현재 연구의 전반적인 목표는 폐쇄 가슴 성인 고팅겐 미니피그에서 심근 경색 및 심근 경색 유도 심부전유도 기술을 제시하는 것입니다. 우리는 또한 미니피그와 랜드 레이스 돼지에서 심근 경색 유도 심부전 모델을 특성화하는 것을 목표로합니다. 먼저 연구 시작 시 심근 기능 및 형태학을 평가하기 위해, 기준선 심장 자기 공명 화상 진찰은 심근 경색의 유도 의 앞에 하루 수행됩니다.
그런 다음 심근 경색은 좌측 전방 관상 동맥의 내루마 폐쇄에 의해 유도된다. 풍선 디플레이션 후, 심근의 재관류가 유도되고, 간 내측 약물 요법이, 이 경우, 마이크로카테터를 사용하여 투여된다. 심근 경색의 결과로 돼지는 심부전을 일으킬 것입니다.
급성 심근 경색의 만성 모포 기능적 결과는 고팅겐 미니피그에서 3 개월 과 6 개월에서 심장 자기 공명 영상과 랜드 레이스 돼지에서 2 개월에서 평가됩니다. 랜드레이스 돼지는 2개월 후 종료되고 8개월간의 레퍼퓨전 끝에 고팅겐 미니피그를 제거한다. 심근 경색 유도 된 심부전의 임상 결과는 새로운 심장 보호 치료의 발달에 의해 더 향상 될 수 있습니다.
전임상 동물 모델에서 효과적인 이러한 심장 보호 치료는 여러 가지 이유로 지금까지 임상 번역에 실패했습니다. 전 헝가리 그룹은 학술 및 기타 파트너와 함께 심혈관 질환(예: 심근 경색 및 심부전)을 위한 새로운 약물 및 의료 기기에 초점을 맞춘 광범위한 혁신적인 전임상 연구 및 개발 서비스를 제공합니다. 또한, 우리는 사내에서 여러 심장 보호 기술을 개발하고 있습니다.
따라서 심장 보호 치료의 임상 개발실패는 적어도 부분적으로는 작은 동물의 심근 경색 모델의 낮은 번역 값으로 인해 기인 할 수 있습니다. 좋은 번역 가치를 가진 대형 동물 모델은 심장 보호 치료의 성공적인 발달을 위해 필수적입니다. 설치류와 Landrace 돼지에서 심장 보호 치료의 임상 시험과는 달리, 큰 동물 모델로 가장 가치, 심장 기능 결과는이 동물에서 1 ~ 2 개월까지 평가 될 수있다.
다른 미니피그를 사용하면 임상 상황을 더 잘 반영하는 더 길고 더 풍성한 기간을 몇 달까지 구현할 수 있습니다. 마취 및 체중 측정 후, 심각 공명 화상 진찰은 방출 분획 및 심장 출력과 같은 챔버 및 벽 치수 및 심장 기능과 같은 기준선 심장 형태의 평가를 위해 수행됩니다. 케타민 염산염 자일라진을 목 부위에 근육 주사로 사용하여 동물의 마취를 유도한다.
심실 부정맥을 방지하거나 치료하기 위해 식품 대체 및 약물 투여에 E-정맥 캐뉼라를 사용하십시오. 수술실이 준비되면 동물을 수술대에 놓습니다. 사지를 고정하고 쐐기를 적용하여 동물을 척추 위치에 고정시하십시오.
포비도네 요오드로 수술 부위를 소독하십시오. 이 경우 수술 부위는 그라실리스와 사르토리우스 근육 사이의 피부 접이식 주위에 있습니다. 면도기와 수술 부위에서 머리카락을 제거합니다.
아인토벤의 삼각형에 표면 심전도 전극을 배치합니다. 마취 기계를 설정하고 양압 환기를 시작합니다. 감염된 수술 부위를 수술 커튼으로 분리합니다.
대퇴한 부위에 접근하여 그레이실리스와 사르토리우스 근육 사이의 피부에 세로 절개를 합니다. 피하 조직과 근막을 해부합니다. 대퇴동맥을 분리한다.
출혈을 제어하기 위해 대퇴 동맥 아래에 두 개의 수술 봉합사를 넣습니다. 대퇴동맥에 구멍을 뚫는다. 셀딩거 기술을 사용하여 대퇴동맥을 수거한다.
피부에 칼집을 고정합니다. 추가 생화확적인 분석을 위해 혈액 샘플링을 위해 동맥을 사용합니다. 적절한 항응고를 확보하고 외과 적 개입 중에 혈전증을 예방하기 위해 대퇴 술을 통해 5, 000 IU 헤파린을 투여하십시오.
대퇴골 용기에 압력 센서를 부착하여 외과 적 개입 전반에 걸쳐 동맥 혈압을 모니터링하십시오. 압력 보정을 위해 압력 기록 시스템을 각 동물의 심장 수준에 배치합니다. 기포를 제거한 후, 3방향 스톱콕이 자유 공기 방향으로 열려 있을 때 제로 압력 교정이 수행됩니다.
동물의 배상 후, 심근 경색은 대퇴 칼집을 통해 좌측 전방 동맥내림의 폐색에 의해 유도되고, 대동맥 아치로 가이드 와이어를 소개하고 안내선을 통해 안내카테터를 소개한다. 전방 위치에 불소 경전을 배치 한 후, 카테터 내에서 혈전이나 기포가 없는지 확인, 혈액의 적어도 5 밀리리터의 포부와 함께, 카테터의 부피, 카테터에 연결된 주사기. 카테터의 다른 부분을 방사선 작용제로 채워진 주사기에 연결합니다.
관상 동맥에 기포의 주입을 방지하기 위해 주사기가 높은 개최되는 것을주의하십시오. 조영제로 오른쪽 및 왼쪽 관상 동맥을 선택적으로 채우면 기준선 혈관조영술을 수행합니다. 최종적으로 위험에 심근 근육의 비율의 추정을 허용하는 기준선 혈관 조영술 후에 BARI 점수를 수행합니다.
경피성 관상 동맥 혈관 성형술 가이드 와이어를 안내 카테터를 통해 삽입합니다. 폐색의 계획된 사이트에 분산배치한다. 혈관 조영술에 의해 PTCA 가이드 와이어의 위치를 확인합니다.
관상 동맥 직경을 기준으로 최적의 풍선 크기를 시각적 으로 추정하여 결정합니다. 풍선 카테터를 PTCA 가이드 와이어 위에 놓고 계획된 위치로 진행합니다. 혈관 조영술에 의해 풍선 카테터의 위치를 확인합니다.
풍선을 팽창시키고 콘트라스트 흐름의 정지를 시각화하여 총 폐색을 확인합니다. 관상 동맥 풍선의 탈구를 피하기 위해 수술 드레이프에 테이프 악기. ST 고도에 의한 폐색의 심전도 기호를 기록하고 문서화합니다.
코어 온도를 유지하기 위해 가열 장치로 동물을 덮습니다. 심실 부정맥의 경우 텍스트에 설명된 대로 프로토콜을 따릅니다. 관상 동맥 폐색 2 시간 동안 30 분마다 풍선 압력을 확인하십시오.
풍선 압력에서 0.5 바 이상 감소하는 경우 초기 값으로 다시 설정합니다. 관상 동맥 폐색이 끝나기 직전에 제어 혈관 조영술을 수행하여 유지 된 풍선 배치 및 폐색 부위로의 흐름 부재를 확인합니다. 혈전증과 부정맥을 방지하기 위해 느린 볼루스로 2, 500 IU 헤파린과 1 그램 황산 마그네슘을 관리하십시오.
풍선 디플레이션으로 재퍼퓨전을 시작합니다. 수축된 풍선을 제거합니다. 관상 동맥 혈관 조영술과 완전한 재관류의 성공을 확인관상 혈관의 황량한 부분에서 혈류를 입증합니다.
심근 재관전개시 후 내측 약물 투여를 준비한다. 관상 동맥 색전화를 방지하기 위해 치료 관류 미생물을 식염수로 채웁니다. PTCA 가이드 와이어 위에 마이크로카테터를 놓습니다.
마이크로카테터의 위치를 미리 확인하고 확인하십시오. 마이크로 카테터의 끝은 폐색의 수준에 배치되어야한다. PTCA 가이드 와이어를 제거합니다.
마이크로카테터를 관류 펌프와 연결합니다. 인터코로나동맥 관리를 시작합니다. 약물 투여 후, 마이크로 카테터를 제거하고 제어 혈관 조영술을 수행하여 공기 색전증 또는 관상 동맥 해부로 이어진 개입을 배제하십시오.
동맥 칼집을 제거하고 대퇴 동맥 근위를 펑크 부위에 묶습니다. 연속 봉합사를 사용하여 상처를 닫습니다. 방부제 코팅을 적용합니다.
이소플루란의 철수를 통해 마취를 종료합니다. 급성 심근 경색의 만성 모포 기능적 결과는 고팅겐 미니피그에서 3 개월 6 개월 및 Landrace 돼지에서 2 개월에서 심장 MRI에 의해 평가됩니다. 사망률은 두 품종 사이에 크게 다르지 않았다.
심장 흉터 크기와 BARI 점수는 두 품종과 비슷했습니다. 좌심실 끝 확장기 질량기준선및 후속 기간 동안 두 품종 마다 다릅니다. 고팅겐 미니피그의 LVED 질량은 6개월 만에 적당히 증가했습니다.
반면, 랜드레이스 돼지의 경우 LVED 질량은 2개월 만에 거의 100% 증가했습니다. 심근 경색으로 인해 3개월 6개월 동안 미니피그에서 배출 분획이 현저히 감소했습니다. 그러나, 랜드 레이스 돼지에서, 배출 분수는 두 달 후 변경되지 않았다.
배출 분획에 관한 두 품종 간의 차이는 Landrace 돼지의 집중적인 심장 성장 속도에 기인할 수 있으며, 따라서 심장 리모델링을 변경합니다. 심장 체중 증가는 2 개월에 Landrace 돼지에 있는 체중에 있는 거의 100% 증가를 동반했습니다. 고팅겐 미니피그에서 반면, 체중 증가는 3 개월 후 8 %와 6 개월 후 30 %에 불과했습니다.
심부전의 징후를 더 조사하기 위해, 우리는 신체 표면적으로 인덱싱 된 왼쪽 심방 부피의 측정을 수행했습니다. LAVi는 6개월 후 고팅겐 미니피그에서 34% 증가했지만 2개월 후 랜드레이스 돼지에서는 크게 변하지 않았습니다. 폐 부종의 존재 또는 부재는 국소화 심상에 심장 MRI에 의해 평가되었다.
폐 부종은 심장 보상의 결과로 두 품종에서 관찰되었다. 고팅겐 미니피그에서 심장 지수는 측정된 시점에서 큰 변화를 보이지 않았습니다. 랜드 레이스 돼지에서 반면, 심장 지수는 거의 크게 증가했다.
심근 경색은 좌심실 기능뿐만 아니라 두 균주에서 우심 실 방출 분획의 상당한 증가를 초래했습니다. 우리는 이상적인 Gottingen 미니 돼지 모델이 인간에 필적하는 기능적 및 형태학적 후 심근 경색 심부전 파라미터를 모방한다는 것을 보여주었습니다. 이것은 급성 및 만성 심근 경색 및 그 결과의 처리의 효험을 평가하기 위하여 실현 가능하고, 추론할 수 있고, 번역모형입니다.
우리는 또한 마이크로 카테터를 사용하여 관상 동맥에 국소 약물 전달방법을 보여주었습니다. Landrace 및 minipigs의 폐쇄 된 가슴 경색 모델의 포괄적 인 특성은 경색 후 심부전을위한 새로운 치료법을 개발하기 위해 가장 적합한 대형 동물 모델을 선택하는 데 유용할 것입니다.
