Углерод-11 является одним из наиболее широко используемых радиоизотопов в позитронно-эмиссионной томографии из-за его изобилия в органических молекулах и короткого периода полуиссяка в 20 минут. В этом видео мы показываем эффективную технику радиозабелки углерода-11 с использованием картриджей для извлечения твердой фазы. По сравнению с обычными методами, методы на основе картриджа устраняет использование HPLC, сокращает время радиосинтеза, повышает надежность синтеза, упрощает процесс автоматизации и облегчает соблюдение хороших производственных практик, GMP.
Техника на основе картриджа продемонстрирована здесь, на радиосинтезе C11 PiB, ПЭТ-трассировщика, используемого для виво-изображения амилоидных бляшек в мозге пациентов, страдающих болезнью Альцгеймера. Недавно мы применили технику «три в одном» к радиосинтезу C11 ABP688, ПЭТ-трассировщику для визуализации метаботропных глутаматных рецепторов типа 5, а также других трассировщиков с маркировкой углерода-11. Смешайте 450 миллилитров 0,2-молярного раствора уксусной кислоты с 50 миллилитров 0,2-молярного раствора ацетата натрия для подготовки ацетатного буфера при рН 3,7 в качестве буферного.
Проверить рН буфера с рН полосы или рН метр. Затем смешайте 12,5 миллилитров абсолютного этанола с 87,5 миллилитров ацетатного буфера в 100-миллилитровой бутылке, чтобы сделать 12,5% раствор этанола в качестве мытья. Комбинат 15 миллилитров абсолютного этанола с 85 миллилитров ацетата буфера в 100-миллилитровую бутылку, чтобы сделать 15%aqueous этанола раствор, как мыть два.
Объедините пять миллилитров абсолютного этанола с пятью миллилитров буфера ацетата, чтобы сделать 50%aqueous этанола раствор в качестве окончательного элюента, и привлечь 2,5 миллилитров этого решения в 10-миллилитровый шприц. Для предварительного предварительного tC18 картридж, от женского конца, использовать шприц, чтобы пройти 10 миллилитров воды следуют пять миллилитров ацетона через картридж. Высушите картридж потоком азота по 50 миллилитров в минуту в течение одной минуты.
В трубке Эппендорфа растворяют два миллиграмма предшественника 6-OH-BTA-0 в одном миллилитров ацетона ангидроуса. Держа Люэр-наконечник, 250-микролитер, точный стеклянный шприц вниз, снять 100 микролитров раствора прекурсора, а затем 50 микролитров воздушной подушки. Снимите иглу и коснитесь шприца, чтобы убедиться, что воздушная подушка выше раствора в шприце.
Нанесите раствор-прекурсор на картридж tC18 из женского конца, медленно толкая поршень всю дорогу вниз. Не толкай воздух дальше. Защитите и соберите стандартный пяти порт одноразовый многообразие на модуле синтеза.
Порт один имеет две позиции. Подключите горизонтальный вход к автоматизированному дозатору, оснащенному 20-миллилитровый шприц. Подключите вертикальный вход к бутылке с мытьем.
Соедините выход модуля, который производит метиловый трифлат C11, чтобы портировать два из многообразия. Установите картридж tC18, загруженный предшественником 6-OH-BTA-0 между портами три и четыре. Порт пять имеет две позиции.
Подключите горизонтальную розетку к бутылке отходов и вертикальной розетке к стерильному флакону для сбора трассировщиков через стерильный фильтр. В горячей ячейке, защищенной свинцом, используйте тефлоновую линию для доставки метилового трифлата C11 в многообразный через порт два, и передать его через загруженный картридж tC18 на 20 миллилитров в минуту выходной поток. Модуль метилового трифлата C11 регулирует поток через порты три и четыре и в бутылку с отходами.
После того, как вся радиоактивность была передана и в ловушке в картридже tC18, как контролируется детектором радиоактивности, остановить поток газа, закрыв порт два. Пусть картридж сидеть в течение двух минут, чтобы завершить реакцию. Затем, через порт один, снять 19 миллилитров мыть один раствор из 100-миллилитровой бутылки в распределительный шприц на 100 миллилитров в минуту.
Разпредельте 18,5 миллилитров мытья один раствор из дозатора через картридж tC18 через порты три и четыре и в бутылку отходов на 50 миллилитров в минуту. Обеспечь отсутствие пузырьков воздуха в многообразии, так как они могут снизить эффективность разделения. Повторите снятие и распределение четыре раза с 18,5 миллилитров мытья один раствор каждый раз и общий объем 92,5 миллилитров, проходящих через tC18.
Переключите входную линию на порт один от мытья один мыть два. Повторите снятие и дозирование три раза с 18,5 миллилитров мыть два раствора каждый раз и общий объем 55,5 миллилитров, проходящих через tC18. Переключить клапан пять к окончательному флакону.
Отсоедините линию от дозатора и соедините ее с 10-миллилитровым шприцем, содержащим 2,5 миллилитров окончательного элюентного раствора и 7,5 миллилитров воздуха. Держа шприц вниз, вручную нажмите окончательный раствор элуента, а затем воздух через картридж tC18 через порты три и четыре и в стерильный флакон для сбора трассировщика через стерильный фильтр. Переключите шприц на тот, который содержит 10 миллилитров стерильного фосфатного буфера, и протолкнуть весь объем через картридж tC18 в стерильный флакон.
Отключите шприц и смойте линию 10 миллилитров воздуха с помощью того же шприца. Используя одноми миллилитровый шприц, изымайте образцы для процедур контроля качества пререлеазы, теста на бактериальный эндотоксин и теста на бесплодие. Для выполнения процедур предрелизного контроля качества сначала определите радиохимическую идентичность, радиохимическую чистоту, химическую чистоту и молярную активность трассировщика с помощью аналитической системы HPLC, оснащенной уф-детекторами радиоактивности и колонкой обратной фазы.
Определите время хранения 6-OH-BTA-0 и 6-OH-BTA-1 и откалибровайте прибор для количественной оценки содержания каждого соединения. Определить содержание остаточного растворителя с помощью аналитической газохроматографической системы, оснащенной капиллярной колонкой. Определите время хранения ацетона и этанола и откалибровайте прибор для количественной оценки содержания каждого растворителя.
Это исследование выполнило радиосинтез C11 PiB C11-метилированием 6-OH-BTA-0 прекурсора с метиловым трифлатом C11. Контроль качества аналитических HPLC C11 PiB показывает, радиохимической чистоты было 98%Время удержания 6-OH-BTA-0 предшественника и 6-OH-BTA-1 трассировщик пик на УФ хроматограммы были 3,6 и 5,9 минут, соответственно. Анализ УФ-следа показывает остаточную концентрацию прекурсоров ниже допустимого предела в 1,3 микрограмма при отсутствии других нерадиоактивных примесей.
Это указывает на то, что радиохимическая и химическая чистота трассировщика приемлема для клинических ПЭТ-исследований. Увеличение количества прекурсоров 6-OH-BTA-0 с 0,1 миллиграмма до 0,3 миллиграмма улучшило радиохимическую урожайность с 18,1% до 32,1% за счет чуть более высокого количества прекурсора в конечном продукте. Этот метод должен быть применим ко многим различным системам с подходящей разницей в полярности между прекурсором и радиозабрюшьемый продукт.
Все манипуляции с радиоактивными изотопами должны выполняться в горячей камере с свинцовой защитой персоналом, который имеет надлежащую подготовку для обработки радиоактивных материалов.
