Nosso protocolo é significativo, pois se expande nos métodos atuais de produção de um biomaterial biodegradável e natural. Nosso método enfatiza a produção de esferas de celulose bacteriana reprodutível. A principal vantagem desta técnica é a facilidade de acesso aos materiais necessários: açúcar, água, chá, vinagre, entrada de cultura bacteriana, um frasco de defletor e um shaker orbital.
Alguém que executa essa técnica pela primeira vez pode não ser capaz de identificar corretamente as esferas e remover massas irregulares de celulose bacteriana. Demonstramos esses passos no vídeo, mas não desanimamos se não funcionar da primeira vez. A demonstração visual deste método é geralmente útil para os pesquisadores visualizarem quais são os tamanhos, quantidades e formas das massas de celulose bacteriana preferidas e não preferidas.
Comece fervendo 350 mililitros de água deionizada usando uma chaleira de chá. Em seguida, transfira a água quente para um béquer de 500 mililitros. Use luvas de proteção térmica e certifique-se de que a barra de vidro possa suportar as temperaturas da água fervente.
Dissolva completamente 42,5 gramas de sacarose granulada na água quente usando uma haste de mexida. Íngreme um saco com 2,54 gramas de chá preto no frasco contendo solução de sacarose por uma hora. Retire o saco de chá com a haste de mexida sem quebrá-la e descarte-a no lixo.
Adicione 100 mililitros de vinagre branco destilado ao béquer e mexa completamente a mistura. Transfira 80 mililitros da mistura de chá ácido preparado para um frasco de 250 mililitros perplexos, e permita que a mistura esfrie de 20 a 25 graus Celsius. Adicione 20 mililitros de líquido de cultura de entrada microbiana ao frasco perplexo quando o líquido estiver em temperatura ambiente, e cubra o frasco com Parafilm.
Coloque o frasco perplexo em uma mesa de agitação orbital, e deixe-o tremer a 125 rotações por minuto durante três dias a 20 a 25 graus Celsius para produzir esferas BC. Remova massas bc indesejadas de formas não esféricas com pinças para evitar a formação de massas a.C. irregulares. Uma vez que as esferas BC tenham se formado, despeje-as suavemente do frasco para uso posterior.
Neste protocolo, as esferas do BC apresentaram alta taxa de crescimento nas primeiras 48 horas de cultura, e o tamanho permaneceu constante após atingir o máximo. As esferas bc começaram a formar tendões por volta do oitavo dia de cultura. A distribuição de tamanho das esferas após o encapsulamento de contaminantes sólidos como biochar, contas de polímero e resíduos de mina foi testada.
Observou-se que a adição de sólidos às esferas bc tem um efeito consistente sobre o tamanho ou frequência da esfera. A velocidade de agitação orbital, temperatura ambiente e formação de partículas irregulares parecem ser os principais fatores que afetam a forma, o tamanho e a frequência das partículas esféricas. Notou-se que uma temperatura ambiente muito alta ou remoção inadequada de massas irregulares mudou a forma de uma esfera a bc intacta para partículas estelares ou aglomerados de cordas.
Para determinar a fração de sólidos encapsulados nas esferas bc, foi feita uma análise gravimétrica térmica. A avaliação térmica e microscópica em conjunto confirmou o encapsulamento efetivo de partículas sólidas nas esferas bc. O perfil TGA diferencial do plano BC apareceu em magnitudes quase idênticas com o BC com contas de poliestireno.
No entanto, observou-se um pico adicional correspondente à decomposição térmica das contas de poliestireno. É mais importante adicionar a cultura de entrada microbiana quando o chá esfriou até a temperatura ambiente. Além disso, devemos garantir que a cultura tenha organismos ativos e saudáveis.
Este método pode ser usado para remoção de contaminantes na remediação ambiental. As esferas também podem ser utilizadas para a liberação controlada de uma substância de interesse. Essa técnica nos permite encapsular materiais ambientais dentro de esferas de celulose bacteriana.
Isso pode ser útil para uma plataforma de liberação ou remediação controlada biodegradável.
