Центральный венозный стеноз может вызвать как аортокавал свищ, или AVF, первичный отказ созревания, а также более поздний сбой в работе свищ. Этот метод использует модифицированную версию установленной модели MURine AVF, которая резюмирует клинический ход человеческого AVF и легко осваивается через несколько критических шагов. Перед началом процедуры, подтвердите отсутствие ответа на щепотку ноша в 9-11-недельный, C57-Black/6 мыши и поместите мышь в положение на спине в хирургической области.
Нанесите мазь на глаза животного и удалите мех с брюшной стороны шеи на нижнюю часть живота. Затем очистить и дезинфицировать хирургическое место с тремя последовательными 10%povidone-йод и 70%isopropanol скрабы, и место хирургической драпировки над животным. Для зажима и прокола воздействия сайта, поместите мышь под рассечение микроскопа и, используя стерильную технику и скальпель, сделать кожу глубокой, средней линии, брюшной разрез от нижней кромки печени до чуть выше лобка.
Прорезать мускулатуру ножницами, чтобы открыть брюшную полость, и вставить ретрактор в живот. Переместите кишечник в правую сторону и оберните их в пропитанную солевым раствором марлю. Перемести мочевой пузырь и семенные пузырьки на хвостовую сторону животного, и использовать держатель микроиглы, чтобы вскрыть мезентерию между прямой кишкой и ретроперитонеумом, чтобы обеспечить полный вид аорты и нижней полой вены, или IVC.
Затем используйте держатель микроиглы для вскрытия инфраренальной аорты и блока IVC en из боковой и спинной окружающих ретроперитонеальных тканей, чтобы перекрестно зажать ткани вместе, и вскрыть окружающие ткани, чтобы разоблачить место прокола аорты примерно на три четверти расстояния от левой почечной вены до бифуркации аорты. Для изоляции IVC, рассекает между инфраренальной IVC и аорты немедленно дистальной левой почечной вены и продлить рассечение дистально на полпути между левой почечной вены и аортальной бифуркации для послеоперационного инфракрасного наблюдения IVC. Сделайте окно, чтобы отделить IVC от аорты, и вскрыть IVC от окружающих тканей.
Затем осторожно поместите 8-0 полиамид монофиламентный шов под IVC и аорты, прежде чем потянув шов конца через окно, чтобы распозить шов под IVC только. Чтобы создать AVF, сначала согните 25-калибровочный иглу под углом от 45 до 60 градусов в четырех миллиметрах от кончика иглы и задавите инфраренную аорту и IVC микрохирургическим зажимом. Схватив соединительной ткани, окружающие бифуркации, поверните аорты medially и caudally подвергать прокол сайт аорты растягивается немного в вентральной стороне, и использовать 25-го калибра иглы прокола через аорту в IVC.
Когда ткань была проколота, отпустите аорту и подтяните с левой стороны аорты, чтобы покрыть место прокола окружающими тканями. Затем снимите иглу и осторожно нажмите на место прокола с помощью тампона с наконечником хлопка для гемостаз. Для создания стеноза IVC поместите кончик внутривенного катетера 22-го калибра продольно на IVC и свяйте катетер в IVC с 8-0 Шов.
Когда шов был помещен, удалить катетер и подтвердить первичный гемостаз перед unclamping аорты и IVC. Обложка прокола сайт еще на минуту, чтобы обеспечить гемостаз, и вернуть органы в брюшной полости, прежде чем закрыть живот с 6-0 швов. Затем поместите мышь в индивидуальную клетку без постельных принадлежностей на тепловом устройстве поддержки с мониторингом до полного выздоровления, и используйте УЗИ Доплера, чтобы подтвердить проходимость свищ.
На седьмой день после хирургической процедуры области свищ и стеноз IVC легко обнаруживаются в продольном виде. У мышей, несущих стеноз без AVF, сегмент стеноза демонстрирует венозную волновую форму с более спектральным расширением, чем фиктивные мыши, но без особой пульсатации. У мышей, имеющих AVF, а также стеноз, стеноз сегмент показывает пульсирующую волновую форму в дополнение к спектральному расширению, и усредняя по времени максимальная скорость потока при стенозе у мышей, имеющих AVF со стенозом значительно выше, чем у мышей со стенозом в одиночку.
Средний диаметр IVC при стенозе у мышей только со стенозом похож на тот, который наблюдается у мышей с AVF и стенозом. Кроме того, используя либо вверх по течению или вниз по течению сегмента в качестве эталона, процент стеноза значительно больше у мышей, имеющих AVF в дополнение к стенозу. Когда вы ligate IV катетер и IVC вместе, важно, чтобы связать их плотно, чтобы создать воспроизводимый стеноз.
Применение этой процедуры к модели имплантации венозной трансплантации мурина может ответить, как преодолеть окклюзию стеноза венозного трансплантата.
