Наш протокол имеет большое значение, поскольку он расширяет современные методы получения биоразлагаемого, встречающегося в природе биоматериала. Наш метод подчеркивает производство воспроизводимых бактериальных целлюлозных сфер. Основным преимуществом данной методики является легкость доступа к необходимым материалам: сахару, воде, чаю, уксусу, закваске для бактериальных культур, колбе для перегородки, орбитальному шейкеру.
Кто-то, выполняющий эту технику впервые, может быть не в состоянии правильно идентифицировать сферы и удалить неправильные бактериальные целлюлозные массы. Мы продемонстрировали эти шаги в видео, но не расстраивайтесь, если это не сработает с первого раза. Визуальная демонстрация этого метода обычно полезна для исследователей, чтобы визуализировать, какие размеры, количества и формы бактериальных целлюлозных масс являются предпочтительными и не предпочтительными.
Начните с кипячения 350 миллилитров деионизированной воды с помощью чайника. Затем переложите горячую воду на 500 миллилитров. Используйте термозащитные перчатки и убедитесь, что стеклянная планка выдерживает температуру кипящей воды.
Полностью растворите 42,5 грамма гранулированной сахарозы в горячей воде с помощью стержня. Заварить пакетик с 2,54 граммами черного чая в колбе, содержащей раствор сахарозы, в течение одного часа. Достаньте чайный пакетик с помощью стержня, не разбивая его, и выбросите в мусорное ведро.
Добавьте в кучер 100 миллилитров дистиллированного белого уксуса и тщательно перемешайте смесь. Переложите 80 миллилитров приготовленной кислой чайной смеси в 250-миллилитровую сбитую колбу и дайте смеси остыть до 20-25 градусов Цельсия. Добавьте 20 миллилитров жидкости для микробной закваски в сбитую с толку колбу, когда жидкость будет при комнатной температуре, и накройте колбу парапленкой.
Поместите сбитую с толку колбу на орбитальный встряхивающий стол и позвольте ей трястись со скоростью 125 оборотов в минуту в течение трех дней при 20-25 градусах Цельсия, чтобы получить сферы BC. Удалите нежелательные массы BC несферической формы пинцетем, чтобы предотвратить дальнейшее образование неправильных масс BC. Как только сферы BC сформируются, аккуратно вылейте их из колбы для дальнейшего использования.
В этом протоколе сферы БК показали высокие темпы роста в течение первых 48 часов культивирования, а размер оставался постоянным после достижения максимума. Сферы британской колумбии начали формировать усики примерно на восьмой день культуры. Было проверено распределение сфер по размерам после инкапсуляции твердых загрязнений, таких как биоуголь, полимерные шарики и шахтные отходы.
Было отмечено, что добавление твердых тел к сферам BC действительно оказывает последовательное влияние на размер или частоту сферы. Скорость орбитального сотрясения, температура окружающей среды и образование неправильных частиц, по-видимому, являются основными факторами, которые влияют на форму, размер и частоту сферических частиц. Было замечено, что слишком высокая комнатная температура или неправильное удаление неправильных масс изменили форму неповрежденной сферы BC на звездчатые частицы или нитевидные сгустки.
Для определения фракции инкапсулированных твердых веществ в сферах БК был проведен термический гравиметрический анализ. Тепловая и микроскопическая оценка вместе подтвердили эффективную инкапсуляцию твердых частиц в сферах BC. Дифференциальный профиль TGA плоскости BC оказался почти в одинаковых величинах с BC с полистирольными шариками.
Однако наблюдался дополнительный пик, соответствующий термической разложенности полистирольных шариков. Наиболее важно добавить микробную закваску, когда чай остынет до комнатной температуры. Кроме того, мы должны обеспечить культуру активными и здоровыми организмами.
Этот метод может быть использован для удаления загрязняющих сред при восстановлении окружающей среды. Сферы также могут быть использованы для контролируемого высвобождения вещества, представляющих интерес. Этот метод позволяет нам инкапсулировать материалы окружающей среды в бактериальных целлюлозных сферах.
Это может быть полезно для биоразлагаемых платформ с контролируемым высвобождением или восстановлением.
