Для просмотра этого контента требуется подписка на Jove Войдите в систему или начните бесплатную пробную версию.
Method Article
Здесь мы представляем неинвазивный протокол электрокардиографии (ЭКГ), оптимизированный для ранних постнатальных мышей, который не требует применения анестезии.
Электрокардиография (ЭКГ) уже давно используется в качестве эффективного и надежного метода оценки сердечно-сосудистой (и сердечно-легочной) функции как в моделях болезней человека, так и животных. Индивидуальный пульс, ритм и регулярность, в сочетании с количественными параметрами, собранными из ЭКГ, служат для оценки целостности сердечной системы, а также комплексной физиологии сердечногоцикла. В этой статье содержится подробное описание методов и методов, используемых для выполнения неинвазивной ЭКГ на перинатальных и неонатальных щенков мыши уже в первый послеродовой день, не требуя использования анестезии. Этот протокол был разработан для непосредственного решения проблемы стандартизированного и повторяемого метода получения ЭКГ у новорожденных мышей. С точки зрения перевода, этот протокол оказывается полностью эффективным для характеристики врожденных сердечно-легочных дефектов, генерируемых с использованием трансгенных линий мыши, и особенно для анализа дефектов, вызывающих летальность в первые и в первые послеродовые дни. Этот протокол также направлен на непосредственное устранение пробела в научной литературе для характеристики и предоставления нормативных данных, связанных с созреванием ранней послеродовой сердечной системы. Этот метод не ограничивается конкретной послеродовой точкой времени, а скорее позволяет ЭКГ сбора данных в неонатальных щенков мыши от рождения до послеродового дня 10 (P10), окно, которое имеет решающее значение для моделирования заболеваний человека in vivo, с особым акцентом на врожденные заболевания сердца (ИГД).
Сердечная функция может быть измерена по-разному, наиболее распространенным из которых является использование электрокардиографии (ЭКГ) для анализа проводимости электрического тока через сердце, а также его общего сердечного цикла ифункции 1. Электрокардиография продолжает оставаться полезным диагностическим инструментом для выявления и характеристики сердечных аномалий как у человека, так и у животныхмоделей заболевания 1,2. Нерегулярности в показаниях электрокардиограммы могут быть обнаружены при аномальном развитии сердца (например, врожденных пороков сердца (ИБД)) и могут включать аритмии, проявляющиеся как изменения частоты сердечных сокращений (например, брадикардия) и ритма (например, «сердечные блоки»), наводящих на себя дефекты целостности и/или функции основного миокарда. Такие изменения могут предрасполагать пациентов к опасной для жизни сердечной дисфункции (например, застойной сердечной недостаточности и/или остановке сердца) иповышенной смертности 3,4. Учитывая высокие показатели смертности с тяжелой и необработанной ИКО, разработка стандартизированного и повторяемого метода сбора ЭКГ в этот ранний послеродовой период имеет решающее значение.
Хотя мы не первые, кто решает эту проблему, предыдущие методы сбора ЭКГ на детенышей мыши традиционно включали инвазивные процедуры (подкожная игла или проводные электроды) и/или использованиеанестезии 5,6,7. Преимущества проведения неинвазивного анализа ЭКГ включают минимизацию боли и отмену стресса на животное. В то время как экспериментатор должен по-прежнему быть осторожным о причинении щенка стресс, устройство предназначено, чтобы избежать общих стрессоров для того, чтобы произвести точные данные. В контексте оценки сердечной функции, введение анестезии для животных, которые могут иметь сердечно-легочные аномалии потенциально может маскировать или даже усугубить основные условия. Анестетики могут влиять на электрическую проводимости путем изменения деполяризации и/или реполяризации клеток. Наконец, применение анестезии может поставить новорожденного щенка на повышенный риск переохлаждения, что может еще больше запутать любую присущую патологию. Следующий протокол не вводит никаких анестезий, инвазивных процедур или выраженного дискомфорта для щенка. Как только установка оборудования завершена, установка устройства и сбор данных с участием животного могут быть завершены эффективно, после чего щенки могут быть возвращены их матери. Кроме того, эта система позволяет проводить повторные и/или серийные анализы, что идеально подходит для экспериментов, требующих анализа с течением времени, внедрения фармакологических методов лечения и т.д.
Следующий протокол соответствует стандартам Институционального комитета по уходу за животными и использованию Университета Новой Англии. Тщательное наблюдение за протоколом должно обеспечить удовлетворительные ЭКГ читает во всех исследованных новорожденных (n
1. Подготовка устройств
2. Подготовка животных
3. Настройка платформы мыши и электрода (приложение электрода)
Идеальная ЭКГ будет иметь четкий, заметный сигнал, который позволяет анализировать все волны в несколько различных временных рамок(рисунок 1). Лаборатория первоначально использовала специальное применение электромиографического аппарата для производства ЭКГ неудовл...
Точки данных, собранные в перинатальный день 1 мыши щенков немного ниже среднего ожидаемого значения для взрослых мышей (500-700 ударов в минуту). 8 Существует увеличение сердечного ритма, как мышь возрастов, который падает больше в соответствии с ожидаемыми значениями (Та?...
Авторы не сообщают о конфликте интересов.
Авторы признают щедрую поддержку со стороны Общества спасения крошечных сердец (KLT), Программы UNE COBRE (NIGMS грант номер P20GM103643; LAF), и программа стипендий SURE в Университете Новой Англии (VLB), а также техническая поддержка пациентов от Ashish More (iWorx, Dover, NH). Рисунок 3, рисунок 4 и рисунок S1 были созданы с помощью программного обеспечения Biorender.
Name | Company | Catalog Number | Comments |
LabScribe4 | iWorx | LabScribe4 | Software used to record ECG |
Neonatal Mouse ECG & Respiration System | iWorx | RS-NMECG : Neonatal Mouse ECG | ECG device |
Tensive Conductive Adhesive Gel | Parker Laboratories, Inc | 22-60 | Tac-gel used as conductive gel for ECG |
Запросить разрешение на использование текста или рисунков этого JoVE статьи
Запросить разрешениеThis article has been published
Video Coming Soon
Авторские права © 2025 MyJoVE Corporation. Все права защищены