалический барьер личинок зебры и поглощенных внутримозговых АЗ42, вызывая токсичность в неспецифической, сопровождающей, как образом, которая была поддержана поведенческой патологией28.

Локомотив, угол пути и социальная активность являются тремя нейроповеденческими индикаторами, используемыми для изучения нейротоксических эффектов личинок зебры после воздействия загрязняющих веществ в представленном протоколе. Локомотив измеряется расстоянием плавания личинок и может быть поврежден после воздействия загрязняющих веществ. Угол пути и социальная активность более тесно связаны с функцией мозга и центральной нервной системы29. Угол наклона относится к углу пути движения животных относительно направления плавания30. В системе установлены восемь угловых классов от 180 -180. Для упрощения сравнения, шесть классов в конечном исходе определяются как обычные повороты (-10 "0", 0 "10", средние повороты (-10 "-90", "10" (90) и отзывчивые повороты (-180 "-90", "90" (180) в соответствии с нашими предыдущими исследованиями21,22. Двухрыбная социальная активность является основополагающей для группового поведения; здесь расстояние злт; 0.5 cm между 2 личинками действительными определено как социальный контакт.

Представленный здесь протокол демонстрирует четкий процесс изучения нейроповеденческого воздействия на личинки зебры и дает возможность выявить нейротоксичность различных веществ или загрязняющих веществ. Протокол принесет пользу исследователям, заинтересованным в изучении нейротоксичности загрязнителей окружающей среды.

протокол

Протокол соответствует руководящим принципам, утвержденным Комитетом по этике животных Университета Тонджи.

1. Сбор эмбрионов зебрафиш

  1. Положите две пары здоровых взрослых тюбингена зебрафиш в ящик для нереста в ночь перед воздействием, сохраняя соотношение полов на уровне 1:1.
  2. Удалите взрослую рыбу обратно в систему 30-60 минут после дневного света на следующее утро.
  3. Удалите эмбрионы из ящика для нереста.
  4. Промыть эмбрионы системной водой.
  5. Перенесите эмбрионы в стеклянную чашку Петри (диаметром 9 см) с достаточным количеством системной воды.
  6. Наблюдайте за эмбрионами под микроскопом и выбирайте здоровые эмбрионы для последующего воздействия.
    ПРИМЕЧАНИЕ: Здоровые эмбрионы, как правило, прозрачны с светло-золотистым цветом под микроскопом. Нездоровые эмбрионы, как правило, бледные и слипаются вместе, как это наблюдается под микроскопом.

2. Подготовка перед воздействием

  1. Подготовьте решение Хэнкса в соответствии с руководящими принципами книги зебры31.
    ПРИМЕЧАНИЕ: Решение Хэнкса включает в себя 0,137 M NaCl, 5,4 мМ KCl, 0,25 мМ Na2HPO4, 0,44 мМ KH2PO4, 1,3 мм CaCl2, 1,0 мМ MgSO4, и 4,2 мМ NaHCO3.
  2. Разбавить раствор Хэнкса 10% раствором Хэнкса с помощью стерильной воды.
  3. Добавьте 1 мл DMSO в 999 мл 10% решения Hanks, чтобы сделать решение управления 10% решения Hanks, включая 0,1% DMSO.
    ПРИМЕЧАНИЕ: Следующие шаги используют BDE-47 в качестве примера решения экспозиции.
  4. Растворите 5 мг аккуратного БДЕ-47 в 1 мл 100% DMSO, чтобы сделать стандартный раствор воздействия 5 мг/мл.
  5. Vortex 5 мг/мл раствор в течение 1 мин, чтобы полностью растворить БДЕ-47 в DMSO.
  6. Перенесите 10 л раствора 5 мг/мл в коричневую стеклянную бутылку 12 мл.
  7. Добавьте стерилизованные воды в конечный объем 10 мл, чтобы сделать концентрацию раствора воздействия БДЕ-47 5 мг/л и Соотношения DMSO на уровне 0,1%, затем вихрь в течение 1 мин.
  8. Перенесите 10 л и 100 л раствора 5 мг/л в две объемные колбы объемом 100 мл соответственно.
  9. Добавьте 10% раствор Хэнкса, включая 0,1% DMSO (подготовлено в шаге 2.3) до 100 мл, чтобы сделать окончательные концентрации решений воздействия БДЕ-47 5 мкг/л и 50 мкг/л, соответственно.
  10. Перенесите растворы в коричневые стеклянные бутылки объемом 100 мл и храните их при 4 градусах Цельсия.

3. Воздействие эмбрионов

  1. Передача 50 эмбрионов в каждую из трех стеклянных посуды Петри (диаметром 6 см) 3-5 часов после оплодотворения (hpf).
  2. Используйте 1 мл пипетки отзыв, чтобы пятно системной воды вокруг эмбрионов.
  3. Используйте пипетку для передачи управления и двух решений воздействия БДЕ-47 (контроль, 5 мкг/л, 50 мкг/л) в три стеклянные блюда Петри, соответственно.
  4. Встряхните стеклянные блюда Петри осторожно один за другим, чтобы эмбрионы разошлись в нижней части пластины.
  5. Положите стеклянные блюда Петри в легкий инкубатор под 28,5 градусов по Цельсию.
  6. Обновляйте половину решений экспозиции каждые 24 ч до 5 dpf.
  7. Проверьте мертвые эмбрионы каждой группы на 1 dpf и 2 dpf и вычислить уровень смертности.
  8. Проверьте инкубированные эмбрионы каждой группы на 2 dpf и 3 dpf и вычислить вылупляемость.
  9. Проверьте деформацию личинок каждый день после того, как они выходят из хора и вычислить скорость деформации каждой группы.
    ПРИМЕЧАНИЕ: Показатели деформации включают перикардиальной кисты, кривизны позвоночника, кривизны хвоста, среди других факторов32.

4. Подготовка к тесту на поведение

  1. Подготовьте микроплиту 48 скважин для испытания на передвижение и угол наклона пути и три 6 скважины для теста на социальную активность утром 5 dpf.
  2. Передача 800 л раствора воздействия в каждую скважину микроплиты скважины 48 скважин.
    ПРИМЕЧАНИЕ: Используйте 16 скважин для каждой группы (т.е. контрольный раствор, 5 мкг/л и 50 мкг/л группы).
  3. Используйте 1 мл пипетки отзыв для передачи 200 л раствора экспозиции с одной личинки из стекла чашка Петри в один колодец из 48 хорошо микроплиты.
  4. Передача 4 мл раствора экспозиции в каждую скважину 6 скважины.
    ПРИМЕЧАНИЕ: Используйте один 6 хорошо микроплиты для каждой группы.
  5. Используйте 1 мл пипетки отзыв для передачи 200 л воздействия раствора с двумя личинками в каждый колодец 6 хорошо микроплиты.
    ПРИМЕЧАНИЕ: Каждая группа имеет шесть повторяющихся групп.
  6. Перед тестом температура испытательного зала составляет 28 градусов по Цельсию.
    ПРИМЕЧАНИЕ: Поведенческие тесты обычно проводятся во второй половине дня.

5. Поведенческий тест

  1. Испытание наклона и угла наклона пути
    1. Нажмите значок пусковой установки на компьютерном столе, чтобы открыть программное обеспечение (см. Таблица материалов), который контролирует корпус мониторинга высокой пропускной их прокладки для запуска программы.
    2. Выберите модуль"Отслеживание, вращения, Углы пути"для входа в операционный интерфейс.
    3. Передача 48 хорошо микроплиты подготовлены в шаге 4.3 на платформу записи и потяните вниз крышку.
    4. Нажмите кнопку«Файл»Generate Protocol, в свою очередь, в программном обеспечении, чтобы начать генерацию нового протокола.
    5. Ввейд "48" в позиции"Местоположение отсчета"и нажмите кнопку"OK".
    6. Нажмите кнопку"Параметры"Параметры протокола"Время" в свою очередь, в программном обеспечении. Установите продолжительность эксперимента на 1 ч и 10 мин и установите период интеграции до 60 с33.
    7. Нарисуйте обнаруженные области.
      1. Выберите эллиптической формы и нарисуйте первый круг вокруг первого верхнего левого хорошо.
      2. Выберите круг, щелкните «Copy«Top-Right Mark« Вставить «Вставить«Выберитекнопку в свою очередь, и используйте мышь, чтобы перетащить скопированный круг в правый верхний.
      3. Выберите круг, щелкните кнопку«Копия»Нижняя Марка«Вставить» Выберите кнопку «Выберите» в свою очередь, и используйте мышь, чтобы перетащить скопированный круг в правый нижний.
      4. Нажмите кнопку"Построить"Очистить знаки" в свою очередь.
        ПРИМЕЧАНИЕ: Система будет автоматически рисовать каждый другой колодец пластины. Вновь созданные области должны идеально соответствовать каждому хорошо между фактической рыбы и ее отражение на стороне колодца.
    8. Нажмите кнопку«Шкала рисования»,нарисуйте линию калибровки на экране (диагональный путь или параллель с боковой микроплитой), введите ее длину иустановите «единицу». Затем нажмите кнопку"Применить к группе".
    9. Установите цвет животного на "Черный" в программном обеспечении.
    10. Установите порог обнаружения на 16-18, чтобы позволить обнаружение животных.
    11. Ввод неактивен/маленький и малый/большой скорости на 0.5 cm/s и 2.5 cm/s соответственно.
    12. Установите классы угла наклона. Вход "-90, -30, -10, 0, 10, 30 и 90 ",чтобы сделать угол наклона пути классов от -180 "-180".
    13. Установите условия освещения
      1. Нажмите кнопку«Параметры»Легкое вождение»Использует один из 3 методов запуска ниже«Расширенные стимулы»,чтобы установить условия освещения.
      2. Выберите кнопку"Край",затем установите темный период в 10 минут, а затем три цикла чередующихся 10 мин света и темных периодов.
    14. Сохраните протокол и выключите свет испытательного зала.
    15. Акклиматизировать личинки в системе в течение 10 минут и нажмите кнопку«Эксперимент»Выполнитев свою очередь, затем выберите папку, где сохраняются файлы эксперимента, и введите имя результата.
    16. Нажмите кнопку"Background""Начать"в свою очередь, чтобы начать тест.
    17. Нажмите кнопку"Эксперимент"Остановить", чтобы остановить эксперимент, когда тест заканчивается.
      ПРИМЕЧАНИЕ: Система показывает данные, проверенные при остановке системы. Данные включают гусенивое расстояние на трех классах скорости и угловые числа под восемью угловых классами каждой минуты. Для теста на передвижение в представленном примере рассчитывается общее расстояние в каждом светлом периоде (10 минут) и сравнивается разница между контрольной группой и группами лечения.
    18. Передача 48 скважин микроплиты обратно в свет инкубатор для других экспериментов.
  2. Тест на социальную активность
    1. Нажмите на значок пусковой установки на компьютерном столе, чтобы открыть программное обеспечение, которое управляет корпусом мониторинга высокой пропускной техники для запуска программы.
    2. Выберите модуль"Социальное взаимодействие"для входа в операционный интерфейс.
    3. Перенесите подготовленную 6 скважину (контрольная группа) в шаге 4.4 на платформу звукозаписи и снесите крышку.
    4. Нажмите кнопку«Файл»Generate Protocol, в свою очередь, в программном обеспечении, чтобы начать генерацию нового протокола.
    5. Ввечой "6" в позиции" Местоположение инажмите кнопку "OK".
    6. Нажмите кнопку"Параметры"Параметры протокола"Время" в свою очередь, в программном обеспечении. Установите продолжительность эксперимента на 1 ч и 10 мин и установите период интеграции до 60 с.
    7. Нарисуйте обнаруженные области.
      1. Выберите эллиптической формы и нарисуйте первый круг вокруг первого верхнего левого хорошо.
      2. Выберите круг, щелкните кнопку«Копия»Top-Right Mark«Вставить«Выберите» кнопку в свою очередь, и используйте мышь, чтобы перетащить скопированный круг в верхний правый колодец.
      3. Выберите круг, щелкните кнопку«Копия»Нижняя Марка«Вставить» Выберите кнопку «Выберите» в свою очередь, и используйте мышь, чтобы перетащить скопированный круг в правый нижний.
      4. Нажмите кнопку"Построить"Очистить знаки" в свою очередь.
        ПРИМЕЧАНИЕ: Вновь созданные области должны соответствовать каждому хорошо идеально и между фактическими личинок и его отражение на стороне колодца.
    8. Нажмите кнопку«Шкала рисования»,нарисуйте линию калибровки на экране (диагональный путь или параллель с боковой частью микроплиты), введите ее длину иустановите «единицу». Затем нажмите кнопку"Применить к группе".
    9. Установите порог обнаружения на 16-18, чтобы позволить обнаружение животных.
    10. Нажмите кнопку"Черное животное"в программном обеспечении.
    11. Выберите кнопку«Порог расстояния»и вввод «5» в программном обеспечении.
    12. Установите условия освещения.
      1. Нажмите кнопку«Параметры»Легкое вождение»Использует один из 3 методов запуска ниже«Расширенные стимулы»,чтобы установить условия освещения.
      2. Выберите кнопку"Край",затем установите темный период в 10 минут, а затем три цикла чередующихся 10 мин света и темных периодов.
    13. Сохраните протокол и выключите свет в комнате.
    14. Акклиматизировать личинки в системе в течение 10 минут и нажмите кнопку«Эксперимент»Выполнитев свою очередь, затем выберите папку, где сохраняются файлы эксперимента, и введите имя результата.
    15. Нажмите кнопку"Background""Начать"в свою очередь, чтобы начать тест.
    16. Нажмите кнопку"Эксперимент"Остановить", в свою очередь, чтобы остановить эксперимент в программном обеспечении, когда тест заканчивается.
      ПРИМЕЧАНИЕ: Система показывает данные, проверенные при остановке системы.
    17. Передача 6 скважин микроплиты (контрольная группа) обратно в свет инкубатор для других экспериментов.
    18. Передача 6 скважин микроплит (5 мкг/л и 50 мкг/л групп) в свою очередь, на платформу записи и повторить шаги от 5,2,4 до 5,2,17 на ординаторские.

6. Анализ данных

  1. Откройте файл электронной таблицы в результатах движения и угла наклона.
  2. Выберите три колонки расстояния(неподходящий, smldist, lardist) и сложить их.
    ПРИМЕЧАНИЕ: Данные inadist, smldist,и lardist означают различные расстояния, записанные системой в различных классах скорости (неактивных/малых/больших), соответственно.
  3. За каждые 10 минут светового периода суммируетрасстояние каждой скважины, вычисляет среднее расстояние 16 скважин и сравнивает данные трех групп под световыми стимулами.
  4. За каждые 10 минут светового периода суммировать угловое число каждого колодца в каждой продолжительности света от cl01 до cl08 в свою очередь, и сравнить данные трех групп под световыми стимулами.
    ПРИМЕЧАНИЕ: Данные столбцов от cl01 до cl08 означают разные номера угла пути, записанные системой в разных углах пути, соответственно.
  5. Откройте файл электронной таблицы в результатах социальной деятельности.
  6. Выберите конткт и контдур колонны, и на каждые 10 минут световой период суммирует социальные времена и их продолжительность для каждого колодца.
  7. Рассчитайте среднее социальное время и продолжительность одной группы в каждой продолжительности света и сравните данные трех групп под световыми стимулами.

Результаты

Здесь мы описываем протокол для изучения нейроповеденческих эффектов загрязнителей окружающей среды с использованием личинок зебры под световыми стимулами. Во введении определяются тесты на передвижение, угол наклона и социальную активность. Приведение микроплит ?...

Обсуждение

Эта работа обеспечивает подробный экспериментальный протокол для оценки нейротоксичности загрязняющих веществ окружающей среды с использованием личинок зебры. Зебрафиш проходит через этот процесс от эмбрионов до личинок в период экспозиции, что означает, что хороший уход за эмбрион...

Раскрытие информации

Авторам нечего раскрывать.

Благодарности

Авторы благодарны за финансовую поддержку со стороны Национального фонда естественных наук Китая (21876135 и 21876136), Национального крупного научно-технического проекта Китая (2017-X07502003-03, 2018-X07701001-22), Фонда МЧС-Шанхай Ключевая лаборатория охраны окружающей среды детей (CEH201807-5) и Шведский научно-исследовательский совет (No 639-2013-6913).

Материалы

NameCompanyCatalog NumberComments
48-well-microplateCorning3548Embyros housing
6-well-microplateCorning3471Embyros housing
BDE-47AccuStandard5436-43-1Pollutant
DMSOSigma67-68-5Cosolvent
MicroscopeOlympusSZX 16Observation instrument
PipetteEppendorf3120000267Transfer solution
ZebraboxViewpointZebraBoxBehavior instrument
ZebrafishShanghai FishBio Co., Ltd.TubingenZebrafish supplier
ZebraLabViewpointZebraLabBehavior software

Ссылки

  1. Sun, L., et al. Developmental neurotoxicity of organophosphate flame retardants in early life stages of Japanese medaka (Oryzias latipes). Environmental Toxicology and Chemistry. 35 (12), 2931-2940 (2016).
  2. Tian, L., et al. Neurotoxicity induced by zinc oxide nanoparticles: age-related differences and interaction. Scientific Reports. 5, 16117 (2015).
  3. Rauh, V. A., Margolis, A. E. Research review: environmental exposures, neurodevelopment, and child mental health-new paradigms for the study of brain and behavioral effects. Journal of Child Psychology and Psychiatry. 57 (7), 775-793 (2016).
  4. Ye, B. S., Leung, A. O. W., Wong, M. H. The association of environmental toxicants and autism spectrum disorders in children. Environmental Pollution. 227, 234-242 (2017).
  5. Schwarzenbach, R. P., Gschwend, P. M., Imboden, D. M. . Environmental Organic Chemistry. , (2016).
  6. Akortia, E., et al. A review of sources, levels, and toxicity of polybrominated diphenyl ethers (PBDEs) and their transformation and transport in various environmental compartments. Environmental Reviews. 24 (3), 253-273 (2016).
  7. Shaw, B. J., Liddle, C. C., Windeatt, K. M., Handy, R. D. A critical evaluation of the fish early-life stage toxicity test for engineered nanomaterials: experimental modifications and recommendations. Archives of Toxicology. 90 (9), 2077-2107 (2016).
  8. Landrigan, P. J., et al. Early environmental origins of neurodegenerative disease in later life. Environmental Health Perspectives. 113 (9), 1230-1233 (2005).
  9. Xu, T., Yin, D. The unlocking neurobehavioral effects of environmental endocrine disrupting chemicals. Current Opinion in Endocrine and Metabolic Research. 7, 9-13 (2019).
  10. Panula, P., et al. Modulatory neurotransmitter systems and behavior: towards zebrafish models of neurodegenerative diseases. Zebrafish. 3 (2), 235-247 (2006).
  11. Félix, L. M., Antunes, L. M., Coimbra, A. M., Valentim, A. M. Behavioral alterations of zebrafish larvae after early embryonic exposure to ketamine. Psychopharmacology. 234 (4), 549-558 (2017).
  12. Bailey, J. M., et al. Persistent behavioral effects following early life exposure to retinoic acid or valproic acid in zebrafish. Neurotoxicology. 52, 23-33 (2016).
  13. Richendrfer, H., Créton, R. Automated High-throughput Behavioral Analyses in Zebrafish Larvae. Journal of Visualized Experiments. (77), e50622 (2013).
  14. Best, J. D., Alderton, W. K. Zebrafish: An in vivo model for the study of neurological diseases. Neuropsychiatric Disease & Treatment. 4 (3), 567-576 (2008).
  15. Yuhei, N., et al. Zebrafish as a systems toxicology model for developmental neurotoxicity testing. Congenital Anomalies. 55 (1), 1-16 (2015).
  16. Wu, S., et al. TBBPA induces developmental toxicity, oxidative stress, and apoptosis in embryos and zebrafish larvae (Danio rerio). Environmental Toxicology. 31 (10), 1241-1249 (2016).
  17. Chakraborty, C., Sharma, A. R., Sharma, G., Lee, S. S. Zebrafish: A complete animal model to enumerate the nanoparticle toxicity. Journal of Nanobiotechnology. 14 (1), 65 (2016).
  18. Wehmas, L. C., et al. Comparative metal oxide nanoparticle toxicity using embryonic zebrafish. Toxicology Reports. 2, 702-715 (2015).
  19. Cavalieri, V., Spinelli, G. Environmental epigenetics in zebrafish. Epigenetics & Chromatin. 10 (1), 46 (2017).
  20. Zhang, B., et al. Effects of three different embryonic exposure modes of 2, 2?, 4, 4?-tetrabromodiphenyl ether on the path angle and social activity of zebrafish larvae. Chemosphere. 169, 542-549 (2017).
  21. Zhao, J., Xu, T., Yin, D. Q. Locomotor activity changes on zebrafish larvae with different 2, 2?, 4, 4?-tetrabromodiphenyl ether (PBDE-47) embryonic exposure modes. Chemosphere. 94, 53-61 (2014).
  22. Zhang, B., et al. Neurobehavioral effects of two metabolites of BDE-47 (6-OH-BDE-47 and 6-MeO-BDE-47) on zebrafish larvae. Chemosphere. 200, 30-35 (2018).
  23. Yang, X., et al. The chlorine contents and chain lengths influence the neurobehavioral effects of commercial chlorinated paraffins on zebrafish larvae. Journal of Hazardous Materials. 377, 172-178 (2019).
  24. Schmitt, C., McManus, M., Kumar, N., Awoyemi, O., Crago, J. Comparative analyses of the neurobehavioral, molecular, and enzymatic effects of organophosphates on embryo-larval zebrafish (Danio rerio). Neurotoxicology and Teratology. 73, 67-75 (2019).
  25. Li, X., Kong, H., Ji, X., Gao, Y., Jin, M. Zebrafish behavioral phenomics applied for phenotyping aquatic neurotoxicity induced by lead contaminants of environmentally relevant level. Chemosphere. 224, 445-454 (2019).
  26. Leuthold, D., Klüver, N., Altenburger, R., Busch, W. Can environmentally relevant neuroactive chemicals specifically be detected with the locomotor response test in zebrafish embryos?. Environmental Science & Technology. 53 (1), 482-493 (2018).
  27. Kinch, C. D., Ibhazehiebo, K., Jeong, J. H., Habibi, H. R., Kurrasch, D. M. Low-dose exposure to bisphenol A and replacement bisphenol S induces precocious hypothalamic neurogenesis in embryonic zebrafish. Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 112 (5), 1475-1480 (2015).
  28. Javed, I., et al. Inhibition of amyloid beta toxicity in zebrafish with a chaperone-gold nanoparticle dual strategy. Nature Communications. 10 (1), 1-14 (2019).
  29. Green, J., et al. Automated high-throughput neurophenotyping of zebrafish social behavior. Journal of Neuroscience Methods. 210 (2), 266-271 (2012).
  30. Tytell, E. D. The hydrodynamics of eel swimming II. Effect of swimming speed. Journal of Experimental Biology. 207 (19), 3265-3279 (2004).
  31. Westerfield, M. A guide for the laboratory use of zebrafish (Danio rerio). The Zebrafish Book. 4, (2000).
  32. Ying, L., Jiang, L., Bo, P., Yong, L. Teratogenic effects of embryonic exposure to pretilachlor on the larvae of zebrafish. Journal of Agro-Environment Science. 36 (3), 481-486 (2017).
  33. Macphail, R. C., et al. Locomotion in larval zebrafish: Influence of time of day, lighting and ethanol. Neurotoxicology. 30 (1), 52-58 (2009).
  34. Kais, B., et al. DMSO modifies the permeability of the zebrafish (Danio rerio) chorion-implications for the fish embryo test (FET). Aquatic Toxicology. 140, 229-238 (2013).
  35. Truong, L., Harper, S. L., Tanguay, R. L. . Drug Safety Evaluation. , 271-279 (2011).
  36. Peeters, B. W., Moeskops, M., Veenvliet, A. R. Color preference in Danio rerio: effects of age and anxiolytic treatments. Zebrafish. 13 (4), 330-334 (2016).
  37. Barba-Escobedo, P. A., Gould, G. G. Visual social preferences of lone zebrafish in a novel environment: strain and anxiolytic effects. Genes, Brain and Behavior. 11 (3), 366-373 (2012).
  38. Blaser, R., Penalosa, Y. Stimuli affecting zebrafish (Danio rerio) behavior in the light/dark preference test. Physiology & Behavior. 104 (5), 831-837 (2011).
  39. Blaser, R. E., Rosemberg, D. B. Measures of anxiety in zebrafish (Danio rerio): dissociation of black/white preference and novel tank test. PloS One. 7 (5), e36931 (2012).
  40. Weichert, F. G., Floeter, C., Artmann, A. S. M., Kammann, U. Assessing the ecotoxicity of potentially neurotoxic substances-Evaluation of a behavioural parameter in the embryogenesis of Danio rerio. Chemosphere. 186, 43-50 (2017).

Перепечатки и разрешения

Запросить разрешение на использование текста или рисунков этого JoVE статьи

Запросить разрешение

Смотреть дополнительные статьи

156

This article has been published

Video Coming Soon

JoVE Logo

Конфиденциальность

Условия эксплуатации

Политика

СВЯЖИТЕСЬ С НАМИ

РЕКОМЕНДОВАТЬ БИБЛИОТЕКЕ

НОВОСТИ JoVE

Исследования

Образование

АВТОРЫ

Библиотекарь

О JoVE

Авторские права © 2025 MyJoVE Corporation. Все права защищены