流出狭窄を伴う大軌道瘻を用した中枢静脈狭窄のマウスモデル

中央静脈狭窄は、大所瘻、またはAVF、成熟の主要な失敗、ならびに作業瘻の後の失敗の両方を引き起こす可能性がある。この技術は、ヒトAVFの臨床コースを再現し、いくつかの重要なステップを経て簡単に習得される確立されたマウスAVFモデルの修正版を使用しています。処置を開始する前に、9〜11週齢のC57-Black/6マウスでつまみつまみへの応答の欠如を確認し、手術領域の上の位置にマウスを置きます。

動物の目に軟膏を塗布し、首の腹側から下腹部に毛皮を取り除きます。次に、3つのシーケンシャルな10%ポビドネヨウ素と70%イソプロパノールスクラブで外科部位を浄化し、消毒し、動物の上に外科用ドレープを置きます。クランプおよび穿刺部位の露出のために、マウスを解剖顕微鏡の下に置き、滅菌技術とメスを使用して、下の肝臓の端から陰部のすぐ上に皮膚深い、正中線の腹部切開を行う。

腹腔を開くためにはさみで筋肉を切り抜き、腹部にレトラクターを挿入します。腸を右側に移動し、生理後のガーゼで包みます。膀胱と精嚢を動物の尾側に移動し、マイクロニードルホルダーを使用して直腸と後腹膜の間の腸間を解剖して、大腸と下腹静脈、またはIVCの完全なビューを確保します。

その後、マイクロニードルホルダーを使用して、後腹膜組織を取り囲む側面および後部から腎大動脈およびIVCエンブロックを解剖し、組織をクロスクランプし、周囲の組織を解剖して左腎静脈から大動脈分岐までの距離の約4分の3で大動脈穿刺部位を露出させる。IVCの分離のために、腎IVCと大動脈の間の解剖は直ちに左腎静脈に遠位し、左腎静脈と術後の不フラレナルIVC観察のための大動脈分岐の中間まで遠位まで解剖を拡張する。大大間からIVCを分離する窓を作り、周囲の組織からIVCを解剖する。

その後、慎重に8-0を配置IVCと大オルタの下にあるポリアミドモノフィラメント縫合糸は、縫合端を窓から引っ張ってIVCの下のみに縫合部を配置する前に行う。AVFを作成するには、まず針先から45〜60度の角度に25ゲージの針を曲げ、尿素大波とIVCを微小外科クリップでクランプします。分岐を取り巻く結合組織をつかみ、大大通りを内側に回転させ、大器官の穿刺部位を腹側にわずかに伸ばして露出させ、25ゲージの針を使用して大器官を通してIVCに穿刺する。

組織が穿孔されたら、大大通を解放し、大通りの左側から引き上げて、穿刺部位を周囲の組織で覆う。次に針を取り出し、綿の先端の綿棒で穿刺部位を軽く押して止止めます。IVC狭窄の作成のために、22ゲージの静脈内カテーテルの先端をIVCに縦方向に置き、8-0でカテーテルをIVCにリゲートする縫合。

縫合糸が配置されたら、カテーテルを取り外し、大間およびIVCをクランプ解除する前に原発性止止めを確認する。穿刺部位をさらに1分間覆って止まりを確認し、臓器を腹腔に戻してから6-0縫合糸で腹部を閉じる。次に、完全に回復するまで監視する熱サポートデバイス上の個々の寝具のないケージにマウスを置き、ドップラー超音波を使用して瘻孔の開口を確認します。

手術後7日目に、IVCの瘻孔および狭窄領域が縦方向の視野で容易に検出される。AVFを持たない狭窄を有するマウスでは、狭窄セグメントは、シャム操作マウスよりもスペクトルが広がるが、あまり脈動性のない静脈波形を示す。狭窄と同様にAVFを有するマウスでは、狭窄セグメントは分光広げに加えて脈動波形を示し、狭窄を有するマウスの狭窄時の流れの時間平均最大速度は狭窄を有するマウス単独よりも有意に高い。

狭窄を有するマウス単独の狭窄における平均IVC直径は、AVFおよび狭窄を有するマウスで観察されたようなものである。さらに、上流または下流のセグメントのいずれかを基準として使用すると、狭窄の他にAVFを有するマウスにおいて、狭窄率が著しく大きい。IVカテーテルとIVCを一緒にリゲートする場合、再現性の狭窄を作り出すためにそれらをしっかりと結びつけることが重要です。

静脈移植モデルをマウスにこの手順の適用は静脈移植狭窄の閉塞を克服する方法に答えることができる。