Karbon-11, organik moleküllerdeki bolluğu ve 20 dakikalık kısa yarı ömrü nedeniyle pozitron emisyon tomografisinde en yaygın olarak kullanılan radyoizotoplardan biridir. Bu videoda, katı fazlı ekstraksiyon kartuşları kullanılarak etkili bir karbon-11 radyoetiketleme tekniği gösterilmektedir. Geleneksel yöntemlerle karşılaştırıldığında, kartuş tabanlı teknikler HPLC kullanımını geçersiz kılmaktadır, radyosentez süresini kısaltır, sentez güvenilirliğini artırır, otomasyon sürecini kolaylaştırır ve İyi Üretim Uygulamaları, GMP ile uyumluluğu kolaylaştırır.
Kartuş tabanlı teknik burada C11 PiB, Alzheimer hastalığı olan hastaların beyinlerinde amiloid plakların in vivo görüntüleme için kullanılan bir PET tracer radyosentezi gösterilmiştir. Son zamanlarda, metabotropik glutamat reseptörlerinin görüntülemesi için pet izleyicisi olan C11 ABP688'in radyosentezine üç-in-one tekniğini uyguladık. 450 mililitre asetik asit çözeltisini 50 mililitre 0,2-molar sodyum asetat çözeltisi ile birleştirerek pH 3.7'deki asetat tamponunu tampon olarak hazırlayın.
Arabelleğe ait pH'ı pH şeritleri veya pH ölçer ile doğrulayın. Daha sonra, 100 mililitrelik bir şişede 87,5 mililitre asetat tampon ile 12,5 mililitre mutlak etanol mililitre birleştirerek%12,5 sulu etanol çözeltisi yapın. 100 mililitrelik bir şişede 85 mililitre asetat tamponu ile 15 mililitre mutlak etanol birleştirerek %15 sulu etanol çözeltisini iki yıkama kayırken yapın.
Beş mililitre mutlak etanol ile beş mililitre asetat tamponu birleştirerek %50'lik sulu etanol çözeltisini nihai eluent olarak yapın ve bu çözeltinin 2,5 mililitresini 10 mililitrelik şırınganın içine çekin. TC18 kartuşu ön koşullandırmak için, dişi uçtan, 10 mililitre suyu geçmek için bir şırınga kullanın ve ardından beş mililitre aseton kartuştan geçirin. Bir dakika boyunca dakikada 50 mililitre azot akışı ile kartuş kuru.
Bir Eppendorf tüpünde, bir mililitre susuz aseton içinde öncül 6-OH-BTA-0'ın iki miligramını çözün. Luer-tip, 250 mikrolitre, hassas cam şırınga aşağı doğru tutarak, öncül çözelti100 mikrolitre ve daha sonra hava yastığı 50 mikrolitre çekin. İğneyi çıkarın ve hava yastığının şırıngadaki çözeltinin üzerinde olduğundan emin olmak için şırıngaya dokunun.
Öncül çözeltiyi dişi uçtan tC18 kartuşu na yavaşça aşağı iterek uygulayın. Havayı daha fazla itme. Sentez modülündeki standart beş portlu tek kullanımlık manifoldu sabitleyip monte edin.
Liman bir iki konuma sahiptir. Yatay girişi 20 mililitrelik şırınga ile donatılmış otomatik dağıtıcıya bağlayın. Dikey girişi yıkama ile şişeye bağlayın.
C11 metil triflate üreten modülün çıkışını manifoldun iki bağlantı noktasına bağlayın. Öncül 6-OH-BTA-0 ile yüklenen tC18 kartuşunu üç ve dört bağlantı noktaları arasında tC18'i takın. Beşinci limanın iki pozisyonu var.
Yatay prizi atık şişesine ve dikey prizi steril filtre ile izleme şişesine bağlayın. Kurşun korumalı sıcak hücrede, C11 metil triflate'i ikinci bağlantı noktasından manifolda teslim etmek için bir Teflon hattı kullanın ve dakikada 20 mililitre çıkış akışıyla yüklü tC18 kartuşu ile geçirin. C11 metil triflate modülü, üç ve dört bağlantı noktası üzerinden atık şişesine akışı düzenler.
Tüm radyoaktivite aktarıldıktan ve radyoaktivite dedektörü tarafından izlendiği gibi tC18 kartuşu içinde sıkışıp kaldıktan sonra, ikinci bağlantı noktasını kapatarak gaz akışını durdurun. Kartuşun reaksiyonu tamamlamak için iki dakika boyunca oturmasını bekleyin. Daha sonra, liman bir aracılığıyla, dakikada 100 mililitre de dispenser şırınga içine 100 mililitrelik şişe den 19 mililitre yıkama bir çözüm çekin.
Dağıtıcıdan 18,5 mililitre yıkama çözeltisini üç ve dört numaralı bağlantı noktalarından tC18 kartuşu ile ve dakikada 50 mililitre atık şişeye dağıtın. Ayırma verimliliğini azaltabileceğinden, manifoldda hava kabarcıklarının olmadığından emin olun. Her seferinde 18,5 mililitre yıkama çözeltisi ve tC18'den geçen toplam hacmi 92,5 mililitre ile çekme ve dağıtmayı dört kez tekrarlayın.
Birinci bağlantı noktasındaki giriş çizgisini bir yıkamadan iki yıkamaya çevirin. Her seferinde 18,5 mililitre yıkama iki çözeltisi ve tC18'den geçen toplam hacmi 55,5 mililitre ile çekme ve dağıtmayı üç kez tekrarlayın. Vanayı son şişeye doğru 5'e çevir.
Hattı dağıtıcıdan kesinolarak kesinlenin ve 2,5 mililitre son elüent çözeltisi ve 7,5 mililitre hava içeren 10 mililitrelik şırınga bağlayın. Şırıngayı aşağı doğru tutarak, son elüent çözeltisini ve ardından havayı tC18 kartuşu üzerinden üç ve dört bağlantı noktası üzerinden ve steril filtre ile izleme için steril şişeye doğru itin. Şırıngayı steril fosfat tamponunun 10 mililitresini içeren eteklere geçirin ve tC18 kartuşundan steril şişeye tüm hacmi itin.
Şırıngayı kesin ve aynı şırıngayı kullanarak hattı 10 mililitre havayla temizle. Bir mililitrelik şırınga kullanarak, serbest bırakma öncesi kalite kontrol prosedürleri, bakteriyel endotoksin testi ve sterilite testi için numuneleri geri çekin. Yayın öncesi kalite kontrol prosedürlerini gerçekleştirmek için, öncelikle izleyicinin radyokimyasal kimliğini, radyokimyasal saflığını, kimyasal saflığını ve azı lı aktivitesini UV radyoaktivite dedektörleri ve ters faz kolonu ile donatılmış analitik bir HPLC sistemi ile belirleyin.
6-OH-BTA-0 ve 6-OH-BTA-1'in bekletme sürelerini belirleyin ve her bileşiğin içeriğini ölçmek için cihazı kalibre edin. Kapiller kolon ile donatılmış analitik gaz kromatografi sistemi ile artık çözücü içeriğini belirleyin. Aseton ve etanoltutma sürelerini belirleyin ve her çözücünün içeriğini ölçmek için cihazı kalibre edin.
Bu çalışmada C11 PiB'nin C11-metilasyon ile C11-6-OH-BTA-0 öncülü C11 metil triflate ile radyosentezi yapılmıştır. C11 PiB'nin kalite kontrol analitik HPLC'si radyokimyasal saflığın %98 olduğunu gösterir 6-OH-BTA-0 öncülünün tutma süreleri ve UV kromatogramında 6-OH-BTA-1 izleyici pik sırasıyla 3.6 ve 5.9 dakika idi. UV izanalizi diğer radyoaktif olmayan yabancı maddelerin yokluğunda 1.3 mikrogram kabul edilebilir sınırın altında kalıntı öncül konsantrasyongösterir.
Bu, izleyicinin radyokimyasal ve kimyasal saflığının klinik PET çalışmaları için kabul edilebilir olduğunu gösterir. 6-OH-BTA-0 öncül miktarının 0,1 miligramdan 0,3 miligrama çıkarılması, radyokimyasal verimi nihai üründeki öncül miktarı biraz daha yüksek bir miktar pahasına %18,1'den %32,1'e yükseltti. Bu teknik öncül ve radyoetiketli ürün arasında polarite uygun bir fark ile birçok farklı sistemler için geçerli olmalıdır.
Radyoaktif izotopları içeren tüm manipülasyonlar, radyoaktif maddeleri işlemek için yeterli eğitime sahip personel tarafından kurşun korumalı sıcak hücrede yapılmalıdır.
