Протокол гетеротопной трансплантации сердца свиней для доставки терапевтических средств к сердечному аллотрансплантату

Резюме

Мы представляем протокол использования нормотермической системы сангвинической перфузии ex vivo для доставки терапевтических средств ко всему сердечному аллотрансплантату в модели гетеротопной трансплантации сердца свиней.

Аннотация

Трансплантация сердца является золотым стандартом лечения терминальной стадии сердечной недостаточности. Тем не менее, он остается ограниченным количеством доступных донорских сердец и осложнений, таких как первичная дисфункция трансплантата и отторжение трансплантата. Недавнее клиническое использование перфузионного устройства ex vivo при трансплантации сердца открывает уникальную возможность для лечения сердечных аллотрансплантатов терапевтическими вмешательствами для улучшения функции и предотвращения вредных реакций реципиентов. Создание трансляционной модели крупного животного для терапевтической доставки ко всему аллотрансплантату имеет важное значение для тестирования новых терапевтических подходов в трансплантации сердца. Свиная гетеротопная модель трансплантации сердца в интраабдоминальном положении служит отличной моделью для оценки эффектов новых вмешательств и иммунопатологии отторжения трансплантата. Эта модель дополнительно обеспечивает долгосрочную выживаемость для свиньи, учитывая, что трансплантат не требуется для поддержания кровообращения реципиента. Целью этого протокола является обеспечение воспроизводимого и надежного подхода к достижению ex vivo доставки терапевтического средства ко всему сердечному аллотрансплантату до трансплантации и предоставление технических деталей для выполнения гетеротопной трансплантации выживаемого перфузированного сердца ex vivo .

Введение

Сердечная недостаточность - это состояние, которое затрагивает примерно 6 миллионов взрослых в Соединенных Штатах и, по прогнозам, увеличится до 8 миллионов взрослых к 2030 году¹. Трансплантация сердца является золотым стандартом лечения терминальной стадии сердечной недостаточности. Однако она не лишена своих ограничений и сложностей. Он остается ограниченным количеством доступных донорских сердец, первичной дисфункцией трансплантата, отторжением сердца и побочными эффектами длительной иммуносупрессии². Эти ограничения особенно важны для молодых реципиентов, которые могут испытывать недостаточность аллотрансплантата и н....

протокол

ПРИМЕЧАНИЕ: Отбираются две самки юкатанских свиней, одна из которых назначена донором сердечного трансплантата, а другая - реципиентом. Рекомендуются свиньи в возрасте 6-8 месяцев, весом около 30 кг и имеющие совместимые группы крови. Обзор протокола показан на рисунке 1. Содержание и процедуры лечения свиней выполняются в соответствии с руководящими принципами Комитета по уходу и использованию животных Медицинского центра Университета Дьюка.

1. Приготовление перфузионного устройства ex vivo

1. Подготовьте перфузионное устройство ex vivo и устройство сохранения ячеек к ....

Результаты

Эта группа успешно пережила 9 свиней в течение 5-35 дней после протокола, представленного здесь, в зависимости от дизайна исследования. Из 10 свиней, прошедших этот протокол, только 1 умерла преждевременно от хирургических осложнений, что дало 90% выживаемость. На фиг.2 показа.......

Обсуждение

Доставка терапевтических средств во время перфузии ex vivo при трансплантации сердца предлагает стратегию модификации аллотрансплантата и потенциального улучшения результатов трансплантации. Протокол, представленный здесь, включает в себя современное нормотермическое хранение ?.......

Материалы

Name	Company	Catalog Number	Comments
0 Looped Maxon suture	Covidien	GMM-341L	Used to close fascia of the laparotomy incision
0 Silk ties	Medtronic, Inc	S346
18 G Angiocath	BD	381144	Used to de-air the left ventricle of the donor heart after implantation
20 Fr LV vent	Medtronic, Inc	12002
2-0 Silk sutures	Ethicon, Inc.	SA11G
2-0 Silk ties	Ethicon, Inc.	SA65H
2-0 Vicryl suture	Ethicon, Inc.	J259H
24 Fr venous cannula	Medtronic, Inc	68124
3-0 Prolene sutures	Ethicon, Inc.	8522
4-0 Monocryl suture	Ethicon, Inc.	Y469G
4-0 Prolene sutures	Ethicon, Inc.	8521
Animal hair cutting clipper	Wahl	8786-452
Aortic clamp	V. Mueller	CH6201
Army Navy retractor	V. Mueller	SU3660
ATF 40, Cell saver disposable set	Fresenius Kabi	9108494	Cell saver device insert
Balfour retractor	V. Mueller	SU3042	Used as an abdominal wall retractor
C.A.T.S cell saver	Fresenius Kabi	ES0019	Cell saver device used to wash donor blood
Cardiac defibrillator	Zoll	M Series	Cardiac defibrillator
Castro needle holder	V. Mueller	CH8589
CG4 iStat cartridges	Abbott	03P85-25	POC testing
CG8 iStat cartridges	Abbott	03P88-25	POC testing
DeBakey forceps	V. Mueller	CH5902
Electrocautery disposable pencil	Covidien	E2450H
Gerald forceps	V. Mueller	NL1451
Hemotherm 400CE Dual Reservoir Cooler/Heater	Cincinnati Sub-Zero	86022	Heater cooler used to regulate perfusion temperature on the ex vivo perfusion device
iSTAT 1	Abbott	04P75-03	POC testing device
Kocher clamp	V. Mueller	SU2790
Large clip applier	Sklar	50-4300
Large clips	Teleflex	4200
Large soft pledgets	Covidien	8886867901
Medium clip applier	Sklar	50-4335
Medium clips	Teleflex	2200
Metzenbaum scissor	V. Mueller	CH2006-001
No. 10 scalpel blade	Swann-Mortan	301	Used for skin incision
No. 11 scalpel blade	Kiato Plus	18111	Used for vascular incision
OCS device with base	TransMedics, Inc.		Ex vivo perfusion device
OCS disposable	TransMedics, Inc.		Ex vivo perfusion device insert with perfusion kits
Pacing cable	Remington Medical	FL-601-97
Pediatric cardioplegia catheter (4Fr)	Medtronic, Inc	10218	Used to deliver cardioplegia to the donor aortic root
Pediatric Foley catheter	Teleflex	RSH170003080	Placed pre-op to decompress the recipient's bladder
Potts scissors	V. Mueller	CH13038
Pressure bag x2 (1,000 mL)	Novaplus	V4010H	Used to deliver cardioplegia at a set pressure
Satinsky clamp	V. Mueller	CH7305	Vascular clamp used for creating anastomoses between donor heart and recipient vessels
Scissors	Felco	FELCO 200A-50	Used to perform sternotomy
Small hard pledgets	Covidien	8886867701
Sternal retractor	V. Mueller	CH6950-007
Temporary cardiac pacing wires	Ethicon, Inc.	TPW32
Temporary dual chamber pacemaker	Medtronic, Inc	5388	Cardiac pacing device
Tourniquet kit	Medtronic, Inc	79005	Rummel tourniquets
Umbilical tape	Covidien	8886861903
Vessel loops	Covidien	31145686