Общая цель нынешнего исследования состоит в том, чтобы представить методы индукции инфаркта миокарда и постмиокарда инфаркта индуцированной сердечной недостаточности в закрытой груди взрослых Gottingen minipigs. Мы также стремимся охарактеризовать пост-миокарда инфаркта индуцированной сердечной недостаточности модели в minipigs и Landrace свиней. Во-первых, для оценки функции миокарда и морфологии в начале исследования, базовая сердечно-магнитно-резонансная томография выполняется за день до индукции инфаркта миокарда.
Затем инфаркт миокарда индуцируется интралюминальным окклюзией левой передней нисходящей коронарной артерии. После дефляции воздушного шара индуцируется реперфузия миокарда, а межкоронная медикаментозная терапия, в данном случае, текал, вводится с помощью микрокатер. В результате инфаркта миокарда у свиней разовьется сердечная недостаточность.
Хронические морфо-функциональные последствия острого инфаркта миокарда оцениваются с помощью сердечной магнитно-резонансной томографии в течение трех и шести месяцев в Готтингенских минипигах и в течение двух месяцев у свиней Landrace. Свиньи Landrace прекращаются после двух месяцев и Gottingen minipigs после восьми месяцев reperfusion. Клинический исход постмиокарда инфаркта индуцированной сердечной недостаточности может быть дополнительно улучшен путем разработки новых кардиопротекторных методов лечения.
Такие кардиопротекторные методы лечения, эффективные в доклинических моделях животных, не смогли в клиническом переводе до сих пор по нескольким причинам. Бывшая венгерская группа, вместе с академическими и другими партнерами, предоставляет широкий спектр инновационных доклинических научно-исследовательских и опытно-исследовательских услуг, ориентированных на новые лекарства и медицинские устройства для сердечно-сосудистых заболеваний, например инфаркта миокарда и сердечной недостаточности. Кроме того, мы разрабатываем несколько кардиопротекторных технологий в доме.
Так что провал клинического развития кардиозащитной терапии можно объяснить хотя бы отчасти низкой трансляционной ценностью моделей инфаркта миокарда у мелких животных. Для успешного развития кардиозащитной терапии необходимы крупные модели животных с хорошей трансляционной ценностью. В отличие от клинических испытаний кардиозащитных методов лечения у грызунов и свиней Landrace, наиболее важным, как большая модель животных, сердечный функциональный результат может быть оценена до одного-двух месяцев у этих животных.
Использование других минипигов позволяет нам реализовывать более длительные, полные периоды до нескольких месяцев, которые лучше отражают клиническую ситуацию. После анестезии и измерения массы тела для оценки базовой морфологии сердца проводится сердечно-резонансная томография, такая как размеры камер и стенок и сердечная функция, такие как фракция выброса и сердечный выброс. Индуцировать анестезию животных с кетамином гидрохлоридом ксилазина в качестве внутримышечной инъекции в область шеи.
Используйте канюлю E-vein для замены пищевых продуктов и введения препарата для профилактики или лечения желудочковой аритмии. Когда операционная будет подготовлена, поместите животное на операционный стол. Зафиксируйте конечности и нанесите клинья, чтобы обездвижить животное в положении лежа.
Дезинфицировать хирургическое отделение йодом повидоне. Хирургическое место в этом случае вокруг кожи между gracilis и sartorius мышцы. Удалите волосы на хирургическом участке с помощью бритвы.
Поместите поверхностные электроды ЭКГ в треугольник Эйнтховена. Установите анестезиологию и запустите вентиляцию с положительным давлением. Изолировать дезинфицированную хирургическую область хирургической драпировкой.
Подойдите к бедренной области и сделайте продольный разрез на коже между мышцами грацилиса и сарториуса. Рассекают подкожные ткани и фасции. Изолировать бедренную артерию.
Положите два хирургических шва ниже бедренной артерии, чтобы контролировать кровоизлияние. Прокол бедренной артерии. Cannulate бедренной артерии с использованием техники Seldinger.
Зафиксите оболочку на коже. Используйте артерию для отбора проб крови для дальнейшего биохимического анализа. Администрирование 5000 МЕ гепарин через бедренную оболочку для обеспечения адекватной антикоагуляции и предотвращения тромбоза во время хирургического вмешательства.
Прикрепите датчик давления к бедренной сосуду для мониторинга артериального кровяного давления на протяжении всего хирургического вмешательства. Для калибровки давления поместите систему записи давления на уровень сердца каждого животного. После удаления пузырьков воздуха калибровка с нулевым давлением выполняется, когда трехготовный стопкок открыт для направления свободного воздуха.
После репарации животного инфаркт миокарда индуцируется внутрисветовой окклюзией левой передней нисходящей коронарной артерии через бедренную оболочку, вводит и заранее направляет провод к аортальной арке и вводит направляющий катетер над направляющим проводом. После позиционирования флюороскопа в антеропостерном положении убедитесь, что в катетере нет тромба или воздушного пузыря, с устремлением не менее пяти миллилитров крови, объемом катетера, шприцем, подключенным к катетеру. Подключите другую часть катетера к шприцу, наполненному радиоконтратным агентом.
Позаботьтесь о том, чтобы шприц был повышен, чтобы предотвратить вливание пузырьков воздуха в коронарную артерию. Выполняем базовую ангиографию путем селективного заполнения правой и левой коронарных артерий контрастным агентом. Выполните BARI скоринга после базовой ангиографии, которая, наконец, позволяет оценить процент миокарда мышцы в опасности.
Вставьте перкутанную транслюминесцентную коронарную ангиопластику направляющей проволоки через направляющий катетер. Распоистить его distally к запланированной площадке окклюзии. Проверьте положение провода гида PTCA по ангиографии.
Определите по визуальной оценке оптимальный размер шара на основе диаметра коронарной артерии. Поместите воздушный шар катетер над ptCA направляющий провод и заранее его в запланированное положение. Проверьте положение катетера воздушного шара с помощью ангиографии.
Надуть воздушный шар и подтвердить полное окклюзии, визуализируя остановку контрастного потока. Ленточных инструментов для хирургической драпировки, чтобы избежать вывиха внутрикоронного шара. Запись и документ ЭКГ знак окклюзии по высоте ST.
Обложка животное с нагревательное устройство для поддержания температуры ядра. В случае желудочковой аритмии следуйте протоколу, как описано в тексте. Проверяйте давление воздушного шара каждые 30 минут в течение двух часов коронарной окклюзии.
При снижении давления на воздушном шаре более чем на 0,5 бар установите его обратно к первоначальным значениям. Выполните контрольную ангиографию незадолго до окончания коронарной окклюзии, чтобы проверить сохраненное размещение воздушного шара и отсутствие потока в месте окклюзии. Администрирование 2, 500 МЕ гепарин и один грамм сульфата магния внутрикоронно, как медленный болус для предотвращения тромбоза и аритмии.
Инициировать reperfusion с шаром дефляции. Удалите спущенный воздушный шар. Подтвердите успех полной реперфузии с коронарной ангиографией, чтобы продемонстрировать кровоток в дистальной части коронарного сосуда.
Подготовка к внутрикороновому администрированию препарата после начала миокарда. Чтобы предотвратить эмболизацию коронарной артерии, заполните терапевтический микрокатетер перфузии солевым раствором. Поместите микрокатетер на направляющий провод PTCA.
Заранее и подтвердить положение микрокатер. Кончик микрокатетера следует помещать на уровень окклюзии. Удалите направляющий провод PTCA.
Соедините микрокатетер с перфузионизной насосом. Инициировать межкоронное управление. После введения препарата удалите микрокатетер и выполните контрольную ангиографию, чтобы исключить, что вмешательство привело к эмболии воздуха или коронарного вскрытия.
Удалите артериальную оболочку и привяжуте бедренную артерию проксимальной к месту прокола. Закройте рану с помощью непрерывных швов. Нанесите антисептическое покрытие.
Прекратите анестезию через вывод изофлюрана. Хронические морфо-функциональные последствия острого инфаркта миокарда оцениваются с помощью МРТ сердца в три и шесть месяцев в Готтингенских минипигах и два месяца у свиней Landrace. Коэффициент смертности между двумя породами существенно не отличался.
Размеры сердечных шрамов и баллы BARI были сопоставимы между двумя породами. Левый желудочковый конец диастолических масс на базовом уровне и в течение последующего периода различаются между двумя породами. LVED масса в Gottingen minipigs увеличилась лишь умеренно на шесть месяцев.
В отличие от этого, в Landrace свиней, LVED масса увеличилась почти на 100% в течение двух месяцев. Инфаркт миокарда привел к значительному снижению фракции выброса в минипигам в течение трех месяцев и шести месяцев. Однако у свиней Landrace фракция выброса не изменилась через два месяца.
Различия между двумя породами в отношении фракции выброса можно объяснить интенсивными темпами роста сердца у свиней Landrace, и, таким образом, изменили сердечной реконструкции. Увеличение массы сердца сопровождалось почти 100%-м увеличением массы тела у свиней Landrace в течение двух месяцев. В то время как в Готтинген minipigs, увеличение массы тела было только 8%после трех месяцев и 30% после шести месяцев.
Для дальнейшего изучения признаков сердечной недостаточности мы провели измерения объема левого предсердия, проиндексированого на площадь поверхности тела. LAVi увеличилось на 34% в Готтинген minipigs после шести месяцев, но не изменилось значительно в Landrace свиней после двух месяцев. Наличие или отсутствие отеков легких оценивалось сердечной МРТ на снимках локализатора.
Отек легких наблюдался у обеих пород в результате декомпенсации сердца. В Готтингене индекс сердца не показывает существенных изменений в измеренных точках времени. В то время как в Landrace свиней, сердечный индекс увеличился почти значительно.
Инфаркт миокарда не только повлиял на функцию левого желудочка, но и привел к значительному увеличению фракции выброса правого желудочка в обоих штаммах. Мы показали, что идеальная модель Gottingen minipig имитирует функциональные и морфологические параметры инфаркта миокарда, сопоставимые с людьми. Это осуществимая, продукуемая и переводческая модель для оценки эффективности лечения как острого, так и хронического инфаркта миокарда и их последствий.
Мы также показали метод доставки местных лекарств коронарным с использованием микрокатеттеров. Всеобъемлющая характеристика моделей инфаркта с закрытыми грудными клетками в Landrace и minipigs будет полезна для выбора наиболее подходящих крупных моделей животных для разработки новых методов лечения постинфаркционной сердечной недостаточности.
