Визуализация сосудов и опухолей с высоким разрешением была реализована с помощью ближнего инфракрасного и флуоресцентного нанопроба, обеспечивая точный и эффективный метод направления сосудистых заболеваний и рака. Визуализация in vivo в окне NIR-II, которая позволяет нам глубоко заглянуть в живой объект, создает возможности для биомедицинских исследований и наших клинических применений. Подготовьтесь к получению изображений в ближнем инфракрасном диапазоне II или NIR-II, поместив имеющийся в продаже черный картон в центр носителя устройства формирования изображения.
Затем поместите образец поверх черного картона так, чтобы он находился в центре носителя. После выбора соответствующего фильтра выполните регулировку высоты платформы. Нажмите и удерживайте опцию платформы вверх на сенсорном экране области управления консолью оператора, чтобы переместить ее вверх.
И нажмите и удерживайте платформу, чтобы переместить ее вниз. После синтеза красителя NIR-II HLY1 подготовьте точки HLY1 методом наноосаждения с использованием DSPE-PEG-2K в качестве матрицы инкапсуляции. Для этого поместите стакан, содержащий раствор 10 миллиграммов DSPE-PEG-2K в девять миллилитров воды для обработки ультразвуком при температуре 25 градусов по Цельсию.
Затем растворите один миллиграмм HLY1 в одном миллилитре тетрагидрофурана или ТГФ. И медленно добавляйте раствор в водный раствор DSPE-PEG-2K, подвергающийся обработке ультразвуком. Впоследствии удалите ТГФ из смеси с помощью диализа.
После концентрирования вышеуказанного раствора центробежно с ультрафильтрацией при 7, 100 G в течение 10 минут поместите его в холодильник с температурой четыре градуса Цельсия для дальнейшего использования. Для визуализации in vivo вводите точки HLY1 внутривенно анестезированным мышам. А через три минуты приступайте к выполнению флуоресцентной визуализации кровеносных сосудов всего тела мышей с помощью оптической системы визуализации NIR-II.
Сосредоточьтесь на голове мыши, чтобы получить сосудистую визуализацию мозга. Установите параметры прибора оптической системы визуализации NIR-II на 90 милливатт на квадратный сантиметр и 808-нанометровый лазер. Соберите изображения через пять минут после инъекции точек HLY1 мышам и обработайте данные с помощью программного обеспечения ImageJ.
Интенсивность флуоресценции HLY1 в 90%-ном растворе ТГФ, содержащем 90%-ную воду, была в пять раз выше, чем в растворе ТГФ, что указывает на заметное излучение, вызванное агрегацией, или особенность AIE HLY1. Точки HLY1 излучали сильные флуоресцентные сигналы под фильтром нижних частот или LP-фильтром 1 500 нанометров, что делает его пригодным для визуализации NIR-IIb. Максимальная длина волны поглощения и излучения точек HLY1 составила 740 нанометров и 1 040 нанометров соответственно.
Кроме того, гидродинамический размер точек HLY1 был определен как 145 нанометров с помощью динамического рассеяния света. У мышей, которым вводили точки HLY1, церебральные сосуды и микрососуды в задней конечности были четко идентифицированы с помощью визуализации NIR-II под 1 500-нанометровым LP-фильтром. Кроме того, четыре опухоли T1 мышей с опухолями также были четко видны при визуализации NIR-II, что указывает на повышенную проницаемость и эффект удержания или ЭПР точек HLY1.
Все эти результаты свидетельствуют о том, что точки HLY1 являются ярким флуоресцентным зондом NIR-II, применимым для визуализации сосудов и опухолей. Подготовка водосуспендируемого нанозонда под флуоресцентной визуализацией in vivo и NIR-II является наиболее важной частью процедуры.
