Целью метода является оценка функциональных последствий инженерии имплантации тканей сердца в небольшой модели криоинфаркции животных. Преимущество этого метода заключается в том, что он позволяет индукции относительно воспроизводимых инфарктов миокарда со стабильными размерами инфаркта. После подтверждения отсутствия реакции на щепотку нося, поместите анестезированую морскую свинку на 40-42 градусов по Цельсию потепление платформы в положении на спине.
Нанесите мазь глаза и побрить и депилировать грудную клетку. Нанесите 25 градусов по Цельсию ультразвуковой преобразователь гель для открытой кожи и поместите преобразователя из системы эхокардиографии на грудную клетку, чтобы приобрести двумерные парастральные длинные виды оси в режиме B от правой шеи к левой ноге в плоскости аортального клапана с одновременной визуализацией верхней части левого желудочка для исследования предисторической функции левого желудочка. Затем поверните предуц на 90 градусов, чтобы получить вид режима короткой оси B на среднем уровне сосоляра.
После получения последнего изображения перенесите морскую свинку на хирургический стол и заклеймить конечности в положении орла. Дезинфицировать открытые кожи с двумя последовательными йода основе и 80% этанола скрабы и сделать 1,5 сантиметра вертикального разреза в области трахеи. Тупо вскрыть мышцы, покрывающие трахею.
Когда трахея может наблюдаться, проколоть воздушную трубку с 18 калибровочных IV канюли и вставить гибкую часть канюли в качестве трахеи трубки. Соедините трахеалистную трубку с дыхательным аппаратом животного для непрерывной вентиляции во время процедуры и подсчитайте пространство ребра, начиная с первого межреберного пространства, чтобы найти пятое межреберное пространство. Сделайте двухсантиметровый горизонтальный разрез на пятом межреберном пространстве на левой стороне морской свинки и удалите подкожные ткани, прежде чем вскрыть мышцы электрокотетерией до тех пор, пока межреберные мышцы не будут достигнуты.
Аккуратно вскрыть межреберные мышцы пинцетом и маленькими ножницами до тех пор, пока плевральное пространство не будет достигнуто и левое легкое не будет визуализировано. Вставьте ретрактор между ребрами и откройте ретрактор тщательно, пока хороший вид на сердце не будет получен. Откройте перикард примерно на один сантиметр в области передней левой желудочковой стенки и поместите компресс на левое легкое, чтобы защитить легкое от повреждений при индуцировании криоинджурия левого желудочка.
Затем в течение трех минут охладить кончик эрозионного металлического штампа с поперечным диаметром 0,5 сантиметра жидкого азота, прежде чем нажимать зонд на левую переднюю стенку сердца в течение 30 секунд. Затем поместите 200 градусов по Цельсию электрического припоя железа внутри марки, чтобы согреть печать, так что металл может быть удален из ткани. После третьего применения штампа, удалить ретрактор из межреберного пространства и зажимают трубку оттока вентилятора в течение двух секунд, чтобы надуть легкие с максимальным давлением, чтобы избежать ателектаза легких.
Затем закройте ребра двумя 4-0 швами, мышцы над ребрами с 5-0 работает шов и кожи с 5-0 швов одного стежка. После удаления трахеи трубки, использовать один 8-0 шв, чтобы закрыть место прокола на трахее и закрыть рану тремя одиночными швами 5-0 швов. Через семь дней после криоинджурии, удалить швы и сделать два сантиметра горизонтального разреза кожи в рубцовой области левой боковой стороны и использовать электрокаутерию, чтобы аккуратно вскрыть дополнительные плевральные спайки.
Аккуратно откройте плевральное пространство ножницами и вставьте реберный распределитель, чтобы разоблачить сердце. Визуально определить область инфаркта по его бледный цвет по сравнению со здоровым окружающим миокарда и место инженерии ткани сердца патч над областью инфаркта. Безопасный патч с двумя 8-0 швы с обеих сторон в неинфарктной области сердца и надуть легкие с давлением, чтобы избежать atelectasis легких.
Затем удалите ретрактор из межреберного пространства и закройте животное, как это было продемонстрировано. Через четыре недели после инженерии имплантации сердечной ткани, выполнить трансторакальной эхокардиографии, как попродемонстрировано для оценки изменений в функции левого желудочка сверхурочно. Мейсон трихромное окрашивание через четыре недели после криоинджурии показывает большие трансмуральные шрамы более 25% левого желудочка миокарда в среднем.
Дистрофин окрашивание демонстрирует большие трансплантаты миокарда, которые частично повторно мускулистые шрам и окрашивание для человека Ku80, что подтверждает происхождение человека вновь образованного миокарда. Трансторакальный эхокардиографический мониторинг имплантированной инженерии ткани сердца показывает улучшение фракции выброса левого желудочка, сокращение дробной области и уменьшение левого желудочка и диастолического диаметра. Важно тщательно открыть плевральной полости в такого рода повторно сделать операции, как спайки между грудной стенкой и левым желудочковой может присутствовать и есть определенный риск повредить левый желудочковой миокарда.
После имплантации человеческой инженерии ткани сердца, несколько методов могут быть использованы для мониторинга изменений в левом желудочковой фракции выброса. Помимо эхокардиографии, для мониторинга этих изменений можно использовать инвазивное измерение циклов громкости давления. Этот метод позволяет исследовать все аспекты имплантации тканей человека.
Функциональные последствия, а также потенциальные риски, такие как аритмии могут быть оценены в этой модели малых животных.
